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黑色素瘤分化相关基因-7/白细胞介素-24(MDA-7/IL-24)抑制肝癌细胞黏附和侵袭的研究
目的 探讨MDA-7/IL-24对肝癌细胞粘附和侵袭的影响.方法 构建MDA-7/IL-24的质粒,通过转染的方法过表达到两种肝癌细胞株中,观察MDA-7/IL-24过表达后是否能够抑制肿瘤细胞的粘附和侵袭.结果 构建稳定表达MDA-7/IL-24的细胞表达株,高表达MDA-7/IL-24能够抑制肝癌细胞的粘附(分别降低37.0％及64.0％,P<0.05)和侵袭(分别降低63.4％及81.3％,P<0.05).结论 MDA-7/IL-24不仅可以抑制肿瘤细胞生长,而且可抑制肝癌细胞的粘附和侵袭,在肿瘤生物治疗中具有良好的应用前景.
关键词： 肝细胞肝癌 MDA-7/IL-24 黏附和侵袭 -
Ad.mda-7高选择性杀伤不同转移潜能肝癌细胞的研究
目的 利用携带人MDA-7/IL-24基因的复制缺陷型腺病毒(Ad.mda-7)作为载体,感染不同转移潜能的肝癌细胞MHCC97H,MHCC97L,Hep3B和正常的肝细胞L02,观察该基因对肝癌的选择性杀伤作用和增殖抑制作用.方法 将携带人MDA-7/IL-24基因的腺病毒Ad.mda-7感染正常肝细胞L02和肝癌细胞MHCC97H,MHCC97L和Hep3B,通过RT-PCR和ELISA方法观察MDA-7基因的表达,通过四甲基偶氮哩蓝染色法(MTT)观察该基因对肝癌细胞的生长抑制,Hoechst染色和流式细胞仪观察MDA-7对肝癌细胞的杀伤作用,流式细胞仪检测细胞周期变化.结果 RT-PCR提示复制缺陷型腺病毒能介导外源基因MDA-7/IL-24在肝癌细胞株MHCC97H,MHCC97L,Hep3B和正常细胞L02中高效表达;ELISA方法检测提示细胞培养上清液中MDA-7/IL-24蛋白的表达,而且随着感染时间延长表达量升高;MTT实验结果表明MDA-7能明显抑制肝癌细胞的生长,Hoechst染色和流式细胞仪提示MDA-7能促进肝癌细的凋亡;细胞周期检测提示肝癌细胞大量被阻滞在G2/M期,正常细胞没有增殖阻滞作用.各项结果提示MDA-7对正常的肝细胞没有促进凋亡和增殖阻滞的作用.结论 Ad.mda-7选择性的杀伤肝癌细胞,促进细胞增殖阻滞及诱导肿瘤细胞凋亡与肝癌细胞的转移潜能无关.
关键词： 癌 肝细胞 MDA-7/IL-24 基因治疗 高选择性 -
携带mda-7基因的复制缺陷型腺病毒通过促进线粒体释放促凋亡蛋白杀伤肝癌细胞
目的 探讨黑色素瘤分化相关基因7/白介素24(mda-7/IL-24)基因选择性杀伤肝癌细胞的机制.方法 应用携带mda-7基因的复制缺陷型腺病毒Ad.mda-7感染正常肝细胞L02和肝癌细胞HepG2.通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、酶联免疫吸附实验(ELISA)及Western blot方法,观察mda-7/IL-24基因的表达;应用Hoeehst染色和流式细胞仪观察mda-7/IL-24对肝癌细胞的杀伤作用;采用RT-PCR和Western blot方法,观察Bcl-2家族和caspase-9基因表达的变化,分离不同感染时点细胞内线粒体和胞浆蛋白,并检测线粒体释放促凋亡蛋白细胞色素C(Cyt-C)和Smac/DIABLO的变化过程.结果 Ad.mda-7能介导mda-7/IL-24在两种细胞株中的高效表达.能选择性杀伤肝癌细胞,感染24 h后,HepG2细胞凋亡率为24.0%±4.6%,而对正常的肝细胞没有影响.RT-PCR和亚细胞蛋白的分析结果显示,胞浆内Bel-2和Bcl-xL的表达在HepG2细胞中明显下降,而在L02细胞中的表达无变化,Bax在肝癌细胞中的表达明显增强,Bak的表达无变化;Ad.mda-7能促进细胞线粒体释放cyt-C和Smac/DIABLO蛋白,并促进caspase-9的表达.结论 Ad.mda-7能选择性杀伤肝癌细胞HepG2,通过促进线粒体促凋亡蛋白的释放而诱导肝癌细胞凋亡.
关键词： MDA-7/IL-24 肝肿瘤 凋亡 细胞色素C Smac/DIABLO Bcl-2 -
mda-7/IL-24和p53治疗神经胶质瘤的机制及临床应用进展
目前新兴的基因疗法对神经胶质瘤的治疗相比传统疗法而言越来越受到重视.在临床应用抑癌基因mda-7/IL-24和p53治疗神经胶质瘤已经显示出积极的疗效.两者抑癌的机制复杂且尚未完全清楚,其中既有不同又有联系.本文就mda-7和p53治疗神经胶质瘤的机制和临床应用进展作一比较综述.
关键词： 神经胶质瘤 P53 MDA-7/IL-24 基因治疗 -
MDA－7／IL－24在结肠癌组织中的表达及其临床相关性研究
目的：探讨抑癌基因MDA－7／IL－24在结肠癌中的表达状态及其与结肠癌临床病理特征的相关性。方法随机选取23对经病理证实的结肠癌及相应的癌旁组织，应用免疫组织化学技术检测MDA－7／IL－24的表达情况。结果 MDA－7／IL－24在结肠癌组织中的表达低于癌旁组织（ P＞0.05）；临床相关性分析表明：结肠癌组织中MDA－7／IL－24的低表达与淋巴结转移（P＞0.05）和肿瘤直径（P＞0.05）无相关性。结论 MDA－7／IL－24的低表达与结肠癌的发生、发展过程相关性不大。
关键词： MDA-7/IL-24 结肠癌 免疫组化 -
显微数字成像组合组织芯片技术平台的建立及其在肿瘤标志物研究中的应用
目的:利用我室新建立的显微数字成像组合组织芯片技术平台探讨新型肿瘤标志物MDA-7/IL-24在胃癌中的表达及意义.方法:取胃癌标本50例及对应正常胃黏膜10例,从预先作好标记的供体石蜡块中取出目标组织,应用组织芯片点样仪制成一定阵列的受体石蜡块,将石蜡切片贴附于硅胶包被的玻片上,采用高敏感EnVision两步法进行MDA-7/IL-24单克隆抗体免疫组织化学染色.将染好的切片置于显微数字成像分析仪中读取图像信息并进行分析.结果:计算机软件将读取的组织芯片全貌显示在屏幕上,研究者在计算机定位下对每一标本点逐一放大分析.50例胃癌组织标本中,剔除组织脱落或取材部位欠佳的无效点,42例纳入统计分析.42例胃癌中27例MDA-7/IL-24表达消失(64.29%).10例正常胃黏膜腺体细胞质MDA-7/IL-24染色全部阳性.MDA-7/IL-24表达消失组癌周淋巴结转移率明显增高(P=0.01),且在TNMⅢ、Ⅳ期患者明显多于TNM Ⅰ、Ⅱ期(P=0.003).MDA-7/IL-24表达与否与年龄、性别、肿瘤发生部位及组织分型无明显关系.结论:显微数字成像组合组织芯片技术在筛查肿瘤标志物表达时显示出高通量、可比性强、计算机定位精确及图像清晰直观等优点,是后基因组时代大规模肿瘤标志物筛选定位分析中可以选择的一种新型技术平台.MDA-7/IL-24表达消失与胃癌的浸润生长及淋巴结转移增加有明显关系,故可将MDA-7/IL-24表达消失作为判断胃癌浸润、转移能力的一种新型肿瘤标志物.
关键词： 显微数字成像 组织芯片 肿瘤标志物 胃癌 MDA-7/IL-24 -
肾癌mda-7/IL-24基因mRNA表达与浸润转移的关系
目的为探讨mda-7/IL-24mRNA在肾癌组织中的表达状况.方法用半定量逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)检测30例肾癌及其癌周组织mda-7/IL-24mRNA的表达情况.结果肾癌组织中的mda-7/IL-24mRNA表达率(13/30,43.3%)较癌周组织的表达率(30/30,100%)低(P＜0.01);Ⅰ、Ⅱ期癌mda-7/IL-24mRNA阳性表达率(11/19,57.8%)高于Ⅲ、Ⅳ期癌中的表达率(2/11,18.2%)(P＜0.05);Ⅰ、Ⅱ期肾癌组织的mda-7/IL-24mRNA表达量[积分光密度比值riOD为(33.61±6.21)%,n=11]较正常癌周组织的表达量[riOD为(38.42±6.91)%,n=30]少(P＜0.01),而Ⅲ、Ⅳ期癌中的表达量[riOD为(15.04±6.25)%,n=2]更少.结论mda-7/IL-24mRNA的表达下调与肾癌的局部发展和转移密切相关,可作为判断肾癌生物学行为的指标之一.
关键词： 肾肿瘤 转移 MDA-7/IL-24 RT-PCR -
腺病毒介导的MDA-7/IL-24基因对裸鼠胆囊癌移植瘤的生长抑制和促凋亡作用
目的:构建胆囊癌荷瘤鼠模型,利用构建的携带人MDA-7/IL-24基因的复制缺陷型腺病毒Ad.mda-7作为载体,观察MDA-7/IL-24基因对胆囊癌荷瘤鼠的作用,为胆囊癌的基因治疗提供理论基础.方法:构建荷瘤鼠模型,将携带人MDA-7/IL-24基因的腺病毒Ad.mda-7作用于荷瘤鼠.通过观察肿瘤大小的变化来了解MDA-7/IL-24基因作用后的效果.观察荷瘤鼠的生存时间,绘制生存曲线,比较各组的治疗效果.取出肿瘤通过免疫组化和TUNEL法检测肿瘤组织内凋亡相关蛋白、细胞增殖相关抗原Ki-67蛋白的表达.结果:Ad.mda-7组裸鼠胆囊癌生长抑制率明显高于PBS组和Ad.GFP组(P＜0.01);Ad.mda-7组裸鼠长期生存率为62.5％,明显高于PBS组和Ad.GFP组的35％ (P ＜0.01);Ad.mda-7组治疗后瘤细胞的凋亡率显著高于对照组(P＜0.01);Ad.mda-7能够明显抑制Ki-67的表达(P＜0.01).结论:复制缺陷型重组腺病毒载体Ad.mda-7能介导MDA-7/IL-24基因在人胆囊癌荷瘤鼠抑制肿瘤的生长,延长荷瘤鼠的生存时间,促进肿瘤细胞的凋亡,减少Ki-67的表达,从而提示MDA-7/IL-24基因能够减少肿瘤的复发和转移.
关键词： 胆囊癌 MDA-7/IL-24 基因治疗 Ki-67 -
腺病毒介导的mda-7/IL-24抑制肝癌VEGF和MMP-9的表达
目的 观察mda-7/IL-24基因对高转移性人肝癌细胞HCCLM6中VEGF和MMP-9的作用,从而探讨mda-7/IL-24基因在抑制肿瘤转移方面的作用.方法 构建Ad.Mda-7并转染至HCCLM6;transwell实验检测侵袭能力的变化;通过RT-PCR和Western Blot分别检测转染mda-7/IL-24基因前后VEGF和MMP-9表达mRNA和蛋白的变化;构建HCCLM6高转移型裸鼠模型,采用Ad.Mda-7肿瘤内注射法干预,观察mda-7/IL-24对裸鼠生存状况的影响和肿瘤内VEGF和MMP-9 的变化.结果 复制缺陷型腺病毒能介导外源基因mda-7/IL-24在肝癌细胞中高效表达;mda-7/IL-24能显著下调肝癌细胞中VEGF和MMP-9的表达.Ad.mda-7能延长裸鼠的生存时间,抑制肿瘤的生长,瘤体内VEGF和MMP-9表达明显降低(P<0.05).结论 mda-7/IL-24基因能明显抑制肝癌细胞的侵袭力,其机制可能与下调VEGF和MMP-9的表达有关.
关键词： MDA-7/IL-24 VEGF MMP-9 肝细胞癌 基因治疗 -
抑瘤基因mda-7/IL-24研究进展
0 引言黑色素瘤分化相关基因-7(Melanoma differentiation-associated gene-7,mda-7)是一种肿瘤抑制基因,其定位于染色体的1q32位点,位于一群分泌IL-10,IL-19和IL-20细胞因子的基因群中,基于氨基酸的同源性预测蛋白质的结构、染色体的定位以及细胞因子样特性,mda-7被命名为IL-24 [ 1 ].mda-7 cDNA 编码一个206个氨基酸的蛋白质,分子质量约为23.8 kDa.通过Prosite 数据库分析发现mda-7/IL-24在第85,99和126位点存在N-糖基化,6个磷酸化位点(即位于101, 111和161位点的酪蛋白激酶II; 88, 133 和 161位点的蛋白激酶C) 以及开始于101 位点的IL-10信号图形,其和IL-10亚家族密切相关.计算机模拟其三维结构得到了一个与预测一致的紧凑的球形分子,含有4个螺旋区,其中夹杂有环状结构.基因作图显示其包括7个外显子,中间隔有6个内含子.转录调节区位于一个5促进子内,3ˊ-most外显子包含有polyadenylation信号和富AU的mRNA 不稳定框架(AREs).
关键词： MDA-7/IL-24 肿瘤抑制 机制 -
mda-7/IL-24联合阿霉素诱导裸鼠肝癌凋亡的初步研究
目的 探讨重组腺病毒介导的mda-7/IL-24基因联合阿霉素(ADM)治疗裸鼠肝癌的作用及机制.方法 采用mda-7/IL-24的重组腺病毒载体(Ad-mda-7)和/或ADM治疗实验性肝癌裸鼠,观察各组裸鼠生长时间及肿瘤体积变化,并对各组瘤体组织进行TUNEL检测.结果 成功构建了重组腺病毒mda-7/IL-24基因载体.Ad-mda-7+ADM联合治疗组裸鼠平均生存时间为(83.8±4.82)d,明显长于其他3组(P<0.01);Ad-mda-7+ADM组肝癌体积明显缩小,抑癌率为79.78%,与单独用药组和对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);联合组癌组织凋亡增加,凋亡指数为38.1%±4.2%,与其余3组比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 重组腺病毒介导mda-7/IL-24联合阿霉素有明显的协同抗肿瘤作用,效果优于单独治疗组,主要作用机制与促进癌组织凋亡有关.
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Mda-7/IL-24与C-myb在Burkitt淋巴瘤中的表达及其相关性研究
目的 深入探讨Burkitt淋巴瘤患者瘤组织中Mda-7/IL-24与C-myb的表达水平、相关性及其临床意义.方法 收集65例Burkitt淋巴瘤患者的瘤组织及33例正常淋巴结组织;通过免疫组化及Western blot技术检测各组织中Mda-7/IL-24与C-myb蛋白的表达水平,并对Mda-7/IL-24与C-myb表达水平进行相关性分析;收集患者临床资料,分析瘤组织Mda-7/IL-24及C-myb蛋白表达水平与患者年龄、性别、临床分期、是否骨髓浸润、Ecog评分及IPI指数之间的关系;分析瘤组织Mda-7/IL-24及C-myb蛋白表达水平与患者生存期之间的关系,并制作生存曲线.结果 与正常淋巴结组织相比,Burkitt淋巴瘤组织中Mda-7/IL-24的表达水平明显降低,而C-myb的表达水平则明显增高;65例Burkitt淋巴瘤患者瘤组织中Mda-7/IL-24与C-myb蛋白表达水平呈明显的负相关(r=-0.4749);瘤组织低表达Mda-7/IL-24、高表达C-myb的患者其临床分期晚、易骨髓转移、瘤细胞增殖活性强、IPI积分较高,同时患者生存期较短(P＜0.05).结论 Burkitt淋巴瘤组织中Mda-7/IL-24与C-myb的表达水平呈明显负相关,低表达Mda-7/IL-24或高表达C-myb是Burkitt淋巴瘤患者临床预后较差的指标.
关键词： MDA-7/IL-24 c-myb Burkitt淋巴瘤 -
Mda-7/IL-24对B细胞淋巴瘤化疗敏感性的影响
目的 研究Mda-7/IL-24对B细胞淋巴瘤化疗敏感性的影响并探讨其作用机制.方法 构建稳定过表达Mda-7/IL-24的人B表型淋巴瘤Raji和Daudi细胞株,MTS法检测稳定转染Mda-7/IL-24对Raji和Daudi细胞在顺铂、表柔比星及长春新碱作用下化疗敏感性的影响,并计算IC50值;流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测细胞凋亡水平及胞内罗丹明-123(rhodamine-123)聚集量;RT-PCR及Western blot技术分别从mRNA及蛋白水平检测转染Mda-7/IL-24对Raji和Daudi细胞表达耐药相关基因MDR1、MRP1及BMI1水平的影响.Western blot技术检测转染Mda-7/IL-24对Raji和Daudi细胞总ERK1/2及p-ERK1/2表达水平的影响.结果 在CDDP、epirubicin及VCR作用下,过表达Mda-7/IL-24的Raji和Daudi细胞株增殖水平明显下降,化疗敏感性明显增高,而化疗药物IC50值明显下降,同时,细胞凋亡水平明显增加;过表达Mda-7/IL-24的Raji和Daudi细胞肿瘤耐药相关基因MDR1、MRP1、BMI1、总ERK1/2及p-ERK 1/2的表达水平均明显下降,而胞内Rhodamine-123聚集量明显增加.结论 转染Mda-7/IL-24可能通过调节ERK途径的活化改变肿瘤多药耐药相关基因的表达,从而促进B细胞淋巴瘤对化疗药物的敏感性.因此Mda-7/IL-24在B细胞淋巴瘤的治疗中可能具有防治多药耐药的作用.
关键词： MDA-7/IL-24 化疗敏感性 B细胞淋巴瘤 多药耐药 -
Mda-7/IL-24和C-myb在弥漫大B细胞淋巴瘤中的表达及其临床意义
目的:研究弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)中Mda-7/IL-24和C-myb的表达水平及其临床意义.方法:收集72例DLBCL患者的瘤组织及36例正常淋巴结组织;通过半定量逆转录PCR及免疫组化技术分别从mRNA及蛋白水平检测各组织中Mda-7/IL-24与C-myb的表达水平,并对Mda-7/IL-24与C-myb进行相关性分析;收集患者临床资料,分析瘤组织Mda-7/IL-24与C-myb蛋白表达水平与患者年龄、性别、临床分期、是否骨髓浸润、Ecog评分及国际预后指数(IPI)之间的关系;分析瘤组织Mda-7/IL-24与C-myb蛋白表达水平与患者无进展生存期之间的关系.结果:与正常淋巴结组织相比,DLBCL组织中Mda-7/IL-24 mRNA的表达水平明显降低,而C-myb mRNA的表达水平则明显增高(P＜0.01);72例DLBCL患者瘤组织中Mda-7/IL-24与C-myb mRNA表达水平呈明显负相关(r=-0.43,P＜0.01);瘤组织低表达Mda-7/IL-24、高表达C-myb的患者其临床分期晚、易骨髓转移、瘤细胞增殖活性强、IPI积分较高,同时患者无进展生存期较短(P均＜0.05).结论:DLBCL组织中Mda-7/IL-24与C-myb的表达呈明显负相关,Mda-7/IL-24低表达或C-myb高表达是DLBCL患者临床预后较差的指标.
关键词： MDA-7/IL-24 c-myb 弥漫大B细胞淋巴瘤 预后分析
