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蜈蚣提取物诱导SiHa细胞凋亡及其作用机制的研究
目的:研究蜈蚣提取物对官颈癌SiHa细胞生长的抑制及其作用机制.方法:观察不同浓度的不同蜈蚣提取物对宫颈癌SiHa细胞的生长抑制情况:运用体外细胞培养技术,以不同浓度的蜈蚣提取物和阳性对照药顺铂作用于培养的SiHa细胞48 h,采用MTT法测定药物对细胞生长的影响,以流式细胞术观察DNA含量和凋亡的变化情况,DNA片断化分析凋亡特有DNA梯形格局和Western Blot测定bax、Caspase 3蛋白水平的表达.结果:SiHa细胞用8、16、32 mg/ml的乙醚、乙醇蜈蚣提取物处理48 h后,细胞生长显著受抑;DNA周期改变明显,亚G1峰与对照组有显著性差异;DNA-Ladder显著:Western Blot提示相关凋亡蛋白bax、Caspase 3表达并显示活性,凋亡率增高明显.结论:中药蜈蚣乙醚、乙醇提取物在体外对宫颈癌SiHa细胞的生长有明显地抑制作用,其机制与改变细胞DNA周期,促进凋亡有关.
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蜈蚣提取物抗肺癌活性的体内外实验研究
目的:探讨蜈蚣提取物对人肺癌A549细胞的增殖抑制、凋亡诱导及裸小鼠皮下移植瘤生长的抑制作用。方法采用酶解法合丙酮沉淀法分离纯化蜈蚣提取物处理人肺癌 A549细胞,MTT 法检测细胞增殖抑制并计算半数抑制率(IC50),流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期变化,Hoechst荧光染色观察细胞凋亡的形态变化。制备人肺癌细胞裸小鼠皮下移植瘤模型,随机分为模型组、对照组和蜈蚣提取物组,每组10只,观察裸小鼠皮下移植瘤瘤体体积、质量及抑瘤率变化。结果体外实验结果显示,蜈蚣提取物对人肺癌A549细胞有明显的增殖抑制作用,IC50为0.603 mg/mL;蜈蚣提取物作用48 h后,细胞周期表现为G0/G1期细胞比例下降,S期与 G2/M期细胞比例均升高,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);Hoechst 荧光染色可观察到明显的凋亡细胞及凋亡特征性的形态学改变;动物体内抑瘤实验结果发现,经蜈蚣提取物治疗后,瘤体质量与体积显著减少,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论蜈蚣提取物对人肺癌A549细胞具有浓度依赖性增殖抑制作用,可诱导细胞凋亡,使A549细胞停滞于G2/M期,并能有效抑制人肺癌裸小鼠皮下移植瘤的生长。
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蜈蚣治疗脑胶质瘤的研究进展
蜈蚣为蜈蚣科动物少棘巨蜈蚣(Scolopendra subsoinioes mutilans L Koch)的干燥体.近年来对蜈蚣的研究报道颇多,对临床应用、药理作用又有新的扩展,尤其是蜈蚣提取物在治疗人体恶性肿瘤方面的研究进展迅速,为便于今后对蜈蚣进行更深入的研究,本文拟综述蜈蚣在治疗肿瘤方面的研究进展.
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体外及活体环境下蜈蚣提取物联合顺铂对人肺癌A549细胞的影响
目的 观察蜈蚣提取物(ECP)与顺铂(DDP)联合运用对人肺癌A549在体外及活体环境下的影响.方法 体外环境下人肺癌A549细胞培养;活体采用裸鼠皮下移植瘤进行试验.分别观察单用ECP或DDP以及两者联用对A549细胞的作用.结果 DDP联用ECP与ECP联用DDP,对A549细胞的抑制作用比单用ECP或DDP时分别增效1.80倍和2.60倍,两药的合并指数为0.93.DDP联用ECP对抑制移植瘤的体积变化与单用DDP比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论 蜈蚣提取物与顺铂联用在体外及活体环境下均有协同作用;两者联用的作用优于单用.
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蜈蚣提取物对宫颈癌Caski细胞增殖的抑制效应
目的:观察蜈蚣对宫颈癌Caski细胞生长的抑制作用.方法:实验于2006-06/09在三峡大学医学院免疫学重点学科实验室完成.运用体外细胞培养技术,以不同浓度(8,16,32 g/L)的乙醚、乙醇蜈蚣提取物作用于培养的Caski细胞48 h,采用MTT法测定细胞代谢率,以流式细胞术观察DNA含量和凋亡的变化情况.结果:①细胞形态由梭形逐渐变圆,胞浆皱缩,体积缩小,细胞数量明显少于阴性对照组.②MTT以浓度依赖方式降低吸光度值,与对照组相比抑制率增高显著.③细胞周期各时相DNA含量改变明显,G0~G1期细胞显著降低(由初64.0%降至低37.2%),而S,G2~M期细胞明显上升;凋亡率显著增高,阳性对照药物顺铂组也有上述类似改变.结论:中药蜈蚣乙醚、乙醇提取物在体外对宫颈癌Caski细胞的生长有明显地抑制作用,机制与影响癌细胞的DNA合成,阻止瘤细胞的分裂增殖,并促进其凋亡有关.呈现一定的量效和时效相关性.
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中药HB对喉癌Hep-2细胞的抑制作用及其机制研究
目的研究蜈蚣提取物HB对喉癌Hep-2细胞生长的抑制作用及其作用机制.方法 MTT法观察不同浓度的HB对Hep-2细胞的生长抑制情况;采用激光扫描共聚焦技术分析HB作用Hep-2细胞48h后细胞内钙、DNA含量的变化情况.结果 Hep-2细胞用10μg/ml、100ug/ml的HB处理72h后,细胞存活率显著降低;用10μg/rnl和20μg/nl的HB处理Hep-2细胞48h后,细胞内钙含量显著升高(P<0.001),DNA含量显著降低(P<0.001).结论中药HB在体外对Hep-2细胞的生长有明显地抑制作用,机制与降低细胞内DNA含量,细胞内钙超载有关.
关键词: 蜈蚣提取物 激光扫描共聚焦显微镜 DNA 细胞内钙 -
蜈蚣提取物诱导宫颈癌HeLa细胞凋亡及其机制的研究
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蜈蚣提取物体外抗肿瘤活性比较及体内活性评价
目的:比较蜈蚣干品和鲜品不同提取物的体外抗肿瘤活性,并评价其体内抗肿瘤活性.方法:蜈蚣干品和鲜品的水、30%、50%、70%及95%乙醇提取物分别处理MGC803细胞,采用MT、法检测细胞生长抑制率,计算半数抑制浓度(IC50);观察蜈蚣提取物对H22腹水瘤小鼠的生存期和实体瘤小鼠的抑瘤率的影响.结果:蜈蚣干品和鲜品不同提取物对肿瘤细胞的IC50值相近,而蜈蚣水提取物的IC50值相对小.蜈蚣水提取物能延长腹水瘤小鼠的生存期;对实体瘤小鼠瘤重有明显的抑制作用,但中剂量和高剂量组有部分动物加速死亡.结论:多种提取方法得到的蜈蚣提取物均具有体外抗肿瘤活性,蜈蚣水提取物有一定的体内抗肿瘤活性,但超剂量使用有一定的毒性.
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蜈蚣提取物对小鼠急性肝损伤的保护作用
目的:研究蜈蚣水提取物和不同体积分数乙醇提取物对小鼠急性肝损伤的保护作用.方法:采用四氯化碳(CCl4)制备小鼠急性肝损伤模型,测定血清中谷草转氨酶(AST),谷丙转氨酶(ALT)和肝脏中超氧化物歧化酶(SOD),丙二醛(MDA)水平;HE染色观察肝脏病理形态改变;RT-PCR检测小鼠肝脏中的肿瘤坏死因子α(TNF-α),白介素6(IL-6) mRNA表达水平.结果:与CCl4模型组比较,蜈蚣水提物和30%乙醇提取物可以降低急性肝损伤小鼠ALT,AST和MDA水平,提高SOD水平;减轻小鼠肝脏病理损伤;降低TNF-α及IL-6的mRNA表达.其中水提物的效果更为显著.结论:蜈蚣水提物和30%乙醇提取物对小鼠急性肝损伤有一定的保护作用,其机制可能与抗脂质过氧化作用以及抑制TNF-α与IL-6的表达有关.
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蜈蚣提取物对裸鼠肝癌原位移植瘤EphA7表达的影响
目的:观察蜈蚣提取物(Scolopendra Centipede Extract,SCE)作用于裸鼠肝癌原位移植瘤模型后对肝癌原位移植瘤生长的抑制作用及EphA7蛋白的影响,探讨SCE抗肝癌的作用机制.方法:以肝内植入裸鼠肝癌组织法构建肝癌原位移植瘤模型.将成瘤裸鼠随机分为SCE高剂量组(蜈蚣提取物高剂量,50 mg/kg/d,腹腔注射)、SCE低剂量组(蜈蚣提取物低剂量,10mg/kg/d,腹腔注射)、5-FU组(50mg/kg/次,腹腔注射),模型组(0.9%氯化钠注射液,10g/kg/d,腹腔注射),另设正常组(同模型组),用药14d.观察裸鼠的瘤体体积与瘤重,计算抑瘤率,测血清AFP含量,检测移植瘤EphA7蛋白的表达情况.结果:(1)与模型组比较,SCE高剂量组、SCE低剂量组、5-FU组瘤重均低于模型组(P<0.01);与5-FU组及SCE低剂量组比较,SCE高剂量组平均瘤重低,差异具有统计学意义(P<0.01);SCE高剂量组、SCE低剂量组、5-FU组抑瘤率分别是62.5%、37.5%、30.8%.(2)SCE高剂量组、SCE低剂量组血清AFP平均含量明显降低,与模型组比较,差异具有统计学意义(P<0.01);与5-FU组比较,SCE高剂量组血清中AFP含量明显降低(P<0.01),SCE低剂量组血清中AFP含量无明显差异(P>0.05).(3)SCE高剂量组、SCE低剂组与模型组比较,肝癌原位移植瘤中EphA7蛋白表达均表现为下调,差异具有统计学意义(P<0.01);与5-FU组比较,SCE高剂量组肝癌原位移植瘤中EphA7蛋白表达下调,差异具有统计学意义(P<0.01),与SCE低剂量组比较,差异有统计学意义(P<0.01).结论:SCE对肝癌原位移植瘤裸鼠肿瘤的生长有明显抑制作用,并有剂量依赖性;SCE通过下调EphA7蛋白的表达,调控酪氨酸磷酸化及肿瘤血管的形成,可能是SCE抗肝癌的机制之一.
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蜈蚣提取物联合顺铂对人肺癌A549细胞裸鼠移植瘤的影响
目的 观察蜈蚣提取物(Extract of centipede,ECP)与顺铂(cisplatin,DDP)联合运用对人肺癌A549细胞裸鼠皮下移植瘤的影响.方法 建立人肺癌A549细胞裸鼠皮下异位移植瘤模型,造模成功后行DDP、ECP干预,观察单用DDP及DDP联用EEP对人肺癌A549细胞裸鼠皮下异位移植瘤的影响.结果 DDP联用ECP较单用DDP能更有效地抑制裸鼠皮下移植瘤,表现为重量与体积的减小(P<0.05).结论 ECP与DDP联用对人肺癌A549细胞裸鼠异位移植瘤的抑制及延缓生长的作用优于单用DDP.
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蜈蚣提取物对小鼠宫颈肿瘤生长的影响及其作用机制的实验研究
研究蜈蚣提取物在体内对宫颈肿瘤生长的影响及其作用机制.方法:观察不同浓度、不同蜈蚣提取物对荷瘤小鼠的生存期、抑瘤率、免疫功能等方面的影响以研究其体内抗肿瘤效应,并探索其作用机制.结果:两种蜈蚣提取物(CE、CA)处理荷瘤鼠,实验中无一死亡,抑瘤率分别可达52.85%、33.65%;光镜观察实体瘤组织发现盐水对照组瘤组织浸润横纹肌组织中生长旺盛,而药物处理组则普遍可见大量坏死和凋亡;电子透射显微镜观察超微结构发现实验组大量核固缩、边聚的凋亡肿瘤细胞;免疫组化结果显示CE和CA使Bax表达量明显增高,Bc1-2和Survivin表达量降低,但Smac的表达无显著差异;CE和CA对VEGF的含量影响不大;胸腺指数和脾脏指数无显著改变;CE组小鼠CD3+的T细胞总数无明显改变,CD4+/CD8+比值、CD19+的B细胞数下降;CA组CD3+以及CD4+细胞下降显著;肝、肾组织切片发现CE、CA在本文实验浓度范围内无明显毒副作用.结论:两种蜈蚣提取物(CE、CA)均可在小鼠体内抑制宫颈肿瘤的生长,通过Bax和Caspase-3介导的线粒体信号转导途径诱导肿瘤组织凋亡机制可能参与了其体内抗肿瘤效应.
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蜈蚣提取物对S180及H22荷瘤小鼠的影响及其毒性的实验研究
目的:研究蜈蚣提取物对正常小鼠和移植性S180、H22荷瘤小鼠的影响及其毒性.方法:分别对正常小鼠和S180、H22荷瘤小鼠经口服给药12 d,观察小鼠的生长情况、肿瘤生长情况、体重及小鼠胸腺、脾脏指数变化,毒性实验分别采用大给药量口服一次给药和多次给药方法观察.结果:蜈蚣水提物对正常小鼠影响较小,蜈蚣醇提物对小鼠肝指数有增大作用.蜈蚣醇提物中低剂昔组对S180荷瘤鼠肿瘤增殖有一定的抑制趋势,但无统计学差异,高剂量组无抑制作用.蜈蚣水提物对H22荷瘤小鼠不具有抑制肿瘤生长的作用,且能导致荷瘤小鼠衰弱和死亡.急性毒性实验中,小鼠给药48 g/kg,未见致死毒性.结论:蜈蚣水提物不能抑制荷瘤小鼠肿瘤增殖,蜈蚣醇提物有一定毒性,提示蜈蚣单独用于治疗癌症尚需深入研究.
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蜈蚣提取物诱导SiHa细胞凋亡及其作用机制
目的 研究蜈蚣提取物对宫颈癌SiHa细胞生长的抑制及其作用机制.方法 观察不同浓度的不同蜈蚣提取物对宫颈癌SiHa细胞的生长抑制情况:以不同浓度的蜈蚣提取物和顺铂作用于SiHa细胞48 h,MTY法测定药物对细胞生长的影响,流式细胞术观察DNA含量和凋亡的改变,DNA片断化分析凋亡特有DNA梯形格局,Western blot测定bax、Caspase 3蛋白水平的表达.结果 SiHa细胞用8、16、32 mg/mL的乙醚、乙醇蜈蚣提取物处理48 h后,细胞生长显著受抑制;DNA周期改变明显,亚G1峰与对照组有显著性差异;DNA-Ladder显著;Western blot提示相关凋亡蛋白bax、Caspase 3表达并显示活性,凋亡率增高明显.结论 中药蜈蚣乙醚、乙醇提取物在体外对宫颈癌SiHa细胞的生长有明显地抑制作用,机制与改变细胞DNA周期,促进凋亡有关.