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HLA不相合异基因骨髓移植后早期造血功能障碍一例
我们曾遇到1例接受异基因骨髓移植(allo-BMT)的慢性粒细胞性白血病患者在移植物植活、造血功能重建后早期出现造血功能障碍,经加大环孢素A(CsA)的用量,并联合应用糖皮质激素和粒细胞刺激因子(G-CSF)治愈,随访至今已2年,患者带慢性局限型移植物抗宿主病(GVHD)存活,现将本例报道如下.一、病例报告1. 一般资料:患者为男性,20岁,1997年12月确诊为慢性粒细胞性白血病(CML)慢性期.经用羟基脲治疗2个月,MA(米托恩醌,阿糖胞苷)及HOAP(三尖杉酯碱,长春新碱,阿糖胞苷,泼尼松)方案一疗程,血象及骨髓象达临床完全缓解,脾脏由肋下8.0*!cm回缩至1.0*!cm.骨髓供者为患者的胞姐,已婚,28岁,有生育史,无输血史.供、受者的ABO血型均为A型.HLA配型仅A位点1个抗原不符.
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成骨细胞促进胚胎干细胞向造血前体细胞分化的研究
目的 观察成骨细胞对胚胎干细胞(ESC)向造血前体细胞分化的促进作用.方法 用平皿黏附法培养BALB/c小鼠骨髓基质细胞,诱导分化为成骨细胞,鉴定后用作支持细胞.将小鼠胚胎于细胞(ESC-D3)先诱导生成胚胎体(EB),再与成骨细胞共培养,3d后进行代表血液血管干细胞的原始细胞集落(BL-CFC)培养并计数;7d后行流式细胞仪检测ESC来源的CD34+细胞生成比例.结果 在成骨细胞的支持下,与空白对照比较,ESC来源的代表血液血管干细胞的BL-CFC集落增加了2.89倍;由ESC生成的CD34+细胞由(12.68±2.39)％增加到(32.83±3.84)％.结论 成骨细胞体外可促进胚胎干细胞向造血前体细胞分化.
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间质干细胞与脑缺血损伤
间质干细胞(MSCs)是指存在于骨髓间质中具有自我复制能力,并在特定条件下分化为中胚层起源组织的非造血组织干细胞.
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大鼠外胚间充质干细胞的体外生长特性及促进造血恢复的研究
目的:了解大鼠外胚间充质干细胞(EMSC)的生物学特性,探索体内输入EMSC能否促进照射动物造血功能的恢复.方法:取E11.5 SD大鼠胚胎颌突,消化法培养获得外胚间充质干细胞,倒置显微镜下观察细胞形态和生长状况,免疫组化鉴定细胞来源;雄性SD大鼠(180～220 g)分为外胚间充质干细胞组(A组)、照射对照组(B组)、成纤维细胞组(C组)、正常对照组(D组),前三组给予60Coγ射线全身照射,剂量6.0 cGy,动态观察大鼠外周血变化,并于第4周检测骨髓有核细胞数量;测定大鼠骨髓细胞粒-巨噬细胞(CFU-GM)形成能力;采用内源性脾结节法测定脾集落形成能力.结果:培养的细胞呈单层生长,成纤维状、长梭形、有2～4个突起,抗HNK-1、Vimentin、S-100、NSE染色阳性,抗GFAP、NF、MA染色阴性,证实为未分化外胚间充质细胞;体内植入EMSC能够明显促进大鼠放射后外周血白细胞和血红蛋白的恢复,增加骨髓有核细胞数,减少骨髓造血细胞的坏死、凋亡,促进骨髓细胞的CFU-GM的形成率并能有效地支持造血细胞增殖、分化.结论:EMSC具有干细胞特征,能促进照射大鼠造血功能的恢复.
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油茶皂甙对实验动物造血机能的影响
目的研究油茶皂甙对豚鼠和罗非鱼造血功能的影响.方法比较油茶皂甙(1mg/kg)处理前和处理后豚鼠红细胞和血红蛋白量计数变化.罗非鱼分对照组和油茶皂甙处理组,分别在清水和含1ppm油茶皂甙水中饲养6天后,再同时置入清水中净养,观察其存活20%的高温度.结果豚鼠用药前后红细胞计数和血红蛋白含量改变轻微,无明显统计学差异(P＞0.05).对照组和油茶皂甙处理组罗非鱼在清水中饲养的耐受高温度为41.5℃,但在含油茶皂甙水中能耐受的高温度为36℃.结论油茶皂甙可短暂、轻微地降低红细胞和血红蛋白,但并不影响造血功能.
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骨髓腔内移植对异基因骨髓移植小鼠造血的影响
为探讨骨髓腔内骨髓移植(IBM-BMT)对异基因骨髓移植小鼠造血功能的影响,将供鼠C57BL/6(H-2b)骨髓细胞经微量注射器直接注入到经致死量照射后的受鼠BALB/c(H-2d)胫骨骨髓腔,在骨髓移植后1、7、14天分别检测受鼠外周血红细胞、白细胞、血小板、骨髓有核细胞数;骨髓移植后7、14天分别检测受鼠骨髓中的骨髓脾集落形成单位(CFU-S).结果显示,IBM-BMT组小鼠移植后7、14天的外周血红细胞、白细胞、血小板、骨髓中的有核细胞数,骨髓脾集落形成单位均显著高于传统骨髓移植组(Ⅳ-BMT)(P＜0.01).提示IBM-BMT较Ⅳ-BMT更能促进小鼠异基因骨髓移植后造血功能重建.
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熟地黄活性成分药理作用研究进展
目的:了解熟地黄活性成分药理作用研究进展.方法:通过数据库查阅分析熟地黄近十年的文献资料.结果与结论:熟地黄水提液能增强学习记忆,具有抗焦虑、抗肿瘤以及促进内皮细胞增殖作用.熟地黄醇提液有抗衰老作用,对红细胞新生有促进作用.多糖能增强机体造血功能,增强机体的免疫力,有抗氧化、抗突变作用,还有中枢抑制作用.5-羟甲基糠醛能增强红细胞变形性.
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制黄精水煎剂对环磷酰胺致造血功能抑制小鼠骨髓基质细胞的影响研究
目的:观察制黄精水煎剂对造血功能抑制小鼠骨髓基质细胞(BMSC)的影响,探讨其促进造血恢复的机制.方法:观测腹腔注射环磷酰胺后灌胃制黄精水煎剂小鼠骨髓基质细胞的形态、80％的贴壁时间及成纤维细胞集落形成单位(CFU-F)数和BMSC生长曲线.结果:灌胃制黄精水煎剂后BMSC生长达80％的贴壁时间较灌胃NS组和未灌胃的空白组相比显著缩短(P＜0.01);CFU-F数目显著多于NS组和空白组(P＜0.01);第5天、第6天、第7天,药物组的细胞数较NS组和空白组显著增加(P＜0.01).结论:制黄精水煎剂可促进环磷酰胺致造血抑制小鼠骨髓基质细胞增殖及CFU-F形成,这可能是其促进造血功能抑制小鼠造血恢复的途径之一.
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肺心病小板指数变化及临床意义
血小板指数包括血小板数(PTL),血小板甲均体积(MPV)、血小板体积分布宽度(PDW)和血小板压积(PCT)其变化有助于对某些非造血本系统疾病的诊断、治疗和病情判断.我们对44例慢性肺病急性期患者的PLT、MPV及PDW进行了检测分析.
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肿瘤化疗病人的护理
化疗是肿瘤综合治疗的重要手段之一,但化疗药物具有很强的细胞毒性作用,易引起恶心、呕吐、食欲减退,严重者可抑制骨髓引起引起造血功能障碍及机体免疫力下降等毒副反应.因此,科学护理是完成化疗计划的重要保证.
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胎盘生长因子(PIGF)的生物学功能
胎盘生长因子(PIGF)属于VEGF家族成员之一,近的研究发现PIGF及其受体Flt-1在治疗性血管新生方面有很大的潜能.PIGF还能通过动员VEGFR-1/Flt-1+的干细胞达到造血重建的目的.
关键词： 胎盘生长因子(PIGF) 血管新生 造血 -
巨细胞病毒感染致婴儿血液系统异常
人巨细胞病毒(HCMV)感染是小儿常见的感染性疾病之一.临床表现呈多样化且无特征性,往往累积多系统、多脏器,引起功能损害.临床报道比较多的是肝、肺、脑的损害,造血系统损害除血小板减少性紫癜外在小儿报道不多.近年我们在日常工作中发现因HCMV感染造成婴儿血液系统受累导致功能障碍的并不罕见,现总结报告如下.
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骨髓内皮细胞条件培养液促进小鼠胚胎干细胞生成造血集落形成细胞
目的:为观察骨髓内皮细胞务件培养液(mouse bone marrow stromal cell-conditional medium,mBMEC-CM)对鼠胚胎干细胞生成造血集落形成细胞的影响.方法:将鼠胚胎干细胞系D3细胞(embry-onic stem cell line-D3,ES-D3)形成4 d拟胚体(day-4 embryoid bodies,4dEBs),再用mBMEC-CM诱导4dEBs生成高增殖潜能集落形成细胞(high proliferation potential-colony formation cell,HPP-CFC)和红系爆式集落形成单位(burst forming unit-erythroid,BFU-E).以形成造血集落的数量为检测指标,观察mBMEC-CM诱导浓度、天数和诱导生成的细胞数与形成HPP-CFC和BFU-E数之间的关系.结果:形成的HPP-CFC和BFU-E集落数均与诱导生成的4dEBs细胞数呈正相关(HPP-CFC:r=0.916,P＜0.05;BFU-E:r=0.927,P＜0.05),且均随着种入的细胞数(在1×107～4×107/L范围内)增加而呈现相应的增加.当种入的细胞数增加到5×107/L时两种集落数均不再增加.mBMEC-CM诱导浓度(在0～20%范围内)与其诱导生成的HPP-CFC和BFU-E数呈剂量依赖性正相关(HPP-CFC:r=0.909,P＜0.05;BFU-E:r=0.927,P＜0.01).20%浓度mBMEC-CM诱导4dEBs来源的细胞于3,6和9 d形成的HPP-CFC和BFU-E数,以诱导3 d者高,6 d次之,9 d低.结论:骨髓内皮细胞条件培养液能促进鼠胚胎干细胞分化为HPP-CFC和BFU-E.
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两种条件培养基促进鼠胚胎干细胞分化为造血干细胞
目的:从鼠胚胎干细胞获得具有造血重建功能的造血干细胞.方法:将ES-D3细胞形成4天拟胚体(4dEBs),再用骨髓内皮细胞条件培养液(mBMEC-CM)和/或胎肝基质细胞条件培养液(FLSC-CM)诱导4dEBs生成造血干细胞.实验为mBMEC-CM+FLSC-CM组、mBMEC-CM组、FLSC-CM组,对照组.检测诱导生成的细胞造血干细胞特异抗原表达、造血相关基因表达、造血集落的形成以及造血重建能力.结果:从诱导ES-D3细胞生成造血干/祖细胞的数量和生成的集落总数看,mBMEC-CM+FLSC-CM组诱导效率显著高于其他3组.mBMEC-CM+FLSC-CM组诱导生成的细胞能重建照射鼠的造血系统.结论:骨髓内皮细胞条件培养液联合胎肝基质细胞条件培养液可促进鼠胚胎干细胞分化为具有造血重建能力的造血干细胞.
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造血刺激因子对巨核细胞体外扩增的影响
目的:探讨造血刺激因子对巨核系成熟细胞体外扩增的影响.方法:将小鼠骨髓单个核细胞(BMNC)按(2,4,6,8,10)×105个/mL浓度加入半固体培养体系,体外培养巨核细胞集落形成单位(CFU-Meg),观察BMNC数与CFU-Meg生成数之间的关系;将BMNC分别加入含rmSCF+rmTPO+rmIL-3(3HSFs),rmSCF+rmIL-3+rmTPO+rmIL-6(4HSFs)或骨髓成纤维细胞条件培养液(F-CM)的液体培养体系中持续培养,从培养的第1d开始每两天观察巨核系成熟细胞的生成情况.结果: 当小鼠骨髓单个核细胞按(2,4,6,8,10)×105个/mL浓度种入CFU-Meg培养体系时,CFU-Meg生成数随细胞种入数增加而增多;种入细胞浓度对CFU-Meg产率有影响,种入细胞浓度为1×106个/mL时,与种入细胞浓度为2×105个/mL,每2×105个骨髓单个核细胞生成的CFU-Meg数相比,差异有统计学意义(P<0.05).3HSFs,4HSFs和F-CM均对巨核系成熟细胞体外扩增有促进作用.3HSFs和4HSFs的扩增作用明显优于F-CM,4HSFs的扩增效果优于3HSFs; 3HSFs和4HSFs扩增体系扩增7 d效果好,F-CM扩增体系扩增5 d效果好.结论: 3HSFs, 4HSFs和F-CM均对巨核系成熟细胞体外扩增有促进作用;4HSFs扩增成熟巨核细胞效果优于3HSFs和F-CM;不同扩增体系扩增巨核细胞的佳效果所需的时间不同.
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卵黄囊干细胞向粒-单系造血祖细胞的定向诱导分化
目的:观察卵黄囊干细胞向粒-单系造血祖细胞(CFU-GM)的定向诱导分化,稳定和优化检测卵黄囊CFU-GM的方法.方法:应用体外琼脂培养法,观察多种因素对小鼠卵黄囊干细胞形成粒-单系造血祖细胞集落形成单位的影响;应用染色压片法对所生成的集落性质作鉴定.结果:植入不同数量的E7.5～8.5 d的卵黄囊干细胞与CFU-GM生成数量之间呈高度正相关;在接种相同数量的卵黄囊细胞数的情况下,DMEM培养体系生成的CFU-GM数明显多于IMDM培养体系生成的集落数(P<0.01);马血清(HS)组优于胎牛血清(FBS)组(P<0.01);与GM-CSF相比,WEHI-3条件培养液(W3-CM)能明显促进卵黄囊CFU-GM的生成(P<0.01).采用完整琼脂凝块压片法对卵黄囊细胞所形成的集落进行鉴定表明为粒-单系细胞集落.结论:卵黄囊干细胞具有向CFU-GM分化的能力;卵黄囊干细胞CFU-GM诱导体系中各组分变化均可影响CFU-GM的集落生成率;以DMEM,GM-CSF或W3-CM,HS为组分的体系可稳定地检测卵黄囊细胞CFU-GM的集落生成率.
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人类卵黄囊造血及卵黄囊内皮细胞的培养
造血是机体生命活动的重要部分,造血活动在胚胎早期就已经开始.成人造血处于稳定状态,血液中的血细胞起源于骨髓中的造血干细胞.胎儿期,肝脏是主要的造血器官,然而在肝脏发育之前,哺乳动物早期胚胎的发育就需要红细胞,这一时期,由卵黄囊的血岛产生大的原始红细胞满足胚胎发育的需要.胚胎的正常发育依赖于卵黄囊的正常功能,卵黄囊内胚层转运和代谢母体来源的大分子物质,合成铁蛋白,中胚层的血岛产生红细胞[1].国内外已有较多关于小鼠卵黄囊造血的报道,{而关于人卵黄囊造血的研究较少.人卵黄囊在妊娠的第3～6周是主要的红细胞生成部位,至妊娠的第6周,其功能逐渐被肝脏所代替,到妊娠22周后骨髓造血逐渐建立并维持终身[2,3].因此本实验取妊娠4周和6周的人药物流产胚胎,研究其卵黄囊造血功能.通过对卵黄囊细胞造血集落生成的分析和内皮细胞的培养,进一步了解人卵黄囊的造血功能,以及卵黄囊内皮细胞在调控造血中的作用.
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亚急性苯中毒9例临床分析
根据苯中毒的发病机理,急性苯中毒以中枢神经系统的抑制作用为主要表现,慢性中毒则以造血系统损害为主要表现.但近期发现在较短时期接触较高浓度苯以后,可出现急性再生障碍性贫血,按照接触毒物到发病时间看应属于亚急性中毒,我院已收治9例此类病人,现报告如下.
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黄芪注射液对骨髓抑制性贫血小鼠造血调控的实验研究
目的观察黄芪注射液(Astragalus membranaceus injection,AMI)对放、化疗因素所致骨髓抑制性贫血小鼠造血的影响,并探讨其可能的机制.方法:采用Co60照射、注射环磷酰胺、氯霉素复合造模建立贫血小鼠模型,并将动物随机分为三组:AMI给药组Ⅰ、Ⅱ和对照组,分别腹腔注射AMI[500 mg/kg、1000 mg/kg]或等量生理盐水,第7日全自动血球仪检测外周血和骨髓有核细胞,并应用免疫组化和造血祖细胞体外培养技术,检测骨髓有核细胞BcL-XL和BcL-2蛋白的表达及进行三系造血祖细胞集落计数.结果:AMI给药组Ⅰ的RBC、HB、PLT(P＜0.05)和BM(P＜0.01)明显高于贫血对照组;同时给药组Ⅰ的CFU-E、BFU-E、CFU-Meg和骨髓有核细胞抗凋亡蛋白BcL-XL的表达也明显高于贫血对照组(P＜0.05或P＜0.01),给药组Ⅱ的CFU-E和骨髓有核细胞抗凋亡蛋白BcL-XL的表达也高于贫血对照组(P＜0.05).结论:黄芪注射液可以通过上调抗凋亡蛋白BcL-XL表达减轻骨髓有核细胞的凋亡,并促进红系、巨核造血.
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黄芪注射液对小鼠骨髓细胞增殖周期的影响
采用骨髓细胞体外培养以及流式细胞仪等实验血液学方法,研究黄芪注射液(AMI)对正常和贫血小鼠骨髓细胞增殖周期的影响,终浓度为40μg/ml的AMI以及终浓度为40μg/ml、400μg/ml的AMI加入培养体系中可分别促进正常或贫血小鼠骨髓细胞进入增殖活跃期(P＜0.05),提示一定浓度的AMI可以增强小鼠的造血功能.
