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荧光定量PCR技术及其应用
PCR技术是一种体外核酸扩增技术.1986年第1台PCR热循环仪的问世使PCR技术实现了操作自动化.通过PCR技术可对特定基因进行扩增,其主要应用领域是基因检测和临床基因诊断.但是,PCR技术应用于基因诊断还存在许多局限性,主要表现在不能准确定量和易产生假阳性和交叉污染等.
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独立通风笼具主体结构设计制作技术规范的研究
独立通风笼具(Individual ventilated Cage,IVC)是一种新型的实验动物笼具,其特点是每个笼盒独立送、排风.可以避免盒与盒之间的交叉污染,防止实验人员污染实验动物,也可以防止实验动物感染实验人员.
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雅培Aeroset全自动生化分析仪分析项目交叉污染的处理体会
了解雅培Aeroset全自动生化分析仪分析项目交叉污染的各种处理方法,包括冲洗样品针和试剂针;清洗冲洗组件;调整分析项目的 位置和顺序等.
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齐齐哈尔市口腔科卫生状况调查与分析
口腔科是易于发生交叉污染、交叉感染的场所.近年来患者在看牙病时感染其他疾病的病例不断增多,随着乙型肝炎病毒(HBV)、人类免疫缺陷病毒(HIV)感染者的逐年增加,医护人员接触HBV、HIV感染或艾滋病患者的机会也随之增加,口腔科器械种类较多,频繁用于患者口中,直接接触患者的唾液、血液,容易传播乙型肝炎、丙型肝炎及艾滋病等.消毒是预防医院内感染的重要措施之一,消毒效果的监测是评价其消毒方法是否合理、消毒效果是否可靠的手段,因而在医院消毒工作中至关重要.为此我们对市区所属医院的口腔科及个体牙科诊所消毒状况进行了监督监测,现将结果报告如下.
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生化试剂对胆汁酸测定的交叉污染及防范措施
目的 探讨生化试剂对胆汁酸(TBA)测定的交叉污染及防范措施.方法 ①采用放大的方法,将总胆汁酸作为观察项目,其他常规生化项目ALT、CREA、GGT、AST、TP、UA、ALB、TBIL、DBIL、TG、CHOL、HDL、BUN、APOA、APOB、GLU、FRUC作为干扰项目,筛查并确认对总胆汁酸测定有明显干扰的项目;②设定特殊清洗程序来降低干扰.结果 本实验发现尿酸、三酰甘油、总胆固醇对总胆汁酸测定有明显的正干扰.设置加强水冲洗试剂针程序可有效的去除尿酸的干扰;设置在总胆汁酸项目加试剂前对仪器固定比色杯自动清洗后再进行特殊清洗,可消除因试剂携带污染对总汁酸测定的干扰.结论 全自动生化分析仪测定总胆汁酸存在项目间的交叉污染,设置特殊清洗方式可有效地消除因试剂携带污染对TBA测定的干扰.
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脂肪酶试剂对血清总胆汁酸测定结果的影响
目的 了解生化分析仪测定脂肪酶(LPS)后是否对测定血清总胆汁酸(TBA)结果有影响.方法(1)取混合血清,单独测定总胆汁酸作为对照组,测定脂肪酶后再测定总胆汁酸作为检测组;(2)测定脂肪酶后,连续测定总胆汁酸10次,看其影响至第几管;(3)把脂肪酶的试剂1和试剂2作为标本分别测定总胆汁酸含量;(4)测定脂肪酶后,设定特殊清洗程序,再测定总胆汁酸,作为清洗后检测组.结果 脂肪酶试剂对血清总胆汁酸的检测有较大的影响,影响到第6管,主要干扰试剂是脂肪酶的试剂1,采用碱性特殊清洗液清洗试剂针和搅拌棒后,可以减少其影响,但不能完全消除.结论 脂肪酶试剂对总胆汁酸测定有明显的正干扰,实际工作中应合理安排脂肪酶与总胆汁酸的检测顺序,定期保养生化分析仪,以减少交叉污染.
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实验室交叉污染致ELISA实验失败原因探讨
目的 寻找ELISA实验失败原因,规范实验室操作.方法 分析排除法,对关键因素用EELSA实验证实.结果"84"消毒液是实验室ELISA失败的主要污染源.结论 实验室应规范操作,不可用"84"消毒液浸泡过的纱布拍板;应避免实验用容器具与"84"消毒液等交叉污染的可能,确保实验结果的准确性和可靠性.
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尿嘧啶DNA糖基化酶在PCR防污染中的应用
1.PCR"残留污染"在PCR操作过程中,容易出现"污染"问题,原因主要有如下几种情况:①模板的交叉污染:在样品采集或处理中,气溶胶、加样器取样时的泡沫或其他原因引起样品或模板的交叉污染,造成假阳性,属于正常DNA(由A、T、G、C四种碱基组成)引起的污染;②扩增产物的污染:在扩增过程中,将碱基T置换成U,使得扩增产物为U-DNA(由A、U、G、C四种碱基组成),由于产物量特别大,容易溢漏引起污染,造成假阳性;③核酸酶、蛋白酶的污染造成假阴性;在这三种情况中为严重是第二种,即称之为"残留污染",因为PCR扩增的放大倍数高达千万倍,而且在实际应用中扩增一直在反复进行,造成扩增产物的大量堆积,难于将其控制降解,即使是荧光PCR也很难避免扩增产物的污染,为了使得PCR结果更加可靠、准确,有必要在反应管完全封闭后于管内通过酶或其他方法,将操作过程中可能带入的残留污染物破坏,使其不能成为新一轮扩增的模板,从UDG的生物学性质可知,它是完成这一任务的佳选择.
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雅培i2000全自动化学发光免疫分析仪性能评价方法研究
目的 对雅培i2000 全自动化学发光免疫分析仪的性能进行了评价.方法参考
医药行业标准和国家质量监督检验检疫总局颁布的有关医疗器械检定校准计量技术规范,阐述了准确度、重复性、线性范围、交叉污染等指标的评价方法和选取理由.结果准确度:197 pmol/L 胰岛素标准品测定结果误差为6 pmol/L,20 pmol/L 胰岛素标准品测定结果误差为2 pmol/L;重复性:对20 pmol/L 的胰岛素标准品重复测定6 次,6 次测定的相对标准偏差为2%;稳定性:开机4 h 后和8 h 后的相对偏差分别为3% 和4%;线性范围:20 ~ 197 pmol/L 的胰岛素范围内,其线性相关系数可达到0.997;交叉污染:从低到高交叉污染率为1%,从高到低交叉污染率为0.2%.结论提出的方法可用于日常全自动免疫分析仪性能的评价和校准,有助于检测结果的准确和可比. -
正确安排生化自动分析项目顺序,防止试剂带来的交叉污染
很多类型的全自动生化分析仪由其清洗系统的工作模式所决定,一个项目对紧随其后的下一个甚至几个项目的测定具有带来一定程度的试剂污染的可能,并且随着仪器使用时间的累加,仪器状况的下降,试剂交叉污染的程度会有所加深.在实际工作中主要表现为某一项目的测定结果一直符合临床要求,可是一段时间以后测定结果趋高,并且日益明显,而单独测定该项目时测得值又合理起来,给日常工作带来极大的不便.因此避免试剂间的干扰,提高测定结果的准确性变得非常重要.
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"人脐静脉内皮细胞系"ECV304实际上是人膀胱癌细胞系T24
细胞系间的交叉污染是全世界生物医学研究领域面临的重大难题之一.多项研究显示18%~36%的人肿瘤细胞系为假细胞系或身份不正确[1].
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临床106例乙肝及丙型肝炎使用干扰素治疗对甲状腺损害的结果分析
作者从2010年1月至2011年4月在我院用干扰素治疗的乙肝及丙形肝炎患者在用药半年后进行甲状腺功能检测1.本院使用的仪器:日本东曹产AIA_1800ST全自动免疫发光分析仪,试剂是本机专用的干粉单人份包装,无任何交叉污染,均在效期内使用,效期为一年,室内指控结果均在二个标准差之内2SD,结果可信.
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HITACHI7080全自动生化分析仪交叉污染与项目设置探讨
目的:揭示全自动生化分析仪使用过程中各检测项目间相互交叉污染的问题。方法以无机磷、镁和甘油三脂为对象将内含磷酸盐、镁离子和甘油类组分的检测项目和这3个项目做几种组合,观察这些试剂对病人标本检测这3个项目的影响。结果说明这3个项目的检测设置对检测结果有明显影响,差异高达数倍。讨论应注意分析项目的设置顺序,对已论证设定好的检测顺序不能随意改动。
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一起伤寒沙门氏菌引起的食物中毒调查及实验室检测分析
目的:调查分析一起伤寒沙门氏菌引起的食品安全事故的流行病学特点、传播途径及病原体,为预防食品安全突发事件,制定相应的预防措施提供依据。方法根据初步流行病学调查建立病例定义,对共同就餐的人员进行病例搜索,并分别对59例病例,40例对照进行现场流行病学调查,填写流行病学个案调查表。根据流行病学调查结果对可疑样品进行现场采样,依据《食物中毒诊断标准及技术处理总则》(G B14938-94)及食品安全国家标准《食品微生物学检验沙门氏菌检验》(GB4789.4-2010)进行检测,针对流行病学特点、病例临床症状及可能的传播途径制定防治方案。结果该起突发食品安全事故的首发病例发病时间为2013年7月29日17时32分,疫情历时3天。各年龄段均有发生,以成年人为主。主要症状为腹痛、恶心、腹泻、呕吐、发热等症状。对肉肠、蛋肠、肝、肉馅等剩余食品进行了采样;对熟肉菜板,对盛装熟食的托盘、切熟食的菜刀、加工间菜板进行了涂抹采样,一份呕吐物,共采集10份样品,送交实验室检测,其中9份样品检出伤寒沙门氏菌。结论此起突发食品安全事件由伤寒沙门氏菌引起的;传播途径为变质卷煎拼肝污染其他食物及食物器具而引起的。
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全自动生化分析仪及试剂化学污染对检测结果的影响
全自动生化分析仪及测定试剂盒目前已在各医院检验科大量应用.但在检测病人标本时由于存在试剂间的化学污染,检测结果的可靠性受到一定程度的影响,这一点目前并未得到生化检验人员足够的重视.出现问题时要追究原因,以避免相似问题的再发生.本文结合实际,探讨试剂间化学交叉污染的来源及避免的对策,希望引起检验人员重视,以减少此类污染带来的结果准确性问题.
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做好甲级写字楼控烟工作的浅议
自2014年3月1日实施《深圳经济特区控制吸烟条例》以来,深圳市卫生监督部门接到数十起投诉写字楼吸烟问题。根据《深圳经济特区控制吸烟条例》第八条规定,室内公共场所和条例规定范围内的室外禁烟场所禁止吸烟。甲级写字楼是由物业管理公司管理,并租赁给商业公司办公室。职工们在办公室每天工作8小时,在室内停留时间长,在烟雾缭绕的办公室里,尤其是对怀、孕哺乳的女职工,若被动吸烟时间长,会严重危害健康二代人的健康。即使在楼梯道吸烟点吸烟,空气仍会交叉污染到办公室,因此,加强甲级写字楼控烟工作很重要。
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探针故障导致生化分析仪数值异常
OLYMPUS AU640生化分析仪如果从分析结果中检测出异常数值,在屏幕上分析数据处就会出现异常数值标志,同时打印机也会打印该标志.该生化分析仪的探针包括样本探针、试剂探针等.在工作中,探针如果被堵塞,或其形状、位置等发生改变,会使加样量不准确,或者不易被冲洗干净而产生交叉污染,导致异常数值产生.下面将探针常见的异常情况及处理方法介绍如下.
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迈瑞BS-300全自动生化分析仪故障分析与排除
迈瑞BS-300全自动生化分析仪是深圳迈瑞公司于2003年推出的一款分析仪,它使用全中文操作软件,具有精密度高、交叉污染低、消耗低等优点.现将使用中所遇到的一些典型故障及处理方法总结如下,供参考.1 故障一1.1 故障现象试剂针在吸试剂时报警.
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Xpand全自动生化分析仪故障2例分析与处理
西门子Dimension Xpand(以前称“德林”)全自动生化分析仪是医院检查患者血液的重要设备.该仪器主要由气路、水路、电路、光路等各个系统组成[1].该仪器主要的优点有:操作维护智能化、检查结果准确、重复性好,而且其独特的全封闭环保型反应杯制作系统,克服了一直以来困扰用户的反应杯交叉污染的问题.反应杯使用后自动封口处理,既保护了操作者,也保护了环境,经济又安全.我院使用的Dimension Xpand自动生化分析仪已经运行5 a,现将在这几年中遇到的一些故障情况和检修分析总结如下,供参考.
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因电磁阀故障导致生化分析仪检测血糖的交叉污染
0 引言随着全自动生化分析仪的普及,试剂之间的交叉污染逐渐引起检验工作者的注意,而试剂探针的残留携带是造成检测项目间交叉污染和影响结果的重要因素[1].在现实工作当中,突然有严重交叉污染的现象出现且比较固定时,应该首先检查仪器冲洗站是否有故障.这一点笔者深有体会.1 故障现象我院的全自动生化分析仪ROCHEP800在2012年2月12日早晨做质控时发现血糖严重失控,高、低值都超出了-3 SD,而其他项目基本在控.