首页 > 文献资料
-
新型H7N9禽流感病毒研究进展
新型H7N9禽流感病毒对中国的突袭引起了全球的高度关注.本文从H7N9禽流感病毒可能的起源和基因重组事件、病毒基因的多样性、重要突变位点与病毒致病性、采样与实验室检测、流行病学调查、临床症状、治疗、疫苗研究和预防等多个方面对国际、国内有关H7N9禽流感病毒的研究进展进行综述,以期为H7N9禽流感病毒的防控提供参考.
-
甲型流感患者感染初期血常规分析及临床意义
目的：了解甲型流感患者感染初期血常规特点，为临床诊断治疗提供依据。方法选取2014年至今我院收治的呼吸道感染的患者，回顾性分析患者感染初期的血常规指标。甲流感染组，其中H1N146例，H7N93例，H5N61例；细菌感染组36例；一般病毒感染组33例；30名健康体检者做对照组。分析各组血常规指标。结果甲流感染组淋巴细胞比例（LY%）明显下降(P<0.05)，血小板（PLT）数目显著减少(P<0.05)；细菌感染组白细胞数目(WBC)明显升高(P<0.05)，血小板没显著变化；一般病毒感染组白细胞数目相对减少，淋巴细胞比例相对升高。结论甲型流感患者初期淋巴细胞比例明显下降，血小板数目显著减少，可以与细菌感染组和一般病毒感染组相鉴别，有利于感染初期的鉴别诊断。
-
淄博市外环境禽流感病毒监测结果分析
目的 了解淄博市首例人感染H7N9禽流感后涉禽外环境中禽流感病毒的污染情况,为人感染H7N9禽流感疫情的防控提供依据.方法 采集全市各区县城乡活禽市场等涉禽外环境的环境标本213份,采用实时荧光定量PCR对甲型通用流感病毒、H5、H7、H9等禽流感亚型进行核酸检测.结果 全市共采集外环境标本213份,流感病毒A型阳性率为12.69％,阳性标本中H9和H7的阳性较高,分别为59.26％和25.93％;不同标本类型,清洗禽类的污水(25.00％)和宰杀或摆放禽类案板表面擦拭标本(17.14％)阳性率较高;监测场所中城乡活禽市场的阳性率高;不同区县中张店区阳性率高,检出H7亚型的区县为张店区、临淄区、周村区.结论 淄博市大部分区县外环境中均检出禽流感病毒,从事禽类宰杀加工的人员对禽流感病毒有较高的暴露风险,需加强健康宣传,同时应加强对城乡活禽市场的监测.
-
北京顺义区人感染H7N9禽流感风险监测与防控
目的 评估北京市顺义区人感染H7N9禽流感发生风险,为完善H7N9禽流感防控策略提供科学依据.方法 2013年4-12月,对北京市首例人感染H7N9禽流感病例感染来源进行调查,采集顺义区普通人群、禽类职业人群、流感样病例、肺炎病例咽拭子标本及禽类饲养、屠宰环境和公园野禽粪便标本进行H7N9禽流感病毒核酸检测,分析感染情况.结果 北京市首例人感染H7N9禽流感病例病家外环境、禽类运输车、鸡笼涂抹标本均检测出H7N9禽流感病毒核酸,而病例本村其他户散养禽类及其环境、本村周边野禽标本均未检出H7N9禽流感病毒核酸;咽拭子标本普通人群440件、禽类职业人群829件、流感样病例1 053件、肺炎病例109件,禽类饲养及屠宰环境涂抹173件,野禽粪便376件,均未检出H7N9禽流感病毒核酸.结论 顺义区人群及本地禽间及环境中均未发现H7N9禽流感病毒,输入性活禽交易及宰杀是顺义区人群感染H7N9禽流感的主要风险来源.相关部门应严格落实取缔活禽贩卖宰杀及加强禽间、人群H7N9病毒感染监测等防控措施.
-
2014—2017年上海市浦东新区外环境H7N9禽流感病毒监测分析
目的 了解2014—2017年上海市浦东新区外环境中H7N9禽流感病毒分布情况,为防控工作提供依据.方法 采集不同涉禽场所不同类型外环境标本,采用Real-time PCR核酸检测方法进行标本检测,数据用Excel和SPSS 20.0软件进行分析.结果 2014—2017年上海市浦东新区共采集外环境标本4347份,检出FluA型流感病毒阳性标本910份(阳性率20.93％),H7N9亚型阳性92份(阳性率2.12％).不同场所中,H7N9亚型在活禽批发市场阳性率高,为5.74％(59/1028),其次是农贸市场(3.71％);不同类型标本中,清洗禽类型笼具后的污水阳性率高(5.65％),其次是地表面及宰杀或摆放禽肉案板表面的擦拭标本(2.64％).结论 上海市浦东新区活禽批发市场、农贸市场是人感染H7N9禽流感病毒的高风险场所.
-
1例慢性粒细胞白血病患者合并感染H7N9的护理
慢性粒细胞白血病[1]合并感染H7N9禽流感[2] ,病情危险性大且极其罕见,大多数医护工作人员没有遇见过这样的病情.本文记录了1例慢性粒细胞白血病患者合并感染H7N9从发病到治愈的护理过程,发现治疗过程中,除了良好的药物治疗外,良好的护理对高致病性禽流感患者救治成功,起到了积极的作用. 希望通过本文给相同及类似病例的护理工作给予借鉴.
-
广东省江门市首例人感染H7N9禽流感病例的流行病学调查
目的 为了及时有效地控制人感染H7N9禽流感疫情,防制疫情扩散蔓延.方法 采用流行病学调查方法,调查病例的发病经过、可能的感染来源、传播途径及暴露因素等,医学观察患者的密切接触者.结果 确诊l例人感染H7N9禽流感病例,经抢救无效死亡.患者有明确的活禽市场接触史,咽拭子检测H7N9禽流感病毒核酸阳性.患者的密切接触者无继发病例.通过强化监测流感病例215例,均未发现H7N9禽流感病毒核酸阳性.患者暴露的活禽交易市场外环境20份标本检出3份H7N9禽流感病毒核酸阳性.结论 以后仍有可能出现人感染H7N9禽流感病例,各项防控措施必须加强.
-
H7N9禽流感病毒实时荧光RT-PCR检测方法的建立与评价
目的 应用TaqMan探针实时荧光RT-PCR技术,建立一种快速检测H7N9禽流感病毒的方法.方法 针对H7N9禽流感病毒的HA和NA基因分别设计特异性引物和TaqMan-LNA探针,建立H7N9禽流感病毒特异性实时荧光RT-PCR快速检测方法.结果 本研究建立的方法对检测H7N9禽流感病毒株的灵敏度达到10 PFU/ml.该方法特异性强,与其他亚型流感病毒株及呼吸道病原体无交叉反应.与对照方法相比,本研究方法的检测阳性符合率为99.07％,阴性符合率为100％,Kappa值为0.993.结论 建立的检测试剂盒具有快速灵敏、结果准确可靠等优点,适用于H7N9禽流感病毒的分子生物学检测和监测.
关键词： H7N9禽流感病毒 实时荧光RT-PCR 检测方法 -
轻症和重症人感染H7N9禽流感病毒的致病性
[目的]研究来自不同临床类型H7N9感染者病毒分离株的致病性,探索病毒分子特性与致病差异的关系.[方法]建立人PBMC体外培养及病毒感染模型,人肺组织体外培养及病毒感染模型以及小鼠感染H7N9动物模型,分别从以上3个层次研究两株来自轻症和重症H7N9感染者病毒分离株(即GD-6和GD-7)的感染性及病理损伤状况.[结果]两株病毒均能感染人PBMC、人肺组织体外培养模型和Balb/C小鼠的肺组织,并在其中有效复制,且GD-7的增殖能力强于GD-6.病毒主要感染人肺组织的II型肺泡上皮细胞,GD-7引起肺组织的病例变化更加明显.在小鼠肺组织,GD-7的病毒载量高于GD-6,小鼠感染病毒后其肺指数增大,肺组织的病理变化明显,且GD-7对小鼠的致病力强于GD-6.[结论]重症分离株GD-7的复制能力和致病力强于轻症分离株GD-6,结合前期研究结果,两株病毒存在关键氨基酸位点的差异,其中PB2蛋白的627位点在GD-7发生了突变E627K,因此推测病毒载量及关键位点突变可能对病毒的致病力起重要作用.
-
两株人H7N9禽流感病毒的全基因组测序及分子特征分析
[目的]对两株从轻症病例和重症死亡病例中分离的人H7N9禽流感病毒进行全基因组测序,研究其来源、基因组特征以及相互间的分子差异,旨在了解毒株的遗传进化特征与其致病性及其所致疾病临床类型的关系,为进一步阐明H7N9禽流感病毒的致病机制提供科学依据.[方法]选取两株从轻症病例和重症死亡病例中分离的H7N9禽流感病毒进行全基因组序列测定;运用生物信息学软件比较分析两株病毒的遗传进化关系、基因组特征、受体结合位点、宿主特异性位点及致病相关位点等重要分子特征;从禽流感共享数据(GISAID)下载2013年至2014年10月轻症和重症病例的病毒分离株序列,分析致病相关关键位点差异,并分析这些变异与其致病性及所致疾病临床类型的关系.[结果]这两株H7N9禽流感病毒的HA、NA和M基因来源于2013年华东地区流行的H7N9禽流感病毒,NP、NS、PA、PB1和PB2基因来源于2013年在广东地区禽类中流行的H9N2禽流感病毒;H7N9禽流感病毒PA蛋白L336M和PB1蛋白I368V的突变率随流行时间的延长而逐渐上升,并存在地区差异;两株病毒各基因核苷酸同源性达到99.2％以上,氨基酸同源性在99.5％以上,但各基因节段存在个别氨基酸的差异,其中HA受体结合位点存在一个关键氨基酸的差异(226L和226 Q),宿主特异性位点存在两个关键氨基酸的差异(PB2-591L和PB2-591Q,PB2-627E和PB2-627K),毒力位点存在两个关键氨基酸差异(PA-353R和PA-353K,PB2-627E和PB2-627K);M2均发生了S31N突变;潜在糖基化位点均相对保守;2013年至2014年10月报道的重症病例病毒分离株PB2蛋白E627K突变率高于轻症病例分离株.[结论]两株来自不同临床类型的H7N9禽流感病毒是一种新的重组病毒,是由华东地区流行的人H7N9禽流感病毒和在广东地区禽类中流行的H9N2禽流感病毒基因重组而来;H7N9禽流感病毒的某些致病相关的关键氨基酸位点在流行的过程中不断发生变异,必须密切监测毒株的变异动向;两株致病力不同的病毒各基因节段虽然同源性较高,但存在关键氨基酸位点的差异,其中PB2蛋白627位氨基酸位点的差异可能对病毒的致病性起重要作用,与所致疾病临床类型相关.
-
H7N9禽流感病毒对人类致病的分子基础分析
[目的]了解H7N9禽流感病毒对人类致病的分子特征,为更好地预防与治疗H7N9人禽流感提供科学依据.[方法]从GISAID数据库中下载中国2013年分离的所有H7N9禽流感病毒株的基因及蛋白序列,并从NCBI数据库中下载其他相关的流感病毒序列,运用生物信息学软件分析H7N9禽流感病毒基因的系统进化特征、受体结合位点、宿主特异位点、飞沫传播关键氨基酸位点、致病及毒力相关位点、耐药性位点及潜在糖基化位点等的变异情况.[结果]2013年中国流行的H7N9禽流感病毒为四源重组病毒,所有基因片段均来源于禽类,不含任何人流感病毒基因;病毒HA的受体结合位点发生了2个关键氨基酸的变异(G186V和Q226L);在与飞沫传播有关的关键氨基酸位点中,个别氨基酸已发生了变异(T160A、Q226L);该病毒具有8个毒力增强位点;所有分离株的M2均发生了S31N变异;分离株A/Shanghai/1/2013的NA的耐药位点发生了R294K变异;所有毒株的潜在糖基化位点均相对保守.[结论]H7N9禽流感病毒为四源重组的新型禽流感病毒.该病毒具有与人呼吸道上皮细胞SAa-2,6 Gal受体结合的分子基础,但目前尚未获得经飞沫传播的充分条件,人传人的可能性不大.该病毒具有低致病性禽流感病毒的分子特征,表明对禽类致病性不强,但其对人类呈高致病性,这可能与其毒力位点的特征有关.所有分离毒株均发生了对离子通道抑制剂金刚烷胺类药物的耐药性突变,个别毒株已发生了对神经氨酸酶抑制剂奥司他韦(达菲)的耐药性突变.
-
H7N9禽流感病毒研究现状
2013年3月在中国华东地区爆发了一场严重的人类感染禽流感疫情,导致此次疫情的病原体为一种全新的H7N9禽流感病毒,该病毒以其对人类的高致病性及远高于H5N1禽流感病毒的传播速度而引起全球广泛关注.本文就H7N9禽流感病毒的病原学、致病的分子基础、流行病学、临床特征及防治措施等方面的研究现状进行综述,旨在了解人感染H7N9禽流感的研究进展,为人感染H7N9禽流感的有效防控提供科学依据.
-
南宁市农贸市场禽类从业人员对H7N9禽流感的知、信、行调查
目的：了解南宁市农贸市场禽类从业人员对H7 N9禽流感的知、信、行现状，探索其感染 H7 N9禽流感潜在的危险因素和防控措施。方法在南宁市7个城区按随机数字表法抽取36个农贸市场对禽类从业人员进行问卷调查。结果共发放调查问卷209份，回收有效调查问卷199份，有效问卷回收率为95．22％。被调查的199名农贸市场禽类从业人员H7N9禽流感知识得分中位数为5．00分，86．93％的被调查者对H7N9禽流感知识掌握情况较差（≤9分）。年龄、文化程度是H7N9禽流感知识得分的影响因素（P＜0．05）。仅18．09％认为自己有被H7N9感染的风险。认为疫苗是预防H7N9感染的有效手段、有必要宣传H7N9知识的男性比例高于女性（P＜0．05）。84．92％的人会采取预防措施，但戴口罩和护目镜的比例较低，分别为19．53％和0．59％。 H7N9禽流感知识得分＞5分组戴口罩、勤洗手比例高于≤5分组（P＜0．05），但穿防护服、穿水鞋比例低于≤5分组（P＜0．05）。结论南宁市农贸市场禽类从业人员H7N9禽流感相关知识匮乏，防护意识不高，应根据该人群的特点有针对性地开展健康教育及防护工作。
-
惠州市首例人H7N9禽流感病例的实验室诊断与防控对策
目的 分析惠州市首例人感染H7N9禽流感病例病原学特征,了解人感染H7N9禽流感的流行规律,为制定防控措施提供依据.方法 提取患者标本病毒核酸,利用荧光定量PCR进行检测,扩增HA和NA基因片段并进行序列分析.通过流感强化监测扩大人感染H7N9禽流感病例的主动筛选,采集活禽交易市场、禽类养殖场以及密切接触者标本开展病原学主动监测.结果 该患者呼吸道标本甲型流感、H7亚型和N9亚型均为阳性,对血凝素和神经氨酸酶基因序列进行比对和进化分析,显示该H7N9禽流感病毒HA基因与NA基因与已公布的人感染H7N9禽流感病毒序列高度同源.96名密切接触者均未发现感染H7N9禽流感病毒.通过流感强化监测,严重急性呼吸道感染病例274例,发现4例人感染H7N9禽流感病例.活禽交易市场外环境和禽类标本检出3份H7N9禽流感病毒核酸阳性.结论 惠州首例H7N9禽流感病例病毒HA及NA特征基因序列与国内流行的病毒株高度同源,未发现人传人的迹象,存在禽类携带及外环境污染H7N9禽流感病毒的情况.通过流行病学调查分析和病原学监测来逐步揭示H7N9禽流感病毒的流行特征和传播途径,为制定科学合理的防控策略提供依据.
-
H7N9禽流感病毒在鸡多个器官分布的研究
目的 建立免疫荧光及激光共聚焦检测H7N9禽流感病毒的方法,了解H7N9禽流感病毒在鸡多个器官的分布情况.方法 从活禽市场现场宰杀的20只活鸡中筛选H7N9禽流感病毒阳性者,取其气管、肺、肝、肠制作石蜡切片,用抗流感病毒核蛋白单抗孵育结合后与DAPI(4',6-二脒基-2-苯基吲哚)及带有FITC(异硫氰酸荧光素)的二抗孵育结合,阳性样本有蓝色和绿色荧光,阴性样本仅发出蓝色荧光,用荧光显微镜及激光扫描共聚焦显微镜分别进行观察.结果 在受检的20只活鸡中,共发现9只活鸡感染H7N9禽流感病毒,感染率为45％.其中5只在气管切片观察到病毒颗粒荧光,2只在肺组织切片观察到病毒颗粒荧光,6只在肝组织切片观察到病毒颗粒荧光,5只在肠组织切片观察到病毒颗粒荧光;其中1只鸡在四种器官中均阳性,1只鸡只在肠组织切片中观察到病毒.结论 鸡全身多个器官组织有H7N9禽流感病毒的受体,肺组织较其他三种器官组织受体分布少,病毒在鸡的消化道分布也较广泛,提示粪-口途径是活禽感染H7N9流感病毒的重要途径.免疫荧光及激光共聚焦实验可检测病毒在组织及细胞的分布.
-
疑似 H7N9禽流感病毒感染患者流感病毒通用引物检测结果分析
目的：分析疑似H7N9禽流感病毒感染患者流感病毒通用引物检测结果。方法采用逆转录聚合酶链反应对26例疑似 H7N9禽流感病毒感染患者咽拭子标本进行流感病毒通用引物筛查。结果共检出3例流感病毒通用引物扩增阳性患者。结论对疑似H7N9禽流感病毒感染患者进行流感病毒核酸检测，能够为临床及时干预提供实验室依据，有助于有效控制病情进展，改善患者预后。
-
北京市郊区1例人感染H7N9禽流感病例的流行病学调查
目的 对北京市郊区1例人感染H7N9禽流感病例感染来源进行流行病学调查,明确辖区H7N9病毒传播风险.方法 通过面对面调查方式对病例、密切接触者等进行流行病学调查.对密切接触者、可疑暴露者及外环境采样,开展实验室检测.结果 患者密切接触过病死禽,患者感染H7N9禽流感病毒为低致病性,1 6份禽类及外环境样本H7N9病毒核酸检测结果为阳性.患者和2份相关环境样基因组测序高度相似.结论 患者感染来源疑与接触病死禽有关,应加强流动活禽交易的管控.
-
新型抗流感病毒神经氨酸酶抑制剂的研究进展概论
流感病毒神经氨酸酶抑制剂(Influenza virus neuraminidase inhibitors,NAI)是近年来开发的一类抗流感病毒药物中重要的组成,具有对各亚型流感病毒广谱、有效、低耐药、良好耐受性等优点,成为当前抗击人感染高致病性禽流感和新型A型HxNx流感病毒主要的一类药物.扎那米韦、奥司米韦和帕拉米韦3个抑制剂能抑制多种A、B型流感病毒的NA活性,前两者早已上市.针对口服生物利用度不高,研发了帕拉米韦氯化钠注射液也已进入Ⅲ期临床.本文报道了国内外扎那米韦、奥司米韦和帕拉米韦3个抑制剂的研发历程、理化性质、作用机制、药效学、药动学、临床实验研究,并对国内外生产企业的研发动态进行了概述.
-
H7N9禽流感病毒的研究进展
2013年2月在国内陆续出现人感染新型H7N9禽流感病毒的病例,这是全球第一次发现的一种新的亚型流感病毒,该病毒属于新型三元重配体病毒.至2013年5月30日WHO的报道显示,在我国内地已有131例患者确诊,并且死亡39例,死亡率高达28％.H7N9禽流感病毒在禽类中感染致病性低,而在人类中感染致病性高.2014年5月21日,山东烟台再现H7N91例.疫情提示应继续注重对此病毒的研究,以防止H7N9疫情再次爆发.本文从微生物学角度对H7N9禽流感病毒的生物学性状、致病性与免疫性、微生物学检查法及防治原则进行综述,并提出相关建议,供临床研究参考.
-
慢病毒介导的H7N9禽流感病毒血凝素基因快速真核表达系统的建立
目的 利用慢病毒载体构建新型H7N9禽流感病毒血凝素(HA)基因的快速真核表达体系,在人胚肾细胞(HEK293T)中表达并进行功能鉴定.方法 提取H7N9禽流感病毒基因组RNA,采用反转录PCR技术扩增HA读码框全长基因,将HA基因连接pMD18-T载体构建pMD18-T-HA重组载体.设计含Kozak序列的引物从pMD18-T-HA质粒中扩增出平末端HA基因,采用Topo克隆构建表达载体pLenti-HA-V5.将表达载体转染HEK293T细胞,通过间接免疫荧光法(IFA)和Westernblot法鉴定HA蛋白的表达,通过血凝实验鉴定重组蛋白的生物学活性.结果 经反转录PCR获得1 683 bp的HA全长基因,完成真核表达载体的构建并表达出相对分子质量(Mr)为70 000的重组蛋白.IFA和Western blot法结果显示该蛋白与阳性血清具有良好的免疫反应,同时血凝实验证实其具有血凝活性.结论 成功利用慢病毒载体建立了HA蛋白的快速真核表达系统,为研制H7N9病毒亚单位疫苗、中和表位研究、假病毒包装奠定基础.
