首页 > 文献资料
-
hBMP2修饰的β－TCP／胶原支架对MC3 T3－E1细胞分化的影响
目的：构建含hBMP2（Human Bone morphogenetic proteins2，hBMP2）质粒DNA的β－TCP／胶原（β－Tricalcium Phos-phate／Collagen β－TCP／胶原）支架材料，并研究其对MC3T3－E1细胞分化的影响。方法：制备纳米级多孔β－TCP／胶原支架并负载含BMP2目的基因的质粒DNA形成基因修饰的支架材料。建立MC3T3－E1细胞株与复合支架的体外培养体系。将其分为支架组和平皿组，再根据质粒的不同浓度每组再分为4个小组。复合培养后取样通过扫描电镜和光镜进行细胞形态学观察；1、3、7、14dALP活性检测测量细胞碱性磷酸酶的活性，1、3、7、14d茜素红染色观察，实时荧光定量PCR检测细胞周期1、3、7、14d观察Runx2、OCN、ALP、OPN因子，检测结果处理并进行统计学分析。结果：含hBMP2为目的基因的质粒DNA修饰纳米β－TCP／I型胶原溶液复合材料上细胞黏附数、分化数量及材料表面分布都高于单纯含hBMP2为目的基因的质粒DNA，具有统计学意义（P ＜0．05），通过用碱性磷酸酶活性ALP、茜素红染色检测结果显示支架组对MC3T3－E1细胞成骨能力的影响优于平皿组，具有统计学意义（ P ＜0．05）。结论：负载hBMP2基因修饰的β－TCP／胶原支架材料具有良好的生物相容性、优良的骨诱导性和骨传导性，是一种理想的骨缺损修复材料。
-
负载骨生长因子的壳聚糖微球研究进展
骨生长因子如骨形态发生蛋白(bone morphogenetic protein,BMP)等是骨组织工程的三要素之一,具有引发及促进骨化,钙盐沉积等成骨生物学效应.然而BMP等多肽类生长因子的体内半衰期很短,局部应用很快被稀释代谢,因此,研究骨生长因子的缓释方法具有重要意义,也是目前骨组织工程的重点课题之一.
-
类风湿性关节炎中Wnt和BMP信号通路对骨重建影响的研究进展
类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种以慢性侵蚀性关节炎为特征的全身性自身免疫病,可引起关节疼痛、肿胀、僵硬,永久性关节破坏,严重损害时可以导致残疾和畸形.骨破坏是类风湿性关节炎疾病进程中造成患者功能障碍等诸多临床问题的重要原因,骨重建(bone remodeling)过程的失调加重了类风湿性关节炎的损伤.在骨重建过程中,两条重要通路在成骨细胞的增殖分化以及骨和软骨形成与损伤修复的过程中起着十分重要的作用,即Wnt信号通路及骨形态发生蛋白(bone morphogenetic proteins,BMPs)信号通路.本文拟对正常状态下骨重建的两条重要通路和其在RA中的异常改变对骨重建的影响作一综述.
-
骨诱导活性材料修复腭裂骨缺损的动物实验研究
目的:观察骨诱导活性材料(osteoinduction active material,OAM)修复腭裂骨缺损的可行性和可靠性.方法:在16只贵州小型猪人工制造硬腭骨缺损,稳定后随机分为2组,实验组植入OAM,对照组植入单纯牛松质骨.术后1周,用3种荧光标记物依次连续给药标记,通过X线、组织学、激光共聚焦显微镜观察成骨情况.结果:实验组较对照组有较多的新骨生成.结论:OAM组织相容性良好,成骨明显,能够较好地修复腭裂硬组织缺损,在腭裂植骨方面有较好的应用前景.
-
Cx43基因敲除胎鼠心脏近端流出道隔心肌化过程中的关键基因
目的 研究Cx43基因纯合敲除(Cx43-/-)小鼠胚胎心脏近端流出道组织中基因表达谱的改变,筛选可能导致Cx43-/-小鼠流出道梗阻的关键基因.方法 以胎龄(embryonic day,ED)14.5的Cx43-/-和野生型(Cx43+/+)鼠胚心脏近端流出道部分为研究对象,分别提取总RNA,逆转录成cDNA,并在体外转录为cRNA,同时进行生物素标记及片段化,再与Affymetrix-430 2.0基因芯片进行杂交.杂交信号经扫描后,应用相关生物信息软件分析基因表达情况.结果 与Cx43+/+组相比,Cx43-/-组中表达上调2倍以上的基因共有143个,表达下调2倍以上的基因有235个.其中表达差异的基因参与转录调控、细胞周期、细胞黏附、细胞活动和细胞骨架的信号通路等主要生理过程.进一步筛查表达差异1.5倍以上的基因发现,与圆锥动脉干畸形相关的TGFβ/BMP信号通路上的多个基因以及Ssr1、Ptk2、Bmp6等基因在Cx43-/-组有明显变化.对这些基因进行荧光定量PCR验证,结果与基因芯片一致(P<0.05).结论 利用基因芯片技术初步筛选出与Cx43-/-鼠胚心脏近端流出道发育有关的多个基因,并经荧光定量PCR验证.其中TGFβ/BMP信号通路上的多个基因以及Ssr1、Ptk2、Bmp6等基因可能与Cx43-/-小鼠流出道梗阻的发生有关.
-
异体脱蛋白松质骨复合纤维蛋白BMP修复兔桡骨缺损
[目的]探讨以纤维蛋白复合脱蛋白松质骨作为骨形态发生蛋白(BMP)的载体修复兔节段性骨缺损.[方法]于36只青紫蓝兔两侧桡骨干处造成1.5cm缺损,采用三种方法进行处理:A组,植入脱蛋白松质骨、纤维蛋白、BMP的复合物;B组,植入脱蛋白松质骨;C组,空白对照.术后2、4、8、12、16周进行放射学、组织学和电镜检查.[结果]A组骨缺损区在成骨活跃程度、骨再生量和再生髓腔结构等方面均显著优于B组,使骨缺损得到了较彻底的修复.B、C两组均不能产生骨性愈合.[结论]脱蛋白松质骨复合纤维蛋白是较理想的BMP载体材料,以三者的复合物修复骨缺损可达到满意效果.
-
兔胫骨干骺端截骨延长延长区BMP、TGF-β1的蛋白表达
目的：研究肢体延长过程中延长区内源性BMP、TGF-β１蛋白表达情况。方法：采用兔胫骨干骺端截骨延长模型，通过免疫组化方法研究延长区内源性BMP、TGF-β１蛋白表达情况。结果：BMP、TGF-β１主要表达在软骨细胞、成骨细胞、成纤维细胞中。BMP在开始延长后前2周高度表达，2周后表达逐渐降低；停止延长1周时在延长区中央见到少量的阳性表达细胞，停止延长2周时，随着延长中央区域纤维组织消失，BMP阳性表达细胞也消失。TGF-β１在延长前2周表达逐渐增强，到2周时强，2周后逐渐减弱，并在延长及停止延长期间均可见阳性表达细胞。结论：肢体延长中延长区内源性BMP、TGF-β１持续表达。
-
BMP-2在成纤维细胞对BMP-3表达的调节作用
目的:观察在BMP-2作用下,成纤维细胞表达BMP-3的情况,探讨BMP-2促进成纤维细胞成骨表型表达的机制.方法:向培养的成纤维细胞内添加BMP-2,当细胞生长到60%时免疫组化观察正常与BMP-2作用下的成纤维细胞内表达BMP-3的情况.结果:正常成纤维细胞内无BMP-3表达,在BMP-2作用下成纤维细胞出现BMP-3表达.结论:在成纤维细胞,BMP-2可促进BMP-3的表达.
-
BMP诱导活体内肌腱组织成骨化的研究
[目的]探讨活体内BMP诱导肌腱组织成骨化的效果.[方法]30只新西兰兔建立活体内肌腱组织诱导成骨模型,一侧为rhBMP-2处理、对侧为空白对照.术后4、8及12周时采用X线片检测肌腱组织钙化情况,术后12周时对肌腱组织进行大体解剖、组织形态及免疫组化检测分析.[结果]术后4、8及12周时X线片检测发现BMP处理侧各时间点上肌腱组织内可见钙化区域,成骨化范围随时间增加逐渐增大(5.51 mm2、9.44 mm2及20.26mm2,P＜0.05),钙化区域IOD值亦随时间增加而增高(1 178.56、2 135.26及4 726.72,P＜0.05).大体解剖可见BMP处理组肌腱组织增粗、质地变硬,H.E及Masson染色检测见肌腱纤维内细胞浸润,局部区域骨样组织形成,并有osteonectin阳性表达细胞分布.此外,肌腱纤维及骨化区域内均可见软骨样细胞形成.[结论]BMP能够诱导活体内肌腱组织发生成骨化,可能与软骨内成骨途径有关.
-
二仙益骨汤对实验性兔股骨头缺血性坏死骨小梁、骨血管面积及矿化等指标的影响
目的:观察二仙益骨汤治疗早期股骨头坏死(ANFH)的疗效.方法:建立液氮冷冻兔ANFH模型,随机分组后,设立正常对照组、中药组、BMP植骨组,进行骨小梁、骨血管面积观察,骨内血管计数和钙、磷、碱性磷酸酶(ALP)检测.结果:中药组和BMP植骨组骨小梁面积分别为287.33∶277.00,血管面积均数39.10∶40.062,血管计数均数16.4∶13.37,其中血管计数有显著差异;中药组和BMP植骨组钙含量均值分别为3.566∶3.168,磷含量均值2.2035∶2.0011,ALP含量比3532.625∶3370.50,其中钙含量有显著差异.结论:二仙益骨汤治疗早期ANFH疗效确切,近似于BMP+植骨术.
-
一氧化碳中毒迟发性脑病的早期预测研究进展
CO中毒迟发性脑病是指急性一氧化碳中毒患者经过"假愈期"后出现的一系列神经精神症状.本病的诊断并不困难,但目前尚无可靠的指标早期预测迟发性脑病的发生,本文就迟发性脑病的早期预测研究进展做一简单介绍,以方便临床医生早期预测迟发性脑病的发生,及时给予治疗,改善患者预后.
-
保留BMP的微脱矿骨条在脊柱融合术中的应用研究
目的 探讨保留BMP的微脱矿骨条在脊柱融合术中的临床疗效.方法 自2005年6月～2010年12月应用保留BMP的微脱矿骨条行脊柱融合术26例(实验组),其中颈椎8例,胸腰椎18例,术后对所有患者行切口愈合情况、异物反应及脊柱融合情况进行观察,对照组为同期应用普通同种异体骨条行脊柱后路融合术26例.结果 实验组与对照组伤口均一期愈合,未发生感染.颈椎实验组、对照组均现脊柱融合:胸腰椎实验组坚强融合16例,可能融合2例,对照组坚强融合13例,可能融合5例.随访6～24月,平均15.2月,内固定系统无松动及断钉断棒.结论 保留BMP的微脱矿骨条应用在脊柱融合术中,脊柱融合可,无排异、感染等并发症,临床疗效满意.
-
Cem-OsteticTM人工骨浆复合骨形态发生蛋白对山羊椎体骨缺损修复作用研究
目的 观察人工骨浆复合骨形态发生蛋白(BMP)对成年山羊椎体骨缺损的修复作用,并探讨其临床应用的可行性.方法 将健康成年山羊24只随即分成单纯Cem-OsteticTM人工骨浆组(A组)和Cem-OsteticTM/BMP人工骨浆复合骨形态发生蛋白组(B组),每组12只动物.在山羊胸腰段3处不相邻椎体分别建立椎体压缩性骨折撑开复位后骨缺损模型.将Cem-OsteticTM/BMP人工骨浆复合材料填充于缺损处,同时设立单纯人工骨浆对照组.术后4周、8周、12周分别处死动物,每组每次处死4只.通过大体观察,影像学检查,HE染色和生物力学测试.结果 术后4周及8周时B组成骨情况、材料降解速度及生物力学强度和刚度测试明显优于A组(P<0.05),但仍未达到正常椎体的力学性能,差异有显著性(P<0.01).第12周时,两组X线及CT下均可见大量新骨生成,基本完整填充空隙,填充材料均基本完全降解,生物力学测试两组强度和刚度无显著性差异,基本达到了正常椎体的力学性能.结论 Cem-OsteticTM人工骨浆是BMP的良好载体,Cem-OsteticTM/BMP复合材料具有较强的传导成骨和诱导成骨活性,生成的新骨有良好的强度和刚度.
-
放射性骨损伤愈合能力降低机制的实验研究
目的探讨放射性骨损伤(RBI)愈合能力降低的机制.方法 60Coγ射线15Gy单次照射并致兔右胫骨骨折,以半环槽氏外固定器固定,未照射组为对照组.术后3d、1、3、6、12、24周通过组织学、血流量测定及免疫组化(BMP与TGF-β1)观察骨折愈合情况.结果实验组骨折愈合较对照组晚12～16周,且骨折端血流量明显降低;BMP与TGF-β1的表达亦低于对照组.结论 RBI愈合能力下降的原因是骨组织血运障碍与抑制BMP与TGF-β1的综合作用.
-
BMP信号调控研究进展
骨形态发生蛋白(BMPs)作用于靶细胞膜上具有丝/苏氨酸蛋白激酶活性的Ⅱ型受体,活化的Ⅱ型受体磷酸化Ⅰ型受体,并进一步将信号传递到Smad途径.磷酸化的受体调节型Smad(R-Smad)从膜受体上脱离,结合共同型Smad(C-Smad)后,进入细胞核.Smad异聚体复合物在其他DNA结合蛋白的参与下作用于特异的靶基因,起转录调节作用.在BMPs信号传递途径中,存在细胞外拮抗剂、膜受体、细胞浆微环境和转录水平四个层次的调节控制.
-
BMP转染骨髓间充质干细胞治疗骨缺损的研究进展
骨缺损是指骨折断端因某种原因丧失了一些骨质而形成较大的缺损,多见于创伤、感染、先天性因素及肿瘤切除等[1].
-
骨膜细胞联合BMP成骨作用的实验研究
目的观察骨膜细胞联合BMP协同成骨作用及其效果,探索骨缺损后骨再生的新方法.方法采用自体骨膜细胞体外培养、扩增、传代,观察兔骨膜细胞活细胞形态学和功能变化;兔24只随机分四组,切除双侧连同骨膜桡骨1cm,分别置入骨膜细胞+BMP、骨膜细胞、BMP、空白对照,术后定期进行X线拍片、组织学检查.结果兔骨膜培养活细胞形态分三期:细胞分裂期、细胞发展期、细胞功能期,细胞传代进化后,其结构与原代细胞无明显差异;骨膜细胞体外培养,大量增殖,其细胞悬液自体移植至骨缺损区能形成骨组织;修复骨缺损能力骨膜细胞+BMP＞BMP＞骨膜细胞,骨膜细胞移植后表现为在骨缺损端形成骨样组织,类似膜内化骨形成新骨,BMP类似软骨内化骨形成新骨,骨膜细胞+BMP表现膜内化骨和软骨内化骨两种机制,以前者明显.结论骨膜细胞或BMP两者均有修复骨缺损的能力,骨膜细胞联合BMP有协同成骨作用,为修复骨缺损的一种理想方法.
-
壮筋续骨汤对骨折大鼠血清BMP和NPY水平的影响
目的 研究壮筋续骨汤对大鼠股骨骨折后血清骨形态发生蛋白(BMP)与神经肽Y(NPY)水平影响,探讨其促进骨折愈合的作用机制.方法 成年健康雄性Wistar大鼠50只,用线锯在股骨中段切断股骨制备骨折模型,应用壮筋续骨汤水煎液灌胃治疗.解剖观察大度骨折局部与和情况,酶联免疫吸附试验检测血清BMP7及NPY水平.结果 骨折伤后7天,骨折断端主要为纤维肉芽组织,14天为纤维性骨痂组织.治疗后7天,骨折断端由纤维性骨痂形成,14天已有软骨性骨痂和骨性骨痂形成.大鼠血清BMP 7和NPY水平在骨折术后14天均显著高于骨折术后7天,P＜0.05.模型组血清BMP7和NPY水平均显著高于假手术组,P＜0.05；治疗组血清BMP7和NPY水平均显著高于模型组,P＜0.05.结论 壮筋续骨汤可能通过提高血清BMP7和NPY的含量而促进骨折愈合.
-
几种哺乳动物骨形态发生蛋白的同源性分析
目的:分析人类、黑猩猩及小鼠的BMPs同源性,为缩小动物实验与人体实验间差距提供依据.方法:从美国国家生物信息中心(NCBI,National Center for Bioteehnology Information)的数据库中检索人类、黑猩猩、牛及小鼠的BMP的核酸及氨基酸序列,分别用软件BLAST、ClustalW进行基因及蛋白质分析,由TreeView绘制系统树结构图.结果:与人类BMPs核酸序列同源性,黑猩猩>牛>小鼠;人类的BMPs家族分为7个组,牛的分组情况与人类的近似,小鼠的分组与人类的差别较大.结论:和小鼠相比,以牛为实验动物研究BMPs的实验结果更接近人体实验的数据.
-
抗骨形成蛋白单链抗体的构建与表达
目的:构建抗骨形成蛋白单链抗体并获得表达.方法:应用一段人工合成的含15个氨基酸的连接肽,采取亚克隆技术,将一株鼠抗BMP单克隆抗体的重链可变区(VH)的N端和轻链可变区(VL)的C端连接起来;将连接产物克隆入融合蛋白表达载体pEGX-4T-l,在大肠杆菌JM109中进行表达.结果:构建的单链抗体(ScFv)全长705 bp,并获得融合表达产物约52×103u.结论:亚克隆方法是一种构建单链抗体快速、简便、可靠的方法.
