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非人灵长类动物活体骨髓样本采集的方法改进
非人灵长类动物由于在生物进化,结构和生理习性上与人相近,是医学、生物学实验研究中理想的实验动物,在药理、神经、器官移植等方面有着不可替代的优势[1].非人灵长类实验动物价格昂贵且耐受性比较其他动物如犬类、啮齿类等差,在实验中如有对机体较大伤害,及易引起感染、应激等反应的操作,则动物易在实验期间死亡,影响实验数据收集,造成较大损失甚至实验失败.
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埃博拉病毒疫苗在非人灵长类动物中的应用评价
埃博拉病毒(EBOV)是埃博拉出血热的病原,可引起急性出血性疾病,使90%的感染者死亡,目前尚无有效的疫苗与治疗方法.1976年,EBOV在前扎伊尔被发现,此后在苏丹、加蓬、前扎伊尔、科特迪瓦和乌干达引起出血热爆发.虽然其爆发呈自限性,但有效疫苗与治疗方法的缺乏引起了公共卫生界对这一病原的关注.
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非人灵长类动物恒河短尾猴眼压测量分析
青光眼是主要的不可逆性致盲眼病之一,根据不完全的调查统计,我国青光眼患病率约为0.21%~1.64%[1]>.
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异种器官移植的研究进展
尽管猪作为人类器官移植的来源得到了认可,但是灵长类动物对猪的免疫排斥是一个很大的障碍,至今仍未完全解决[1].近年来转基因猪的出现和诱导免疫耐受的方法使得免疫排斥不再是主要的问题,消耗性的凝血障碍也是需要关注的.因为异种移植尚未应用于临床,所以对于异种移植的动物模型,我们选择猪和非人灵长类动物之间的器官移植.本文将对异种移植的现状和存在的问题作一综述.
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以树鼩为动物模型研究精原干细胞的初步探讨
精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)是雄性精子发生和生育能力维持的基础,具有干细胞的普遍特征,可自我更新并具分化潜能.SSCs在成熟睾丸中的数量很少,加之没有可用于鉴定SSCs的特异性分子标记,SSCs的相关研究一直是雄性生殖生物学领域研究的热点和难点.近年来针对啮齿类动物SSCs的研究技术和体系日趋成熟,研究成果不断涌现,但对灵长类动物SSCs的生理特性,自我更新及调控机制的研究尚未深入,而相关研究在临床上对治疗男性不育等生殖疾病有重要意义.树鼩是灵长类的近亲,在很多方面具有可用来替代猕猴等大型灵长类实验动物的遗传基础,可以作为研究灵长类SSCs的良好模型.
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异种器官移植研究的主要问题与对策
器官移植是目前治疗器官功能衰竭的主要手段,但供者器官严重短缺使大部分患者不能及时接受治疗.据美国器官资源共享网络报道,近13年来约有30 000例肝病患者因缺乏合适的供肝而死亡.在美国,患者等待肝移植的平均时间为6d,但部分病情较重的患者必需在24~36 h内接受肝移植治疗,否则将失去手术机会.因此,开展异种器官移植研究,以动物器官桥接或替代人类器官进行移植,对解决供者短缺具有重大意义.尽管非人灵长类动物在系统发育方面比别的物种都更接近于人类,但它们并不适合成为临床异种移植的器官来源,主要原因有伦理学问题、种间交叉感染的风险、繁殖困难及器官体积不匹配等.目前大部分研究者都认为,猪比非人灵长类动物更适于成为临床异种移植的供者.猪具有器官体积和生理指标与人类接近、繁殖速度快、适于进行基因改造和修饰等优势[1].当前,以转基因猪为标志的异种移植研究已取得重要突破,使异种移植向临床应用迈出了重要的一步,但移植排斥反应、生理屏障和安全问题等仍限制着异种移植发展.本文就目前阻碍异种移植进入临床应用的主要问题和可能的解决方法作一综述,希望对未来的临床异种移植研究提供参考.
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353例不同人群生殖器支原体检测分析
生殖器支原体(Myeoplasma genitalium Mg)首先由Tully等于1980年在美国从男性非淋菌性尿道炎患者泌尿生殖道分泌物中分离到两株(G-37株和M-30株).其后的研究提示Mg可引起人类非淋菌性泌尿生殖道感染,并与盆腔炎、输卵管炎、呼吸道感染和关节炎等疾病的发生有关.此外,Mg实验感染雄、雌性非人灵长类动物时也可引起泌尿生殖道感染.由于Mg的分离培养非常困难和缺乏特异性血清学试验[1],国内外至今报道较少.为了解武汉市有无Mg感染及其频率,为防治工作提供依据,我们对不同人群353例标本以分离培养Mg和聚合酶链反应检测了MgDNA,并对Mg扩增的特异性DNA进行了酶切分析,现报道如下.
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D-氨基半乳糖诱导的非人灵长类动物急性肝衰竭模型的建立
目的 探讨不同剂量D-氨基半乳糖(D-Gal)对非人灵长类动物食蟹猴的影响并建立不同程度急性肝衰竭(ALF)猴模型.方法 将12只食蟹猴分为3组,每组4只,分别为低剂量组、中剂量组和高剂量组,给药剂量分别为0.23、0.25、0.27 g/kg.各组动物均在清醒状态(无麻醉)下,将相应剂量的D-Gal溶液经前臂静脉一次性注射入猴体内.记录猴的存活时间,观察是否出现消化道症状和肝性脑病症状.分别于给药前0 h,给药后12、24、36、48、60、72、96、120、144 h测量生命体征,留取血标本检测丙氨酸转氨酶(ALT)、总胆红素(TB)、凝血酶原时间(PT)、血氨等指标.取肝脏组织行苏木素-伊红(HE)染色观察病理学改变.结果 低剂量组猴全部存活,仅出现一过性肝损伤,无肝性脑病症状,给药后60 h,肝功能和凝血指标达峰值,后逐渐恢复,120 h后基本恢复正常;中剂量组猴病程进展稍缓,在出现严重肝功能损伤及肝性脑病症状后逐渐恢复,仅1只死亡;高剂量组猴均出现肝性脑病症状后死亡,存活时间(72±13)h,肝功能严重受损.肝组织病理学检查示,低剂量组肝组织散在肝细胞坏死,炎症细胞浸润;中、高剂量组可见肝小叶结构不清,肝细胞片状坏死伴有明显出血.结论 中、高剂量组均符合ALF模型标准,中剂量组ALF程度较轻,有利于肝移植手术等实验的开展;高剂量组ALF程度较重,适用于相关治疗方案疗效评价.
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异种肝移植的历史与发展
异种移植是解决同种供体器官短缺的重要途径.以α-1,3-半乳糖基转移酶基因敲除(GTKO)小型猪为供体、非人灵长类动物为受体的心脏和肾移植,长存活达945 d和136d,但肝移植尚无长期存活报道.国内外研究表明,免疫排斥和凝血调节障碍仍是阻碍移植肝和受体长期存活的主要原因.本文总结异种肝移植的发展历程,分析目前存在的问题,为未来的临床异种移植研究提供参考.
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50只非人灵长类动物肾移植模型的建立
目的探讨应用非人灵长类动物(食蟹猴)建立同种异体肾移植模型的可行性.方法50只食蟹猴,每2只互相作供体和受体.取左侧肾脏作供肾,于下腹腔部移植另一供肾,供肾动、静脉分别与受体腹主动脉和下腔静脉端侧吻合,供肾输尿管与受体输尿管端端吻合.移植术后即刻切除受体右肾.结果50只肾移植,无一只外科并发症,无一只因手术原因死亡,热缺血时间(30±5.0)min,成功率为100%.结论应用食蟹猴建立肾移植模型,技术成熟,方法可靠.应用此模型评价新型免疫抑制药物,进行免疫耐受、异种移植等研究,可为临床试验提供更为准确可靠的依据.
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脊髓半横断猕猴的护理
脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)是脊柱骨折的严重并发症.有效的动物模型是脊髓损伤修复研究的基础.以往的研究都是建立在啮齿类动物上的,而人类神经系统生理结构及修复能力与啮齿类动物有很大不同.建立猴脊髓半横断(hemi-sected SCI,hSCI)和全横断(transected SCI,tSCI)脊髓损伤模型,更深入地研究脊髓损伤修复机理,为临床提供治疗脊髓损伤提供新的策略.动物模型建立之后,正确的护理是实验成功的必要环节,常常决定了实验的成败.为提高非人灵长类动物在脊髓损伤与修复研究中的成活率,本文对实践中猴脊髓半横断损伤模型有效的护理经验进行了总结.