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二硫苏糖醇对流式细胞术分析诱导痰液中淋巴细胞亚群的影响
目的 探讨二硫苏糖醇(DTT)对流式细胞术测定诱导痰液中淋巴细胞亚群结果的影响.方法 将15名健康人的诱导痰各分为2份,1份按DTT液化诱导痰液程序处理(DTT组),另1份在实行该处理程序后,再用磷酸盐缓冲液(PBS)洗涤2次(DTT+ PBS组),以除去残留DTT.采用流式细胞术分析2组样本中的淋巴细胞亚群百分率及平均荧光强度(MFI).结果 与DTT+ PBS组比较,DTT组CD3+ CD4+细胞和自然杀伤(NK)细胞百分率明显增加(P＜0.05、P＜0.01),CD3+ CD8+和CD3 - CD19+细胞百分率明显减少(P均＜0.01)；CD3+CD8+和CD3 - CD19+细胞MFI均明显减弱(P ＜0.01、P＜0.05),NK细胞MFI明显增强(P＜0.05).2组CD3+细胞百分率及CD3+、CD3+ CD4+细胞MFI差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 DTT对诱导痰液中淋巴细胞亚群百分率及MFI检测结果产生影响,诱导痰经DTT液化后应增加PBS洗涤步骤,以去除残留的DTT,降低DTT前处理对结果的影响.
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不同发作期儿童哮喘诱导痰液安全性分析
痰液作为气道的直接分泌物能确切反映气道炎症的变化,1992年Pin[1]等首先将痰液诱导方法用于支气管哮喘病人,以后许多学者对其进行了广泛的研究,但大部分受检者为成人患者且以轻度和稳定期哮喘为主,有关儿童哮喘报道较少,尤其对于中重度哮喘儿童的安全性仍存在争议.本文主要对诱导痰液分析方法用于不同发作期哮喘儿童的安全性进行探讨.
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婴幼儿毛细支气管炎诱导痰分析的临床意义
诱导痰液直接来源于气道的分泌物,能够反映气道炎症的真实状态,是一种安全有效、非侵入性的研究方法[1].近几年在国内已陆续开展了诱导痰液在儿童与成人哮喘的研究与临床应用,但在婴幼儿中的应用的研究较少,为此我们随访观察70例毛细支气管炎(毛支)患儿3年,比较发展为哮喘与无哮喘发生的单纯毛细支气管炎两组患儿在初发毛支阶段诱导痰液中炎性细胞及细胞成分的变化,探讨其在婴幼儿期哮喘早期诊断中的价值,现报告如下.
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慢性阻塞性肺疾病患者诱导痰液中IL-6和IL-8水平变化的临床意义
目的 探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者诱导痰液中白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-8(IL-8)水平变化的临床意义.方法 选取COPD患者35例为COPD组,另选取健康体检者40例为健康组,根据有无吸烟史分为无吸烟22例和吸烟18例.2组受试者行肺功能检测,运用诱导痰液方法收集痰液,酶联免疫吸附试验(EHSA)测定痰液上清中IL-6和IL-8水平变化,Spearman相关性检验分析IL-6、IL-8水平与肺功能的相关性.结果 COPD组诱导痰液中性粒细胞百分比显著高于健康组无吸烟者和吸烟者(P ＜0.05或P＜0.01);痰上清中IL-6、IL-8水平显著高于健康组无吸烟者和吸烟者(P＜0.05).相关性分析显示,COPD组诱导痰上清IL-6与第1秒用力呼气容积占预期值百分比(FEV1％)和第1秒用力呼气容积占用力肺活量的百分比(FEV1/FVC)呈负相关(P＜0.01),IL-8与FEV1％和FEV1/FVC呈负相关(P＜0.01).结论 COPD患者气道腔内存在以中性粒细胞浸润为主的慢性气道炎症,IL-6和IL-8可能在气道损伤和重塑过程中扮演重要作用.
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诱导痰在急性毛细支气管炎中运用的安全性分析
1992年Pin等首先将痰液诱导方法用于支气管哮喘病人,以后许多学者对其进行了广泛的研究,但大部分受检者为成人和大于6岁的儿童,有关在婴幼儿中的运用报导较少,诱导痰对于儿童安全性仍存在争议.本文主要对诱导痰液分析方法用于急性毛细支气管炎(毛支)婴幼儿的安全性进行探讨.
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急性哮喘发作患儿诱导痰液炎性细胞、白细胞介素-6、-8变化的意义
目的了解儿童哮喘急性发作时气道炎性特征及临床意义.方法对34例急性发作期、24例稳定期哮喘患儿和15例正常儿童的诱导痰液进行炎性细胞计数和分类,并测定其中白细胞介素-6(IL-6)、IL-8水平,分析炎性细胞与上述细胞因子及大呼气流速(PEF)的关系.结果哮喘急性发作组总细胞数较正常对照组明显增高,急性发作组嗜酸性粒细胞(EOS)、中性粒细胞及单核细胞比例均高于正常对照组,淋巴细胞比例明显低于正常对照组,稳定组EOS比例明显高于正常对照组.EOS比例与PEF呈显著负相关,IL-8水平与中性粒细胞呈显著正相关,急性发作期IL-6水平与EOS呈显著正相关.结论急性哮喘发作患儿气道炎症是由EOS、中性粒细胞及单核细胞参与的炎症,IL-6、IL-8可能是参与此过程的重要细胞因子.痰液EOS数与病情严重程度相关,可作为监测病情及疗效的指标之一.针对这些细胞因子的治疗具有潜在价值.
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支气管哮喘患者应用特布他林诱导排痰效果观察
目的 观察患者采用特布他林加高渗盐水吸入诱导排痰的效果.方法 将42例哮喘患者随机分成两组各21例,对照组采用4%盐水诱导排痰,观察组采用特布他林加4%盐水诱导排痰,观察两组患者所收集的痰液质量以及雾化前后患者肺功能(第1 s用力呼气容积,FEV1)变化.结果 诱导后两组均荻取合格痰液,痰量、痰液中鳞状上皮细胞含量以及不良反应发生率比较,差异无显著性意义(均P＞0.05);但对照组FEV1值显著低于观察组,差异有显著性意义(P＜0.05).结论 特布他林加高渗盐水吸入诱导支气管哮喘患者排痰安全、有效,且能增加患者舒适感.
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支气管哮喘痰液指标与肺功能和临床的关系
支气管哮喘有三个相互联系的特征:自发或药物可逆性气流阻塞、气道高反应性(BHR)和气道炎症.哮喘始动于气道炎症,炎症导致病理过程,终出现临床症状. 气道炎症被认为是引起气流阻塞和高反应性的基础.哮喘的基本病理特征包括气道壁组织结构破坏增厚、上皮细胞损伤脱落、基底膜胶原沉积、平滑肌增生肥大、分泌物闭塞气道,以及嗜酸性粒细胞和T淋巴细胞浸润.以往在临床实践中,只有通过症状、气道高反应性的测定和治疗效果来假定气道炎症的有无.如何直接获得气道炎症过程的信息,以对哮喘患者做出确切评价,还存在很多问题.采用痰液检测这一非侵入性且安全的对气道分泌物进行细胞和生化成分分析的方法,可以对哮喘患者气道炎症直接检测.使用吸入高渗盐水以诱导痰液的检测手段已被证实为一种用以评价嗜酸性粒细胞性气道炎症的重复性好,行之有效的方法[1,2].
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诱导痰液在小儿痰液标本采集中的应用
为了提高痰液细菌培养的阳性率,我科在采集患儿痰液标本时通过高渗盐水诱导痰液进行痰液标本采集,发现诱导痰液具有量多、阳性率高的特点.现将方法介绍如下.
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吸入皮质激素对哮喘急性发作患儿诱导痰液中炎性细胞的影响
目的 了解按照GINA方案吸入皮质激素治疗儿童哮喘急性发作前后其气道炎性细胞的变化.方法 对55例哮喘发作期儿童的新鲜痰涂片做细胞学分类计数,同步检测肺通气功能.结果 嗜酸细胞是上呼吸道感染诱因组明显低于非感染诱因组,中性粒细胞则是上呼吸道感染诱因组明显高于非感染诱因组,两组差异均有显著性统计学意义(P均＜0.01).在非吸入激素组和不正规吸入激素组嗜酸细胞均明显高于正规吸入激素组,而正规吸入激素组的嗜酸细胞数则在正常范围,组间比较差异有显著意义(P＜0.01).在正规吸入激素组和不正规吸入激素组肺功能都正常,而非吸入激素组的肺功能则低于正常范围,组间比较差异有显著性统计学意义(P＜0.01).结论 正规吸入皮质激素可改善急性哮喘发作患儿肺通气功能,显著降低气道内嗜酸细胞的数量,因此必须按照GINA方案正规执行吸入皮质激素治疗,以达到哮喘完全控制.
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支气管哮喘患者诱导痰EOS ECP及血清IL-13水平检测及其意义
目的 探讨哮喘患者急性期诱导痰液中嗜酸性粒细胞(EOS)、嗜酸性细胞阳离子蛋白(ECP)及血清白细胞介素-13(IL-13)的水平变化及在哮喘发病机制中的作用.方法选择55例支气管哮喘急性期患者和20例健康对照者的痰液,行EOS计数并测定ECP水平.同时采用固相酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清中IL-13的水平,并对结果进行统计学处理.结果 支气管哮喘急性期患者诱导痰液中EOS、ECP分别与血清IL-13呈正相关,且诱导痰液中EOS、ECP及血清IL-13的水平均明显高于健康对照组(P<0.05).结论 嗜酸性粒细胞是导致哮喘的主要炎性细胞,而IL-13又是嗜酸性粒细胞激动剂并参与支气管哮喘发病的病理生理过程,诱导痰液EOS、ECP和血清IL-13检测是哮喘诊断及病情转归的一个重要实验室指标.
关键词： 支气管哮喘 诱导痰液 嗜酸性粒细胞 嗜酸性细胞阳离子蛋白 白细胞介素-13
