首页 > 文献资料
-
人细小病毒B19IgM抗体间接ELISA检测方法的初步建立
目的：利用原核表达并纯化的人细小病毒B19（HPV B19）结构蛋白VP1初步建立HPV B19 IgM酶联免疫吸附试验（ELISA）的检测方法。方法以纯化的重组蛋白包被酶标板，建立IgM 间接ELISA检测方法，确定Cut-off值，并进行初步的应用。结果建立间接 ELISA方法Cut-off值为0．25，灵敏度为84．60％，特异性为99．70％，与对照试剂盒检测结果符合率为99．47％；用自产试剂盒检测115份孕妇和1700份健康献血志愿者血清中B19 IgM抗体，阳性率分别为12．17％和1．59％。结论通过包被 HPV B19-VP1蛋白建立的间接ELISA检测方法可用于 HPV B19早期感染或急性感染的辅助诊断。
-
实验诊断学实验教学模式探索
通过引入临床使用的新仪器设备用于学生实验，使学生了解目前临床检验的技术方法及其对结果和临床诊断的影响。同时选用临床典型病例的样本用于学生实验，利用信息系统调取其他检测结果，并结合细胞图库以便于学生利用所有检验结果进行综合分析，推导出临床诊断，终在老师的引导下形成正确的临床思维模式。
-
血清胃蛋白酶原检测结合美蓝-靛胭脂双重染色法对胃癌及胃癌前病变的诊断价值
目的:探讨胃蛋白酶原Ⅰ (Pepsinogen Ⅰ,PG Ⅰ)、胃蛋白酶原Ⅱ(PepsinogenⅡ,PGⅡ)、PG Ⅰ/PGⅡ(PG Ⅰ/PGⅡratio,PGR)水平变化结合内镜下美蓝-靛胭脂双重染色对胃癌及胃癌前病变(Precancerous lesions of gastric cancer,PLGC)诊断的价值.方法:应用酶联免疫法(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELASA)法测定了124例胃溃疡(Gastric carcinoma,GU)患者、130例慢性浅表性胃炎(Chronic superficial gastritis,CSG)患者、102例慢性萎缩性胃炎(Chronic atrophic gastritis,CAG)患者、90例胃癌(Gastric carcinoma,GC)患者、93例正常人的血清PGⅠ、PGⅡ含量及PGR的变化.将446例患者随机分为两组(双重染色组和对照组),每组各223例,双重染色组内镜下双重染色后在可疑病灶处活检,对照组不作染色按肉眼判断常规活检.结果:与正常组相比较,CSG、GU组血清PGⅠ、PGⅡ、PGR水平显著升高(P＜0.01),CAG及GC组血清PGⅠ、PGR水平著降低(P＜0.01).染色组中检出阳性率72.20％;对照组中检出率53.36％.两组检出率差异有统计学意义(P＜0.05).结论:血清PGⅠ、PGⅡ、PGR可作为早期GC筛查的一项血清学指标,对PLGC及早期GC的诊断有一定的临床意义.内镜下美蓝-靛胭脂双重染色可显著提高早期GC及PLGC的检出率.两项技术联合应用,可进一步提高GC及PLGC的检出率,有助于早期GC筛查.
-
乙肝表面抗原阳性反应血清的乙肝病毒核酸检测分析
[目的]探讨HBsAg血清学阳性反应标本的HBV核酸检测状况. [方法]留取血站6个月志愿者标本6 000例,酶联免疫检测(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)HBsAg阳性标本70例,将阳性标本分组:国产进口两种酶免试剂检测同时强阳性反应标本30例(S/CO≥5);国产进口两种酶免试剂检测同时弱阳性反应标本22例(S/CO<5);单一进口酶免试剂检测阳性反应标本17例;单一国产酶免试剂检测阳性反应标本1例.采用核酸检测技术(Nucleic Acid Test,NAT)对70例酶联免疫检测阳性反应标本进行HBV核酸检测. [结果]两种酶免试剂检测同时强阳性标本(S/CO≥5)组NAT检测结果30例均为阳性;两种酶免试剂检测同时弱阳性标本(S/CO<5)组NAT检测结果20例阳性,2例阴性;单一进口试剂检测阳性标本NAT检测结果10例阳性,7例阴性;单一国产试剂检测阳性标本,1例NAT检测结果为阴性. [结论]HBsAg阳性反应血清的HBV核酸检出率与S/CO值的高低和两种酶联免疫试剂检测结果符合度有一定关联,核酸扩增技术对现行血筛试剂有一定补充作用.
-
乙肝前S1抗原与乙肝两对半阳性关系的研究
目的:对HBV血清标志物阳性模式与乙肝病毒前S1抗原阳性关系的对比分析,进而对乙肝病毒前S1抗原临床意义的探讨.方法:用酶联免疫法(ELISA)严格按照说明书操作对乙肝病毒血清标志物和乙肝病毒前S1抗原比较.结果:对HBV血清标志物不同组合模式进行分析发现,乙肝病毒血清标志物模式中的模式①,乙肝病毒前S1抗原的阳性率为82.9%,乙肝病毒前S1抗原的阳性率为82.9%,模式②为59.9%,模式③为47%,模式④为79%,模式⑤为43%,其他模式基本上为阴性.结论:前S1抗原较HBV血清标志物更为敏感,可作为一种新的HBV血清标志物和更为完善监测指标.
-
动物源性食品中氯霉素残留量的检测方法研究
[目的]建立氨霉素残留量的检测方法,以了解深圳市市售动物源性食品中氯霉素残留的污染状况,为市场卫生监管提供依据.[方法]用定量酶联免疫法对市售动物源性食品进行初筛,然后对阳性样品用高效液相色谱-质谱联用法进行确证. [结果]应用酶联免疫法对测定动物源食品中氯霉素残留量,方法的线性范围为0.025～2.0 μg/L,标准曲线相关系数为0.998,回收率为63.3%～84.7%,检出限为0.02 μg/kg.高效液相色谱-质谱联用法测定动物源性食品中氯霉素含量,方法的线性范围为0.1～10.0 μg/L,线性相关系数为0.999 4,定量检出限为0.02 μg/kg,回收率为81.0%～89.5%.[结论]酶联免疫法灵敏度高,样品处理简单,适合大批量样品中氯霉素半定量筛选,成本较低;高效液相-质谱联用法灵敏度高,抗干扰能力强,适合对样品中氯霉素残留进行检测及结构确证.
关键词： 动物源性食品 氯霉素 酶联免疫 高效液相色谱-质谱联用 -
ELISA方法检测HBsAg设置灰区的必要性探讨
目的 探讨ELISA方法检测无偿献血者HBsAg设置灰区的必要性.方法 采用2个厂家生产的ELISAHBsAg试剂对献血者标本分别进行检测,其检测结果在0.6≤s/co＜1之间的标本再用同种试剂进行双孔复试,双孔中至少有1份结果仍在灰区内的,留取标本分别做电化学发光定量分析、HBV 5项和核酸HBV DNA检测.结果 106例灰区标本中电化学发光法检测出阳性标本12例,核酸检测出HBV DNA阳性标本16例.结论 对HBsAg灰区标本,ELISA检测漏检率很高,应该引起高度重视,并结合实验室室内质控规则,考虑到批内差异和批间差异的存在,结合自己实验室的情况设置合适的灰区,大限度地检出这些可疑标本,并进行重复检验或确认实验,进一步减少HBsAg漏检的可能性,以提高输血安全.
-
2种酶联免疫试剂筛查血液抗-HIV应用比较
目的 评估使用2种不同酶联免疫(ELISA)试剂对无偿献血者血液抗-HIV检测应用的效果.方法 采用第3代与第4代2种抗-HIV(1+2) ELISA试剂平行检测献血者标本,初筛阳性标本送江门市疾病预防控制中心确证.结果 检测125 245例标本,第3代抗-HIV(1+2) ELISA试剂初筛阳性198例,确证阳性20例,其灵敏性与特异性分别为:100％与99.81％;第4代抗-HIV(1+2) ELISA试剂初筛阳性352例,确证阳性20例,其灵敏性与特异性分别为:100％与99.64％.结论 同时平行使用第3代与第4代2种抗-HIV酶联免疫试剂对献血者血液进行抗-HIV筛查具有较高可靠性,可降低经血源传播HIV的危险性.
-
核酸检测后血液检测模式的探讨
目的 对采供血机构开展核酸检测后的血液检测模式的探讨.方法 应用全自动核酸检测系统针对HIV、HCV和HBV的检测,ULTRIO反应性的标本再进行拆分鉴别试验.所有的标本同时应用2种酶联免疫试剂(进口与国产)进行针对3种病毒的检测,其中每个单位约检测10 000人份,所有酶联免疫与NAT结果不符的标本进行血清学的确证试验.结果 30 050份有效标本的检测中共有251份酶联免疫阳性,29 799份阴性,而酶联免疫阴性标本中共有21份NAT阳性,是为酶联免疫漏检(漏检率0.07％,1/1428)；酶联免疫阳性中共有46份经补充血清学试验确认为血清学真阳性(全部为HBV),且NAT无反应性,是为NAT漏检(漏检率0.15％,1/663).在抗-HIV和抗-HCV的检测上,进口与国产试剂对真阳性标本的检测能力无明显区别.而在HBsAg的检测上,进口试剂明显优于国产试剂.结论 单独应用NAT或酶联免疫进行血液筛检,都会造成阳性血的漏检,如果只选一种酶联免疫试剂检测的话,抗-HIV和抗-HCV的检测可选择国产试剂,而HBsAg的检测上则以进口试剂为佳.
-
环介导逆转录等温扩增技术在输血前HCV检测中的应用
目的 尝试使用环介导逆转录等温扩增技术用于输血前检测HCV RNA.方法 同时采用抗-HCVELISA检测和HCV RT-LAMP检测,比较2者检测结果的差异.结果 2 716例输血前标本,ELISA检测发现19例(0.70％)阳性结果,HCV RT-LAMP检测发现32例(1.18％)阳性结果(P＜0.05),2种方法在检测效率上具有显著性差异.RT-LAMP检测在灵敏度上略高于ELISA方法.结论 基于HNB颜色反应的环介导逆转录等温扩增技术检测HCV的方法具有快速、灵敏度高的特点.
关键词： 丙型肝炎病毒(HCV) 酶联免疫 环介导逆转录等温扩增 -
献血者血液乙型肝炎病毒核酸及血清学筛查策略的探讨
目的 探讨1种ELISA试剂检测HBsAg 1种试剂检测HBV核酸策略的可行性.方法 留取新创和BIOMERIEUX ELISA双试剂检测判为不合格的血液标本418份,应用诺华或罗氏核酸检测试剂进行核酸检测,ABBOTT化学发光试剂进行补充血清学乙肝两对半检测,对ELISA单试剂阳性NAT阴性的标本用ABBOTT HBsAg中和试剂进行HBsAg确证试验,并对HBsAg确证阳性标本进行追踪并进行相关检测进一步加以确证.结果 616份标本中ELISA双试剂阳性为49.0％ (302/616),BIOMERIEUX单试剂阳性为5.7％(220/616),新创单试剂阳性为15.3％(94/616)；BIOMERIEUX单试剂阳性标本中,31份标本核酸检测为阴性、ABBOTT HBsAg确证为阳性,也即在616份不合格血液中,有5.0％(31/616)的HBsAg确证阳性的标本被新创HBV ELISA试剂漏检且不能被NAT检出；新创单试剂阳性标本中,2份标本核酸检测为阴性、ABBOTT HBsAg确证为阳性,也即在616份不合格血液中,有0.5％(3/616)的HBsAg确证阳性的标本被BIOMERIEUX HBV ELISA试剂漏检也不能被NAT检出；对34份HBsAg确证试验阳性的血液进行乙肝两对半分析,其中除4份标本未做检测外,其余21份为抗-HBc和抗-HBe阳性,3份为抗-HBc和抗-HBe阳性,1份为抗-HBc阳性,1份为抗-HBs阳性,1份为抗-HBe和HBeAg阳性,1份为抗-HBs和抗-HBc阳性,2份为抗-HBs、抗-HBc、抗-HBe、及HBeAg均阴性,即共有26份抗-HBc为阳性.34份HBsAg确证试验阳性的血液中共追踪成功12名,其乙肝两对半检测结果与原始标本的乙肝两对半检测结果不矛盾.结论 实施核酸检测后,去掉2种ELISA试剂中的任何一种均存在一定的漏检.是否去掉一种ELISA试剂以及去掉哪种ELISA试剂,需要各血站进行适当的风险效益分析评估.
-
复发性流产患者自身免疫性抗体的变化研究
目的:探讨自身免疫性抗体ACA、β2GP1-IgG/IgM、APE、aPS、TPOAb和TgAb与复发性流产(RSA)的关系.方法:选取100例有复发性流产史未孕妇女为研究组,其中原发性RSA 62例,继发性RSA 38例,另选100例有正常妊娠史、未孕健康妇女为对照组,测定两组血清中ACA、β2GP1-IgG/IgM、APE、aPS、TPOAb和TgAb.比较2组中抗体的阳性率.结果:研究组与对照组中ACA、β2GP1-IgG/IgM、APE、aPS/IgG、aPS/IgM、TPOAb和TgAb的抗体阳性率分别为8%、11%、41%、0%、0%、28%、24%和0%、0%、9%、0%、0%、6%、4%.aPS(IgG和IgM)在两组中比较差异无显著性,其余各项两组比较差异有显著性(P＜0.05).抗甲状腺抗体阳性者ACA、β2GP1-IgG/IgM及APE的阳性率分别为2.6%、7.9%和26.3%;抗甲状腺抗体阴性者ACA、β2GP1-IgG/IgM及APE的阳性率分别为4.3%、4.9%和24.7%,两组比较差异无显著性(P＞0.05).结论:自身免疫性抗体与复发性流产有关,抗甲状腺抗体是复发性流产的独立危险因素.
-
抗金霉素单克隆抗体的制备与鉴定
目的制备抗金霉素(CTC)的单克隆抗体(mAb).方法采用甲醛作为连接基,将CTC与牛血清白蛋白偶联制备免疫原,免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠的脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合,经筛选克隆,以ELISA法对杂交瘤细胞的稳定性和mAb的特性进行鉴定.结果获得1株可稳定分泌mAb的杂交瘤细胞1H4-C4-C10,间接ELISA方法测定,细胞上清抗体效价为1:1000,腹水效价为1:5 ×105,为IgG1,与四环素交叉反应率为44.4%,与土霉素的交叉反应为8.2%.体外传代培养和冻存复苏后抗体分泌稳定.结论成功制备了针对CTC的mAb,为进一步研制检测CTC的ELISA试剂盒奠定了基础.
-
6 590例新生儿先天性甲状腺功能低下筛查分析
目的对6590例新生儿于生后72小时进行先天性甲状腺功能低下的筛查,做到早期诊断、早期治疗.方法取足跟血1～2滴于滤纸片上,采用酶联免疫方法定量检测血中TSH浓度.以＞15mIU/L为阳性可疑病例.结果共筛查新生儿6 590例,其中男性婴儿3 356例,女婴3 234例,3例筛查阳性患儿,进一步血清检查确诊为甲低患儿(女婴2例,男婴1例),发病率为1:2197.结论甲低的筛查与诊断主要依据实验室检查,早期诊断的关键是进行早期甲状腺功能筛查.
关键词： 先天性甲状腺功能低下 新生儿 TSH 酶联免疫 -
雷公藤乙素及其类似物对糖尿病肾病大鼠肾脏中转化生长因子β1的影响
探究雷公藤乙素及其类似物对糖尿病肾病(DN)大鼠肾组织和血清中转化生长因子β1 (TGF -β1)含量的影响及作用.以链脲佐菌素(STZ)制备DN大鼠模型,药物治疗12周后对各组大鼠肾脏标本进行常规病理检测,观察DN肾脏结构的修复状况,用酶联免疫双抗夹心法检测TGF -β1在大鼠肾组织和血清中的实际含量.雷公藤乙素及其类似物能调节TGF -β1在肾组织和血清中的含量,修复和保护肾脏,对DN起到治疗的作用.
关键词： 雷公藤乙素及其类似物 转化生长因子β1 酶联免疫 -
荨麻疹患者血清过敏原特异性IgE检测分析
目的 通过测定荨麻疹患者血清过敏原特异性IgE,了解西宁地区荨麻疹患者过敏原的状况,为临床诊断提供依据.方法 采用酶联免疫方法对55例荨麻疹患者进行过敏原检测.结果 主要过敏原食物组:蛋白/蛋黄、海虾/海蟹、大豆/花生、鱼,阳性率分别为34.5%、32.7%、32.7%、25.5%;吸入组:尘螨/粉螨、室内尘土、点青霉/交链孢霉/黑根霉、榆树/柳树/杨树/松树,阳性率分别为40%、34.5%、30.9%、30.9%.结论 酶联免疫法检测变应原具有简便快捷的优点,克服了皮内试验在患者发作期需要停药,减轻了患者针刺痛苦,为荨麻疹患者病因诊断提供了依据.
-
140例乙型肝炎血清乙肝病毒前S1蛋白抗体检测
乙型肝炎是我国的高发及常见病,10%以上转变为慢性肝炎,部分演变为肝硬变.乙肝病毒(HBV)也是肝癌诱发因子,近年来研究认为乙型肝炎病毒前S1蛋白抗体(抗-HB VPreS1)与乙肝转归等有密切关系[1,2].采用EIA的方法检测140例各类临床分型乙肝病人及60例健康者血清中抗-HBVPreS1,现将结果报告如下:
关键词： 乙型肝炎病毒前S1蛋白抗体 乙型肝炎 酶联免疫 -
菏泽地区新生儿先天性甲状腺功能低下症酶标法筛查切值的研究
开展新生儿疾病筛查是提高人口素质,降低残疾儿发生率的重要措施.先天性甲状腺功能低下症是<中华人民共和国母婴保健法>所规定的新生儿疾病筛查的病症之一.目前国内对甲低的筛查多以TSH为指标,方法有放免法和酶免法等.酶免法以不污染环境、灵敏度、特异性高等特点,近来来被普遍接受.我们在对实验方法鉴定之后,进行菏泽地区先天性甲状腺功能低下症酶标法筛查切值的研究,确定了本地区的筛查切值.
关键词： 先天性甲状腺功能低下症 促甲状腺素 酶联免疫 切值 -
江苏省宿迁地区育龄妇女TORCH感染的调查分析
目的 回顾宿迁地区育龄妇女TORCH结果,分析TORCH阳性率和流行病学特点,为优生优育提供参考依据.方法 选取2016年1月～2018年5月在宿迁市第一人民医院进行TORCH筛查的7860例育龄妇女,应用酶联免疫方法检测anti-TORCH.结果 IgM抗体中,单纯疱疹病毒 Ⅰ/Ⅱ(herpes simplex virus,Ⅰ/Ⅱ)检测出809例,阳性率为10.29％,明显高于其他三种病原体;不同季节中风疹病毒(rubellavirus,RUV)和HSVⅠ/Ⅱ好发于秋季,巨细胞病毒(cy-tomegalovirus,CMV)好发于春、秋两季;在不同年龄组中CMV在35岁以上妇女中阳性率高(31/758,4.09％),与其他组相比,差异具有统计学意义(χ2=4.12,P=0.04),HSVⅠ/Ⅱ在35岁以上妇女中阳性率低(48/758,6.33％),与其他组相比,差异具有统计学意义(χ2=14.47,P=0.00);农村人口中TOX,CMV和HSVⅠ/Ⅱ抗体阳性率明显高于城市,差异具有统计学意义(χ2=10.39,6.31,4.84,均P<0.05);IgG抗体中,TOX检出率低,阳性率为3.27％(257/7860),明显低于RUV,CMV和HSVⅠ/Ⅱ(78.89％,82.82％和65.95％).结论 宿迁地区育龄妇女TORCH筛查结果阳性率较低,但防控形势依然严峻,仍需积极做好预防措施,提高优生优育质量,改善人口素质.
-
罗氏Elecsys170电化学发光免疫分析仪故障排除
Elecsys170全自动电化学发光免疫分析系统采用了瑞士罗氏公司电化学发光免疫测定专利技术,由日立公司生产,是继放射免疫、酶联免疫、荧光免疫、化学发光免疫之后的新一代标记免疫分析设备.该仪器自动化程度高、灵敏度和重复性好,检测结果准确、快速,大大方便了病人,但试剂昂贵,每一测试都在几十元以上,能否正确使用和保养仪器,减少故障,降低实验成本特别重要.笔者将两年来使用中的一些故障处理体会介绍如下:
