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应用实时荧光定量PCR检测机采献血者HCV
<中国输血技术操作规程>规定,献血者必须进行酶联免疫(ELA)方法HBsAg、抗-HCV、抗-HIV检测.而抗-HCV检测的窗口期为70天,就目前的检测方法不可避免地要出现漏检.采用PCR方法检测病毒核酸,可将窗口期缩短到13天.常用PCR方法操作复杂,且不能进行定量检测.我们采用实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测,省去了电泳照相分析等一系列过程,同时采用先进的分析软件进行分析,提高了检测结果的准确性.
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TecraTM大肠杆菌O157酶联免疫快速方法与经典培养方法的比较及其应用评价
目的 考察TecraTM大肠杆菌O157酶联免疫快速方法的准确度和特异度,与经典培养法进行比较,并针对不同种类的食品样品进行应用评价.方法 用不同来源的大肠杆菌O157菌株考察其准确度;用多种标准非大肠杆菌O157菌株考察其特异度；利用加标回收实验结合国标方法测定其检出限;用TecraTM大肠杆菌O157酶联免疫快速方法与国标中经典法和免疫磁珠法对不同种类的食品样品进行检测,比较并评价其应用效果.结果 该方法准确度为100％;特异度为100％;检出限为1CFU/25 g；630份实测样品的结果与国标方法对比其灵敏度为100％.结论 该方法快速、简便、高效和准确,适宜食源性突发公共卫生事件及大批量样品的大肠杆菌O157快速检测.
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应用酶联免疫竞争层析技术检测乳品中β-内酰胺类抗生素残留
目的:开发乳品中β-内酰胺类抗生素残留的快速检测系统.方法:应用酶联免疫竞争层析技术,开发了BioQuick快速检测系统.通过绘制检测曲线推算灵敏度,通过重复试验确定精确度,通过与非β-内酰胺类抗生素反应确定交叉反应率.结果:通过与国外同类型试剂的实验对比分析,该检测系统在使用方便性、检测灵敏度、精密度以及交叉反应数据方面具有优势,是一种操作简便、快速,灵敏度和精密度能够达到检测要求,符合国际标准,并优于国外同类型检测试剂.结论:该检测系统适用于我国各奶牛场、乳品企业以及食品安全监控机构.
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免疫印迹法对孕妇梅毒螺旋体抗体检测的分析
目的：探讨免疫印迹法（ WB）对孕妇梅毒螺旋体抗体检测的分析作用，积极预防诊治孕妇梅毒。方法随机选取在我院进行梅毒筛查并确诊为梅毒阳性的孕妇35人，为阳性组；再随机选取在我院进行梅毒筛查为阴性的孕妇35人，为阴性组，使用免疫印迹法对两组患者进行检测，观察免疫印迹法对孕妇梅毒螺旋体抗体的阳性检测率。结果免疫印迹法对阳性组检测的结果阳性率为97．14％，对阴性组检测的假阳性率为5．71％。结论免疫印迹法对梅毒螺旋体抗体检测的阳性率高，假阳性率低，作为梅毒螺旋体抗体检测的临床应用方法，有很高的临床价值，可以提高孕妇梅毒螺旋体抗体筛查的正确率，有利于防治孕妇的梅毒。
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云南省部分地区鸡戊型肝炎病毒血清流行病学调查
目的：调查云南省部分地区鸡体内戊型肝炎病毒的感染情况。方法采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测鸡血清标本中戊肝血清标志物（ HEV－IgG，HEV－IgM）。结果大理、保山两地未检出阳性血清；楚雄地区HEV－IgG阳性血清有1份，所占比例为1.09％（1／92）；丽江地区HEV－IgG阳性血清有1份，所占比例为0.54％（1／184）。丽江地区HEV－IgM阳性血清有2份，所占比例为1.09％（2／184）。结论丽江与楚雄地区的鸡体内有戊型肝炎病毒感染，大理与保山地区未检出。
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酶联免疫一步法检测HBsAg前带现象
自从酶免试验问世以来,酶标技术以其特异性、敏感性等优点,在临床上被广泛采用检测血清中的HBsAg,然而由于酶标技术操作程序复杂,时间长,给实验室工作带来了许多不便,近年来,该试验在保持原有的特异性、敏感性的基础上,更趋于快速简便:检测血清中HBsAg由原来的二步法改为一步法,大大缩短了测试时间,同时也带来了许多弊端:如高滴度的HBsAg标本出现假阴性结果.而在五项指标时出现HBsAg(-)、HBeAg(+)、HBcAb(+)的模式.我们经过不同方法检测确定HBsAg(-)是"前带现象所致.为了避免这种情况,我们应采用标本稀释法操作.
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血清中半乳糖凝集素-3在卵巢上皮性肿瘤中的表达水平及意义
目的:本实验的目的是为了通过检测卵巢上皮性肿瘤患者和正常健康非妊娠妇女对照组血清中的半乳糖凝集素-3(Galectin-3)表达水平,及其相关的临床意义.探讨半乳糖凝集素-3(Galectin-3)在卵巢上皮性肿瘤患者中的发病机制、诊断、监测、治疗以及预后的情况等提供一定的实验依据.方法:回顾性的分析了佳木斯大学第一附属医院2011年02月至2012年11月期间的卵巢上皮性肿瘤患者术前组良性肿瘤19例、交界性肿瘤21例、恶性肿瘤36例,术后组28例,及正常健康非妊娠妇女对照组18例.患者的年龄统计学均无差异,临床资料齐全.应用了酶联免疫方法检测样本血清中半乳糖凝集素-3 (Galectin-3)的表达水平.结果:半乳糖凝集素-3 (Galectin-3)在术前组、术后组、健康非妊娠妇女对照组中均有表达.术前组及术后组的表达水平均明显高于正常健康非妊娠妇女对照组,且差异具有统计学意义(P＜0.05).结论:通过检测卵巢上皮性肿瘤患血清中的半乳糖凝集素-3 (Galectin-3)表达水平,可作为临床上判断卵巢上皮性肿瘤良恶性程度高低的指标.对卵巢上皮性肿瘤疾病的诊断、治疗及其预后的情况等提供了一定良好的实验依据.
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血管内皮细胞增殖标志物CD105在上皮性卵巢癌血清中的表达水平及意义
目的:本实验通过检测上皮性卵巢癌患者、卵巢良性肿瘤患者及正常健康非妊娠妇女对照组血清中CD105的表达水平,对上皮性卵巢癌的预防、诊断、治疗及预后提供良好的实验依据.方法:采集并分析了佳木斯大学附属第一医院妇产科2010-01～2012-11期同上皮性卵巢癌患者34例、卵巢良性肿瘤患者14例及正常健康非妊娠妇女对照组19例的血清.患者的年龄统计学上无差异,临床资料齐全.应用酶联免疫方法检测样本血清中CD105的水平.结果:上皮性卵巢癌患者血清中CD105水平明显高于正常对照组、卵巢良性肿瘤,且差异有统计学意义(P＜0.05);血清中CD105在临床病理分期中的表达水平不同,即恶性程度越高表达水平越高,各组间比较差异有统计学意义(P＜0.05);血清中CD105在有淋巴结及远处转移者中表达水平明显高于无淋巴结及远处转移者,两组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论:通过检测上皮性卵巢癌患者血清中CD105水平为该疾病的预防、诊断、监测、治疗及预后提供了一定良好的实验依据.
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联合检测血清脂蛋白相关磷脂酶-A2(LP-PLA2)及新蝶呤(NPT)在急性冠脉综合征患者血清中的表达及意义
目的:通过研究急性冠脉综合征患者血清脂蛋白相关磷脂酶-A2 (LP-PLA2)及新蝶呤(NPT)的表达及其含量的变化规律,以期探讨两者联合检测在急性冠脉综合征中的临床诊断价值.方法:用酶联免疫法检测46例急性冠脉综合征(ACS)患者血清中LP-PLA2及NPT水平,其中:非ST段抬高的心肌梗死组(NSTEMI)8例,ST段抬高的心机梗死组(STEMI) 15例,不稳定型心绞痛组(UAP)23例,并选取16例健康体检者为正常对照组,结果采用SPSS17.0软件进行统计学处理.结果:急性冠脉综合征组血清LP-PLA2(28.15±4.36)ng/mL及NPT（2.87±0.43）μg/L水平明显高于正常对照组血清LP-PLA2（13.08±3.08）ng/mL及NPT（1.68±0.53）μg/L(P＜0.01);非ST段抬高的心肌梗死组血清LP-PLA2(29.86±1.59)ng/mL及Npt（3.15±0.24）μg/L,ST段抬高的心机梗死组血清LP-PLA2（31.19±3.23）ng/mL及Npt（3.09±0.42）μg/L水平均高于不稳定型心绞痛组血清LP- PLA2（25.57±4.14）ng/mL及NPT（2.63±0.36）μg/L水平(P＜0.01).结论:在急性冠脉综合征组中血清LP-PLA2和NPT水平较高,与对照组比较有极显著差异,两者联合检测有助于提高急性冠脉综合征的早期鉴别诊断.
关键词： 急性冠脉综合征 脂蛋白相关磷脂酶-A2 新蝶呤 酶联免疫 -
结肠癌血清中表皮生长因子受体的表达水平及其临床意义
目的:本实验的目的是研究表皮生长因子受体在结肠癌患者血清中和正常健康对照组血清中的表达水平及临床意义.对结肠癌患者的发病机制、诊断、监测、治疗、预后等提供一定的良好的依据.方法:收集了佳木斯大学附属第一医院普外科2011-02～2012-12期间正常对照组21例,结肠癌患者术前组A期15例、B期19例、C期26例、D期8例,术后组41例.患者年龄无统计学差异,资料齐全.应用酶联免疫的方法检测样本血清中表皮生长因子受体的表达水平.结果:表皮生长因子受体在正常健康对照组、术前纽、术后纽均有表达.术前组、术后纽的表达水平明显高于正常健康对照纽,且差异具有统计学意义(P＜0.05).结论:通过检测结肠癌患者血清中的表皮生长因子受体表达水平,可作为临床上判断结肠癌良恶性程度高低的有效指标.对其诊断、监测、治疗及预后的情况等提供了一定的实验依据.
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MMP-7和HGF在白血病中的表达及其相关性研究
目的:探讨基质金属蛋白酶-7(MMP-7)和肝细胞生长因子(HGF)在白血病患者中的表达及两者的相关性.方法:采用酶联免疫法(ELISA)检测了50例白血病患者和40例健康对照组外周血中MMP-7和HGF的表达.及经两个疗程标准化 疗后50例白血病患者中HGF及MMP-7的表达.结果:HGF和MMP-7在白血病组的表达水平高于对照组,且差异有显著性(P均＜ 0.05),两者之间呈正相关性(r=0.303,P＜0.05).HGF与MMP-7在白血病各分型中的表达无差异(P＞0.05),初治组与复发组之间HGF与MMP-7的表达差异无统计学意义(P＞0.05).HGF与MMP-7在白血病完全缓解组(CR)的表达水平明显低于未完全缓解组(PR)(P＜0.05).结论:HGF与MMP-7的高表达可能与白血病的发生发展发病相关.HGF和MMP-7在白血病的早期诊断与治疗中也起到了重要的作用.
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血清肝纤维化指标酶联免疫试验与放射免疫检测比较
目的:探讨酶联免疫试验与放射免疫检测血清肝纤维化指标比较.方法:对笔者所在医院检测肝纤维化指标的各型慢性肝病患者分别进行酶联免疫和放射免疫检测.结果:两组在检测4 项指标以及异常率比较无显著性差异.结论:酶联免疫具有较好的特异性,无污染、简单、快速、稳定及易于自动化操纵,可代替放射免疫检测.
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EB病毒VCA抗体(IgA)及早期抗原(IgG)抗体的检测其临床意义
目的 检测EB病毒VCA抗体(IgA)及早期抗原(IgG)抗体有何差别,探讨EB病毒VCA抗体(IgA)及早期抗原(IgG)抗体在临床上的应用及诊断意义.方法 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测某单位正常查体258例血清标本EB病毒VCA抗体(IgA)及早期抗原(IgG)抗体.结果 正常查体258例如血清标本EB病毒VCA抗体(IgA)全为阴性,EB病毒早期抗原(IgG)抗体阳性结果有26例,其中女性9例.结论 EB病毒早期抗原(IgG)抗体阳性者EB病毒VCA抗体(IgA)不一定为阳性,在临床应用中医院检验科在EB病毒检测时应根据不同的标本来源选择更有意义的检测方法,如正常查体应选择EB病毒早期抗原IgG抗体,疑为传、鼻咽癌等应选EB病毒VCA抗体IgA,有条件应两者同时检测,并注明检测方法.
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高血压病血瘀证患者血清对血管内皮细胞分泌vWF、TM、EPCR的影响及丹参酮ⅡA的干预作用
目的:探讨高血压病血瘀证患者血清对血管内皮细胞分泌vWF、TM、EPCR的影响及丹参酮IIA的干预作用.方法:将培养的人脐静脉内皮细胞株CRL-1730按照不同的作用血清,分为血瘀组、非血瘀组、健康组及对照组,作用时间为24 h;药物的作用分组分为血瘀组及丹参酮IIA40、20、10、5 μg/mL组,药物组为血瘀证患者血清和药物同时加入细胞内培养,作用时间为24 h,采用ELISA法测定细胞培养上清液的vWF、TM、EPCR.结果:血瘀组、非血瘀组、健康组分泌的vWF、TM、EPCR与对照组比较,分泌量较大;血瘀组、非血瘀组分泌的vWF、TM、EPCR与健康组比较,分泌量较大,其中,血瘀组与健康组比较,差异显著(P＜0.05或P＜0.01);丹参酮IIA的某些浓度可以减少血瘀组细胞分泌的vWF、TM、EPCR,其分泌量与血瘀组比较,差异显著(P＜0.05或P＜0.01).结论:高血压病血瘀证患者血清可以促进CRL-1730分泌vWF、TM、EPCR,丹参酮IIA的某些浓度可以减少血瘀证患者血清作用后细胞分泌的vWF、TM、EPCR.
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活体脊髓取材吹出法与传统方法的比较
脊髓的神经细胞培养、免疫蛋白印迹、酶联免疫等实验研究都需要提取动物的活体脊髓组织。脊髓的单细胞膜片钳和薄片膜片钳等电生理学研究方法，对脊髓细胞活性的要求较高，快速提取结构完整的脊髓显得更为重要[1]。但脊髓在椎管和硬脊膜的保护下，难以提取。通过改良杜俊英等[2]所介绍的固定脊髓提取方法，应用于大鼠和小鼠的活体脊髓取材，并将其效果与传统方法进行比较。该方法是利用注射器和微量移液器枪头，将活体脊髓从两端离断的椎管中吹出的提取方法。吹出法与传统方法相比，取材时间显著缩短，脊髓灰质中大部分细胞活性很好。
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化学发光免疫法检测美洲大蠊sIgE水平的研究
将6只美洲大蠊全虫用液氮研磨提取粗浸液,用阴离子交换剂(DEAE,Sephadex A-50)纯化后测定蛋白浓度,并配制成不同浓度梯度,分别将粗浸液及纯化后的不同浓度变应原点于硝酸纤维膜(NC膜)上,依次加入不同蟑螂过敏患者血清、生物素-亲和素系统的IgE二抗和辣根过氧化物酶(HRP),以及鲁米诺化学发光底物进行化学发光反应.结果 表明,化学发光免疫法可检测美洲大蠊粗浸液低蛋白浓度为0.87 μg/ml.在此浓度下,其检出结果与皮试阳性患者血清符合率为90%,与皮试阴性及健康人血清的符合率均为100%.
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基质金属蛋白酶9与糖尿病大血管病变的关系
细胞外基质作为血管壁的主要成分在血管病变的病理生理过程中起重要作用.基质金属蛋白酶(MMP)9,即相对分子质量92000的明胶酶与细胞外基质(ECM)的动态失衡关系密切.本研究应用酶联免疫及分子生物学等技术测定MMP-9血浆水平、MMP-9 mRNA表达变化,以探求MMP-9在2型糖尿病血管病变中的作用.
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CLIA法检测高龄患者梅毒特异性抗体的临床应用
梅毒血清学检查已成为临床患者手术前、输血前及各种创伤性检查前的必检常规项目,由于高龄患者易受各种内外源性因素干扰,因而对梅毒抗体检测反应性较强标本的确认及弱反应性标本鉴别尤为重要[1].本文探讨化学发光免疫分析法(CLIA)检测高龄患者梅毒特异性抗体在临床诊断中的应用价值并与梅毒酶联免疫吸咐试验(TP-ELISA)、梅毒螺旋体颗粒凝集试验(TPPA)、甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)等多种检测方法进行了比较分析.
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自然人群接种乙肝疫苗免疫效果观察
为了探讨接种过乙肝疫苗后机体产生保护性抗体抗-HBs的情况,我们采用固相放射免疫(SPRIA)及酶联免疫(ELISA)两种方法分别对373例、446例全程接种过乙肝疫苗者进行抗-HBs的产生与时间关系的分析,现将结果报告如下.
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一种快速检测HIV抗体方法的评价
目的:探讨一种快速检测人类免疫缺陷病毒(HIV)抗体方法的敏感性和特异性,为艾滋病自愿咨询检测(VCT)及各种应急检测提供参考依据.方法:选择MSM调查人群血样1 010份,平行用抗HIV-1/2快速检测(RT)试剂与抗HIV-1/2酶联免疫(ELISA)试剂进行检测,凡结果阳性者均用免疫印迹法(WB)进行确认.结果:710份血浆标本两种方法均有42份阳性,两者相符;300份全血标本用RT法检测,19份阳性,ELISA法22份阳性,3份不符标本后用血浆重复用RT法检测为阳性.所有阳性标本经WB确认均判为阳性.结论:HIV抗体快速检测试剂的使用需满足质量保证的要求并做好检测前后的咨询.建议使用经权威机构推荐的快速检测试剂;对于采供血机构,应使用ELISA法进行检测.
