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山楂叶不同提取物对血瘀大鼠全血黏度影响的谱效关系研究
目的 研究山楂叶不同提取部位指纹图谱与其降低血瘀大鼠全血黏度的相关性,为建立指纹图谱与药效关联的中药质量控制模式提供理论依据和数据支持.方法 采用高效液相色谱法建立山楂叶不同提取部位的指纹图谱;采用MATLAB软件的逐步后退分析方法,计算指纹图谱共有峰(X)与全血黏度药效值(Y)的多元线性回归方程.结果 指纹图谱共有峰有32个,其中X9、X10、X11、X13、X14、X15、X17、X19、X27、X29和Y具有相关性,组成功效成分组;X10、X11、X13、X19、X29与Y呈负相关,有可能是活性单体成分,其中X14为牡荆素葡萄糖苷,X17为牡荆素,X19为芦丁.结论 利用MATLAB统计软件计算得到的多元回归方程具有统计学意义,为进一步研究山楂叶提取物的活性成分提供理论依据.
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酸枣仁黄酮部位不同配伍的解郁安神作用及谱-效相关性分析
目的 建立酸枣仁黄酮部位不同配伍的HPLC指纹图谱,研究其与解郁安神功效的谱效关系.方法 采用Spearman 分析、灰色关联度分析、多元回归分析方法将HPLC指纹图谱中各组分特征峰的峰面积与小鼠行为学指标数据相关联.结果 酸枣仁黄酮部位HPLC指纹图谱中与药效有较强相关性的成分有5个,分别为维采宁-Ⅱ、牡荆素葡萄糖苷、斯皮诺素、6'''-阿魏酰斯皮诺素、6'''-对羟基苯甲酰斯皮诺素.结论 通过谱-效相关性分析,推测出酸枣仁黄酮部位发挥抗抑郁、镇静催眠作用的有效成分,为酸枣仁有效成分筛选及质量控制方法的建立提供了依据.
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山楂体外降三酰甘油主要活性组分谱效关系研究
目的 探讨山楂降三酰甘油(TG)主要活性成分UPLC指纹图谱与药效之间的相关性.方法 利用TG体外模拟消化模型,筛选出山楂降TG主要活性组分.采用UPLC法建立12批不同产地山楂降TG主要活性组分指纹图谱,并获取相应的药效数据,运用偏小二乘法,进行相关性分析.结果 山楂中富含黄酮的组分能够明显地降低TG水平.经相关性分析,在该组分指纹图谱所含的11个共有峰中,1(B型原花青素二聚体)、3(原花青素C1)、4(B型原花青素二聚体)、5(芦丁)、6(金丝桃苷)、7(异槲皮苷)、8 (B型原花青素二聚体)号色谱峰所对应的化合物对降TG呈正相关作用,其余包括2(表儿茶素)、10(槲皮素)、11(5-O-咖啡奎尼丁酯)号色谱峰在内的各峰则呈负相关.结论 山楂黄酮类成分对降低TG水平存在不同程度的影响.
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基于灰色关联度与正交偏小二乘法分析的苍术挥发油燥性谱效关系研究
目的 研究苍术挥发油的气相色谱-质谱(GC-MS)联用指纹图谱与苍术燥性效应的谱效关系,初步明确苍术主要燥性成分.方法 采用GC-MS法对不同批次苍术(S1～S9)挥发油进行分析,以大鼠日均饮水量、全血黏度、肾脏中水通道蛋白2(AQP2)量为苍术燥性效应药效指标,采用灰色关联度分析法和正交偏小二乘法相结合分析其谱效关系.结果 苍术发挥燥性效应是多种成分共同作用的结果,对燥性作用药效贡献较大的3个峰分别为31、28、33号峰,经过谱库检索分析鉴定出3个峰对应的成分分别为β-桉叶醇、马兜铃烯、异愈创木醇.结论 初步明确苍术主要燥性成分有β-桉叶醇、马兜铃烯、异愈创木醇,为苍术燥性物质基础研究提供参考.
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红芪提高免疫功能活性部位的谱效关系研究
目的 研究红芪提高正常小鼠机体免疫功能活性部位与HPLC指纹图谱的相关性.方法 建立二硝基氟苯(DNFB)所致小鼠迟发型变态反应(DTH)模型,以1批甘肃宕昌野生红芪的不同提取部位ig给药,选择优部位.HPLC测定条件:色谱柱为Hypersil ODS C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈和0.1％甲酸,梯度洗脱;体积流量为1.0 mL/min,柱温为30℃,检测波长为275 nm;测定12批红芪药材水提部位的HPLC指纹图谱及其提高免疫功能的活性,采用偏小二乘(PLS)法将HPLC图谱的各组分峰面积与提高免疫功能药效指标相关联,研究谱效相关性.结果 红芪水提部位提高免疫功能活性强,根据PLS法回归系数大小确定红芪药材水提部位中物质群对提高机体免疫功能的贡献程度,常用于表征红芪质量的腺苷、芒柄花苷、金雀异黄酮、芒柄花素、美迪紫檀素等指标化合物均表现为负相关.结论 红芪药材水提部位具有明显的提高免疫功能活性,不同来源的红芪药材提高免疫功能的活性不同,谱效关系研究表明常用于表征红芪质量的腺苷、芒柄花苷、金雀异黄酮、芒柄花素、美迪紫檀素等指标化合物对红芪提供免疫功能活性未表现出积极作用.
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两面针提取物抗肝癌谱-效关系研究
目的 研究两面针药材提取物HPLC指纹图谱与抗肝癌活性之间的关系.方法 以人肝癌细胞株HepG2为药效模型,采用MTT法测定33批不同产地两面针药材提取物的抗肝癌活性,采用逐步后退法将量化特征峰面积与MTT法测得两面针提取物抗肿瘤活性的结果结合,构建两面针药材提取物抗肝癌的谱效关系方程.结果 建立的两面针药材提取物HPLC指纹图谱相似度达到0.7以上,经相似度软件筛选出24个特征指纹峰,用逐步后退法拟合两面针药材提取物抗肝癌谱效关系方程,该方程具有统计学意义和实际意义,可较准确地预测两面针药材提取物的抗肝癌活性.结论 两面针药材提取物抗肝癌活性是多种成分协同、互补、制约相互作用的结果,根据方程可预测肿瘤细胞的敏感性.
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藿香正气水抑菌作用药效物质基础及质量控制方法研究
目的 探讨藿香正气水ig大鼠后肠道内容物指纹图谱特征峰所代表的化学成分与抑菌药效的相关性,为建立“代谢物指纹图谱与药效关联”的中药质量控制模式提供理论依据和数据支持.方法 自制11批藿香正气水,ig给予大鼠后40min处死动物,制备肠道内容物样品,检测藿香正气水抑菌效果,建立HPLC指纹图谱,并用化学计量学方法将抑菌圈直径与指纹图谱数据进行相关分析,以期寻找控制藿香正气水质量的药效成分群.结果 以强迫引入法进行多元线性回归分析,有10个与抑菌活性密切相关的色谱峰被引入回归方程,其中呈正相关的色谱峰有4个(6、13、26、30号),且26号峰(和厚朴酚)经实验证明具有抑菌作用.结论 运用所建立的数学模型找到可控制藿香正气水质量的体内药效成分群,且证明相关成分具有抑菌作用,这些成分群对藿香正气水质量控制具有参考价值,该法切实可行.
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黑顺片血浆指纹图谱与抗心衰作用的谱效关系研究
目的 探讨ig黑顺片(附子炮制品)醇提物后大鼠血浆指纹图谱与药效指标(血压、心率)间的谱效关系,以阐明附子抗心衰作用的药效物质基础.方法 利用UPLC-QTOF/MS建立大鼠ig黑顺片醇提物的血浆指纹图谱,并连续监测心衰大鼠的血压和心率,再用偏小二乘回归(PLSR)法对黑顺片入血成分指纹峰与药效指标进行相关性分析.结果 从黑顺片血浆指纹图谱中筛选出13个入血成分,通过PLSR分析发现次乌头原碱、苯甲酰中乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱和3,13-脱氧苯甲酰乌头原碱的血浆药物浓度变化与心率或血压变化呈显著正相关性,且VIP值大于1.结论 次乌头原碱、苯甲酰中乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱和3,13-脱氧苯甲酰乌头原碱为黑顺片抗心衰作用的潜在药效物质.
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菊苣降尿酸作用的谱效关系研究
目的 研究菊苣HPLC指纹图谱与其降尿酸药效的相关性,初步揭示菊苣降尿酸药效物质基础.方法 高嘌呤饮食诱导鹌鹑高尿酸血症,并给予菊苣水提物.采用偏小二乘(PLS)法将菊苣HPLC指纹图谱中各共有峰的相对峰面积和降尿酸药效进行数据处理,研究谱效相关性,确定菊苣降尿酸作用的药效物质基础.结果 菊苣地上部分具有较好的降尿酸药效,根据变量投影重要性指标确定了菊苣HPLC指纹图谱中各个共有峰对降尿酸作用的贡献度.其中,绿原酸、菊苣酸及峰3、6、7、8所代表的化合物对降尿酸药效的贡献度较大.结论 通过菊苣HPLC指纹图谱与其降尿酸药效PLS法分析可知,菊苣降尿酸作用与其所含的多种成分有关.
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基于UPLC-MS联用技术的头花蓼抗炎谱效关系初探
目的 初步阐明头花蓼Polygonum capitatum醇提物和水提物与其体外抗炎活性之间的谱效关系.方法 采用脂多糖(LPS)诱导小鼠RAW264.7细胞制备细胞炎症模型,利用NO、肿瘤坏死因子-α(TNF-a)试剂盒检测细胞炎症因子释放量,利用偏小二乘法关联UPLC-MS方法建立的指纹图谱数据和头花蓼不同提取物的药效活性指标,建立头花蓼化学成分的谱效关系.结果 头花蓼不同提取物在质量浓度小于250 mg/L时无细胞毒性,且均具有炎症抑制作用,存在一定的量效关系.应用偏小二乘法对药效指标TNF-α和色谱峰进行关联度比较发现,峰24、17、22、23、20与抗炎药效呈正相关,峰11、1、7、15、5、3与抗炎药效呈负相关.对峰24、17、22、23、20分析发现,除17号峰为鞣花酸外,其余4个峰均为黄酮类化合物.结论 头花蓼不同提取物均可以抑制RAW264.7细胞的炎症反应,谱效关系分析得出槲皮苷、鞣花酸、金丝桃苷对头花蓼的抗炎药效(调节TNF-a水平)有较大贡献.
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红芪活性组分抗骨质疏松作用的谱效关系研究
目的 研究红芪抗骨质疏松药效与HPLC指纹图谱的相关性.方法 建立去卵巢大鼠所致骨质疏松模型,红芪(S1)的不同提取部位ig给药,选择红芪抗骨质疏松活性强的提取部位.采用HPLC法建立10批不同产地红芪乙醇提取部位指纹图谱,获取相应的药效数据,运用偏小二乘法,进行相关性分析.将筛选出的活性物质单体作用于成骨细胞,验证其抗骨质疏松活性.结果 红芪乙醇提取部位抗骨质疏松药效强.经过相关性分析,该组分指纹图谱共确定9个共有峰,鉴定出的3种化合物中,腺苷、毛蕊异黄酮与药效呈正相关,芒柄花苷与药效呈负相关.体外验证实验结果表明毛蕊异黄酮可以提高成骨细胞碱性磷酸酶(ALP)活性.结论 红芪抗骨质疏松作用是其所含各种成分共同作用的结果,腺苷、毛蕊异黄酮对药效有一定的贡献,且毛蕊异黄酮有促进成骨细胞分化的作用.
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丹参提取物对糖基化终末产物/缺氧条件下视网膜Müiller细胞低氧诱导因子-1α作用的谱效关系研究
目的 探讨丹参提取物对糖基化终末产物(AGEs)/缺氧条件下视网膜Müller细胞低氧诱导因子-lα (HIF-lα)表达的药理作用与化学成分之间的关系,并以丹参酮ⅡA为对照,初步探索丹参治疗糖尿病性视网膜病变(DR)的药效物质基础.方法 采用HPLC法建立10批丹参提取物的指纹图谱,获得各特征峰的峰面积.在AGEs/缺氧条件下培养视网膜Müiller细胞,并测定丹参提取物给药组及丹参酮ⅡA对照组HIF-lα的表达量.结合灰色关联分析法与偏小二乘法回归分析成分与药效之间的谱效相关性.结果 根据10批样品指纹图谱共标示出17个特征峰.与模型组相比,10批样品及丹参酮ⅡA对照组均能降低视网膜Müller细胞HIF-1α的表达量.谱效相关性研究显示峰1、5、6、9、10、11、12、14、15、16代表的化学成分对抑制HIF-1α表达具有较大的贡献.结论 初步确定15,16-二氢丹参酮Ⅰ、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA及6个尚未确定结构的成分(峰1、5、6、9、14、15)为丹参治疗DR的可能药效物质.
关键词： 丹参提取物 谱效关系 指纹图谱 视网膜Müller细胞 低氧诱导因子-1αt -
黑玛咖不同提取物的抗疲劳作用与谱效关系研究
目的 研究黑玛咖不同提取物的抗疲劳作用及其超高效液相色谱(UPLC)图谱与抗疲劳作用的谱效关系,为明确黑玛咖的抗疲劳作用的物质基础提供依据.方法 通过小鼠力竭游泳实验、检测肝糖原和血清乳酸水平,比较黑玛咖8种提取物的抗疲劳作用;采用UPLC-Q-TOF/MS法建立黑玛咖8种提取物的指纹图谱;以小鼠力竭游泳实验为抗疲劳作用的药效学指标,采用偏小二乘法回归(PLSR)分析建立其谱效关系.结果 黑玛咖60％、80％、95％乙醇提取物(醇提物)均明显增加小鼠力竭游泳时间,且以95％醇提物增加作用更为显著;黑玛咖80％醇提物能显著增加因过度运动所致的降低的肝糖原水平;黑玛咖95％醇提物能明显减少小鼠负重游泳后产生的血清乳酸堆积.从黑玛咖不同提取物UPLC指纹图谱中提取出23个能够表征含量差异的特征峰.采用PLSR分析,以力竭游泳时间为药效指标时,发现黑玛咖提取物中N-苄基十六酰胺、N-苄基-5-氧代-6E,8E-十八碳二烯酰胺、1,3-二苄基-2-苯基-4,5-二甲基咪唑和N-十八烷酰胺与抗疲劳作用呈正相关,且VIP值大于1.结论 黑玛咖95％及80％醇提物具有显著的抗疲劳作用;明确N-苄基十六酰胺、N-苄基-5-氧代-6E,8E-十八碳二烯酰胺、1,3-二苄基-2-苯基-4,5-二甲基咪唑和N-十八烷酰胺是黑玛咖抗疲劳作用的主要有效成分.为深入研究黑玛咖抗疲劳药效物质基础及建立全面可靠的质量控制方法提供思路.
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复方芒果叶抗炎物质筛选和作用机制研究
目的 探究复方芒果叶的抗炎活性,明确其抗炎药效物质基础,初步阐明其网络调控机制.方法 采用UPLC-Q/TOF-MS法结合核因子-κB (NF-κB)荧光素酶报告基因检测系统对复方芒果叶进行抗炎成分的筛选;运用网络药理学对其中药效成分进行作用靶点与通路的预测;并利用肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导人支气管上皮细胞BEAS-2B炎症模型以及采用酶联免疫法(ELISA)对复方芒果叶的抗炎活性进行验证.结果 从复方芒果叶中筛选出16个主要抗炎成分;预测这些抗炎成分分别作用于40个靶点并与11条炎症通路相关,活性验证结果表明芒果苷、补骨脂素、人参皂苷Rg1 3个化合物均具有很好的抗炎作用,且各成分间两两配伍具有协同作用.结论 初步揭示了复方芒果叶抗炎作用与丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、黏着斑(focal adhesion)、血管内皮生长因子(VEGF)信号通路等多重调控机制有关.
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鳖甲药材指纹图谱与其抗肝纤维化作用的谱效关系研究
目的 研究不同产地鳖甲药材的HPLC指纹图谱与其抗纤维化作用的谱效关系,揭示鳖甲约材抗肝纤维化作用的“药效成分组”.方法 HPLC-DAD法测定了12个产地鳖甲药材样品,采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004 A进行评价,建立了共有模式,并进行主成分分析(PCA).以LX-2肝星状细胞为模型研究其对肝细胞的抑制效果,采用SPSS软件对数据进行相关分析,研究谱效相关性.结果 12个产地鳖甲药材HPLC指纹图谱中共有7个特征共有峰,其中峰2、5与LX-2肝星状细胞抑制效果(A值)的相关性呈现中等程度相关,峰4的相关性强.由PCA可知,峰4的量对鳖甲质量有着重要的影响.结论 12个产地鳖甲药材对LX-2肝星状细胞均有抑制作用,HPLC指纹图谱与其抗纤维化作用之间有一定的相关性,为进一步控制鳖甲药材内在质量提供参考.
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基于小二乘回归分析法的雷公藤多苷片免疫抑制作用谱效关系研究
目的 初步探讨雷公藤多苷片免疫抑制作用及其HPLC指纹图谱间的相关性.方法 采用HPLC建立7个厂家生产的雷公藤多苷片醋酸乙酯提取物的指纹图谱,选择刀豆蛋白A (Con A)刺激的小鼠脾淋巴细胞模型进行免疫抑制药效学研究,分别考察雷公藤多苷片对小鼠脾淋巴细胞增殖以及细胞因子γ干扰素(IFN-γ)分泌的影响;采用偏小二乘回归分析法分析谱效关系.结果 建立了7个厂家生产的雷公藤多苷片的HPLC指纹图谱,从HPLC指纹图谱中提取出18个能够表征差异的特征峰.药效研究结果显示不同厂家生产的雷公藤多苷片均可显著抑制Con A诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖和IFN-γ的分泌(P＜0.05).偏小二乘回归法分析结果显示,以抑制小鼠脾淋巴细胞增殖IC50值为药效指标时第1、2、6、7、17、18号峰为药效峰;以IFN-γ分泌抑制率为指标时,第1、2、6、7、8、9、12、13号峰为药效峰.结论 第1、2、6、7、8、9、12、13、17、18号峰所代表的化合物可能为雷公藤多苷片中发挥免疫抑制主要有效成分.
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高良姜提取物促进黑素生成的谱效关系分析
目的 建立高良姜提取物指纹图谱,考察其对B16鼠黑素瘤细胞增殖、酪氨酸酶活性及黑素量的影响,并分析其谱效关系.方法 HPLC法建立高良姜醇提物(G1)、G1水沉物(G2)、G2大孔树脂纯化物(G3)、G3聚酰胺精制物(G4)指纹图谱;MTT法检测各提取物对B16细胞增殖的影响;比色法检测其对酪氨酸酶活性和黑素量的影响;灰关联度分析法研究其谱效关系.结果 与对照组相比,G1浓度为1.00～5.00 μmol/L、G2浓度为0.50～5.00 μmol/L、G3浓度为0.25～5.00 μmol/L,G4浓度为0.25～ 10.00 μmol/L,能显著促进B16细胞增殖(P＜0.01); G1、G2浓度为0.50μmol/L,G3、G4浓度为0.50～ 1.00μmol/L,能显著增强酪氨酸酶的活性(P＜0.05、0.01);G1浓度为0.50、5.00 μmol/L,G2、G4浓度为0.50～5.00 μmol/L,G3浓度为0.25～5.00μmol/L时,促黑素合成作用显著(P＜0.05);在相同浓度下,G4促B16细胞增殖和增强酪氨酸酶活性的作用强.谱效关系分析表明,与药效关联度高的是高良姜素(7号峰).G1、G2、G3、G4含高良姜素分别为27.61、88.72、348.53、693.35 mg/g,验证实验结果表明高良姜素在0.25～10.00 μmol/L均有显著的促B16细胞增殖、增强酪氨酸酶活性和促进黑素量升高的作用.结论 随着高良姜素量的增加,高良姜各提取物对B16细胞增殖、酪氨酸酶活性及黑素量的作用逐渐增强,表明高良姜素是高良姜治疗白癜风的有效物质之一.
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基于聚类分析和典型相关分析的北柴胡保肝作用谱效关系研究
目的 探讨北柴胡正丁醇萃取部位的保肝作用及与其HPLC指纹图谱间的谱效关系,以阐明其药效物质基础.方法 采用HPLC-ELSD法获取北柴胡正丁醇萃取部位的指纹图谱；检测CCl4所致急性肝损伤小鼠血清中丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)水平、肝组织中丙二醛(MDA)的量和超氧化物歧化酶(SOD)的活性；利用聚类分析与典型相关分析法对色谱-药效数据进行相关分析.结果 从HPLC指纹图谱中共提取出12个能够标示药材特征的皂苷类成分的共有峰.不同产地北柴胡药材的保肝作用存在显著差异(P＜0.05).聚类分析和典型相关分析明确了给予北柴胡正丁醇萃取部位的小鼠血清中ALT水平和肝组织中SOD活性与皂苷类化合物柴胡皂苷a和柴胡皂苷d之间存在线性关系.结论 北柴胡保肝作用的部分药效物质基础为柴胡皂苷a和柴胡皂苷d.
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大叶冬青药材的黄嘌呤氧化酶抑制作用的谱效关系研究
目的 研究不同产地10批次大叶冬青药材的HPLC指纹图谱与其黄嘌呤氧化酶(XOD)抑制作用的谱效关系,初步揭示大叶冬青药材的药效物质基础.方法 HPLC法测定了10批次不同产地的大叶冬青药材样品,采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A版评价,建立共有模式,并进行主成分分析.采用HPLC法建立酶-底物反应体系,对不同批次的大叶冬青药材的XOD抑制活性进行研究,基于谱效关系,采用SPSS软件对数据进行相关性分析.采用氧嗪酸钾诱导建立小鼠高尿酸血症模型,检测小鼠血清中以及肝组织中尿酸(UC)、XOD水平变化.结果 10批次不同产地的大叶冬青药材HPLC指纹图谱中共有15个特征峰,其中峰11(苦丁茶冬青皂苷E)、14(苦丁冬青皂苷F)与XOD抑制作用呈中等程度相关,峰5(未鉴定)、6(山柰酚-3-D-β-D-芸香糖苷)、7(异鼠李素-3-O-β-D-芸香糖苷)、10(大叶冬青皂苷C)、13(大叶冬青皂苷D)相关性强.由主成分分析可知,峰9(大叶冬青皂苷H)的量在大叶冬青药材质量控制中起到至关重要的作用.体内实验结果表明,大叶冬青提取物高、中、低剂量组均能显著降低小鼠血清UC和XOD水平,抑制肝组织中XOD活性,并呈现一定的量效关系.结论 10批不同产地的大叶冬青药材对XOD均有较强的抑制作用,HPLC指纹图谱显示出7个共有峰对应的化合物与该药效存在一定的相关性.
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生物活性结合UPLC-Q/TOF分析的芒果核仁中抗炎药效物质筛选研究
目的 探究芒果Mangifera indica核仁的抗炎活性,并筛选出其中具有抗炎作用的药效物质.方法 利用二甲苯诱导的小鼠耳肿胀模型和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的人胚肾细胞293 (HEK-293)炎症模型对芒果核仁提取物的抗炎作用进行评价,并采用UPLC-Q/TOF结合核因子-κB (NF-κB)萤光素酶报告基因检测系统进行谱效关系研究,筛选芒果核仁提取物中具有抗炎活性的药效物质.结果 芒果核仁提取物能显著改善小鼠耳廓的肿胀情况并能显著抑制细胞中NF-κB的表达;经UPLC-Q/TOF谱效关系分析筛选出10个具有NF-κB抑制活性的化合物为芒果苷和没食子酸鞣质类化合物,后者包括:没食子酸、1-没食子酰-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-β-D-半乳糖苷、1-没食子酰-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→6)-β-D-半乳糖苷、1,2,3-三-O-没食子酰-β-D-葡萄糖、1,2,3,4-四没食子酰-β-D-葡萄糖、1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖、六没食子酰葡萄糖.结论 芒果核仁提取物具有较好的抗炎作用,芒果苷和没食子酸系列衍生物为其提取物中主要的抗炎活性物质.
