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治疗乳腺增生验方1则
处 方生牡蛎10g,鳖甲6g,穿山甲(炮)6g,柴胡15g,广郁金15g,川楝子15g,香附15g,夏枯草20g,蒲公英15g,山慈姑15g,当归15g,三棱15g,莪术15g,王不留行10g,青皮6g,路路通15g,海藻15g,昆布15g,生甘草6g.
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鳖甲抗肝纤维化药效物质基础及质量控制研究思路
鳖甲作为防治肝纤维化的常用中药,备受人们关注,近年来对其进行了广泛深入的研究,明晰了一些化学成分及其抗肝纤维化的可能机制,但其质量标准研究相对薄弱,目前尚未有统一认可的质控手段.本文对鳖甲的化学成分及抗肝纤维化的可能机制进行了整理和归纳,提出了基于"敲出敲入"的鳖甲抗肝纤维化药效物质基础及质量控制研究思路.
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鳖甲及其混伪品的DNA分子鉴定
目的:探讨快速、准确鉴定鳖甲及其混伪品的方法.方法:本文对中华鳖及其混伪品的COI序列用MEGA 4.0等软件进行遗传距离等分析,并构建中华鳖及其混伪品的NJ树.结果:中华鳖种内COI序列变异很小,种间存在较多的变异位点,种间的遗传距离显著大于种内的遗传距离.由所构建的系统聚类树图可以看出,同属聚在一起,且各物种又形成相对独立的支.结论:基于COI序列的DNA条形码技术可以很好地鉴定鳖甲及其混伪品.
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鳖甲水提物和醇提物对单胺氧化酶活性影响的研究
目的:评价鳖甲水提物和醇提物总氨基酸及寡肽类成分含量及两种提取物对单胺氧化酶(MAO)活性影响的比较研究,考察两种化学成分与药效的关系,探讨鳖甲提取工艺及有效组分.方法:分别采用水提和醇提制备鳖甲药材的提取物,分别以谷氨酸和鳖甲七肽为标准物质建立总氨基酸和寡肽类含量测定标准曲线,测定鳖甲水提物和醇提物总氨基酸和寡肽类含量,并按照单胺氧化酶试剂盒说明书测定两种提取物对体外MAO活性作用.结果:水提法和醇提法的浸膏得率分别为20.6％和5.4％;鳖甲水提物和醇提物中寡肽类含量分别(48.13±3.27)％和(20.17±2.49)％;总氨基酸含量分别为(23.68±1.76)％和(55.88±2.41)％;水提物和醇提物均具有抑制MAO活性作用,MAO抑制率分别为(65.12±1.34)％和(50.95±1.1 3)％.结论:鳖甲水提物浸膏得率及寡肽含量均大于醇提法;总氨基酸含量则是醇提物高于水提物.二者均有抑制MAO活性效果,且水提物的MAO抑制效果略优于醇提物;提示鳖甲中寡肽类成分和总氨基酸类成分都具有抑制MAO活性作用,且水提物效果更佳,因此鳖甲以水提为佳,推测寡肽类成分和氨基酸类成分可能均为其有效物质.
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鳖甲提取物对抑制TGF-β诱导的大鼠肝星状细胞活化的影响
目的:研究鳖甲提取物相对分子质量＜6 kDa肽段(P6)对转化生长因子]β(transforming growth factor-β,TGF-β)诱导的大鼠肝星状细胞HSC-T6的活化增殖与肝纤维化(hepatic fibrosis,HF)相关基因表达的影响,初步探究其抗肝纤维化的作用机制.方法:应用透析法得到P6;细胞增殖与活性检测(CCK8)法检测P6对HSC-T6细胞增殖的影响;实时荧光定量聚合酶反应(Real-time PCR)检测HSC-T6细胞内α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA),Ⅰ型胶原(collagen type Ⅰ,ColI),基质金属蛋白酶抑制因子-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)以及基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)的mRNA表达水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)分析HSC-T6细胞内α-SMA与Col Ⅰ蛋白的表达.结果:与空白组比较,P6对HSC-T6细胞存活率无明显影响,但却能显著抑制TGF-β诱导的HSC-T6细胞的增殖(P＜0.05).与TGF-β组比较,P6各浓度均能显著降低HSC-T6细胞中α-SMA,Col Ⅰ,TIMP-1 mRNA的表达,增加MMP-2 mRNA的表达(P ＜0.05,P＜0.01),明显降低α-SMA与Col Ⅰ蛋白的表达.结论:P6能抑制TGF-β诱导的HSC-T6细胞的活化增殖,减少细胞外基质(extracellular matrix,ECM)生成,促进其降解,发挥抗肝纤维化作用.
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鳖甲抗肝纤维化活性多肽部位HPLC指纹图谱
目的:建立鳖甲抗肝纤维化活性多肽部位HPLC指纹图谱,全面完整地反映其内在化学信息,为鳖甲活性多肽部位的质量控制提供依据.方法:采用高效液相色谱法,ZORBAX SB-C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相乙腈-0.03％三氟乙酸梯度洗脱,检测波长220 nm,流速1 mL· min-,柱温25℃.结果:建立了鳖甲抗肝纤维化活性多肽部位的HPLC指纹色谱,获得了13个共有峰;利用中药指纹图谱相似度评价软件进行相似度评价,10批样品的相似度均＞0.9,提示鳖甲活性多肽质量较稳定.结论:该方法准确可靠,精密度、重复性和稳定性良好,能有效控制鳖甲活性多肽部位的质量,为进一步药效研究、制剂研发提供质量保证.
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鳖甲水提物W-A-80在模拟胃肠液中消化情况分析
目的:研究鳖甲水提物W-A-80在模拟胃、肠环境中消化情况,探讨其体内转化形式.方法:采用水提醇沉法制备鳖甲水提物W-A-80,模拟胃肠液环境,于37℃消化.以寡肽产率为指标,通过双缩脲反应-酶联免疫检测仪法考察胃蛋白酶和胰蛋白酶于不同酶底比、酶解时间的寡肽(截留相对分子质量＜3 500)产率变化；平衡透析法测定模拟胃肠液消化后所得寡肽与体外小鼠肝组织的蛋白结合率.结果:确定酶解条件为人工胃液酶底比1∶10,于37℃酶解3h,不同质量浓度寡肽与肝组织的蛋白结合率分别为31.63％,19.93％,9.65％；人工肠液酶底比1∶100,于37℃酶解11h,不同质量浓度寡肽与肝组织的蛋白结合率分别为48.75％,47.43％,22.72％;均明显高于空白对照的7.00％,5.31％,4.60％.结论:鳖甲水提物W-A-80经模拟胃肠液消化有大量寡肽产生,且活性显著强于原液,推测寡肽可能是鳖甲抗肝纤维化的物质基础.
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隔鳖甲灸治疗颌下腺炎并涎石病13例
颌下腺炎并涎石病是一种不太多见的口腔疾患,西医多通过手术方法治疗.笔者自1999年以来采用隔鳖甲灸治疗该病13例,效果满意,现报告如下.1 一般资料13例中男8例,女5例;年龄12～45岁;病程短1周,长7年.13例均为一侧发病,属慢性炎症者6例,属急性炎症者7例,均可于颌下三角区扪及肿大压痛的颌下腺.此外,于口底部颌下腺导管内可扪得涎石者7例;挤压颌下腺能压出脓性或黏液脓性分泌物者9例.属慢性炎症者可扪得粗大而硬的导管,导管口水肿,轻度发红;属急性炎症者口底与颌下腺明显肿胀、疼痛,颌下腺导管口发红,其中有5例伴发热恶寒、头痛等全身反应.13例中有5例经咬合片检查而确诊.
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龟板、鳖甲炮制研究概况
龟板、鳖甲传统的炮制方法是采用水浸泡法,其生产周期长,腐烂时发臭,影响环境卫生.另外由于大量的水长时间浸泡,会使一部分水溶性成分流失,影响药效.鉴于以上原因,不少中药工作者对龟板,鳖甲的炮制方法进行了研究.
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鳖甲寡肽I-C-F-6对四氯化碳诱导大鼠肝纤维化的影响
目的：观察鳖甲寡肽 I-C-F-6对四氯化碳(CCl4)诱导的大鼠肝纤维化的影响,探讨其抗纤维化作用及可能机制。方法将48只SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、联苯双酯组和鳖甲寡肽组。每组12只,CCl4腹腔注射建立大鼠肝纤维化模型。鳖甲寡肽组、联苯双酯组按0.12μg/g体质量皮下注射给药,正常组、模型组给予等量生理盐水,连续7周。检测血清或肝组织中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)的水平及丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、白细胞介素(IL)-4、IL-10、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量；苏木素-伊红(HE)染色光镜下观察组织形态学变化及免疫组化染色观察肝组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)表达。结果与模型组比较,鳖甲寡肽组血清ALT、AST水平显著降低,肝组织MDA、TNF-α含量下降,IL-4、IL-10含量升高,SOD 活性增强,肝组织纤维化程度明显改善,TGF-β1抗体呈弱阳性表达。结论鳖甲寡肽 I-C-F-6能减轻模型大鼠肝细胞损伤,具有抗氧化和抗纤维化作用。
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乳核消胶囊治疗气滞血瘀型乳腺增生病Ⅱ期临床试验
乳核消胶囊是由陕西省白鹿制药厂研制的治疗乳腺增生病(气滞血瘀型)的中药新药(三类).该药由夏枯草、川芎、鳖甲、柴胡、赤芍等组成,具有疏肝理气、活血散结之功.
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鳖甲多糖对小鼠免疫调节作用的研究
中药鳖甲具有滋阴清热、软坚散结的功效.笔者近来研究发现,鳖甲多糖(trionyx sinensis polysaccharides,TSP)具有抗肿瘤的作用[1],为了进一步研究鳖甲多糖抗肿瘤的作用机制,本研究探讨了鳖甲多糖对小鼠的免疫调节作用,旨在运用祖国传统医学"药食同源"的理论,研究鳖甲多糖的免疫调节作用及其机制,为临床治疗肿瘤提供理论依据.
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对《中国药典》2000年版一部收载的动物类药材性状特征探讨
紫河车、乌梢蛇、龟甲、鳖甲4种药材均为<中国药典>2000年版一部收载品种,紫河车为健康人的干燥胎盘;乌梢蛇为游蛇科动物乌梢蛇Zaocys dhumnades (Cantor )除去内脏的干燥体;龟甲为龟科动物乌龟Chinemys reevesii (Gray) 的背甲及腹甲;鳖甲为鳖科动物Trionyx sinensis Wiegmann的背甲,均为常用中药.目前市售的动物类药材中,上述这些品种的伪劣药品较多,成分较为复杂,加上药品标准不够完善,多以性状项作鉴定品种为依据,对检验、生产、经营、销售、使用单位执行标准带来一定难度,直接影响药品质量.
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特异性PCR方法鉴别鳖甲药材和饮片
鳖甲为临床常用的动物药材,炮制加工后鳖甲药材及饮片形态特征丢失,难以鉴别.为建立高效稳定的鳖甲DNA鉴别方法,该研究将SDS法与柱纯化相结合,使用通用引物进行PCR扩增和测序,并根据鳖甲及其混伪品序列差异,寻找特异性SNP位点设计了鉴别引物,对PCR反应条件进行优化,并进行适用性及准确性考察.当退火温度为62℃,循环次数为35,使用设计的鳖甲特异性鉴别引物Biejia-272.F/R进行PCR扩增,鳖甲药材、饮片及醋鳖甲均扩增获得约300 bp的特异性鉴别条带,混伪品无条带.该方法可作为一种快速准确鉴别鳖甲正伪品的鉴定方法.
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清燥救肺汤治验实录
1 范文甫治疗秋燥医案宋老婆婆,素有痰饮气喘,新感秋后燥热,以致内热气紧加甚.大生地12g,炙甘草3g,麻仁12g,生石膏12g,杏仁9g,麦冬9g,枇杷叶9g,鳖甲9g,沙参9g,桑叶9g.二诊:身热见减,咳喘未止.燥热伤肺,当以甘润.
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小柴胡汤制剂对慢性乙型肝炎患者的临床试验研究
本研究对小柴胡汤制剂加鳖甲和郁金治疗慢性乙型肝炎及抗肝纤维化的疗效进行了临床试验研究.
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基于血浆药理学的鳖甲超微粉抗肝纤维化作用研究
目的 用血浆药理学方法,体外观察鳖甲超微粉含药血浆抗肝纤维化作用.方法 采用体外肝纤维化细胞模型,以大鼠含药血浆对HSC-T6细胞增殖的影响为指标,采用效应动力学方法,确定大鼠给药方案和采血时间,并优选体系中血浆添加量.制备鳖甲超微粉和普通粉含药血浆,MTT法检测含药血浆对HSC-T6细胞增殖的影响,ELISA法测定含药血浆对HSC-T6细胞胶原分泌的影响.结果 鳖甲超微粉和普通粉含药血浆对HSC-T6细胞增殖和Ⅰ型胶原合成均有显著抑制作用(P＜0.01),超微粉组的抑制作用强于普通粉组,且有显著性差异(P＜0.01).结论 鳖甲超微粉碎后可提高其抗肝纤维化疗效.
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鳖甲活性多肽的合成及对肝星状细胞增殖的抑制作用
探讨鳖甲活性多肽的固相合成及对肝星状细胞(HSC-T6)增殖的抑制作用.根据鳖甲活性多肽的序列结构,采用固相方法对多肽进行全合成,并用MALDI-TOF MS质谱对合成多肽进行分析鉴定；肝星状细胞(HSC-T6)培养至对数生长期后,加入不同浓度合成多肽作用肝星状细胞株HSC-T6,采用MTS法分析HSC-T6生长的抑制作用；使用Annexin V-FITC/PI法检测HSC凋亡率.结果显示通过固相合成可以得到与原序列结构一致的鳖甲合成多肽;鳖甲合成多肽浓度依赖性地抑制肝星状细胞增殖,并能显著提高肝星状细胞早期凋亡率.因此,可以成功地合成鳖甲活性多肽,且对肝星状细胞增殖有明显的抑制作用.
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熟地、鳖甲对大鼠成骨细胞增殖、碱性磷酸酶蛋白和核心结合因子α1 mRNA表达的影响
目的 观察熟地、鳖甲含药血清对大鼠成骨细胞增殖和功能的影响.方法 雄性SD大鼠随机分为3组后,分别灌服高浓度熟地、鳖甲煎剂( 3.25 g/kg)、低浓度熟地、鳖甲煎剂(1.625 g/kg)及等量容积的蒸馏水,连续灌胃3d,制得大鼠高、低剂量熟地、鳖甲含药血清及空白对照血清.原代培养并传至第3代经碱性磷酸酶鉴定取得的大鼠成骨细胞,消化计数铺板并分为3组,以上述血清处理72 h,MTT法检测成骨细胞的增殖率,ELISA法检测碱性磷酸酶(ALP)分泌量并以相应OD值进行纠正,并且运用实时荧光定量PCR检测各组成骨细胞核心结合因子α1(Cbfα1)mRNA表达情况.结果 低剂量含药血清组成骨细胞增殖率、ALP浓度及Cbfα1 mRNA表达量明显高于其他2组.结论 熟地、鳖甲可能是通过提高成骨细胞的增殖潜能而起骨保护作用的.
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复方鳖甲软肝片联合恩替卡韦对慢性乙型肝炎肝纤维化患者的临床分析
目的 探讨复方鳖甲软肝片联合恩替卡韦对慢性乙型肝炎肝纤维化患者的疗效.方法 方便选择2014年2月—2015年3月该院收治的慢性乙型肝炎肝纤维化患者64例.其中观察组32例采用复方鳖甲软肝片联合恩替卡韦治疗,对照组仅采用恩替卡韦治疗.比较两组患者治疗前后血清ALT、AST、透明质酸、粘连蛋白及Ⅲ型前胶原含量.结果 治疗后,观察组血清ALT[(42.4±14.6)U/L vs(55.8±17.7)U/L]、AST[(34.3±12.2)U/L vs(43.2±13.5)U/L]、透明质酸[(95.6±28.6)ng/mL vs(128.2±25.7)ng/mL]、粘连蛋白[(102.6±21.4)ng/mL vs(125.3±24.6)ng/mL]均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 复方鳖甲软肝片联合恩替卡韦可有效改善慢性乙型肝炎肝纤维化患者的肝功能,降低肝纤维化相关细胞因子水平.
