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黄芪甲甙治疗Balb/c小鼠慢性柯萨奇B3病毒性心肌炎的疗效
目的 观察黄芪甲甙对实验性小鼠柯萨奇B3病毒(CVB3)性心肌炎的疗效.方法 Balb/c小鼠80只随机分为模型组(30只)、干预组(30只)、对照组(20只).模型组和干预组小鼠1次/月腹腔接种CVB3,共3个月;对照组腹腔注射等容积不含病毒的培养液.对照组和模型组小鼠每日以饮用水喂养,干预组小鼠以加有羧甲基纤维素钠助溶的黄芪甲甙饮用水(质量浓度为300 mg/L)喂养,观察小鼠生存率.3个月后处死所有存活小鼠,HE染色进行心肌病理检查、苦味酸天狼星红胶原染色后以自动图像分析系统计算胶原容积积分(CVF),采用原位末端标记法检测其心肌细胞凋亡指数,半定量反转录聚合酶链反应进行心肌CVB3RNA和心肌组织凋亡检测.结果 模型组生存率为59.7%,干预组生存率为76.7%,二组比较有显著性差异(x2=4.26 P＜0.05);模型组与干预组病理积分分别为(3.86±0.47)、(1.72±0.56),二组比较有显著性差异(t=4.21 P＜0.01);模型组与干预组CVF分别为(17.4±1.2)%、(8.6±0.9)%,二组比较有显著性差异(x2=5.38 P＜0.05);模型组与干预组心肌细胞凋亡指数分别为(19.6±5.2)%、(4.3±2.5)%,二组比较有显著性差异(x2=35.16 P＜0.01).干预组心肌组织中CVB,RNA水平与模型组比较有非常显著的统计学意义[(0.69±0.38)vs(1.24±0.57),t=4.26 P＜0.01].结论 黄芪甲甙可能成为一种有效的治疗Balb/c小鼠慢性CVB3心肌炎的药物.
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黄芪甲甙对病毒性心肌炎小鼠神经生长因子表达的影响
目的探讨黄芪活性成分黄芪甲甙对病毒性心肌炎(VM)小鼠心肌中神经生长因子(NGF)表达的影响.方法Balb/c小鼠100只,随机分成6组.非感染小鼠腹腔无菌注射病毒培养液,分为正常对照组[A组,10只,以羧甲基纤维素钠(CMC)0.1 mL灌胃7 d]、高剂量对照组(B组,10只,9%黄芪甲甙液0.1 mL灌胃7 d);余80只小鼠以柯萨奇病毒(CVB3)腹腔无菌注射制作VM模型,VM小鼠随机分为心肌炎对照组和低、中、高剂量干预组,分别以CMC、1%、3%、9%黄芪甲甙液0.1 mL灌胃7 d(分别为C、D、E、F组,每组20只).14 d后处死小鼠并取其心脏,采用RT-PCR和免疫组织化学检测NGF mRNA及蛋白表达水平.结果F组小鼠较C组死亡率明显降低,B组无小鼠死亡;与C组比较,NGF mRNA、蛋白表达水平以及心肌病变积分在F组均显著下降,而低、中剂量黄芪甲甙对心肌炎小鼠NGF mRNA、蛋白表达及心肌病变积分无明显影响.结论黄芪甲甙可能通过抑制NGF表达,对Balb/c小鼠CVB3心肌炎具有良好的治疗作用.
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黄芪甲甙对病毒性心肌炎小鼠心肌组织蛋白酶B mRNA表达的影响
目的探讨黄芪活性成分黄芪甲甙对病毒性心肌炎(VM)小鼠心肌中组织蛋白酶B (cathepsin B,CB)mRNA表达的影响.方法 Balb/c小鼠100只随机分为6组.非感染小鼠腹腔无菌注射病毒培养液,分为正常对照组(A组10只,以羧甲基纤维素钠0.1 mL灌胃7 d)、9%黄芪甲甙对照组(B组10只,9%黄芪甲甙0.1 mL灌胃7 d);余80只小鼠以柯萨奇病毒(CVB3)腹腔无菌注射制作VM模型,VM小鼠随机分为VM对照组和1%、3%、9%黄芪甲甙干预VM组,分别以生理盐水、1%、3%、9%黄芪甲甙0.1 mL灌胃7 d(分别为C、D、E、F组,每组20只).14 d后处死全部小鼠并取其心脏.采用RT-PCR半定量检测心肌CB mRNA表达水平.结果 F组小鼠较C组死亡率明显降低[10%(2/20)vs 45%(9/20),χ2=6.14 P<0.05],B组无小鼠死亡;与C组比较CB mRNA表达水平及心肌病变积分在F组显著下降,而1%、3%黄芪甲甙对VM小鼠CB mRNA表达及心肌病变积分无明显影响.结论黄芪甲甙可能通过抑制CB表达,对Balb/c小鼠CVB3心肌炎具有良好的治疗作用.
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黄芪甲甙对病毒性心肌炎小鼠心肌柯萨奇病毒受体基因表达的影响
目的探讨黄芪活性成分黄芪甲甙对病毒性心肌炎(VM)小鼠心肌柯萨奇-腺病毒受体(CAR)基因表达影响.方法Balb/c小鼠100只,分为6组.非感染小鼠腹腔无菌注射病毒培养液,分为正常对照组(A组,10只,以羧甲基纤维素钠0.1 mL灌胃7 d)、9%黄芪甲甙对照组(B组,10只,9%黄芪甲甙0.1 mL灌胃7 d);余80只小鼠以柯萨奇病毒(CVB3)腹腔无菌注射制作病毒性心肌炎模型,VM小鼠随机分为心肌炎对照组和1%、3%、9%黄芪甲甙干预心肌炎组,分别以生理盐水、1%、3%、9%黄芪甲甙0.1 mL灌胃7 d(分别为C、D、E、F组,每组20只).14d后处死一小部分鼠并取其心脏.采用RT-PCR检测心肌CARmRNA表达水平.结果F组小鼠死亡率较C组明显降低(10%与45%比较),(χ2=6.14 P＜0.05),B组无小鼠死亡;与C组相比较,CARmRNA表达水平以心肌病变积分在F组显著下降,而1%、3%黄芪甲甙对心肌炎小鼠CARmRNA表达及心肌病变积分无明显影响.结论9%黄芪甲甙可抑制CAR表达,提高心肌炎小鼠生存率,减轻心肌损害,安全有效,对VM有良好的治疗作用.
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胃安舒颗粒质量标准的研究
目的:建立胃安舒颗粒的质量标准.方法:采用TLC法对胃安舒颗粒中的黄芪甲甙进行含量测定.结果:胃安舒颗粒中黄芪甲甙含量在0.0534 mg/g,平均加样回收率为97.04%.结论:TLC法简单,重复性好,可用作控制胃安舒颗粒制剂质量.
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胃捷康颗粒质量标准的研究
目的:建立胃捷康颗粒的质量标准.方法:采用TLC法对胃捷康冲剂中的黄芪甲甙进行含量测定.结果:胃捷康冲剂中黄芪甲甙含量在0.0534 mg/g,平均加样回收率为97.04%.结论:该方法较简单,重复性好,可作该制剂质量控制标准.
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黄芪甲甙对急性心肌梗死大鼠早期心功能、炎性相关因子及内皮型一氧化氮合酶信号通路的影响
目的 观察黄芪甲甙对急性心肌梗死模型大鼠心脏的保护作用,并探讨其可能的分子机制.方法 将45只Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组和黄芪甲甙组,每组15只.模型组和黄芪甲甙组大鼠通过永久性结扎大鼠左冠状动脉前降支制作急性心肌梗死模型,假手术组大鼠只穿线不接扎;造模24 h后,黄芪甲甙组大鼠腹腔注射黄芪甲甙20 mg·kg-1·d-1,假手术组、模型组大鼠腹腔注射相同体积的羧甲基纤维素钠,每日1次,连续2周.分别于造模前、造模后即刻及给药1、3、7、14d描记肢体Ⅱ导联心电图,观察ST段变化.给药2周后,检测各组大鼠左心室舒张末期内径(LVDD)、左心室收缩末期内径(LVDS)、左心室舒张末期容积(LVEDV)、左心室收缩末期容积(LVESV)、左心室短轴的缩短率(LVFS)及左心室射血分数(LVEF);应用酶联免疫吸附试验法检测各组大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)及核转录因子-κB(NF-κB)水平,并检测血浆一氧化氮(NO)水平;实时荧光定量聚合酶链反应检测各组大鼠心肌组织中Toll样受体(TLR)2、TLR4、核苷酸结合寡聚化结构域(NOD)1、NOD2及内皮型一氧化氮合酶(eNOS) mRNA的表达.结果 造模过程中,假手术组、模型组、黄芪甲甙组大鼠分别死亡0、4、2只.模型组和黄芪甲甙组大鼠造模后即刻及给药后1、3、7、14 d ST段值均显著高于假手术组(P＜0.01).黄芪甲甙组大鼠给药后3、7、14dST段值均显著低于模型组(P＜0.05).与假手术组比较,模型组和黄芪甲甙组大鼠LVDD、LVDS显著扩大(P＜0.01),LVEDV、LVESV显著增加(P＜0.01),LVFS、LVEF显著下降(P＜0.01);血清IL-1β、1L-6、TNF-α水平和心肌组织中TLR2、TLR4、NOD1、NOD2 mRNA水平显著增加(P＜0.01);血浆NO水平显著降低(P＜0.05).模型组大鼠血清NF-κB水平高于假手术组(P＜0.01),心肌组织中eNOS mRNA表达低于假手术组(P＜0.05).黄芪甲甙组与假手术组大鼠血清NF-κB水平和心肌组织中eNOS mRNA表达比较差异无统计学意义(P＜0.05).与模型组比较,黄芪甲甙组大鼠LVDD、LVDS显著缩小(P＜0.05),LVEDV、LVESV显著下降(P＜0.05),LVFS、LVEF显著增加(P＜0.05);血清IL-1β、IL-6、TNF-α、NF-κB水平和心肌组织中TLR2、TLR4、NOD1、NOD2 mRNA表达显著降低(P＜0.05);血浆NO水平和心肌组织中eNOS mRNA表达显著升高(P＜0.05).结论 黄芪甲甙对急性心肌梗死大鼠心脏具有保护作用,其机制可能与激活eNOS信号系统和抑制TLR信号途径有关.
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黄芪甲甙定量方法概况
黄芪甲甙是中药黄芪中的特征性鉴别成分。《中国药典》1995版黄芪项下，以黄芪甲甙作为标准品的含量测定，许多中成药也以黄芪甲甙为标准品作为该品种的定量依据。现将近年来有关黄芪甲甙定量方法概述如下。
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肾炎冲剂中黄芪甲甙含量测定
本实验采用薄层扫描法测定了肾炎冲剂中黄芪甲甙的含量.方法简单,重现性良好.平均变异系数 CV=2.57%,平均回收率 =97.1%.
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黄芪水煎工艺优选试验
将黄芪等药物进行水煎提取正交试验,分别以水提取物得量和黄芪甲甙收率作考察指标,数据作方差分析.结果表明,各因素间无显著性差异.
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正交试验优选舒冠胶囊提取工艺
采用薄层扫描、高效液相色谱法分析,应用正交试验优选舒冠胶囊提取工艺.结果发现,佳提取工艺为药材加6倍量70%乙醇,回流提取3次,3 h/次.
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黄芪及其制剂中黄芪甲甙测定方法研究进展
黄芪Astragalus membranaceus (Fish.) Bge. 为常用中药.具有补气固表、利尿排脓、托毒生肌之功效.现代研究表明,黄芪具有增强免疫、促进代谢、降压及利尿作用.
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培元冲剂中黄芪甲甙的鉴别
培元冲剂为我院自制品种,该冲剂由黄芪、天冬、党参等9味药组成.其功能培元填精、补脾益肾.主要用于体弱贫血、久喘不愈等病,临床总有效率达到85%.为我院自制产品中的骨干品种之一.由于培元冲剂成分复杂,笔者综合6个月来的制剂工艺和鉴别试验,逐步摸索出用于鉴别其君药黄芪的有效成分黄芪甲甙的方法.其鉴别方法简便可靠,且重现性好.现介绍如下:
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黄芪甲甙联合甜菜碱凝胶在结肠造口皮肤黏膜分离护理中的应用
目的 观察黄芪甲甙联合甜菜碱凝胶伤口敷料在结肠造口皮肤黏膜分离护理中的应用效果.方法 选择2010年3月至2013年2月38例肠造口术后发生造口皮肤黏膜分离的患者为对照组,行常规护理;2013年3月至2015年2月29例患者为黄芪甲甙组,行常规护理联合黄芪甲甙护理;2015年3月至2016年12月32例患者为联合组,行甜菜碱凝胶敷料联合黄芪甲甙护理.评价三组造口皮肤黏膜分离愈合时间、疼痛改善情况和回缩狭窄发生情况.结果 治疗后1个月和3个月,联合组和黄芪甲甙组疼痛评分显著低于对照组,且联合组评分显著低于黄芪甲甙组(均P＜0.05);黄芪甲甙组和联合组袁浅分离和深层分离的平均愈合时间显著短于对照组,且联合组深层分离的平均愈合时间显著短于黄芪甲甙组(均P＜0.05).结论 黄芪甲甙联合甜菜碱凝胶伤口敷料应用于结肠造口皮肤黏膜分离护理能有效促进伤口肉芽组织生长,有利于伤口早日愈合及减轻疼痛.
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黄芪甲甙对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用
黄芪甲甙是黄芪单体之一,除了有抗炎,降压,改善心肌缺血等作用外,还具有抗脂质过氧化及清除自由基作用,我们观察了黄芪甲甙对大鼠肾缺血再灌注损伤的影响.
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十全大补酒薄层鉴别及阿魏酸的含量测定
采用薄层层析法,对十全大补酒中阿魏酸、芍药甙、黄芪甲甙进行了定性鉴别,并对阿魏酸进行了薄层扫描含量测定.
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高效液相色谱-蒸发光散射检测器法测定虚汗停口服液中黄芪甲甙的含量
虚汗停口服液由黄芪、浮小麦、大枣、糯稻根、牡蛎(煅)等中药组成,具有益气养阴、固表敛汗之功.用于气阴不足之自汗、盗汗等疾病.方中黄芪为君药,为了有效控制该制剂的质量,本文采用高效液相色谱-蒸发光散射检测器法测定虚汗停口服液中黄芪甲甙的含量,本法简便易行,准确可靠,可作为本品的质量控制方法,现笔者介绍如下.
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参苓祛斑涂膜质量标准研究
目的:建立参苓祛斑涂膜的质量标准.方法:以薄层扫描法进行定性鉴别和定量测定.结果:回归方程Y=490.39X-94.196,R=0.999,表明黄芪甲甙浓度在1.10～8.80μg范围内,加样回收率为99.0%,浓度与积分值呈良好的线性关系,并确定黄芪甲甙含量不低于0.16%/10g.结论:该方法简便、准确、可靠,含量限度可观,能够保证参苓祛斑涂膜的质量.
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小鼠柯萨奇B3病毒性心肌炎心脏炎症细胞因子基因和蛋白表达及黄芪甲甙干预研究
目的 探讨黄芪甲甙对小鼠柯萨奇B3病毒性心肌炎心脏炎症细胞因子肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β、白细胞介素6和白细胞介素10 mRNA表达和蛋白质产生的影响.方法 Balb/c小鼠50只随机分为5组,空白对照组,腹腔无菌注射不含病毒的Eagle's培养基0.1 mL,在腹腔注射病毒培养基30 min后,以生理盐水0.1 mL灌胃,共7 d;病毒性心肌炎对照组,小鼠每只腹腔注射0.1 mL内含1×105TCID50柯萨奇B3病毒的Eagle's培养基,在腹腔注射含病毒的Earle's培养基30 min后,以生理盐水0.1 mL灌胃,共7 d;黄芪甲甙低、中、高剂量干预组,在腹腔注射病毒30 min后,用黄芪甲甙剂量分别为0.07、0.2和0.6 ms/(kg·d)0.1 mL灌胃,共7 d.14 d后处死全部小鼠并取其心脏.心脏组织一半用于逆转录聚合酶链反应法测定心脏细胞因子mRNA表达.另一半用Western blot测定细胞因子蛋白质生成量.结果 空白对照组上述细胞因子均无明显表达,心肌炎对照组肿瘤坏死因子α,白细胞介素1β,白细胞介素6和白细胞介素10 mRNA和蛋白产生均显著高于空白对照组;同心肌炎对照组比较,高剂量黄芪甲甙组的肿瘤坏死因子α,白细胞介素1β.白细胞介素6 mRNA和蛋白生成均显著下降,而白细胞介素10mRNA和蛋白明显升高.结论 黄芪甲甙明显降低小鼠柯萨奇B3病毒性心肌炎心脏的致炎症细胞因子肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β和白细胞介素6,而升高炎症保护因子白细胞介素10.
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黄芪甲甙对小鼠柯萨奇B3病毒性心肌炎的抗氧化作用
目的 观察黄芪甲甙对小鼠柯萨奇B3病毒性心肌炎的抗氧化作用.方法 Balb/c小鼠50只随机分5组(每组10只),空白对照组腹腔无菌注射不含病毒的Eagle's培养基0.1 mL,在腹腔注射病毒培养基30 min后,以生理盐水0.1 mL灌胃,共7d;病毒性心肌炎对照组小鼠每只腹腔注射0.1 mL内含1×102 TCID50柯萨奇B3病毒的Eagle's培养基,在腹腔注射含病毒的Eagle's培养基30 min后,以生理盐水0.1 mL灌胃,共7 d;黄芪甲甙低、中、高剂量干预组在腹腔注射病毒30 min后,用黄芪甲甙剂量分别为0.07、0.2、0.6 g/(kg·d)0.1 mL灌胃,共7 d.观察小鼠生存数;心肌病变积分;心肌谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶、超氧化物歧化酶活力及逆转录聚合酶链反应检测铜锌超氧化物歧化酶-mRNA水平表达.结果 (1)与空白对照组比较,病毒性心肌炎对照组小鼠的生存数明显下降,心肌病变积分明显升高(3.23±0.83,P＜0.01);与病毒性心肌炎对照组比较,黄芪甲甙高剂量干预组可明显提高小鼠的生存数(P＜0.01),心肌病变积分明显下降(1.86±0.59 比 3.23±0.83,P＜0.01);(2)与病毒性心肌炎对照组比较,黄芪甲甙高剂量干预组心肌组织谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶、超氧化物歧化酶活力呈增高趋势,心肌组织谷胱甘肽过氧化物酶(39.73±8.02比9.99±2.71, P＜0.05)、过氧化氢酶(6.35±2.33比1.36±0.87,P＜0.05)、超氧化物歧化酶(65.71±4.93比40.15±6.03,P＜0.01)活力明显增强, 铜-锌超氧化物歧化酶-mRNA水平表达明显增高(0.43±0.11比0.32±0.01, P＜0.01).但黄芪甲甙低、中剂量干预组,虽然也在一定程度使心肌组织谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶、超氧化物歧化酶活力及逆转录聚合酶链反应检测铜-锌超氧化物歧化酶-mRNA表达水平增加,有一定的量效关系,但与病毒性心肌炎对照组比较无统计学意义(P＞0.05).结论 黄芪甲甙通过增加心肌抗氧化酶活力,对小鼠柯萨奇B3病毒性心肌炎具有明显的保护作用.
