328 金丝桃素对脂多糖激活巨噬细胞产生白介素-12的抑制作用

优化酶提取贯叶连翘药材活性成分工艺

目的:探讨贯叶连翘中金丝桃素的酶提取法的优酶及其佳工艺.方法:以高效液相色谱法测定金丝桃素含量为指标,在纤维素酶、果胶酶、木聚糖酶、β-葡聚糖酶、复合酶SPE-007A中筛选出优2种酶,继考察这2种酶复合后的浸提倍数、加酶量、pH、温度、酶解时间等因素对提取工艺的影响,并用正交试验优选提取条件,从而得到佳工艺.结果:优酶为纤维素酶与果胶酶复合酶,pH 4.8、酶用量(纤维素酶/果胶酶)2.0%/2.0%、温度50℃、酶解时间6 h、酶解液浸提倍数15倍.结论:该工艺高效、稳定,可用于今后对贯叶连翘的研究.

贯叶连翘提取物缓释片的处方工艺优选

目的:优选贯叶连翘提取物凝胶骨架缓释片的处方并考察其体外释药机制.方法:以贯叶连翘提取物中金丝桃素在不同时间点的累积释药率为综合评价指标,采用正交试验考察乳糖和MCC质量比、骨架材料及HPMC用量对处方工艺的影响.利用体外释放度试验考察缓释片的释药机制.结果:优选的处方工艺为HPMC K15M用量30％,MCC用量6.4％,乳糖用量12.6％,硬脂酸镁用量1％.贯叶连翘提取物凝胶骨架缓释片在2h释药率15％～30％,6h释药率40％ ～ 75％,12h释药率＞85％,释药行为符合Ritger-Peppas方程,释药过程为药物扩散和骨架溶蚀的协同作用.结论:优选的处方工艺合理、简单.制备的缓释片体外释药缓慢、平稳,药物释放机制符合释放动力学模型.

金丝桃素的酶提取工艺优选

目的:探讨贯叶金丝桃中金丝桃素的佳酶提取工艺.方法:以高效液相色谱法测定金丝桃素含量为指标,从纤维素酶、果胶酶、木聚糖酶、β-葡聚糖酶及复合酶SPE-007A中筛选出优酶,采用单因素试验和正交试验优选提取工艺条件.结果:优酶为纤维素酶,优选酶解工艺为酶用量2.0％,pH4.8,温度50℃,酶解时间5h,浸提倍数8倍.结论:该优选工艺高教、稳定.

响应面法优化贯叶连翘中金丝桃素超声提取工艺

目的:以贯叶连翘为原料,应用响应面法探求超声提取金丝桃素的优工艺.方法:在对影响金丝桃素提取率的单因素系统考察的基础上,采用部分析因设计分析筛选以上因素.并应用响应面法对其显著因索进行研究和优化.结果:建立了超声提取贯叶连翘中金丝桃素的工艺数学模型.超声提取金丝桃素的佳工艺条件为超声提取时间36.15 min,丙酮/乙醇混合提取溶剂中丙酮体积分数为68.14%,液料比为11.87 mL·g-1,此时金丝桃素提取率理论值可达到1.454%.经验证,提取率为1.44%,与理论值相符.主效应关系为超声提取时间＞丙酮体积分数＞液料比.结论:通过以上试验得到的提取工艺条件可靠,金丝桃素提取率远高于常规提取方法,可为金丝桃素的工业化放大生产提供了一定的理论依据.

浅析贯叶连翘浸膏的工艺研究

开辟新的药物资源,研究植物药新的化学有效成份,离不开实验的基础工作,作为一个医药工作者,为开展丰富的药物植物资源,作一些基础的研究工作是应该的.贯叶连翘浸膏的工艺研究,对进一步提取该中药的有效成份有重要的意义.目的:研究贯叶连翘有效成份的提取工艺.方法:采用TLC法进行定性比较.结果:确定自制贯叶连翘浸膏与贯叶连翘浸膏对照品及金丝桃素对照品斑点相一致.结论:此研究方法实用可靠,值得推广.

贯叶连翘浸膏的工艺研究

开辟新的药物资源,研究植物药新的化学有效成份,离不开实验的基础工作,我作为一个在凉山彝族自治州工作了32年医药工作者,愿意为开展丰富的药物植物资源,作一些基础的实验研究工作,贯叶连翘浸膏的工艺研究,对进一步提取该中药有效成份,具有重要的意义.目的:研究贯叶连翘有效成份的提取工艺.方法:采用TLC法进行定性比较.结果:确定自制贯叶连翘浸膏与贯叶连翘浸膏对照品、金丝桃素对照品斑点相一致.结论:此研究方法实用可靠,重复性好,值得推广应用.

贯叶金丝桃愈伤组织的诱导及其有效成分的定性

目的:诱导出贯叶金丝桃的愈伤组织,并确定其中含有金丝桃素.方法:在不同条件下采用组织培养技术,进行贯叶金丝桃的愈伤组织诱导研究,用HPLC方法确定其中含有的金丝桃素.结果和结论:佳诱导条件是MS基本培养基加入生长调节物质2,4-D(4μg@L-1)和6-BA(0.2μg@L-1).叶腋等分生组织较多的部位易于诱导愈伤组织.诱导出的愈伤组织,经HPLC方法确定其含金丝桃素.

高效液相色谱法测定贯叶金丝桃药材及无菌苗中金丝桃素的含量

目的:建立贯叶金丝桃药材中金丝桃素含量测定方法,并对不同产地贯叶金丝桃药材和无菌苗中金丝桃素的含量进行测定.方法:样品用甲醇-吡啶(9∶1)超声提取,液相条件为HypersilyODS2柱(4. 6 mm×150 mm,5 μm);流动相甲醇-1.56%磷酸二氢钠缓冲液(用磷酸调pH值为2.1) -醋酸乙酯(4∶1.9∶1);流速1 mL*min-1;柱温35 ℃;检测波长590 nm.结果:金丝桃素与杂质分离效果较好,在0.052 4～0.262 0 μg内 ,进样量与峰面积呈线性(r=0.999 8),加样回收率为97.50%.结论:贯叶金丝药材中金丝桃素含量与药材的遗传因素、环境因素、生长期以及干燥方式有关,同时该方法可作为贯叶金丝桃药材的质量控制方法.

金丝桃素对急性弓形虫感染小鼠脾脏CD4+和CD8+T淋巴细胞亚群的影响

目的 观察金丝桃素对急性弓形虫感染小鼠脾脏CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群的影响.方法 将40只昆明种雌性小鼠随机分为4组:空白对照组(A组)、弓形虫感染组(B组)、金丝桃素对照组(C组)和金丝桃素治疗组(D组),每组各10只小鼠.除A组和C组外,B、D两组每组小鼠腹腔接种RH株弓形虫速殖子l×103个,建立急性弓形虫感染动物模型.C、D组于感染12h后腹腔注射给药,A、B组同时进行生理盐水腹腔注射,连续7d后,用流式细胞仪检测小鼠脾脏中CD4、CD8+T淋巴细胞水平.结果 C组和D组CD4 T细胞百分率分别为20.57±1.76和23.33±1.82,CD4+与CD8 T细胞比值分别为2.04±0.40和2.29±0.65,A、B组CD4T百分率及CD4 /CD8+值分别为12.13±2.35、15.96±2.71和1.35±0.30、0.77±0.92,差异有统计学意义(P＜0.01);A、B、C、D组CD8T细胞百分率分别为8.95±0.40、20.74±1.50、10.42±2.43和10.86±3.18,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 金丝桃素可显著改善急性弓形虫感染小鼠的细胞免疫功能,增强小鼠抗弓形虫感染的能力.

金丝桃素光动力效应对大鼠C6胶质瘤抑制作用及其对血管细胞黏附因子-1和基质金属蛋白酶-9的影响

目的 探讨金丝桃素被光激活后对C6胶质瘤的抑制作用及其对血管细胞黏附因子-1(VCAM-1)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的影响.方法 36只C6脑内胶质瘤模型Wistar大鼠随机分为6组:对照组,单纯光照组,金丝桃素低、高剂量非光照组,金丝桃素低、高剂量光照组.实验第2周和3周MRI观察肿瘤的生长情况.第3周切取肿瘤,称重计算抑瘤率.SP法检测瘤组织中VCAM-1和MMP-9.结果 (1)MRI检测显示,金丝桃素光照组肿瘤体积比对照组明显减小(P<0.05).(2)高剂量光照组抑瘤率为75.6%;低剂量光照组抑瘤率为51.4%.单纯光照组、金丝桃素非光照组对肿瘤无抑制作用.(3)金丝桃素光照组中VCAM-1和MMP-9明显低于对照组(P<0.05).VCAM-1与MMP-9呈正相关(r=0.82).结论 光激活的金丝桃素可能通过抑制VCAM-1和MMP-9,降低肿瘤突破基质屏障的能力,抑制肿瘤新生血管形成,而制约胶质瘤生长和侵袭.

光激活金丝桃素对大鼠C6胶质瘤抑制作用及其对bFGF和bFGF-R及MVD的影响

目的:研究金丝桃素被光激活后对C6胶质瘤的抑制作用及其对bFGF、bFGF-R和微血管密度(microvessel density,MVD)的影响.方法:将接种C6胶质瘤细胞后的40只Wistar大鼠随机分为5组,空白对照组、高和低剂量金丝桃素作用组、高和低剂量金丝桃素+光照组,16 d后切取肿瘤组织,称质量计算抑瘤率,标本用SP法免疫组化染色,检测瘤组织中bFGF、bFGF-R和MVD.结果:1)光照下,当金丝桃素为0.8μg/mL时,抑瘤率为67.2%,金丝桃素为2.0μg/mL时抑瘤率为82.4%,非光照金丝桃素组对肿瘤无抑制作用.2)bFGF在各组大鼠C6胶质瘤组织中均有表达,表达值较高,各组间差异无统计学意义.空白对照组中bFGF-R表达较高,且微血管计数多.金丝桃素+光照组中bFGF-R蛋白表达和MVD明显低于非光照组及对照组,P=0.019,P=0.007,呈剂量依赖关系.bFGF-R与肿瘤MVD呈正相关,rbFGF-R=0.85.结论:光激活金丝桃素对bFGF-R有抑制作用,对bFGF表达没有影响.光激活的金丝桃素能抑制大鼠C6胶质瘤生长的机制,可能是抑制肿瘤组织中bFGF-R后,阻止了bFGF发挥效应,抑制了肿瘤间质血管生成,而抑制肿瘤的生长.

金丝桃素光照对喉癌细胞Hep-2的影响

目的探讨金丝桃素对喉癌细胞Hep-2的影响.方法体外培养的喉癌细胞Hep-2分别加入终质量浓度为0.5、1.0、2.0、3.0、5.0 μg/ml的金丝桃素,加药后1 h给予照射能量为7.5 J/cm2的光照10 min,另取喉癌细胞Hep-2分别加入终质量浓度为5.0、10.0、20.0、25.0 μg/ml的金丝桃素,不给予光照.各实验组均设空白对照组.继续培养48 h后,应用荧光显微镜、四甲基偶氮唑盐[3-(4,5-Dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl -2H tetrazolium bromide,MTT]法和流式细胞仪检测观察金丝桃素在光照和非光照条件下对喉癌细胞Hep-2的影响.结果光镜下可见对照组喉癌细胞生长密集,细胞呈梭型或多角型,细胞彼此之间相接触.光照后小剂量金丝桃素组可见细胞数量明显减少,随着金丝桃素剂量的增加,细胞数量明显减少,在高剂量组可见细胞坏死.MTT结果显示光活化金丝桃素呈剂量依赖性抑制喉癌细胞的生长.流式细胞仪分析表明金丝桃素经光照后,可将喉癌细胞阻滞在G0-G1期,并诱导喉癌细胞凋亡;吖啶橙染色可见细胞胞膜出芽、染色质凝集、核片段化及凋亡小体等典型的细胞凋亡特征.金丝桃素单独应用,对喉癌细胞的抑制作用相对较弱.结论金丝桃素经光照后,可有效抑制体外培养的喉癌细胞的增殖,并可诱导喉癌细胞凋亡.

金丝桃素在肿瘤治疗和诊断中的应用

金丝桃素是从金丝桃属植物中分离得到的一种天然光敏剂.金丝桃素经光激活产生过氧化物可以诱导癌细胞凋亡并抑制其生长,同时其对肿瘤组织具有特异的亲和力(可以优先积聚在肿瘤组织),这种生理活性在光学诊断中已得到广泛应用.本文对金丝桃素基于光学性质的抗肿瘤作用及在光动力学诊断中的应用进行了概述,为充分利用金丝桃素资源,进行金丝桃素衍生物的研究和开发提供依据.

金丝桃素在非人灵长类动物血浆中的药代动力学及脑脊液穿透力

β-环糊精及其衍生物对金丝桃素增溶及荧光增强作用

目的 研究β-环糊精(β-CD)及其衍生物对金丝桃素的增溶作用及荧光增强作用.方法 通过测定金丝桃素在不同浓度CD衍生物中的溶解度,绘制相溶解度曲线及荧光谱图.结果 随着CD浓度的增加金丝桃素的溶解度也增加,荧光强度也随着增强,金丝桃素与交联环糊精包结比为1∶2.结论 β-CD及其衍生物对金丝桃素均有增溶作用,其中交联环糊精的增溶效果为显著,且对金丝桃素具有较强的荧光增强作用.

六种金丝桃属植物叶中分泌结构的研究

目的寻找金丝桃属中,草本植物含金丝桃素而木本不含的形态学及组织化学依据,为该属植物资源的开发利用提供依据.方法对金丝桃属中6种植物叶片进行解剖学研究:观察透明材料,组织化学实验和观察石蜡切片.研究分泌结构在各种植物叶片中的分布和结构特征.结果存在分泌细胞团和分泌囊(道)二类形态结构特点不同的分泌结构,草本植物中两者都有,而木本植物中只有分泌囊(道).金丝桃素储存于分泌细胞团内.结论金丝桃属中,只有草本植物含金丝桃素.

HPLC法测定滇西产金丝桃属植物中金丝桃素的含量

目的测定生长于云南西部的7种金丝桃属植物中金丝桃素(hypericin)的含量,并考察其分布.方法采用HPLC法,使用ODS色谱柱,流动相B:甲醇-乙腈-乙酸(50∶50∶0.5),A:乙腈(B∶A=6∶4).检测波长590nm.结果回归方程:C＝0.521 1S-0.049 88,r=0.999 98,加样回收率为102.7%,7种滇西产金丝桃属植物中有3种含金丝桃素.结论本实验建立的方法适用于分析金丝桃属植物中金丝桃素含量,具有良好的重现性及精密度.

金丝桃素的资源提取工艺药理作用研究进展

金丝桃素主要分布在贯叶连翘及金丝桃属其他植物中,其含量随产地不同有很大差异,在陕西和甘肃的贯叶连翘中金丝桃素含量高,金丝桃属其他植物中元宝草花中金丝桃素含量高,丛芽中含量低；提取纯化工艺有醇提酸沉结晶法；大孔树脂吸附法；醇提萃取层析法；CTAB反胶束萃取法；超声提取大孔树脂吸附法；超临界CO2萃取法等；金丝桃素具有多种多样的药理作用,如抗病毒、抑菌、抗抑郁、促进记忆、抗肿瘤、抗阿尔茨海默病、抗禽流感等,尤其是其抗禽流感作用使其成为目前的一大研究热门.本文就金丝桃素的主要原料来源,提取工艺及药理作用作一全面综述,为进一步研究提供依据.

金丝桃素与乙基金丝桃素的全合成及对人免疫缺陷病毒逆转录酶的抑制活性

近年发现由贯叶金丝桃(Hypericum perzoratum),三棱三叶金丝桃(H.triquetrif-olium Turra)等金丝桃属植物的鲜花中提取出来的金丝桃素(Hypericin)有抗艾滋病人免疫缺陷病毒(Human immunodificioncy virus, HIV)的作用.它在细胞培养中可抑制逆转录病毒的复制[1,2].