首页 > 文献资料
-
白桦脂醇对人皮肤成纤维细胞胶原蛋白及相关蛋白酶基因的调控机制研究
目的：研究白桦脂醇对人皮肤成纤维细胞(ESF-1)相关抗衰老基因 mRNA 的调控作用，探讨白桦脂醇对皮肤皱纹的修复机制。方法将细胞分为空白对照组，雌二醇组，白桦脂醇高、中、低剂量组。采用MTT法测定各组细胞活力，RT-PCR法测定各组细胞中Ⅰ型及Ⅲ型胶原蛋白(collagen, Col)、基质金属蛋白酶抑制剂(tissue inhibitors of matrix metalloproteinase, TIMP)1和2、基质金属蛋白酶1(matrix metalloproteinase 1, MMP-1)mRNA的表达水平。结果与空白对照组比较，雌二醇组与白桦脂醇中剂量组细胞增殖率[(0.455±0.037)、(0.445±0.040)比(0.385±0.601)]增高(P＜0.05)；ColⅠmRNA[(0.960±0.012)、(0.929±0.015)比(0.842±0.014)]，Col Ⅲ mRNA[(0.892±0.009)、(0.824±0.022)比(0.768±0.025)]、TIMP-1 mRNA[(0.938±0.026)、(0.878±0.035)比(0.796±0.022)]、TIMP-2 mRNA[(0.557±0.025)、(0.506±0.036)比(0.436±0.063)]表达水平均升高(P＜0.01)。结论白桦脂醇通过促进细胞增殖，提高Col合成及相关蛋白酶的表达等途径发挥对皱纹的修复作用。
-
异补骨脂素对紫外线诱导人真皮成纤维细胞损伤的保护作用及机制研究
目的 研究异补骨脂素对人真皮成纤维细胞(human dermal fibroblasts, HDF)增殖活性及抗老化相关蛋白表达的影响,并探讨其作用机制.方法 将细胞按随机数字表法分为空白组、模型组、雌二醇组、异补骨脂素组、雌激素受体拮抗剂+雌二醇组、雌激素受体拮抗剂+异补骨脂素组、P38通路阻断剂组.分别给予不同药物进行干预24 h.除空白组外,其余各组细胞给予紫外线照射,照射剂量为150 mJ/cm2.采用MTT法检测细胞增殖率,采用Western blot法检测细胞中胶原蛋白Ⅰ(collagenⅠ, COLⅠ)、MMP-1、雌激素受体β(estrogen receptor β, ERβ)、P38、p-P38蛋白表达量,实时荧光定量PCR法检测MMP-1 mRNA表达.结果 与模型组比较,异补骨脂素10、1、0.1、0.01 μmol/L组HDF细胞增殖率升高(P<0.01);异补骨脂素10 μmol/L组HDF细胞COLⅠ[(0.326±0.006)比(0.176±0.007)]、ERβ[(0.281± 0.011)比(0.143 ± 0.006)]蛋白表达升高(P<0.01),MMP-1[(0.256 ± 0.006)比(0.395 ± 0.006)]和p-P38[(0.224±0.003)比(0.318±0.005)]蛋白表达降低(P<0.01);与异补骨脂素10 μmol/L组比较,雌激素受体拮抗剂+异补骨脂素组 ERβ[(0.120 ± 0.007)比(0.281 ± 0.011)]蛋白表达下降、MMP-1 mRNA[(1.377±0.012)比(1.024±0.010)]表达升高(P<0.01).结论 异补骨脂素可能通过ER-P38 MAPK信号通路使MMP-1降解,进而促进胶原合成,达到预防和治疗光老化的目的.
-
松脂醇二葡萄糖苷对人皮肤成纤维细胞胶原蛋白分泌机制的研究
目的：观察松脂醇二葡萄糖苷(pinoresinol diglucoside, PDG)对人皮肤成纤维细胞ESF-1细胞胶原蛋白分泌的基因调控作用，探讨PDG对烧伤皮肤的修复机制。方法体外培养细胞按随机数字表法分为空白组，雌二醇组，PDG高、中、低剂量组。PDG高、中、低剂量组分别加入100、10、1μmol/L的PDG溶液，雌二醇组加入10-3μmol/L的雌二醇。采用MTT法检测细胞增殖活性。采用RT-PCR技术测定细胞中Ⅰ型胶原蛋白(collagen I, Col I)、Ⅲ型胶原蛋白(ColⅢ)、组织金属蛋白酶抑制剂(tissue inhibitors of matrix metalloproteinase, TIMP)-1、TIMP-2、MMP-1mRNA表达水平。结果与空白组比较，雌二醇组、PDG 中剂量组ESF-1细胞增殖率[(0.559±0.027)、(0.552±0.034)比(0.489±0.027)]升高(P＜0.05)；雌二醇组与PDG中、低剂量组细胞ColⅠ[(0.958±0.021)、(0.929±0.031)、(0.916±0.015)比(0.844±0.022)]、Col Ⅲ[(0.783±0.038)、(0.918±0.021)、(0.855±0.017)比(0.678±0.024)]、TIMP-1[(0.939±0.025)、(0.889±0.036)、(0.853±0.015)比(0.780±0.023)]、TIMP-2[(0.507±0.024)、(0.655±0.037)、(0.572±0.025)比(0.405±0.062)]mRNA 表达水平升高(P＜0.05或 P＜0.01)， MMP-1[(0.343±0.038)、(0.407±0.046)、(0.435±0.037)比(0.519±0.041)]mRNA表达水平下降(P＜0.05或P＜0.01)。结论 PDG可提高ESF-1细胞的增殖活性，促进相关胶原蛋白和TIMP的表达，抑制MMP的表达，减少胶原的降解，从而发挥修复烧伤皮肤的作用。
-
金属蛋白酶在骨关节炎软骨内环境中的表达与调控
关节软骨降解是骨关节炎(OA)的一个重要特征,而金属蛋白酶(MMPs)则是参与OA软骨细胞外基质降解的主要酶系,近年来随着对MMPs激活、活性调节以及相关信号转导通路与转录因子领域的深入研究,其在OA软骨降解中的作用机制逐渐明确,本文从OA软骨中MMPs的激活、表达、调控几个层面上对近几年MMPs与OA软骨相关的理论和实验研究成果进行了综述.
-
针药结合对子宫内膜异位症大鼠基质金属蛋白酶-2的影响
目的:探讨治疗子宫内膜异位症(endometriosis,EMs)的有效方法及作用机制.方法:采用清洁级雌性成熟未交配SD大鼠50只,建立大鼠EMs模型,随机分为模型组、针灸组、中药组、针药结合组,并设立正常组.针灸组电针"血海""三阴交",艾灸"关元";中药组采用加味没竭片生理盐水溶液灌胃;针药结合组采用上述2种方法综合治疗;正常组和模型组捆绑固定并行生理盐水灌胃.治疗35 d后,测量各大鼠异位组织大直径,取异位组织进行组织病理学观察,并测定组织中基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)的表达.结果:针药结合组异位组织大直径(2.300±1.252)mm、组织中MMP-2表达为1.000±0.667,均明显低于模型组[(5.300±1.337)mm,3.300±0.823]和中药组[(3.700±1.160)mm,1.900±0.738](P<0.05),异位内膜趋于萎缩,部分上皮细胞坏死.结论:针药结合对子宫内膜异位症疗效更佳,其作用机制可能通过下调异常升高的MMP-2水平,从而抑制异位组织对局部基质的侵袭,达到缩小异位组织面积、治疗EMs的作用.
-
黄芪丹参复方成分对模型孕鼠滋养细胞基质金属蛋白酶9 mRNA表达及白细胞介素-10水平的影响
目的研究黄芪丹参复方成分提高胎盘血供的分子机制.方法提取黄芪、丹参复方成分,运用一氧化氮合酶(NOS)阻滞剂L-精氨酸甲酯(L-NAME)制作一氧化氮合成阻滞大鼠模型,ELISA法检测妊娠18 d大鼠血浆白细胞介素-10(IL-10)水平,核酸原位杂交(FISH)法检测胎盘滋养细胞基质金属蛋白酶9(MMP-9)mRNA表达.结果模型组IL-10含量较空白组低(P＜0.01),治疗组IL-10水平高于模型组(P＜0.05);模型组MMP-9 mRNA表达增加,明显高于空白组和黄芪丹参治疗组(P＜0.01),黄芪丹参治疗组与空白组比较差异无显著意义(P＞0.05).结论黄芪丹参复方成分可能通过干预IL-10与MMP-9的互动关系,影响胎盘滋养层细胞的移行与侵袭性,协调胎盘重构与蜕膜重塑过程,从而阻抑胎盘浅表着床,利于母胎循环构建,维持胎盘血液供应.
-
朱红膏对基质金属蛋白酶活性及成纤维细胞分泌的影响
目的:观察朱红膏是否通过对基质金属蛋白酶的影响来促进创面的愈合.方法:收集阳证疮疡创面渗液8例,检测朱红膏对渗出物中明胶酶MMP-2,MMP-9酶活性的影响；在蛋白水平观察朱红膏对MMP-1,-2活性的影响；检测朱红膏对HSF细胞的细胞毒性及IC50及用药前后HSF细胞MMP-1,-2,-9的蛋白表达.结果:朱红膏对创面渗出液中MMP-2活性有明显的抑制作用,与对照组相比P＜0.01;对创面渗出液中MMP-9活性在lg·L-1时与对照组比较无差异,但高于5g·L-1时有明显抑制作用,与对照组比较有差异.当汞质量浓度为320 mg· L-1时,朱红膏溶液能直接抑制MMP-1活性(P＜0.01)和MMP-2活性(P＜0.05)；但当汞质量浓度为2.56～0.51 mg·L-1时,朱红膏溶液能增强MMP-1活性(P＜0.05)；同时当汞在0.51 ～64 mg·L-1时,朱红膏溶液能够增强MMP-2活性(P＜0.01).朱红膏在DMEM的饱和浓度为39.6 mg·L-1,当汞质量浓度大于1.23 mg·L-1时有细胞毒性,HSF细胞IC50汞质量浓度为61.11 mg· L-1,在1.23,0.62,0.31 mg· L-1组均可促进HSF细胞MMP-1的蛋白表达(P＜0.01)；朱红膏1.23,0.62 mg· L-1组对HSF细胞MMP-2蛋白表达有抑制作用,作用不明显,0.31 mg·L-1组对MMP-2蛋白表达有促进作用,作用不明显；在汞0.62 mg·L-1时,朱红膏可促进HSF细胞表达MMP-2(P＜0.01)；但在这3个汞浓度条件下,朱红膏均可降低HSF细胞MMP-9的蛋白表达.结论:朱红膏在高浓度情况下对创面渗出液的MMP-2,MMP-9均有抑制作用,且抑制作用呈朱红膏含量依赖性增强；并直接抑制体外激活的MMP-1,MMP-2活性.但低浓度情况下却刺激正常成纤维细胞MMP-1,2蛋白的表达及体外酶活性；但对正常成纤维细胞MMP-9的表达表现出抑制效应.
-
蝎毒多肽提取物联合5-氟尿嘧啶对H22肝癌血管生成拟态形成的作用及机制研究
目的 观察蝎毒多肽提取物(polypeptide extract from scorpion venom,PESV)联合5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-Fu)对小鼠H22肝癌移植瘤血管生成拟态(vasculogenic mimicry,VM)形成的抑制作用并探讨其可能的作用机制.方法 60只昆明小鼠,皮下接种H22肝癌细胞悬液建立荷瘤模型,随机分为荷瘤对照组、5-氟尿嘧啶组(5-Fu组)、联合组(PESV +5-Fu),每组20只,连续干预14天,隔日测量肿瘤体积,绘制肿瘤体积增殖曲线,并计算抑瘤率；HE染色法观察肿瘤组织的形态学改变；免疫组织化学法和过碘酸雪夫氏染色(PAS)双标法检测各组肿瘤组织VM密度；免疫组织化学法检测缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible fac-tor-1α,HIF-1α)、基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)的蛋白表达水平,用LeicaQw-inV3图像分析软件进行灰度值半定量分析.结果 联合组和5-Fu组H22肝癌移植瘤的生长较荷瘤对照组均受到明显抑制(P＜0.05),且联合组和5-Fu组瘤重和肿瘤体积亦存在显著差异(P＜0.05)；免疫组织化学法和PAS双标法检测显示,联合组VM密度明显低于荷瘤对照组和5-Fu组(P＜0.01)；与荷瘤对照组比较,联合组HIF-1α和MMP-2的蛋白表达水平均显著降低(P＜0.01).结论 PESV联合5-Fu可抑制小鼠H22肝癌移植瘤VM形成,其机制可能与抑制肿瘤微环境中HIF-1α和MMP-2的表达有关.
-
基质金属蛋白酶及其组织抑制因子在左心室机械辅助减负荷模型中的表达
目的 研究基质金属蛋白酶(MMP)及其组织抑制因子(TIMP)在左心室机械辅助减负荷模型中的表达,探讨左心室减负荷后心肌逆向重构的分子机制.方法 结扎Lewis大鼠冠状动脉左前降支诱导心力衰竭,4周后将14只心力衰竭大鼠随机分为心力衰竭组(n=7)与移植组(n=7).将供体移植组心力衰竭大鼠的心脏及右肺移植到受体正常Lewis大鼠的腹部,通过供体的升主动脉与受体的降主动脉吻合.7只正常Lewis大鼠作为正常组.结扎左前降支4周后心脏超声测量3组大鼠心室直径和心肌梗死范围.移植2周后,称取各组大鼠心脏、左心室质量；显微镜观测左心室心肌细胞直径与心肌纤维化程度；采用实时荧光定量PCR检测MMP-1、MMP-9、TIMP-1的mRNA表达及计算MMP-1mRNA/TIMP-1 mRNA的比值.结果 结扎左前降支4周后,心力衰竭组及移植组舒张末直径(LVEDD)较正常组升高、左心室短轴缩短率(LVFS)较正常组下降,而此两组间LVEDD、LVFS及心肌梗死范围比较差异无统计学意义,两组的心力衰竭严重程度差异也无统计学意义.心力衰竭组心脏、左心室质量和左心室心肌细胞直径大于移植组与正常组；移植组心脏、左心室质量、左心室心肌细胞直径接近正常组.心肌纤维化的程度移植组＞心力衰竭组＞正常组[(7.90±2.32)％比(4.20±1.84)％比(1.54±0.31)％,均P＜0.05].心力衰竭组和移植组MMP-1、MMP-9mRNA表达均高于正常组(1.89±0.23、1.32±0.16比0.41±0.01,2.03±0.15、1.50±0.13比0.46+0.01,均P＜0.05),但心力衰竭组与移植组比较差异无统计学意义.心力衰竭组TIMP-1mRNA表达低于正常组与移植组(0.72±0.18比1.21±0.02、1.68±0.21,均P＜0.05)；正常组与移植组比较差异无统计学意义.心力衰竭组MMP-1 mRNA/TIMP-1mRNA比值较正常组及移植组明显增高(2.03±0.15比0.30±0.01、0.81±0.11,均P＜0.05)；正常组与移植组差异则无统计学意义.结论 左心室减负荷后,心肌逆向重塑的过程伴随着心肌细胞MMP及TIMP水平的改变.
-
基质金属蛋白酶及其组织抑制剂与滋养细胞侵袭性生长关系的研究
目的了解基质金属蛋白酶(MMPs)和组织抑制剂(TIMPs)在滋养细胞中的定位及其在不同滋养细胞病变中的表达和相互调节作用.方法采用免疫组化方法检测MMP-2、MMP-9和TMP-1、TIMP-2在绒毛膜癌、侵袭性水泡状胎块、水泡状胎块、胎盘植入和超常反应胎盘部位等病变以及胎盘着床部位中的表达.结果MMP-2、9和TIMP-1、2主要在中间滋养细胞和合体滋养细胞表达.滋养细胞在胎盘着床部位仅表达MMP-2;超常反应胎盘部位和胎盘植入不但表达MMP-2,而且多数病例MMP-9(+),但阳性强度弱,TIMP-1和TIMP-2(-);水泡状胎块较强表达MMP-2,伴持续性滋养细胞疾病MMP-9和TIMP-1、2(+);侵袭性水泡状胎块和绒毛膜癌MMP-2和MMP-9表达明显增强,TIMP-1和TIMP-2多数(+).结论在病理性妊娠中MMP-9活性增强可导致滋养细胞发生过度浸润.MMP-9的过度表达和TIMP-1、2的轻微增加,可能共同增强了肿瘤细胞的侵袭能力.
关键词： 基质金属蛋白酶类 金属蛋白酶类组织抑制剂 滋养细胞病变 -
基质金属蛋白酶2和9及血管内皮生长因子C在乳腺癌淋巴结转移中的作用
目的 研究血管内皮生长因子C(VEGF-C)与基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9在乳腺癌组织中的表达及三者在乳腺癌淋巴结转移中的作用.方法 应用免疫组织化学SP法对84例乳腺癌(有腋淋巴结转移者52例,无腋淋巴结转移者32例)的VEGF-C、MMP-2和-9以及血管内皮透明质酸受体-1(LYVE-1)的表达进行检测,统计分析VEGF-C、MMP-2和-9与乳腺癌淋巴管生成的关系.利用重组质粒表达载体介导的短发夹式干扰RNA(shRNA)靶向沉默乳腺癌MCF-7细胞株中VEGF-C基因,PCR检测VEGF-C、MMP-2和-9的表达.结果 VEGF-C与MMP-2和-9在乳腺癌组织中均呈过表达,分别为83.3%(70/84)、89.3%(75/84)和75.0%(63/84),且在腋淋巴结转移组[94.2%(49/52)、98.1%(51/52)和88.5%(46/52)]比无淋巴结转移组[65.6%(21/32)、75.0%(24/32)和53.1%(17/32)]明显高表达(P＜0.05);淋巴管密度在腋淋巴结转移组及无转移组的表达有统计学意义(P＜0.05),随着VEGF-C与MMP-2和-9表达强度增加,淋巴管数量也增加(P＜0.05);转染重组质粒后MCF-7细胞株的VEGF-C及MMP-2和-9的mRNA表达水平下调,抑制率分别为95.0%、53.0%和77.0%(P＜0.05).结论 VEGF-C与MMP-2和-9协同促进乳腺癌组织的淋巴管新生和乳腺癌淋巴结转移.
-
CD147、基质金属蛋白酶和转化生长因子β1在乳腺癌中的表达与肿瘤转移和预后及其相互间的关系
目的 探讨CD147和基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9与转化生长因子(TGF)β1及其Ⅰ型受体(TGFβR I)在乳腺癌组织中的表达与肿瘤转移和预后及其相互间的关系.方法 建立组织芯片平台,应用免疫组织化学SP法检测160例乳腺癌组织CD147、MMP-2、MMP-9、TGFβ1和TGFβRI蛋白的表达情况,并进行了8～64个月随访.结果 160例乳腺癌中CD147、MMP-2、MMP-9、TGFβ1和TGFβRI阳性率分别为87.5%(140例)、96.9%(155例)、95.0%(152例)、73.7%(118例)和60.6%(97例);CD147的表达与乳腺癌腋淋巴结受累、TNM分期和HER2过表达均呈正相关(P<0.01,P<0.05和P<0.01),与孕激素受体表达呈负相关(P<0.05);CD147蛋白阳性患者(55.9个月)无复发生存期显著低于阴性患者(46.1个月,P=0.023);CD147与MMP-2、MMP-9蛋白的表达均呈显著正相关(r=0.728和r=0.399,均P<0.01);CD147蛋白表达与TGFβ1和TGFβRⅠ表达均呈显著正相关(r=0.223,P<0.01和r=0.191,P<0.05).结论 乳腺癌组织中CD147表达状况与肿瘤侵袭转移和患者预后有密切关系;CD147的表达与MMP-2、MMP-9、TGFβⅠ和TGFβR Ⅰ表达状况关系密切.
-
不同微环境对黑色素瘤细胞侵袭能力和局部微循环模式形成的影响
目的 明确不同微环境对肿瘤细胞侵袭能力和微循环模式的影响,并阐述其相关分子机制.方法 将恶性黑色素瘤单细胞悬液B16分别接种至C57小鼠腹腔和后肢肌肉组织中,于接种肿瘤后第18天后处死动物,取腹腔内肿瘤组织和小鼠后肢肿瘤组织,免疫组织化学(SP法)CK18染色对后肢组和腹腔组肿瘤细胞恶性侵袭表型进行比较,并比较在不同微环境生长下肿瘤细胞缺氧诱导因子(HIF)-1α的表达,免疫组织化学染色和Real time PCR方法从蛋白水平和mRNA水平比较腹腔组和后肢组肿瘤细胞基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9的表达差别;并对肿瘤组织内不同微循环模式进行计数.结果 免疫组织化学染色结果显示与腹腔组相比,后肢组肿瘤细胞CK18、HIF-1α表达明显增高(t=8.142,t=3.645,P均＜0.05),同时也表达更高的肿瘤侵袭相关蛋白,肿瘤细胞表达MMP-2和MMP-9均明显高于腹腔组(t=4.916,t=7.782,P均＜0.05),Real time PCR检测结果也显示后肢组MMP-2和MMP-9 mRNA表达也明显高于腹腔组(t=36.814,t=26.025,P均＜0.05).在后肢组肿瘤组织中,血管生成拟态是肿瘤细胞获得营养的主要方式,而腹腔组肿瘤细胞获得营养供应方式主要通过内皮依赖性血管.结论 不同生长微环境影响黑色素瘤细胞的恶性表型转化,致使肿瘤细胞分泌更多肿瘤侵袭转移相关蛋白,促进肿瘤细胞向周围组织浸润,肿瘤细胞侵袭能力的增高促进了肿瘤血管生成拟态的形成.
-
成纤维细胞与结肠癌细胞相互作用促进细胞外基质金属蛋白酶诱导因子的表达
目的 研究成纤维细胞与结肠癌细胞相互作用对二者表达细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)的影响,初步探讨肿瘤-基质相互作用在结肠癌侵袭转移中的作用.方法 结肠癌SW480细胞与HELF成纤维细胞以RPMI 1640培养液分别共培养0、12、24、48 h,通过RT-PCR和免疫细胞化学方法检测SW480和HELF细胞中EMMPRIN的表达.结果 共培养组SW480细胞EMMPRIN mRNA和蛋白的表达均明显升高,HELF细胞本来不表达EMMPRIN,与SW480细胞共培养12、24、48 h后检测到EMMPRIN表达,且随时间延长而表达增加.结论 成纤维细胞与结肠癌细胞相互作用上调SW480细胞EMMPRIN的表达,并诱导HELF细胞表达EMMPRIN,有可能在结肠癌侵袭转移中发挥重要作用.
-
沉默CD147基因对人甲状腺髓样癌TT细胞相关蛋白表达和生物学特性的影响
目的 探讨沉默CD147基因对人甲状腺髓样癌TT细胞ANXA2、基质金属蛋白酶(MMP)-2和组织金属蛋白酶抑制因子(TIMP)-2蛋白表达和生物学特性的影响.方法 首先用免疫细胞化学技术检测CD147、ANXA2、MMP-2、TIMP-2等蛋白在TT细胞中的表达情况；应用RNA干扰(RNAi)技术筛选出能有效沉默TT细胞CD147基因的小干扰RNA(siRNA)序列和佳时间点；在佳时间点,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot分别检测ANXA2、MMP-2、TIMP-2等在mRNA和蛋白水平的表达情况；四甲基偶氮唑盐法检测CD147基因沉默后TT细胞的增殖情况；流式细胞技术检测CD147基因被沉默后各实验组TT细胞的周期和凋亡的改变；Transwell小室实验检测沉默CD147基因对TT细胞迁移和侵袭的影响.结果 CD147、ANXA2、MMP-2、TIMP-2等蛋白在TF细胞中均有不同程度的表达；筛选出2条能够在72 h时有效沉默TT细胞CD147基因表达的siRNA序列；MMP-2 mRNA和蛋白的相对表达量也同时下降；而ANXA2 mRNA和蛋白的相对表达量均无明显变化:TIMP-2 mRNA相对表达量无变化,但其蛋白的表达水平明显下降；沉默CD147基因后TT细胞的增殖受到抑制,Go/G1期细胞明显增加,G2/M期细胞比例明显下降,但各实验组凋亡细胞的比例没有变化；沉默TT细胞CD147基因后,Transwell小室迁移和侵袭实验中,各实验组的穿膜细胞数差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 通过RNAi技术,2条CD147 siRNA可以有效的沉默TT细胞CD147基因在mRNA和蛋白水平上的表达,同时下调MMP-2 mRNA和蛋白的表达,对TIMP-2 mRNA无明显影响,但是导致了TIMP-2蛋白表达下降,对ANXA2 mRNA和蛋白的表达均无明显影响；沉默CD147基因可以抑制TT细胞的生长,改变其细胞周期,但是对TT细胞的凋亡、迁移和侵袭影响不大.
-
高糖和茶多酚对人脐静脉内皮细胞基质金属蛋白酶2及其诱导因子表达的影响
目的 探讨高糖对内皮细胞基质金属蛋白酶2(MMP-2)及其诱导因子(EMMPRIN)表达的影响,以及茶多酚对高糖作用的干预情况.方法 培养人脐静脉内皮细胞,分为正常对照组、高糖组、茶多酚对照组和茶多酚干预组.培养24 h后,用免疫细胞化学、RT-PCR和Western blot法测定细胞内MMP-2及EMMPRIN的变化.结果 高糖下调内皮细胞MMP-2及EMMPRIN表达,其变化随时间延长更为明显;而茶多酚干预组MMP-2活性明显上调(P<0.05);茶多酚干预组EMMPRINmRNA及蛋白表达均较高糖组上调(P<0.05),茶多酚干预可拮抗高糖对内皮细胞的影响.结论 高糖影响内皮细胞的细胞外基质降解,茶多酚可以抑制这种作用.
-
基质金属蛋白酶系统在糖尿病及其并发症中的研究进展
糖尿病(DM)及其并发症的发生发展与多种因素有关,除通常所说的遗传和生活方式等因素外,还与众多细胞因子和酶活性改变有关.2型糖尿病(2TDM)广泛的代谢异常可引起基底膜的结构和功能发生改变,这些改变可使血管基底膜的降解与重构机制失常,而细胞外基质(extracellular matrix,ECM)作为血管壁的主要成分在这些生理病理过程发挥重要作用.基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMPs)及其组织抑制因子(tissuse inhibitor of metalloproteinase,TIMPs)在细胞外基质代谢中起重要作用,研究结果表明,MMPs和TIMPs的代谢紊乱不仅可引起多种疾病,而且在不同肿瘤中的表达和分泌水平对肿瘤的防治具有重要意义[1].本文就MMPs系统的生物学特性和在DM及其并发症研究中的应用进展概述如下.
关键词： 糖尿病/并发症 基质金属蛋白酶类 金属蛋白酶类组织抑制剂 -
兔膝骨性关节炎软骨MMP-2表达动态变化与MRI表现的对照研究
目的:通过动态监测兔膝关节骨性关节炎(OA)模型软骨内基质金属蛋白酶-2 (MMP-2)表达水平的变化,并与MRI分级对照分析,探讨MRI软骨损伤分级与MMP-2表达水平之间的内在关系.方法:健康新西兰大白兔35只,随机分为5组,除对照组外其他组均采用前交叉韧带切断术建立OA模型,分别在术后2周、4周、6周、8周行MRI检查和病理学观察,观察退变软骨的病理变化和MMP-2表达水平.结果:随着时间延长,软骨破坏日趋明显,各组间MRI分级差异均有统计学意义(P＜0.05).MMP-2表达水平在术后第4周高,对照组MMP-2表达水平与手术组相比差异均有统计学意义(P＜0.05),术后4周组高于术后8周组(P＜0.05).各组软骨损伤的MRI分级与MMP-2表达存在相关性(Spearman's相关系数,r=0.547,P=0.001).结论:MRI能够准确评价不同时期OA软骨退变的病理改变；MMP-2在退变的早期和中期起重要作用.
-
肝癌组织中基质金属蛋白酶表达与侵袭转移的关系研究
目的：检测肝癌患者血液及组织中MMP-2、MMP-9的表达，分析二者与肝癌侵袭转移的关系。方法选取2013年1月至2014年10月在我院住院行手术切除的肝细胞癌（HCC）患者40例作为试验组，经病理确诊为HCC，且未经放、化疗等抗肿瘤治疗；对照组患者40例，包括局灶性增生性结节16例，肝血管瘤13例，肝外伤11例。采用酶联免疫吸附法和免疫组织化学法检测入组患者血液及组织中基质金属蛋白酶（MMP）-2、MMP-9的表达。结果采用酶联免疫吸附法对两组患者 MMP-2、MMP-9的水平进行检测，结果发现，试验组患者血液中 MMP-2水平（0.384±0.026）、MMP-9水平（0.337±0.012）明显高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）；采用免疫组织化学法对试验组肝癌组织、癌旁组织、对照组进行 MMP-2、MMP-9的检测，结果发现，肝癌组织中MMP-2强阳性（＋＋＋）表达30例，MMP-9强阳性（＋＋＋）表达31例，阳性率为87.5%、85.0%；癌旁组织无 MMP-2、MMP-9强阳性表达，阳性率分别为10.0%、12.5%；对照MMP-2、MMP-9阳性率分别为7.5%、10.0%。试验组肝癌组织MMP-2、MMP-9的表达阳性率较癌旁组织及对照组明显升高，差异有统计学意义（P＜0.05）；MMP-2、MMP-9的表达与静脉浸润、肝内外转移、包膜有关（P＜0.05），与性别、年龄、病灶大小、肝硬化、甲胎蛋白（AFP）、HBsAg无关（P＞0.05）。结论 MMP-2、MMP-9在肝癌中表达升高，与有无静脉浸润、有无肝内外转移及有无包膜有关，并且出现静脉浸润、有肝内外转移、无包膜的肝癌中，MMP-2、MMP-9表达明显升高，与肝癌的生长、侵袭和转移有密切的关系。
-
FRAT1、MMP-9及RhoC在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义
目的：探讨FRAT1、MMP-9及RhoC在喉鳞状细胞癌组织中的表达及其与临床病理参数的关系，同时分析三者之间的相关性。方法免疫组织化学方法检测FRAT1、RhoC及MMP-9在喉鳞癌中的表达，并结合临床病理学特征进行统计学分析。结果 FRAT1在喉癌中主要定位于细胞质，偶有核表达，散在炎症细胞也有少量表达，其阳性表达与年龄及病理分化程度有关（P＜0.05）。MMP-9阳性表达与病理分化程度及淋巴结转移有关（P＜0.05）。RhoC阳性表达与喉鳞癌的病理分化程度、T分期、临床分期及淋巴结转移有关（P＜0.05）。FRAT1与MMP-9呈正相关（r＝0.482，P＝0.000），RhoC和MMP-9（r＝0.429， P＝0.000）呈正相关。结论 FRAT1、MMP-9及 RhoC在喉癌的侵袭转移过程中可能具有重要作用。
