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细胞凋亡抑制剂防护晶状体上皮细胞氧化损伤的信号转导机制
目的:旨在探讨细胞凋亡抑制剂阿魏酸钠(SF)、五味子乙素(Sch B)、菊花(FC)、车前子(SP)对氧化损伤的晶状体上皮细胞(LEC)内Ca2+、环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)的影响,揭示天然药物防治白内障的细胞和分子学机制.方法:将四种药物与H2O2造成氧化损伤的体外培养牛LEC共同孵育后,进行以下研究:1、采用四甲基偶氮唑兰(MTT)法观察在不同时间和浓度条件下LEC活性的变化.2、采用荧光分光光度法测定不同时间细胞内钙离子浓度([Ca2+]i).3、采用放射免疫法测定不同时间LEC内cAMP、cGMP的含量.观察药物的剂量效应与时间效应.
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实验性癫痫鼠脑组织环核苷酸及ATP酶的测定
已有文献报道环核苷酸包括环磷酸腺苷(cAMP)和环磷酸鸟苷(cGMP)及ATP酶对电解质离子均有调整作用[1],推测它们在癫痫发病机理中可能有作用,并已表明Na+-K+-ATP酶活力下降具有肯定的致痫作用[2],但对环核苷酸及其它离子ATP酶在癫痫中的作用及它们在癫痫中的相关性少有研究,本文利用癫痫动物模型检测cAMP、cGMP及3种ATP酶的变化来进一步探讨.
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加味镇眩颗粒对自发性高血压大鼠血压及血管内皮功能的影响
目的 观察加味镇眩颗粒对自发性高血压大鼠(SHR)血压、一氧化氮的合成和生物利用途径以及血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)含量的影响.方法 将50只SHR大鼠随机分为加味镇眩颗粒高、中、低剂量组(给予37.50,18.70,9.35 g/kg)、卡托普利组(25 mg/kg)、SHR组(给予等体积蒸馏水),均为灌胃给药,经过12 w的干预治疗,分别测定大鼠的基础血压和4、8、12周的血压,实验结束后检测血浆一氧化氮(NO)和AngⅡ的含量,以及主动脉一氧化氮合酶(NOS)的活性、环磷酸鸟苷(cGMP)的含量.结果 加味镇眩颗粒可降低SHR血压,提高SHR血浆NO含量、主动脉NOS活性和主动脉cGMP含量,降低血浆Ang Ⅱ含量,与SHR组相比,差异具有显著性(P<0.05),其中,加味镇眩颗粒高剂量组的效果好.12周时,加味镇眩颗粒高剂量组与卡托普利组降压效果相当,且增加主动脉cGMP含量效果更佳(P<0.05),并能提高NO的生物利用度.结论 加味镇眩颗粒能够降低SHR大鼠血压,可能是通过改善SHR大鼠NO/NOS/cGMP系统和降低Ang Ⅱ水平来发挥作用.
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黄芪四君汤对脾虚证大鼠甲状腺素及环核苷酸水平的影响
目的 观察黄芪四君汤对脾虚证模型大鼠甲状腺激素及环核苷酸水平的影响,探讨该方防治脾虚证的作用机理.方法 SD雄性大鼠随机分为3组:正常对照组,脾虚模型组,黄芪四君汤组.采用大黄复制脾虚证动物模型,观察各组动物血清甲状腺素(T4)、三碘甲腺原氨酸(T3)、促甲状腺素(TSH)及血浆环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)水平的变化.结果 与正常对照组比较,脾虚模型组大鼠血清T3、T4含量下降(P＜0.01),血浆cAMP含量及cAMP/cGMP比值均升高(P＜0.01).黄芪四君汤能提高实验性脾虚证大鼠T3、T4水平及脾脏指数、胸腺指数,降低cAMP含量及cAMP/cGMP比值.结论 黄芪四君汤能改善脾虚证模型大鼠的脾虚症状,其作用机理与调节甲状腺激素及cAMP、cGMP水平有关.
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油酸肺损伤时肺泡内液体清除和肺泡Ⅱ型细胞内cAMP、cGMP水平的变化
目的 观察油酸致大鼠急性呼吸窘迫综合症(ARDS)模型中肺泡Ⅱ型细胞cAMP、cGMP水平的变化及特布他林的作用.方法 随机将SD大鼠分为对照组、ARDS组、特布他林组.用放射免疫分析法测定肺泡Ⅱ型上皮细胞内cAMP、cGMP水平;应用重力法测定血管外肺水含量(EVLW).结果 ARDS组大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞内cAMP明显降低.cGMP水平升高,EVLW明显增多.给予特布他林治疗后,EVLW下降,肺泡Ⅱ型细胞内cAMP含量升高,cGMP变化不明显.结论 油酸致ARDS时,肺水清除能力下降.特布他林可通过提高肺泡Ⅱ型细胞内cAMP水平提高肺水清除能力.肺泡Ⅱ型细胞内cAMP、cGMP水平变化参与急性肺损伤的分子生物学发病机制.
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体外反搏提高切应力调节NO和cGMP机制的探讨
目的观察体外反搏对心肌梗死犬头背干切应力和信号转导物质一氧化氮(NO)和环磷酸鸟苷(cGMP)的影响,探讨体外反搏保护缺血心肌的机制.方法19只健康杂种犬随机分为对照组、缺血组和缺血+反搏组(反搏组)3组,采用开胸结扎冠状动脉左前降支的方法建立心肌缺血模型,观察体外反搏前后头背干切应力的变化,用改良硝酸还原酶法测定体外反搏前后心肌缺血犬血浆和主动脉NO含量,采用放免法检测心肌缺血前后血浆和主动脉cGMP的含量.结果体外反搏可提高因心肌缺血而造成的切应力降低,并使之恢复正常.同时也发现体外反搏可提高缺血组犬血浆和主动脉NO和cGMP水平.结论体外反搏能提高切应力,促进NO和cGMP的产生,这可能是其抗心肌缺血损伤的重要机制之一.
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补肾活血化痰开窍方对耳鸣模型大鼠血液肾虚相关指标的影响
[目的]探讨补肾活血化痰开窍方对耳鸣模型大鼠肾虚相关指标的影响.[方法]将60只大鼠随机分为正常组,模型组,中药低、中、高剂量组,西药组,每组10只.除正常组外,其余组别大鼠采用水杨酸钠腹腔注射联合"饮水抑制"大鼠行为学实验复制耳鸣模型.造模成功后,正常组、模型组大鼠给予2 mL生理盐水灌胃;中药低、中、高剂量组给予补肾活血化痰开窍方(剂量分别为5.5、11、22 g·kg-1·d-1)灌胃;西药组大鼠给予卡马西平(剂量为5 mg·kg-1·d-1)灌胃.每天1次,持续给药8周.采用全自动生化仪测量大鼠血清钙、磷、铁,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定大鼠血浆多巴胺、皮质醇、环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP).[结果]造模成功率为88％.与正常组比较,模型组大鼠血液中钙、铁、皮质醇、多巴胺、cAMP含量,cAMP/cGMP比值下降,磷、cGMP含量增加(均P<0.05);与模型组比较,中药各剂量组上述指标明显改善(P<0.05).[结论]补肾活血化痰开窍方可改善耳鸣大鼠肾虚相关指标.
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异丙酚靶控输注系统研究不同麻醉深度下兔脑NO、cGMP水平的改变
目的 研究异丙酚不同麻醉深度对兔脑不同脑区NO、cGMP水平的影响.方法 30只日本大耳兔,随机分为3组,即对照组,浅麻醉组,深麻醉组.浅麻醉组,深麻醉组予以异丙酚靶控输注(TCI),达到所需麻醉状态60分钟后断头处死.对照组行耳缘静脉注射空气造成空气栓塞后致死.三组0℃～4℃分离取脑,测定大脑皮层、海马、小脑NO,cGMP含量.结果 与对照组比较,小脑NO、cGMP水平随着异丙酚麻醉深度的增加而显著降低,三组之间均存在显著性差异(P＜0.05).大脑皮层、海马NO、cGMP水平在麻醉状态下显著升高(P＜0.05),但麻醉深度的增加并不能进一步降低NO、cGMP水平(P＞0.05).结论 异丙酚通过降低NO,cGMP水平,抑制兴奋性神经传递和增强抑制性神经传递,从而发挥麻醉作用.异丙酚对NO/cGMP信号转导通路的抑制可能存在着脑区上的差异.
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PDE5抑制剂伐地那非预处理对人羊膜间充质干细胞生物学特性的影响
目的：观察特异性5型磷酸二酯酶抑制剂（PDE5）伐地那非对人羊膜间充质干细胞（hAMSCs）生物学特性的影响。方法：分离培养hAMSCs，以终浓度为10μmol/L伐地那非预处理hAMSCs，观察伐地那非处理hAMSCs组（Vard-hAMSCs）生长形态，采用流式细胞术分析比较hAMSCs细胞免疫表型、增殖能力及抗氧化损伤能力；免疫双荧光染色计数阳性表达细胞数，计算hAMSCs向神经细胞诱导分化百分率。结果：（1）流式细胞术结果显示，hAMSCs、Vard-hAMSCs均阳性表达CD90、CD105、CD73，不表达CD45、CD34、CD19、CD11b及HLA-DR；Vard-hAMSCs组细胞S期细胞比率及增殖指数为（0．57±0．40）％和（2．20±1．60）％，与hAMSCs组[分别是（0．62±1．33）％，（1．90±1．40）％]比较，无统计学差异（P ＞0．05）；（2）Annexin V/PI双染色结果显示，经250μmol/L H2O2作用4 h后，Vard-hAMSCs组细胞凋亡率为（7．67±0．82）％，明显低于hAMSCs组（18．72±2．92）％和特异性Vardenafil阻断剂组（15．90±1．69）％（均P ＜0．05）；（3）免疫双荧光染色结果显示，在相同诱导条件下，Vard-hAMSCs组细胞MAP-2及GFAP阳性细胞百分率分别是（49．8±6．42）％和（55．2±6．10）％，均高于hAMSCs组[分别为（29±3．94）％，（32．2±3．03）％，P＜0．05]。结论：伐地那非处理一定时间可明显提高hAMSCs抗氧化损伤效应和hAMSCs向神经细胞分化的能力，但短时间内不明显影响hAMSCs生长形态、增殖能力和免疫表型。提示伐地那非处理可能作为hAMSCs移植治疗神经系统疾病的优选预处理方案。
关键词： 间充质干细胞 环磷酸鸟苷 5型磷酸二酯酶抑制剂 预处理 -
电针不同时段对大鼠中枢cAMP和cGMP含量的影响
[目的]探讨针刺镇痛与中枢环核苷酸含量变化之间的关系.[方法]运用放射免疫分析法(RIA)测定大鼠电针15min、30min、45min后,中枢cAMP和cGMP含量的变化.[结果]电针15min大鼠全脑cAMP含量降低,端脑cGMP含量降低(P＜0.05);电针30min全脑和间脑cAMP含量显著降低,端脑cGMP含量显著降低而脑干cGMP含量升高(P＜0.05);电针45min脑干cGMP含量升高(P＜0.05);电针30min痛阀明显提高.[结论]实验结果初步证实,针刺镇痛以大约30min为宜.
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电针不同时段对大鼠中枢cGMP含量的影响
目的:探讨针刺镇痛与中枢cGMP含量变化之间的关系.方法:运用放射免疫分析法(RIA)测定大鼠电针15、30、45min后,中枢cGMP含量的变化.结果:电针15min大鼠端脑cGMP含量降低,电针45min脑干含量升高,电针30min端脑cGMP含量显著降低而脑干含量升高(P＜0.05),且痛域明显提高.结论:实验结果初步证实,针刺镇痛以大约30min为宜.
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羟基红花黄色素A联用β-乳香酸对血瘀证模型大鼠凝血功能、NO、cGMP的影响
目的:研究羟基红花黄色素A(HSYA)联用β-乳香酸(β-BA)对血瘀证模型大鼠凝血功能、一氧化氮(NO)与环磷酸鸟苷(cGMP)的影响.方法:48只SD大鼠随机分为正常对照(等容生理盐水)组、模型(等容生理盐水)组、阿司匹林(100 mg/kg)组、HSYA(100 mg/kg)组、-BA (200 mg/kg)组、联合用药(HSYA 50 mg/kg+β-BA 100 mg/kg)组,每12h灌胃给药1次,连续7次.第5次给药后给予大鼠皮下注射盐酸肾上腺素(0.8 mg/kg)2次,间隔4h,中间给予冰水刺激以复制大鼠急性血瘀证模型.末次给药30 min内取腹主动脉血检测凝血指标和NO、cGMP水平,并取大鼠颈动脉观察其病理变化.结果:与正常对照组比较,模型组大鼠血浆凝血酶时间(TT)、血浆凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)缩短,纤维蛋白原(FIB)含量增加,NO、cGMP水平降低,差异均有统计学意义(P＜0.01);病理切片表明,大鼠颈动脉内皮受损,血管内皮细胞部分从血管壁脱落.与模型组比较,HSYA组、-BA组、联合用药组大鼠血浆TT、PT、APTT延长,FIB含量减少,NO、cGMP含量增加,差异均有统计学意义(P＜0.01);大鼠血管内皮受损程度改善,且联合用药较单独用药效果明显.结论:HSYA联用-BA能显著改变血瘀证大鼠的凝血功能,增加血浆NO与cGMP的含量.
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滋阴清热药对环核苷酸的影响
中医滋阴清热方药能有效缓解阴虚发热证候群.西医现代研究表明,阴虚患者常有β-肾上腺素受体-环磷酸腺苷(cAMP)系统功能偏亢,M-胆碱受体-环磷酸鸟苷(cGMP)系统功能偏衰的现象.经滋阴清热治疗,可使cAMP水平降低,cAMP/cGMP比值恢复正常.此项研究从微观上深化了中医理论.
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缺血预适应对大鼠肢体缺血再灌注后小肠损伤的保护效应及NO的作用
目的观察缺血预适应（IPC）对肢体缺血再灌注（LIR）后小肠损伤的保护效应，探讨一氧化氮（NO）在该过程中的作用机制。方法雄性Wistar大鼠52只，随机分为4组（n＝13）：假手术（Sham）组，肢体缺血再灌注（IR）组，缺血预适应（IPC）组，Nω-硝基-L-精氨酸甲酯处理（L-NAME）组，测定各组大鼠血浆和小肠组织二胺氧化酶（DAO）、NO含量，血浆异硫氰酸荧光素标记的脂多糖（FITC-LPS）浓度，小肠组织丙二醛（MDA）、环磷酸鸟苷（cGMP）的含量；采用免疫组织化学法检测蛋白P-选择素（P-selection）和凋亡蛋白酶（Caspase-3）的表达情况，利用原位脱氧核糖核甘酸末端转移酶介导的缺口末端标记法（TUNEL）检测各组小肠组织细胞的凋亡情况，使用自动图像分析系统对其结果进行定量分析。结果 IPC组与IR组比较，血浆DAO和FITC-LPS明显降低，NO升高（P＜0．01），小肠组织NO、DAO和cGMP浓度升高，MDA浓度下降（P＜0．01），小肠组织黏膜上皮细胞P-selection、Caspase-3的表达明显下降，AI降低（P＜0．01）；L-NAME组与 IPC组比较，血浆NO浓度明显下降，DAO 和 FITC-LPS明显升高（P＜0．01），小肠组织NO、DAO和cGMP浓度明显下降，MDA浓度升高（P＜0．01），P-selection、Caspase-3表达均明显上调，AI明显升高（P＜0．01）。结论 IPC可明显改善LIR后小肠黏膜肠通透性升高、组织脂质过氧化损伤及肠细胞凋亡， NO参与IPC的保护效应。
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抑制磷酸二酯酶5治疗心力衰竭的机制和临床意义
磷酸二酯酶5(PDE5)影响环磷酸鸟苷(cGMP)维持血管平滑肌紧张性的生理学效应,在阴茎海绵体的静脉系统和肺血管系统中尤为明显.第一个选择性的cGMP-PDE5抑制剂(复方uK92480,辉瑞)的第一个临床靶向是心绞痛,但它的早期研究除了发现男性参与者有阴茎勃起这个有趣的"不良反应"外,结果令人失望.
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应用血浆亚硝酸根和环磷酸鸟苷浓度诊断早产
目的:探讨血浆亚硝酸根(NO2-)及环磷酸鸟苷(cGMP)浓度诊断早产的临床意义.方法:采用示波极谱法和放射免疫法测定322例妊娠妇女(240例正常妊娠妇女、30例正常产妇和52例早产妇女)血浆NO2-和cGMP浓度.结果:正常妊娠妇女从28周开始,血浆NO2-和cGMP浓度均逐渐增加,在足月及产后又分别下降.血浆NO2-和cGMP浓度分别在34～34+6周和33～33+6周达高值.足月妊娠时血浆NO2-浓度与妊娠33～33+6周、34～34+6周、36～36+6周比较,明显降低,差异均有显著性(P＜0.05).足月妊娠血浆cGMP浓度与妊娠33～33+6周、35～35+6周、36～36+6周比较,亦明显降低,差异有显著性(P均＜0.005).早产妇女血浆NO2-和cGMP浓度均低于相应孕周的正常妊娠妇女(P＜0.001,P＜0.05).血浆NO2-和cGMP浓度诊断早产的敏感性和特异性分别为86.36%、80% 和 82.12%、78.56%.结论:血浆NO2-和cGMP浓度在诊断早产上可能具有良好的临床应用前景,但尚需进一步深入研究.
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sGC-cGMP信号通路在CO介导的呼吸节律调节中的作用
目的 探讨可溶性鸟苷酸环化酶(sGC)-环磷酸鸟苷(cGMP)信号通路是否参与一氧化碳(CO)在延髓水平介导的呼吸节律调节.方法 电生理实验分为5组(每组n=8):单纯人工脑脊液(ACSF)对照组、外源性CO组、ODQ(sGC的选择性抑制剂)组、ODQ+CO组和二甲基亚砜(DMSO)组,制备SD大鼠离体延髓脑片标本,以舌下神经根节律性自发放电频率(burst frequency,BF)为指标,分别灌流以上药物,观察呼吸节律的变化;并以放射免疫方法检测单纯ACSF对照组、外源性CO组、ODQ组和ODQ+CO组给药后脑片cGMP水平的改变(每组n=6).结果 外源性CO可以使BF减慢(P＜0.05),cGMP水平升高(P＜0.05).ODQ使BF增快(P＜0.05),cGMP水平降低(P＜0.05).在灌流ODQ的同时给予CO,BF和cGMP水平均无明显变化(P＞0.05);给药结束后,BF增快(P＜0.05).结论 在延髓水平,sGC-cGMP信号通路在CO介导的呼吸节律调控中具有重要作用.
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血浆亚硝酸根及环磷酸鸟苷浓度预测早产的价值
目的探讨血浆亚硝酸根(NO2-)及环磷酸鸟苷(cGMP)浓度预测早产的价值.方法采用示波极谱法和放射免疫法测定了250例妊娠妇女(210例正常妊娠妇女和40例早产妇女)血浆NO2-和cGMP浓度. 结果正常妊娠妇女从28周至36+6周,血浆NO2-和cGMP浓度均逐渐增加.NO-2从1.9575±0.3509增加至2.2360±0.3486 μmol/L,cGMP从31.1625±3.9082增加至42.1850±11.3816 μmol/L.血浆NO2-浓度在34～34+6周达高值(2.2425±0.3407 μmol/L),血浆cGMP浓度在33～33+6周达高值(49.0010±8.6719 μmol/L).早产妇女血浆NO2-和cGMP浓度均低于相应孕周的正常妊娠妇女(P＜0.01和P＜0.05).结论血浆NO2-和cGMP浓度预测早产具有良好的可行性和应用前景.
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针刺镇痛与大鼠全脑cAMP和cGMP含量变化之间的关系
目的:探讨针刺镇痛与全脑cAMP和cGMP含量变化之间的关系.方法:运用放射免疫分析法(RIA)测定大鼠电针前后,全脑组织中cAMP和cGMP含量的变化.结果:电针30min提高大鼠痛阈的同时,使全脑cAMP含量显著降低(P＜0.05).结论:中枢环核苷酸可能参与针刺镇痛.
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急性脑外伤垂体内分泌改变及其临床意义
目的研究急性脑外伤后垂体-甲状腺轴和性腺轴激素改变,以及脑脊液中环磷酸腺苷(cAMP)和环磷酸鸟苷(cGMP)含量的变化,探讨其临床意义.方法采用放射免疫分析法前瞻性的研究,分别于伤后或术后1～2天、5～7天、12～14天、20～22天检测了18例急性脑外伤患者血中垂体、甲状腺和性腺激素以及脑脊液中cAMP和cGMP含量,与对照组10例进行比较.结果 cAMP、cGMP伤后早期较对照组明显降低(P＜0.01),中晚期逐步升高并接近对照组.血清三碘甲状腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)伤后早期较对照组明显降低(P＜0.05,P＜0.01),随意识好转T3接近正常,T4浓度增高,但未恢复正常.卵泡刺激素早期无明显改变,中期明显降低(P＜0.01),晚期接近正常;睾酮观察期间均较对照组降低(P＜0.01),虽晚期有所升高,但未恢复正常.皮质醇伤后早期升高,但与对照组无明显差别(P＞0.05).cAMP、血清T4与GCS评分减少有相关关系,GCS评分愈低,cAMP和T4降低就愈明显(P＜0.05),随意识障碍改善而逐渐升高.结论急性脑外伤可影响脑脊液(CSF)中cAMP和cGMP,及下丘脑垂体-甲状腺和性腺轴的功能,其变化程度与脑伤程度有关,对伤后判断病情程度和估计预后有一定价值.
