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氯化锂对异氟醚诱导的发育期幼鼠海马毒性的影响
目的 探讨氯化锂对异氟醚诱导的发育期幼鼠海马神经细胞凋亡的影响以及糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)/脑衰反应调节蛋白-2(CRMP2)通路的作用.方法 60只出生后7d的SD大鼠,随机分为空气对照组(Air+ NS),氯化锂对照组(Air+LiCl),异氟醚组(Iso+ NS)及异氟醚复合不同剂量氯化锂组(Iso+ LiCl2,Iso+ LiCβ4,Iso+ LiCl8).前2组吸入空气6h,后4组吸入体积分数为0.75％异氟醚6h.吸入异氟醚前30 min,Air+ NS组和Iso+ NS组经侧脑室注射5μL生理盐水(NS),Iso十LiCl2组、Iso+ LiCl4组、Iso+ LiCl8组以及Air+ LiCl组分别经侧脑室注射浓度为20、40、80、80 mmol·L-1氯化锂溶液5μL.麻醉结束后即刻蛋白印迹法检测海马激活型caspase-3,磷酸化GSK-3β(p-GSK-3β),GSK-3β,磷酸化CRMP2(p-CRMP2)和CRMP2蛋白表达变化(n=5).麻醉结束后2h,TUNEL检测海马CA1区神经细胞凋亡(n=5).结果 80 mmol·L-1LiCl可明显减少异氟醚诱导的海马激活型caspase-3蛋白表达(P＜0.01)以及TUNEL阳性细胞数目增加(P＜0.01).与Air+ NS组比较,Iso+ NS组p-GSK-3β表达减少,p-CRMP2表达增加,有统计学意义;与Iso+ NS组比较,Iso+ LiCl8组p-GSK-3β表达增加了41.03％ (P ＜0.05),p-CRMP2表达减少了23.64％(P＜0.05).结论 氯化锂预处理能通过减少海马细胞凋亡来减轻异氟醚对发育期幼鼠的神经毒性作用,抑制GSK-3β/CRMP2通路的激活可能是保护作用的机制之一.
关键词： 异氟醚 氯化锂 凋亡 糖原合成酶激酶-3β 脑衰反应调节蛋白-2 -
五子降糖方对2型糖尿病模型大鼠肝组织糖原及AKT/GSK-3β信号通路的影响
目的 观察五子降糖方对2型糖尿病模型大鼠肝组织糖原及丝氨酸-苏氨酸激酶(AKT)/糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)信号通路的影响,初步探讨其改善糖代谢的分子机制.方法 高脂饮食喂养联合腹腔注射小剂量链脲佐菌素建立2型糖尿病大鼠模型,大鼠随机分为模型组、二甲双胍组、五子降糖方低、中、高剂量组(给予折合生药剂量分别为3.5、7.0、14.0 g/kg),另设正常组.正常组及模型组灌胃纯净水,其他各组大鼠分别灌胃相应的药物,干预6周.6周后处死大鼠,测定肝组织中糖原的含量,AKT、GSK-3β的蛋白表达量.结果 与正常组比较,模型组大鼠空腹和餐后2h血糖升高,肝脏组织糖原含量降低、AKT蛋白含量及其磷酸化水平降低、GSK-3β蛋白含量增加而其磷酸化水平降低(P＜0.05)；与模型组比较,五子降糖方各组大鼠空腹及餐后2h血糖降低,肝脏组织糖原含量增加、AKT蛋白含量及其磷酸化水平升高、GSK-3蛋白含量降低且其磷酸化水平升高(P＜0.05).结论 五子降糖方可改善2型糖尿病模型大鼠糖代谢、增加肝脏糖原含量,其作用机制可能与提高肝脏AKT及GSK-3β丝氨酸位点磷酸化水平有关.
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马钱苷通过抑制蛋白磷酸酶2A催化亚基C磷酸化降低tau蛋白过度磷酸化
目的 探讨马钱苷对tau蛋白过度磷酸化的影响及其作用机制.方法 马钱苷(500、1 000 μmol/L)与入神经母细胞瘤细胞株(SK-N-SH细胞)预孵育24 h,之后加入PI3K抑制剂Wortmannin(WT)及PKA抑制剂GF-109203X(GFX)与SK-N-SH细胞孵育3h,采用Western blotting方法观察马钱苷对tau蛋白在Thr205、Thr217、PHF-1位点的磷酸化,GSK-3β-Ser9、GSK-3β、PP2A催化亚基C(protein phosphatase 2A catalytic subunit C,PP2Ac)磷酸化/甲基化及PP2Ac的表达.结果 WT/GFX明显抑制p-GSK-3β-ser9的表达,引起GSK-3β活性增高,从而导致tau蛋白Thr205、Thr217、PHF-1位点高度磷酸化.马钱苷能够明显抑制模型细胞tau蛋白在Thr205、Thr217、PHF-1位点的过度磷酸化,但是不能增高p-GSK-3β-ser9的表达,提示马钱苷抑制tau蛋白磷酸化的作用不是通过影响GSK-3β通路实现的.但是实验显示马钱苷能够抑制PP2A催化亚基C Tyr307位点的磷酸化,但对Leu309位点甲基化无影响.结论 马钱苷能够抑制tau蛋白过度磷酸化,机制可能与其抑制PP2A催化亚基C Tyr307位点的磷酸化,提高PP2A活性有关,与GSK-3β通路无关.
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糖原合成酶激酶-3β与肿瘤的研究进展
糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)是普遍存在于真核细胞中的一种多功能丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,参与Wnt/β-catenin、NF-κB及PI3K/AKT/mTOR等多条细胞信号转导通路.近年研究发现,GSK-3β除了参与糖代谢外,还参与细胞内多种生理病理过程,如细胞的分化、增殖和凋亡等,其活性异常与多种肿瘤的发生、发展、侵袭、转移和预后密切相关,已成为许多疾病治疗的靶点.
关键词： 糖原合成酶激酶-3β 肿瘤 细胞信号转导通路 治疗靶点 -
糖原合成酶激酶-3β和心肌肥厚的负性调控
心肌肥大和心力衰竭是大多数心血管疾病的严重和终末阶段,研究其信号转导机制具有重要意义.目前,治疗心肌肥厚的药物主要是以促肥厚的信号分子作为靶点[1,2],例如血管紧张素转化酶抑制剂、β肾上腺素阻断剂,能够减少肥厚反应,但不能完全逆转肥厚.因此,开发另一类作用机制完全不同但能有效阻断病理性心肌肥厚的药物就显得十分必要.日益增多的证据表明,探索心肌肥大的负性调控机制和研究心肌肥大的致病机制一样重要.已经被报道的心肌肥大的负性调控分子包括MCIP1、ICER、SOCS3、PPAR和GSK3B等[3].糖原合成酶激酶(GSK)3β调节多种细胞功能,包括代谢、细胞生长和死亡、基因表达、蛋白质翻译、细胞支架的完整性等.GSK3β可能通过多种机制来影响心肌肥厚的发生.本文将心肌肥大的负性调控分子和心肌肥大时GSK313的新研究进展综述如下.
关键词： 心肌病 肥厚 信号传导 负性调控 糖原合成酶激酶-3β -
LiCl通过抑制GSK-3β的活性防治AD的研究
目的：探讨氯化锂（LiCl）通过调节糖原合成激酶-3β（GSK-3β）的活性防治AD的机制。方法通过LipofectaminTM2000将pBACE1-mychis和pAPPswe质粒瞬时转染入SHSY5Y细胞中，LiCl处理细胞后12小时收集细胞总蛋白，采用Western blot分别检测GSK-3β、β-链蛋白（β-catenin）和核内转录因子CyclinD1的表达，并通过MTS、Brdu实验观察LiCl对细胞增殖的影响。结果 LiCl处理后，细胞内GSK-3β蛋白的表达明显减少；β-catenin、CyclinD1的表达明显增加，LiCl明显抑制转染后SHSY5Y细胞的生长，较未处理组相比，MTS实验、Brdu实验的抑制率分别为23.45%、22.58%。结论 GSK-3β是一个潜在的AD治疗靶点，LiCl可以通过抑制其活性发挥保护细胞的作用。
关键词： 阿尔茨海默病 LiCl 糖原合成酶激酶-3β -
人参皂苷Rh2通过激活GSK-3β降解β-catenin发挥抗肝癌作用研究
目的 探讨人参皂苷Rh2抗肝癌作用机制.方法 HE染色观察HepG2和HepG2-β-catenin荷瘤裸鼠肿瘤组织的细胞形态;免疫组化检测GSK-3β、β-catenin和MMP-3表达;ELISA法检测肿瘤细胞GSK-3β活性;PCR检测GSK-3β、β-catenin、Bcl-2、Cyclin D1、Bax和MMP-3基因的表达;Western blotting蛋白印迹法检测GSK-3β和β-catenin的表达.结果 HepG2组和HepG2-β-catenin组荷瘤裸鼠肿瘤细胞核成异型性,占整个细胞比例大,但HepG2-β-catenin组更明显.HepG2-β-catenin+人参皂苷Rh2组和HepG2+人参皂苷Rh2组肿瘤细胞胞核固缩,出现大量破碎细胞,而HepG2+人参皂苷Rh2组肿瘤细胞核固缩及破碎细胞更明显.免疫组化结果显示人参皂苷Rh2诱导HepG2及HepG2-β-catenin荷瘤裸鼠后,GSK-3β表达增强,β-catenin、MMP-3表达降低;HepG2+人参皂苷Rh2组中β-catenin、MMP-3表达弱于HepG2-β-catenin+人参皂苷Rh2组,而GSK-3β表达则无明显差异.ELISA结果显示,人参皂营Rh2诱导HepG2及HepG2-β-catenin荷瘤裸鼠后,GSK-3β的活性均升高.PCR结果显示,HepG2+人参皂苷Rh2组中β-catenin、Cyclin D1、Bcl-2基因表达弱于HepG2-β-catenin+人参皂苷Rh2组,Bax基因表达增强更明显,而GSK-3β基因表达无明显差异.Western blotting结果显示,HepG2+人参皂苷Rh2组中β-catenin蛋白表达弱于HepG2--catenin+人参皂苷Rh2组,而GSK-3β蛋白表达无明显差异.结论 人参皂苷Rh2对肝癌的抑制作用是通过激活GSK-3β降解β-catenin而实现的,且能抑制肿瘤的转移.
关键词： 人参皂苷rh2 HepG2 糖原合成酶激酶-3β β-链蛋白 肝癌 -
基于网络药理学的脑震宁颗粒治疗脑外伤的机制分析
目的 借助网络药理学技术预测脑震宁颗粒主要成分的潜在作用靶点,探讨其治疗脑外伤多成分-多靶点-多通路的作用机制.方法 依据反向分子对接服务器(DRAR-CPI)和CooLGeN数据库预测和筛选脑震宁颗粒主要成分的作用靶点;采用Cytoscape软件ClueGO插件对靶点进行GO富集分析,借助生物信息学注释数据库(DAVID)对获取的靶点信息进行KEGG通路注释分析;采用Cytoscape软件构建药材-成分-靶点-通路-疾病网络.结果 脑震宁颗粒的33个主要成分涉及丝裂原活化蛋白激酶-1 (MAPK1)、胱天蛋白酶-3(CASP3)、糖原合成酶激酶-3β (GSK3B)等34个靶点,GO富集分析和KEGG通路注释分析提示脑震宁颗粒可作用于活性氧的生物合成、平滑肌细胞增殖等生物过程,以及磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)、MAPK通路、JAK/STAT、mTOR等信号转导通路;网络分析显示脑震宁颗粒的作用机制可能与调控氧化应激、抑制炎症反应和神经细胞凋亡、调节脑内硫化氢生成和纤溶酶原(PLG)活性、改善认知功能及脑外伤后抑郁等相关.结论 揭示了脑震宁颗粒多成分、多靶点、多通路的作用机制,为进一步深入研究脑震宁颗粒药效物质基础及作用机制奠定了基础.
关键词： 脑震宁颗粒 网络药理学 脑震荡 脑外伤 作用机制 丝裂原活化蛋白激酶-1 胱天蛋白酶-3 糖原合成酶激酶-3β -
糖原合成酶激酶3β活性调节机制的分子动力学模拟
目的:探讨研究糖原合成酶激酶(GSK-3β)的活性调节机制.方法:利用Desmond 9.0软件对GSK-3β-轴素复合物和GSK-3β-FRATtide复合物进行分子动力学模拟研究.结果:与GSK-3β-轴素复合物相比,在GSK-3β-FRATtide复合物中,Lys205同Glu211、Asn213之间的氢键作用消失,Lys205与Glu211不能形成稳定的盐键；FRATtide的Arg219与GSK-3β的Asp264,GSK-3β的Gly259与Arg220之间能形成稳定的氢键.此外,Phe67和Phe93显示出位置的偏移.这些都将导致GSK-3β活性环的构象变化进而抑制GSK-3β的催化活性.结论:GSK-3β的活性调节是通过改变其活化环构象来实现的.
关键词： 糖原合成酶激酶-3β Wnt信号通路 轴素 FRATtide 分子动力学模拟 -
Akt/GSK-3β/eNOS通路在藏红花酸保护离体大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用
目的：研究藏红花酸（CRO）对离体大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用，探讨其与丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶（Akt）/糖原合成酶激酶（GSK）-3β/一氧化氮合酶（eNOS）信号通路的关系。方法 SD大鼠40只，随机数字表法均分为正常（N）组、缺血再灌注（IR）组及5、10、15 mg/L加药（CRO1、CRO2、CRO3）组，比较再灌注30 min时各组心率（HR），冠脉流量（CF），左心室内压测定(LVDP、LV+dp/dtmax、LV-dp/dtmax)。灌流结束TTC心肌染色评估梗死范围，分光光度法测定肌浆乳酸脱氢酶（LDH）和肌酸激酶（CK-MB)；Western blot检测各组心肌组织内Akt、磷酸化的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(p-Akt )、GSK-3β、磷酸化的糖原合成酶激酶(p-GSK)-3β、eNOS、磷酸化的一氧化氮合酶（p-NOS）。结果 IR组再灌注30 min时HR、CF、LVDP、LV+dp/dtmax、LV-dp/dtmax较N组及加药组降低，心肌梗死面积较加药组增大，LDH、CK-MB表达较N组及加药组增加（均P<0.05），CRO3组再灌注指标较CRO1组升高，梗死面积降低，LDH、CK-MB表达减少（P<0.05）。IR组Akt、GSK-3b及eNOS较N组及加药组的表达差异无统计学意义，但p-Akt、p-GSK-3β及p-NOS与N组及加药组降低，且CRO3组较CRO1组增加（均P<0.05）。结论藏红花酸能够减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤，其作用机制可能与激活Akt/GSK-3β/eNOS通路并影响其磷酸化水平有关。
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糖原合成酶激酶-3β在瑞芬太尼诱发大鼠脊髓背角神经元NMDA受体微小兴奋性突触后膜电流中的作用
目的 探讨糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)在瑞芬太尼诱发大鼠脊髓背角神经元NMDA受体微小兴奋性突触后膜电流(mEPSCs)中的作用.方法 取出生14～ 18 d的Wistar大鼠24只,体重50 ～ 60 g,制备腰段脊髓切片,取切片144张,采用随机数字表法,将其分为4组(n=36):对照组(C组):置入人工脑脊液中培养；甘氨酸组(G组):置入含甘氨酸(浓度0.24 μmol/L)的人工脑脊液中孵育；瑞芬太尼组(R组):置入含瑞芬太尼(浓度为4 nmol/L)的人工脑脊液中孵育；瑞芬太尼+GSK-3β抑制剂TDZD-8组(RT组):置入含瑞芬太尼和TDZD-8(浓度分别为4 nmol/L和10 μmol/L)的人工脑脊液中孵育.各组孵育60 min后应用全细胞膜片钳技术记录脊髓背角神经元NMDA受体mEPSCs的幅值和频率.结果 与C组比较,R组mEPSCs的幅值和频率升高(P＜0.01),G组和RT组差异无统计学意义(P＞ 0.05)；与R组比较,RT组mEPSCs幅值和频率降低(P＜0.01).结论 脊髓背角神经元GSK-3β参与了瑞芬太尼增强NMDA受体mEPSCs的作用,提示其可能参与了瑞芬太尼诱发的痛觉过敏.
关键词： 哌啶类 痛觉过敏 受体 N-甲基-D-天冬氨酸 糖原合成酶激酶-3β 脊髓 -
GSK-3β在移植肾肾组织的表达及其意义
目的:探讨糖原合成酶激酶在移植肾组织中的表达及其在慢性移植肾失功发病机制中的意义.方法:收集解放军第181医院2007年01月~2009年12月因蛋白尿或肌酐升高而行肾脏穿刺术的肾移植患者的肾穿标本.其中病理诊断符合慢性移植肾失功的病例有28例,包括男21例,平均年龄(45±10)岁,女7例,平均年龄 (42±9)岁,肾穿时间为肾移植术后1年～9年,平均3.5年,血清肌酐(206±122)μmol/L.利用免疫组织化学技术和计算机真彩色图像分析系统(imagepro-plus 6.0)半定量检测28例慢性移植肾失功患者移植肾组织中糖原合成酶激酶的表达情况,计算GSK表达的平均面积和平均累计光密度,分析GSK-3β表达水平与移植肾组织炎症细胞浸润、间质纤维化/小管萎缩程度之间的关系.5例正常肾组织作为对照组.结果:慢性移植肾失功患者肾组织中GSK-3β的表达比正常肾组织明显增加,并随肾组织炎症细胞浸润、间质纤维化、小管萎缩程度而递增.结论:糖原合成酶激酶的高表达与移植肾肾组织炎症细胞浸润、间质纤维化/小管萎缩存在正相关关系.
关键词： 肾移植 糖原合成酶激酶-3β 炎症细胞浸润 间质纤维化/小管萎缩 -
GSK-3β在胃癌中的表达及其与5-氟尿嘧啶、顺铂药物敏感性之间的关系
目的 研究胃癌中糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)蛋白表达及其与5-氟尿嘧啶、顺铂药物敏感性之间的关系. 方法 收集胃癌新鲜标本50例,提取组织总蛋白,采用蛋白印迹实验(Western blot)检测胃癌及癌旁组织GSK-3β蛋白的表达情况.四甲基噻唑蓝(MTT)法检测不同胃癌组织对5-氟尿嘧啶及顺铂的药物敏感性,分析GSK-3β蛋白的表达与临床病理、药物敏感性之间的关系. 结果 与癌旁正常组织相比,胃癌组织中GSK-3β的表达显著降低(P＜0.05),并且与患者的年龄、分化程度、TNM分期及淋巴结转移有关(P＜0.05).GSK-3β在5-氟尿嘧啶及顺铂耐药病例中的表达量明显低于敏感病例,差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 GSK-3β的表达下调可能参与了胃癌发生、发展的病理过程,并且与化疗药物耐药性有关.
关键词： 糖原合成酶激酶-3β 胃癌 原代培养 四甲基噻唑蓝 免疫印迹 -
炎性微环境中糖原合成酶激酶-3β对颌骨来源骨髓间充质干细胞成骨分化影响研究
目的 探讨炎性微环境中糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)对颌骨来源间充质干细胞(JBMMSCs)成骨分化的影响.方法 应用慢病毒(shRNA)转染技术在JBMMSCs中敲减GSK-3β表达,利用白细胞介素(IL)-lβ和肿瘤坏死因子(TNF)-α模拟炎症微环境.成骨诱导后利用Western Blot检测成骨相关蛋白表达,茜素红染色检测成骨效率.结果 敲减GSK-3β表达可增强JBMMSCs成骨诱导后的成骨相关蛋白表达,成骨效率增强.炎症微环境可显著下调正常JBMMSCs成骨诱导后的成骨相关蛋白表达,成骨效率明显降低,而对敲减GSK-3β表达的JBMMSCs成骨诱导后的成骨相关蛋白表达下调较弱,成骨效率降低较轻.结论 抑制GSK-3β既可促进JBMMSCs的成骨作用,又可减轻炎性微环境对JBMMSCs成骨的不良影响,为提高炎症状态下JBMMSCs促进组织再生提供了新的治疗靶点.
关键词： 糖原合成酶激酶-3β 炎性微环境 成骨诱导 -
Tau蛋白激酶及其抑制剂的研究进展
阿尔茨海默病是一种常见的原发性中枢神经系统退行性疾病,其病理学机制较为复杂.研究发现,过度磷酸化的Tau蛋白聚集是阿尔茨海默病神经病理学损伤的一个标志性特征,因此利用药物调节Tau蛋白的过度磷酸化成为治疗阿尔茨海默病的一种有效策略.本文重点介绍了影响Tau蛋白过度磷酸化的两种重要蛋白激酶GSK-3β(糖原合成酶激酶-3β)和CDK5(细胞周期素依赖蛋白激酶5),以及近年来针对这两种激酶设计的不同结构类型的小分子抑制剂,并对其构效关系进行综述.
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逍遥散对阿尔茨海默病大鼠海马CA3区PP-2 A、GSK-3β表达的影响
目的：探讨逍遥散对阿尔茨海默病大鼠海马CA3区PP-2A、GSK-3β表达的影响。方法：将清洁级大鼠随机分为4组，其中模型组、西药组、中药组均采用D-gal 腹腔注射和A-β1～42 peptide 双侧海马注射联合造模，生理组仅采用等体积灭菌生理盐水腹腔及海马注射造模。造模完成后，生理组、模型组均用生理盐水灌胃，西药组和中药组分别用奥拉西坦溶液和逍遥散煎剂灌胃，四组灌胃体积均为5 ml/kg，每日1次，连续28 d。灌胃结束后即分离鼠脑，分组标记放入4℃4％戊二醛固定液玻璃容器密封，4℃保存。修块，切取海马区组织，石蜡包埋，切片。 PP-2A稀释度为1∶200，GSK-3β稀释度为1∶150。图像采用Image-pro Plus 5．0分析系统分析，数据采用SPSS11．5统计软件分析，4组间比较用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD-t检验，检验水准α＝0．05。结果：PP-2A阳性细胞数、平均光密度及阳性面积、积分光密度等指标的表达，在逍遥散灌胃干预后与模型组比较明显增加（P＜0．01）；GSK-3β以上各项指标在经逍遥散灌胃后较模型组明显减少（P＜0．01）。结论：逍遥散可以上调PP-2A表达和下调GSK-3β表达，可能对凝聚态A-β1～42 peptide诱导的海马Tau蛋白过度磷酸化有一定的抑制作用。
关键词： 逍遥散 阿尔茨海默病 海马CA3区 蛋白磷酸酶-2A 糖原合成酶激酶-3β -
逍遥散对阿尔茨海默病模型大鼠海马mRNA表达的影响
目的：探讨疏肝理气方剂逍遥散对阿尔茨海默病（ AD）模型大鼠海马 mRNA 表达的影响。方法将4～5个月鼠龄，体重（250±20） g的清洁级SD雄性大鼠随机分为4组，其中模型组、西药组、中药组采用D－gal腹腔注射和 Aβ1～42双侧海马注射联合造模；生理组采用等体积灭菌生理盐水按上述方法象征性造模。造模完成后，生理组、模型组以生理盐水灌胃，西药组和中药组分别采用奥拉西坦溶液和逍遥散煎剂灌胃。四组均每日1次，连续灌胃28 d，用药体积0．5 ml／100 g。结果经灌胃干预后，中药组水迷宫成绩较模型组提高明显（P＜0．01）；大鼠海马中蛋白磷酸酶－2A基因表达明显增加（P＜0．01），细胞依赖性蛋白激酶－5、糖原合成酶激酶－3β的基因表达明显减少（P＜0．01）。结论逍遥散通过上调蛋白磷酸酶－2A基因表达和下调细胞依赖性蛋白激酶－5、糖原合成酶激酶－3β基因表达，对凝聚态Aβ1～42 peptide诱导的海马Tau蛋白过度磷酸化有一定抑制作用，对大鼠AD模型记忆能力的改善起到了一定影响。
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氯化锂对高糖致乳鼠心肌细胞损伤的保护作用及其机制
目的:观察不同浓度氯化锂(LiCl)对高糖环境培养下乳鼠心肌细胞的影响,探讨经典Wnt信号途径对高糖致乳鼠心肌细胞损伤的保护作用.方法:40只1～3 d SD乳鼠,原代心肌细胞培养后,随机分为对照组、高糖损伤组、氯化锂5、10 mmol·L~(-1)组.倒置显微镜下观察心肌细胞形态学改变,TUNEL法检测心肌细胞凋亡,免疫细胞化学方法检测心肌细胞磷酸化糖原合成酶激酶-3β(p-GSK-3β)、β-连环蛋白 (β-catenin)的表达变化.结果:与高糖损伤组比较,LiCl 5、10 mmol·L~(-1)组心肌细胞的搏动频率趋于正常.心肌细胞的凋亡减少(P<0.05),p-GSK-3β和β-catenin的表达增多(P<0.05).随着LiCl浓度的增加,β-GSK-3β和β-catenin的表达增强.结论:LiCl明显抑制高糖致乳鼠心肌细胞的损伤,该效应可能与经典Wnt信号途径的激活有关.
关键词： 氯化锂 糖原合成酶激酶-3β β连环蛋白 Wnt信号途径 心肌细胞 -
急性心肌梗死介入治疗患者糖原合成酶激酶-3β和心钠素前体肽的水平变化及舒血宁的干预作用
目的 观察急性心肌梗死(AMI)经皮冠状动脉内介入治疗(PCI)患者血液糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)及心钠素前体肽(ProANF)的水平变化及舒血宁注射液的干预作用.方法 将45例AMI介入治疗患者随机分为治疗组(23例,在PCI治疗基础上加用舒血宁注射液40 mL静脉注射,每天1次,共7 d)和对照组(22例,PCI治疗),另取20例健康人血为正常对照.分别应用PCR法、WB法和放射免疫法检测患者入院时及术后1、3、7 d的血液GSK-3β、ProANF1-30、ProANF31-67和ProANF79-98水平.结果 治疗组和对照组患者入院、术后1 d GSK-3β mRNA及蛋白水平较正常值明显升高,ProANF1-30、ProANF31-67和ProANF79-98水平显著升高,术后3 d和7 d治疗组各项指标均显著低于对照组.结论 AMI介入治疗患者血液GSK-3β及ProANF水平呈先上升后下降的趋势,舒血宁注射液具有心肌保护作用,能减轻再灌注损伤.
关键词： 舒血宁注射液 急性心肌梗死 糖原合成酶激酶-3β 心钠素前体肽 -
锂剂和氯胺酮对N2a细胞mTOR及GSK-3β的影响
目的 观察锂剂和氯胺酮分别对N2a细胞中西罗莫司靶蛋白(mTOR)及糖原合酶激酶-3β( GSK-3β)的影响.方法 将N2a细胞随机分为3组(n=6),分别加入DMEM培养液(C组)、3μmol/L氯化锂(L组),1μmol/L氯胺酮(K组),孵育2d后采用Western Blotting分别检测mTOR和GSK- 3β表达.结果 与C组相比,L组和K组mTOR表达显著上调,GSK- 3β表达显著下调(P＜0.05).结论 锂剂和氯胺酮可上调mTOR,下调GSK- 3β.
关键词： 锂 氯胺酮 西罗莫司靶蛋白 糖原合成酶激酶-3β N2A细胞
