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贵州十种民族药的应用研究
黑骨藤、大乌泡、透骨香、小花清风藤、珊瑚姜、飞龙掌血、蓝布正、马鞭草、蜘蛛香、五倍子是10种较为常用的贵州民族草药.本文对其开发应用现状,以及来源、化学及药理研究、成分制剂构成及其功能、用法、用量,进行较为系统的文献挖掘研究,为进一步探索采用民族药防病治病的实用性、有效性和开发应用前景奠定了基础.
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一测多评法测定透骨香中儿茶素、白珠树苷、滇白珠苷A的含量
目的:建立透骨香中儿茶素、白珠树苷、滇白珠苷A的一测多评含量测定方法.方法:采用高效液相色谱,以中药透骨香为研究对象,以儿茶素为内参物,建立其与白珠树苷、滇白珠苷A的相对校正因子,并进行含量测定,实现一测多评.同时采用外标法测定28批透骨香中儿茶素、白珠树苷、滇白珠苷A的含量,验证一测多评法的准确性.结果:建立的校正因子重复性良好,采用校正因子计算的含量值与外标法实测值之间无显著差异.结论:以外标法测定儿茶素,利用相对校正因子实现对白珠树苷和滇白珠苷A测定是准确的、可行的,一测多评法可以用于特定的不同类型成分间的测定.
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HPLC测定滇白珠药材中槲皮素的含量
滇白珠为杜鹃花科植物滇白珠Gaultheria yunnanensis(Franch.)Rehd的根,其植物亦称满山香、透骨草、老鸦泡、透骨香[1,2],产于我国云南、四川、贵州、湖北、湖南、广东、广西、江西等地区,质量标准在《贵州省中药材、民族药材质量标准》、《中药大辞典》和《中国民族药志》中均有记载.它具有祛风除湿、活血化瘀、通络止痛、清热解毒等功效,用于治疗风湿性关节炎、关节肿痛、跌打损伤、慢性气管炎和风寒感冒等[3,4].
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透骨香药材HPLC指纹图谱研究
目的 建市透骨香药材的HPLC指纹图谱,为科学评价药材质量提供可靠方法.方法 采用Hypersil C18色谱柱;流动相:乙腈-0.1%醋酸梯度洗脱;体积流量:1.0 mL/min;柱温20℃;检测波长为220 nm;分析时间53 min.测定了不同产地以及同一产地不同采收时间和同一采收时间不同年份共17批透骨香药材.使用计算机辅助相似度评价软件进行数据处理.结果 建立了透骨香药材HPLC-DAD色谱指纹图谱,标示出18个共有峰.相似度计算发现17批透骨香指纹图谱相似度均大于0.910.不同来源透骨香药材化学组成相似,其相对比例具有差异.结论 建立的HPLC指纹图谱可用于透骨香的质量评价.
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透骨香挥发油化学成分的SPME-GC-MS分析
目的:分析中药透骨香挥发油成分.方法:利用固相微萃取/气相色谱/质谱(SPME/GC/MS)联用技术对透骨香挥发油的化学成分进行了研究.结果:共鉴定出34种成分,占挥发油总成分的89.52%.结论:透骨香挥发油主要化学成分是水杨酸甲酯 (74.18%)、十六烷(1.59%)、十五烷(1.38%)、2-羟基-4-甲氧基苯乙酮 (1.09%)等.
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不同炮制方法对透骨香抗炎镇痛作用及水杨酸甲酯苷含量的影响
目的 探讨不同炮制方法对透骨香抗炎、镇痛作用及水杨酸甲酯苷含量的影响.方法 分别采用二甲苯致小鼠耳廓炎症肿胀法、热板法比较生品及各炮制品的抗炎、镇痛作用；采用双波长分光光度法测定透骨香生品、盐制品、醋制品、酒制品中水杨酸甲酯苷的含量.结果 透骨香各给药组均能显著降低小鼠耳廓肿胀度,提高肿胀抑制率(P＜0.05),其作用强弱顺序为:醋制组＞清炒组＞盐制组＞生品组＞酒制组.生品组、醋制组、清炒组、酒制组均有镇痛作用(P＜0.05),生品组作用较强,清炒组在药后1h作用强.炮制品中水杨酸甲酯苷的含量与生品比较均降低,其中酒制含量较高,盐制含量低.结论 不同炮制方法对透骨香抗炎、镇痛作用及水杨酸甲酯苷含量有显著影响,透骨香用于镇痛抗炎宜采用清炒炮制方法.
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相同试剂对不同产地的透骨香种子发芽率的影响
目的 通过对不同产地透骨香种子的发芽率、发芽势等方面的研究,筛选出佳产地透骨香种子,为后续的育苗研究提供相应的参考数据.方法 采用培养皿发芽试验,实验组用10mg/mlNaOH溶液对不同产地的透骨香种子处理1h;待种子露白后,记录并计算发芽率和发芽势.以发芽势、发芽率及发芽指数三个指标进行评价.结果 产地6的发芽率高为76％,产地4的低,仅为16％.结论 通过对6个产地进行试验及数据分析发现产地6的种子发芽率等各项指标佳.
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不同采收期和部位的黔产透骨香中槲皮素含量测定
目的 通过对不同采收期和部位的黔产民族药透骨香槲皮素的含量进行测定,为拟定黔产透骨香药材质量标准提供依据.方法 采用HPLC法对不同采收期和部位的黔产透骨香中槲皮素含量进行测定.结果 不同采收期药材中的含量成分变化不大,但不同部位中存在有明显的差别.结论 综合考虑活性成分含量及对药材的资源保护利用来说,建议使用该药材的地上部分.
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透骨香不同部位显微特征研究
目的 对透骨香不同部位的显微构造进行研究, 为其药材鉴别提供科学依据.方法 采用生药显微鉴定技术观察、描述各部位的显微特征.结果 进一步详细阐明了透骨香不同部位根、茎、叶、花、果实的组织横切面及粉末显微特征.结论 该研究结果可为透骨香不同部位的显微鉴定提供依据.
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反相高效液相色谱法测定透骨香中槲皮苷的含量
目的:建立测定透骨香中槲皮苷含量的高效液相色谱法.方法:采用Benetnach C18(4.6mm×15mm,5μm)填料色谱柱,流动相为0.01mol·L-1磷酸二氢钾—甲醇—冰醋酸(体积比65:35:0.7),流速1.0mL·min-1,检测波长为254nm,柱温30℃.结果:槲皮苷在(0.044～0.154)μg范围内与峰面积线性关系良好(r=0.999 3),平均加样回收率为101.25％,RSD为1.92％.结论:该方法快速、简便,专属性强,重现性好,准确度高,可用于透骨香中槲皮苷含量的测定.
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苗药透骨香抗急性痛风性关节炎作用的实验研究
目的:考察苗药透骨香治疗急性痛风性关节炎的作用和可能机理.方法:制备急性痛风性关节炎大鼠模型,并分为5组,分别为模型组、阿司匹林(300 mg/kg)阳性对照组及透骨香低(4 g/kg)、中(8 g/kg)、高(16g/kg)剂量组,另设正常对照组.所有大鼠连续给药10 d,检测步态评分、足跖肿胀体积、痛阈、踝关节关节液中K+、DA、NE、5-HT含量及血清PGE2、LTB4含量.结果:与正常对照组比较,造模后1～10d模型组的步态评分、足趾肿胀体积及造模后10d踝关节关节液K+、DA、NE、5-HT含量和血清PGE2、LTB4含量显著升高(P＜0.05),痛阈显著降低(P＜0.05),提示急性痛风性关节炎模型制备成功,与模型组比较,透骨香各组步态评分、足跖肿胀体积及造模后10d踝关节关节液K+、DA、NE、5-HT含量和血清PGE2、LTB4含量不同程度降低,痛阈不同程度升高,其作用呈剂量依赖性.结论:苗药透骨香具有治疗急性痛风性关节炎的作用,能降低急性痛风性关节炎模型大鼠踝关节关节液K+、DA、NE、5-HT及血清PGE2、LTB4含量.
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壮药透骨香对胶原诱导型关节炎大鼠的干预效果及作用机制
目的 探讨壮药透骨香对类风湿性关节炎大鼠的干预效果及作用机制.方法 将70只SD大鼠随机分为空白组10只及胶原诱导型关节炎(CIA)模型组60只.造模21 d后将10只足趾肿胀度较轻的大鼠剔除,将剩余50只大鼠随机分为模型组、雷公藤多苷组及低、中、高剂量透骨香组各10只.雷公藤多苷组给予雷公藤多苷(0.01 g/kg)灌胃,高、中、低剂量透骨香组分别给予73.79 g生药/kg、36.89 g生药/kg、18.45 g生药/kg透骨香水溶部位灌胃,空白组与模型组分别予以等体积蒸馏水灌胃.灌胃28 d后,计算各组大鼠足趾肿胀度,评价关节炎指数(AI),测定大鼠血清及关节组织匀浆中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)水平.结果 造模21 d后,CIA模型组的足趾肿胀度高于空白组(P<0.05).灌胃28 d后,与模型组比较,各干预组大鼠足趾肿胀度降低(P<0.05),雷公藤多苷组和高剂量透骨香组AI降低(均P<0.05).与雷公藤多苷组比较,低、中剂量透骨香组AI升高(均P<0.05),而高剂量透骨香组AI差异无统计学意义(P>0.05),且高剂量透骨香组大鼠AI低于低剂量透骨香组(P<0.05).与空白组比较,模型组大鼠血清与关节组织匀浆中TNF-α、IL-1β水平均升高(P<0.05).灌胃28 d后,与模型组比较,中剂量透骨香组大鼠的血清TNF-α、IL-1β水平及关节组织匀浆中TNF-α水平均降低,高剂量透骨香组大鼠血清及关节组织匀浆中TNF-α、IL-1β水平降低(均P<0.05).结论 壮药透骨香水溶部位对CIA大鼠有治疗作用,且高剂量(73.79 g生药/kg)的透骨香水溶部位效果佳,其作用机制可能与调节炎症因子TNF-α和IL-1β的表达有关.
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滇白珠的药理、毒副作用研究及开发应用进展
目的:了解滇白珠的药理、毒副作用研究和开发应用进展.方法:查阅近年来国内外相关文献,就滇白珠的药理作用、毒副作用及开发应用情况进行归纳和总结.结果:滇白珠具有抗炎镇痛、抑菌、抗氧化、治疗呼吸系统疾病、治疗眩晕和调节胃肠功能等广泛的药理作用.其中,滇白珠抗炎镇痛的作用机制与传统药物不同,主要与抑制机体一氧化氮、肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β(IL-1β)和IL-6等炎症介质的产生、分泌有关;抗氧化作用主要与清除自由基,提高机体超氧化物歧化酶活性有关;抑制炎症介质释放和抗氧化是其治疗呼吸系统疾病的作用基础;其余药理机制尚不清楚.滇白珠毒性较低,安全性较高.已公开的与滇白珠相关的专利较多,几乎涵盖了滇白珠所有的药理作用应用,但目前开发上市的制剂不多,且主要集中在祛风除湿、活血化瘀功效的应用上.结论:滇白珠具有多种药理作用,可对人体多系统、多器官同时进行功能调节与治疗.
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苗药透骨香的质量标准研究
目的:建立透骨香药材的质量标准.方法:采用薄层色谱法(TLC)对药材进行定性鉴别;测定药材水分、总灰分和酸不溶性灰分;采用高效液相色谱法测定药材中水杨酸甲酯的含量:色谱柱为Eclipse XDB-C18,流动相为甲醇-水(62:38,V/V),流速为1.0 mL/min,检测波长为307 nm,柱温为30℃,进样量为10μL.结果:药材的TLC图斑点清晰,分离度好.药材水分为8.2%~10.8%,总灰分为0.9%~4.0%,酸不溶性灰分为0.1%~0.9%.水杨酸甲酯检测进样量线性范围为0.045~0.73μg(r=0.9999);精密度、稳定性、重复性试验的RSD≤1.0%;水杨酸甲酯加样回收率为97.8%~104.3%(RSD=2.6%,n=9).结论:该研究所建标准可用于透骨香药材的质量控制.
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HPLC法测定透骨香中挥发油的含量研究
目的:建立新的透骨香中挥发油含量测定方法.方法:采用HPLC法来测定透骨香中挥发油成分.结果:HPLC法中挥发油在0.08～0.48μl/ml范围内呈良好的线性关系,回收率为101.09％,RSD=1.79％.结论:HPLC法对于水杨酸甲酯含量测定方法稳定,可行.
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六地透骨香叶的质量评价研究
目的:通过对不同产地贵州民族药透骨香叶进行比较研究,对其质量做出客观评价,为透骨香药材质量标准的提升提供依据.方法:对透骨香叶药材进行了水分、灰分、浸出物、挥发油含量等测定.结果:不同产地的透骨香叶水分、灰分、浸出物、挥发油含量等有一定差异.结论:产于贵阳市乌当区水田镇的透骨香质量佳,产于贵阳市花溪区高坡乡的质量较差.
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正交试验设计法优选透骨香提取的工艺研究
目的:优选出透骨香佳提取工艺.方法:采用正交试验设计法,以粉碎度、料液比、提取时间和对照空白组为因素,利用四因素三水平正交表优选佳工艺.结果:透骨香药材中挥发油的佳提取工艺.结论:采用水蒸气蒸馏法提取透骨香中的挥发油,加15倍量水,粉碎为直径约1cm,提取时间12h,方法可靠,易行.
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不同产地透骨香叶的质量评价
目的:对不同产地透骨香叶的质量进行综合评价.方法:用气相色谱法测定五个产地透骨香叶中水杨酸甲酯的含量,并考察样品水分、灰分、浸出物等药材常规理化实验项目.结果:不同产地的透骨香叶中水杨酸甲酯的含量差异显著.结论:产于贵阳市乌当区水田镇的透骨香质量较好,而产于贵阳市花溪区高坡乡的透骨香质量较差.
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透骨香微乳镇痛抗炎作用的实验研究
目的:对透骨香微乳新剂型进行镇痛抗炎药效研究.方法:将透骨香微乳制剂分高、中、低剂量组;以水杨酸甲酯软膏为阳性对照组、生理盐水为空白对照组,经皮给药.采用热板法和扭体法分别测定小鼠痛阈值；用二甲苯造小鼠耳廓肿炎症模型,测定其药物抗炎作用.结果:实验结果提示透骨香微乳对不同方法的模型小鼠均有镇痛抗炎作用.结论:透骨香微乳性质稳定经透皮给药吸收好,具有明显的镇痛及抗炎作用.
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不同干燥方式对透骨香药材水杨酸甲酯含量的影响
目的:比较阴干、晒干等干燥方式对透骨香不同药用部位挥发油中水杨酸甲酯含量的影响,研究透骨香药材适宜的干燥方式.方法:采用水蒸气蒸馏法提取挥发油,再用气相色谱法对不同干燥方式的透骨香药材挥发油中水杨酸甲酯含量进行测定.结果:阴干的透骨香药材中水杨酸甲酯含量均高于晒干药材的含量,阴干叶(3.98 μg/g)＞晒干叶(3.84μg/g)、阴干茎(4.48μg/g)＞晒干茎(3.97 μg/g)、阴干根(4.85μg/g)＞晒干根(4.21 μg/g).结论:该方法检测时间短,准确度高,重现性好,可为其产地加工提供参考.
