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坤宝丸对去卵巢小鼠睡眠的影响
目的：研究中药坤宝丸治疗去卵巢小鼠睡眠障碍的实验疗效。方法：选用健康KM小鼠60只，按照体重随机均衡的原则分为4组：假手术组、模型组、地西泮组、坤宝丸组，每组15只。除假手术组外，其余各组均行双侧去卵巢手术，假手术组不摘除卵巢，只剪掉卵巢周围的小部分脂肪组织。坤宝丸组小鼠于术后28天灌胃给予坤宝丸1.667g·kg-1，每天1次，连续28天；地西泮组小鼠于测试前1h单次灌胃给药，给药剂量为1.25mg·kg-1。观察坤宝丸对去卵巢小鼠自主活动、戊巴比妥钠诱导的睡眠及子宫系数的影响。结果：与假手术组相比，小鼠摘除双侧卵巢后自主活动次数和站立次数显著增加（P约0.01），地西泮能够显著降低去卵巢小鼠的自主活动次数（P约0.01），同时可减少小鼠的站立次数，但无统计学差异；坤宝丸具有减少去卵巢小鼠自主活动的趋势，但是作用不显著，对小鼠的站立次数无明显影响。地西泮能够显著延长戊巴比妥钠诱导的去卵巢小鼠睡眠时间（P约0.01），坤宝丸能延长戊巴比妥钠诱导的去卵巢小鼠的睡眠时间，缩短睡眠潜伏期，但均无统计学差异。坤宝丸和地西泮对去卵巢小鼠的子宫系数无明显影响。结论：坤宝丸具有改善去势小鼠睡眠障碍的作用，但作用较温和。
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G蛋白耦联受体30对去卵巢小鼠子宫中toll样受体4分布与表达的影响
目的 探讨雌激素膜性受体G蛋白耦联受体30(GPR30)在子宫免疫中的作用.方法 将80只小鼠分为假手术(sham)组、卵巢摘除(OVX)组、OVX注射0.1nmol、0.5nmol和2.5nmol GPR30激动剂G1组及OVX小鼠注射0.1 nmol、0.5nmol和2.5nmol GPR30拮抗剂G15组,分别采用免疫组织化学SP法及实时定量PCR技术,对子宫中toll样受体4(TLR4)的分布及TLR4 mRNA的表达量进行研究.结果 TLR4免疫反应阳性产物主要分布在小鼠子宫的内膜上皮、腺上皮及间质细胞;G1高浓度组中TLR4的免疫组织化学阳性着色强度显著低于其他组(P＜0.01),去卵巢小鼠给予GPR30拮抗剂G15后,TLR4的相对表达量随G15浓度的升高面升高,各浓度组间TLR4的相对表达量显著性变化差异同OVX+G1组.各组小鼠子宫中TLR4 mRNA的表达量变化与TLR4相对表达量变化一致.结论 GPR30可下调子宫中TLR4的表达,并可能介导雌激素参与子宫的局部免疫功能的调节.
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应用microCT技术对中药干预去卵巢小鼠骨组织微结构的分析
目的 应用microCT技术观察健骨颗粒对C57小鼠去卵巢骨质疏松模型骨组织骨量、骨微结构及生物力学的影响.方法 将4周龄清洁级C57小鼠30只随机分为三组(假手术组10只、卵巢切除小鼠两组各10只),两组卵巢切除小鼠术后1周开始,分别用健骨颗粒和生理盐水进行灌胃,假手术组用生理盐水灌胃.2个月后,小鼠左胫骨行microCT检测及图像分析、右胫骨行生物力学三点抗压大载荷检测.结果 与假手术组比较,去卵巢组BMC、BMD、Mean、BV、BS显著下降(Pp＜ 0.01),TMC下降(0.01＜P＜0.05);与去卵巢组比较,去卵巢中药组BMC、BMD、Mean指标显著提高(P＜0.01);图像分析结果显示去卵巢组较假手术组骨皮质薄,骨小梁数量少,形态细小、不连续呈扭曲或断裂状等明显骨质疏松病理特征,去卵巢中药组介于两者之间.生物力学结果显示三组胫骨三点抗压大载荷均具有明显差异(P＜0.01).结论 去卵巢2月成功建立小鼠绝经后骨质疏松症模型;健骨颗粒抗骨质疏松作用明显,主要通过增加骨量和改善骨小梁微结构来终提高骨强度;microCT对骨质疏松参数分析简洁、高效,图像多维、全面,与传统的检测方法相比,具有一定的优势.
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下坡跑对生长期雌性去卵巢小鼠成骨细胞分化和骨形成的影响
目的:研究下坡跑运动对生长期雌性小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)数量、成骨细胞(OB)成骨能力和骨密度(BMD)等的影响.方法:40只4周龄C57BL/6雌性小鼠适应性喂养1周后,随机分为5组:安静组(C组)、运动组(D组)、安静去卵巢组(C+OVX组)、运动去卵巢组(D+OVX组)和安静假手术组(C+SHAM组).D组和D+OVX组进行8周下坡跑训练,其余三组不训练.8周训练结束后,C+OVX组和D+OVX组小鼠行去卵巢手术,C+SHAM组行假手术,术后安静状态下饲养6周.分别在8周训练结束后和术后6周处死C组、D组小鼠和其余三组小鼠.取下肢骨髓腔细胞进行原代培养并诱导BMSCs向OB分化,采用结晶紫染色检测培养皿中细胞总数,采用碱性磷酸酶(ALP)染色检测BMSCs数量,采用Von Kossa染色检测OB成骨能力,测定各组小鼠左侧前肢骨BMD.结果:与C组相比,D组BMSCs数量显著增加(P＜0.05)、OB成骨能力显著增强(P＜0.01)、BMD显著增加(P＜0.05);与C+OVX组相比,D+OVX组细胞数量(P＜0.01)和BMSCs数量(P＜0.05)均显著增加、OB成骨能力显著增强(P＜0.05)、BMD显著增加(P＜0.05).结论:下坡跑促进生长期小鼠骨形成,在生长期进行下坡跑对骨的作用影响在去卵巢后仍存在.
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下坡跑对生长期去卵巢小鼠骨BMP-2、Smad1/5和Runx2表达的影响
目的:研究下坡跑对生长期去卵巢后骨质疏松小鼠骨形成蛋白BMP-2及其信号转导蛋白Smad1/5和靶基因Runx2基因表达的影响.方法:24只4周龄雌性C57BL/6小鼠,适应性喂养1周后随机分为安静去卵巢组(C+OVX组)、运动去卵巢组(D+OVX组)和安静假手术组(C+SHAM组)3组.D+OVX组进行8周下坡跑,训练结束后C+OVX组和D+OVX组行去卵巢手术,C+SHAM组行假手术.术后正常喂养6周处死小鼠,采用RT-PCR检测骨BMP-2、Smad1/5和Runx2 mRNA表达;采用比色法检测血液生化指标；使用Hologic Discovery A骨密度仪检测前肢骨BMD.结果:与C+OVX组相比,D+OVX组BMP-2(P＜ 0.01)、Smad1 (P＜0.05)、Smad5(P＜0.01)和Runx2(P＜0.01)mRNA表达显著上调,磷离子浓度和BMD显著升高(P＜0.05),钙离子浓度显著降低(P＜0.05).与C+SHAM组相比,D+OVX组Runx2和Smad1mRNA表达显著下调(P＜0.05),ALP活性显著降低(P＜0.05),磷离子浓度显著升高(P＜0.05).与C+SHAM组相比,C+OVX组BMP-2(P＜0.05)、Runx2(P＜0.01)和Smad5 (P＜0.01)mRNA表达显著下调,ALP活性(P＜0.05)和BMD (P＜0.01)显著降低,磷离子浓度显著升高(P＜0.01).结论:BMP-2及其信号转导蛋白Smad1/5、靶基因Runx2基因表达水平较高可能是促进骨形成的生物学机制,下坡跑上调生长期去卵巢后小鼠BMP-2、Smad1/5和Runx2基因表达,可能与早期运动训练防治骨质疏松的机制有关.
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朝藿定C与淫羊藿苷对去卵巢小鼠子宫的影响
目的 观察朝藿定C与淫羊藿苷对去卵巢小鼠子宫的作用.方法 取昆明种雌性小鼠,手术摘除双侧卵巢,术后3天随机分为8组:模型组、己烯雌酚组、朝藿定C高、中、低剂量组及淫羊藿苷高、中、低剂量组,另设假手术组.连续给药60d后,处死动物,观测动物子宫系数(UC)、子宫内膜厚度(ET)和子宫腺体直径(UGD).结果 与假手术组比较,模型组UC、ET和UGD明显降低.与模型组比较,淫羊藿苷高、中、低组的UC、UGD明显增加；朝藿定C高、中、低组的UC、UGD明显增加,而ET增加不明显.结论 淫羊藿苷和朝藿定C均具有拟雌激素样作用,但淫羊藿苷拟雌激素样作用高于朝藿定C.
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柴胡加龙骨牡蛎汤改善围绝经期睡眠质量的机制
目的:探讨柴胡加龙骨牡蛎汤有效部位(CHJLMD70E)改善去卵巢合并电刺激小鼠睡眠质量的机制.方法:采用戊巴比妥钠协同睡眠方法,观察CHJLMD70E延长睡眠的用药时间效应;通过酶联免疫法,观察CHJLMD70E对日间和夜间下丘脑-垂体-卵巢轴激素水平变化的作用.结果:CHJLMD70E(48 mg·kg-1),连续灌胃给药7d,可以明显延长戊巴比妥钠协同睡眠时间(P＜0.01);去卵巢合并电刺激小鼠下丘脑促性腺激素(Gonadotropin-releasing Hormone,GnRH)和血清雌二醇(Estradiol,E2)水平表现出昼夜紊乱,CHJLMD70E可以纠正这种激素水平的节律紊乱.结论:CHJLMD70E可能是通过调节下丘脑-垂体-卵巢轴激素水平节律平衡而改善围绝经期睡眠质量.
关键词： 柴胡加龙骨牡蛎汤 去卵巢小鼠 睡眠障碍 昼夜节律 下丘脑-垂体-卵巢轴 -
鹿茸对去卵巢小鼠子宫和阴道增重及雌二醇的影响
目的 探究鹿茸对去卵巢小鼠性器官和雌二醇的影响,从而进一步探究其有无雌性激素作用.方法 雌性昆明小鼠72只,其中12只为对照组；60只去卵巢后随机分5组,即正常对照组,激素对照组,3 mg/kg鹿茸低剂量组、6 mg/kg鹿茸中剂量组和12 mg/kg鹿茸高剂量组,灌胃给药.结果 12 mg/kg鹿茸组和激素对照组与正常对照组比较,在性器官脏器指数、雌二醇水平上有显著差异,且12 mg/kg鹿茸组与激素对照组之间差异不显著,结果表明12 mg/kg鹿茸组具有激素样作用.结论 灌胃给12 mg/kg鹿茸,可使性器官系数升高,且具有雌激素样作用.
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补肾活血片促排卵的药效学研究
目的研究补肾活血片Ⅰ、Ⅱ号的作用机理.方法观察补肾活血片的雌激素活性,分别进行对小鼠生殖器官重量的影响及对去卵巢小鼠阴道涂片的影响试验;观察补肾活血片促排卵作用,分别进行小鼠排卵实验及兔排卵实验.结果补肾活血Ⅰ、Ⅱ号均可显著增加小鼠卵巢及子宫重量;阴道涂片示补肾活血Ⅰ、Ⅱ号可使阴道角化上皮波动性增高;补肾活血Ⅱ号可显著提高排卵数及孕酮含量;补肾活血Ⅰ号促进卵泡发育;补肾活血Ⅰ、Ⅱ号显著增加兔的子宫重量;补肾活血Ⅰ、Ⅱ号使雌二醇波动性升高.结论补肾活血片通过改善排卵的周期性调节,使排卵的内分泌变化趋于正常.
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鹿茸对去卵巢小鼠子宫内膜LIF蛋白表达的影响
[目的]观察鹿茸对去卵巢(ovariectomized,OVX)小鼠子宫内膜白血病抑制因子(leukemia inhibit tory factor,LIF)蛋白的表达情况.[方法]雌性小鼠去卵巢10d后,随机分为对照组和实验组.实验组用鹿茸冻干粉每天以2mg、6 mg和18 mg剂量连续给去卵巢小鼠灌胃14d,对照组为仅用等量生理盐水,通过免疫组化染色和灰度值检测来确定子宫内膜LIF蛋白的表达情况.[结果]鹿茸处理去卵巢小鼠子宫内膜LIF蛋白的表达主要定位在子宫的腔上皮细胞和腺上皮细胞,通过灰度值检测得到:2mg组、6mg组、18 mg组及对照组分别是(144.78±3.46)、(131.37±3.83)、(113.80±7.04)和(193.10±4.49).2 mg组、6 mg组和18 mg组与对照组比较均有统计学意义(P＜0.05).[结论]鹿茸促进去卵巢小鼠子宫内膜LIF蛋白的表达,并且随着鹿茸的剂量的增大而逐渐增加.
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鹿茸上调去卵巢小鼠子宫内膜LIF基因的表达
目的 观察鹿茸对去卵巢小鼠子宫内膜白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor,LIF)基因的表达情况.方法 40只雌性小鼠去卵巢10 d后,随机分为对照组和实验组.实验组用鹿茸冻干粉每天以2、6和18 mg剂量连续给去卵巢小鼠灌胃14 d,对照组为去卵巢组,通过RT-PCR和灰度值检测子宫内膜LIF基因的表达情况.结果 鹿茸处理去卵巢小鼠子宫内膜LIF基因的表达随着鹿茸剂量的增加而逐渐增强,通过LIF和GAPDH相对灰度值比值检测得到:2、6和18 mg组与对照组比较有统计学意义(P＜0.05).结论 鹿茸促进去卵巢小鼠子宫内膜LIF基因的表达,并与鹿茸的剂量呈正相关.
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五加生化胶囊对去卵巢小鼠的影响
目的 观察五加生化胶囊的拟雌激素样作用.方法 60只雌性小鼠随机分为假手术组、模型组、五加生化低剂量组、五加生化高剂量组及乙烯雌酚组,每组12只,灌胃给药4周,分别在第2、4周进行阴道涂片检查;于后给药2h后摘除眼球取血,采用ELISA法检测血清中E2浓度;迅速剥离子宫,计算小鼠子宫系数;并进行病理学观察.结果 与假手术组比较,模型组小鼠一直处于动情间期,子宫质量减轻,内膜变薄,腺体萎缩变细变少,血清中E2浓度明显降低.与模型组比较,五加生化高、低剂量组及乙烯雌酚组均能恢复小鼠的动情周期,使子宫质量增加,内膜变厚,腺体增多且腺腔扩大,其中部分充满了红色分泌物,血清E2浓度明显升高,有统计学差异(P＜0.01).结论 五加生化胶囊能恢复去卵巢小鼠动情周期,拮抗子宫萎缩,增加子宫质量,并能上调血中E2浓度.提示五加生化胶囊具有拟雌激素样作用.
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逍遥散对去卵巢模型小鼠雌激素样作用的实验研究
目的 探讨逍遥散的拟雌激素样作用.方法 采用去卵巢小鼠模型,观察逍遥散对小鼠动情周期、血清中雌二醇、卵泡刺激激素水平、子宫质量,以及子宫形态的影响.结果 逍遥散能显著提高去卵巢小鼠动情期,增加去卵巢小鼠子宫质量及血清雌二醇水平,降低血清中卵泡刺激激素水平,减轻子宫萎缩程度.结论 逍遥散具有明显的拟雌激素样作用.
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去卵巢小鼠海马内脑源性神经营养因子的表达
目的:探讨小鼠卵巢切除后的不同时期脑源性神经营养因子(BDNF)在海马表达的变化.方法:用免疫组织化学染色结合图像分析检测BDNF在小鼠卵巢切除后海马CA各区与齿状回的表达.结果:在小鼠卵巢切除后4d BDNF的表达明显下降,14d BDNF的表达开始恢复,28d BDNF在海马的表达基本恢复到正常水平.结论:雌激素水平的下降在早期可减弱BDNF在小鼠海马的表达.
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淫羊藿苷的拟雌激素作用研究
淫羊藿苷是淫羊藿的主要有效成分之一,其拟雌激素作用尚未见报道.本实验通过观察淫羊藿苷对去卵巢小鼠的影响,探讨淫羊藿苷的拟雌激素作用.
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淫羊藿苷对去卵巢小鼠血清雌二醇水平的影响
淫羊藿苷是淫羊藿的主要有效成分之一,其对去卵巢小鼠雌激素水平的影响尚未见报道.本实验以去卵巢小鼠观察其对血清雌激素水平的影响.1 材料与方法1.1 材料淫羊藿苷,淡黄色粉末,南京崇原生物科技有限公司(批号:20070501);己烯雌酚,合肥久联制药有限公司(批号:20060518).KM种小鼠,雌性,4周龄,体质量20～22 g,一级实验动物(由贵阳医学院实验动物中心提供,合格证:SCXK(黔)2002-0001);We//Scanks酶标仪(芬兰雷勃);AB104-S梅特勒-托利多电子分析天平(梅特勒-托利多仪器上海有限公司).
