首页 > 文献资料
-
益肾健脾方对少弱精子症小鼠模型精液质量和精子线粒体结构及功能的影响
目的 观察益肾健脾方对雷公藤多苷(GTW)诱导少弱精子症小鼠模型精液质量、精子线粒体超微结构和膜电位(MMP)水平的影响,探讨益肾健脾方治疗少弱精子症可能的作用机制.方法 60只BALB/c小鼠随机分为正常组、模型组、阳性对照组(东维力口服液)、中药组(益肾健脾方低、高剂量组).除正常组外,其余各组以GTW诱导少弱精子症小鼠模型.造模后,阳性对照组给予东维力口服液灌胃,益脾健肾方低、高剂量组分别给予不同剂量的益脾健肾方灌胃,正常组和模型组给予蒸馏水灌胃.治疗结束后,应用伟力彩色精子质量检测系统检测小鼠精液质量,应用透射电镜观察精子线粒体超微结构,应用荧光染色、流式细胞技术检测精子MMP正常精子百分率(JC-1,%).结果 阳性对照组、中药组A级精子活力、精子总活力高于模型组(P<0.05);阳性对照组及中药高剂量组低于中药低剂量组(P<0.05).阳性对照组、中药组精总数低于模型组(P<0.05);阳性对照组、中药低、高剂量组之间相比无统计学意义(P>0.05).模型组精子MMP低于正常组(P<0.05);中药高剂量组高于中药低剂量组及阳性对照组(P<0.05);中药低剂量组高于阳性对照组(P<0.05).结论 益肾健脾方可能通过改善精子线粒体结构、提高精子MMP从而改善精液质量达到治疗少弱精子症的目的.
-
基于PI3K/AKT信号通路探讨标本配穴电针对慢性心肌缺血大鼠的保护作用及机制
目的:观察标本配穴电针治疗对慢性心肌缺血模型大鼠心肌线粒体超微结构及Bcl-2、Bax蛋白表达影响,探讨标本配穴改善心肌缺血的腧穴配伍效应及实现保护心肌缺血作用的基因调控途径.方法:将经过筛查心电图无异常的70只SPF级Wistar雄性大鼠根据随机数字表法分为正常组、模型组、LY294002组、IGF-1组、内关组、标本配穴组、标本配穴+LY294002组,每组10只,采用盐酸异丙肾上腺素(ISO)注射大鼠腹部皮下的方法制作心肌缺血模型(2mg/kg,共14d);所有针刺组在造模前进行电针针刺预处理,每次10min,电流1mA,波形疏密波,频率2Hz,共治疗21d.治疗后采用电镜观察线粒体超微结构的变化,采用免疫组化技术检测心肌组织中Bcl-2和Bax蛋白表达的变化.结果:与正常组比较,其它各组出现不同程度的心肌线粒体损伤,模型组心肌线粒体损伤明显,LY294002组线粒体损伤重,各组Bcl-2、Bax蛋白表达增加(P＜0.01);标本配穴+LY294002组线粒体损伤及Bcl-2、Bax蛋白表达介于两者之间.与模型组比较,IGF-1组、内关组及标本配穴组心肌线粒体损伤明显改善,而Bcl-2蛋白表达增加(P＜0.01),Bax蛋白表达相应减少(P＜0.01,P＜0.05),并且标本配穴组心肌线粒体损伤改善程度和Bcl-2蛋白表达增加、Bax蛋白表达减少与内关组明显比较差异显著(P＜0.01,P＜0.05).结论:标本配穴电针治疗通过PI3K/Akt信号通路可有效调控Bcl-2和Bax蛋白的表达活性,从而起到对慢性心肌缺血大鼠的保护作用.
-
血府逐瘀胶囊对大鼠急性心肌缺血及心肌线粒体超微结构的影响
目的:观察血府逐瘀胶囊对大鼠急性心肌缺血及心肌线粒体超微结构的影响.方法:采用冠状动脉左前降支结扎制备大鼠急性心梗模型,给药5d,通过死亡率、心电图、心脏超声心动、血浆cTn-T、心肌梗死质量、心肌间质及血管用围胶原Ⅰ、Ⅲ型胶原分布,电镜观察心肌线粒体超微结构阐明血府逐瘀胶囊对急性心梗的治疗作用及机制.结果:血府逐瘀各剂量组术后即刻死亡率均较模型组降低,cTn-T、LDH、CK降低明显,高、低剂量组可明显降低ST段并改善心功能.各剂量组心肌胶原表达显著降低,对心肌线粒体结构有明显改善作用.结论:血府逐瘀胶囊对大鼠急性心肌梗死有明确的治疗作用,可降低死亡率,降低血浆cTn-T、LDH、CK,改善心电图ST段,增加射血分数,减小左室内径,降低心肌胶原表达,改善心肌线粒体超微结构.
-
还脑益聪方提取物对不同月龄APP转基因小鼠行为学及其海马区线粒体超微结构的影响
目的:研究还脑益聪方提取物对不同月龄APP转基因小鼠行为学及其海马CA1区线粒体超微结构的影响,从能量代谢的角度探讨中药提取物治疗AD的部分作用机制.方法:选用3月龄APP695 V717I转基因小鼠120只为痴呆模型,随机分为模型组、盐酸多奈哌齐组、还脑益聪方提取物高剂量组、低剂量组,每组30只,并设正常对照组.采用Morris水迷宫及跳台实验观察试验动物的行为学；应用透射电镜观察模型脑海马区线粒体超微结构.结果:7,9月龄APP转基因模型小鼠Morris水迷宫试验中穿越原平台位置次数、游泳时间和路程均较转基因模型组显著增多(P＜0.05,P＜0.01)、跳台实验中的潜伏期均明显缩短(P＜0.01),且随着病程的进展而有加重之势.还脑益聪方提取物能明显提高不同月龄转基因小鼠穿越原平台位置次数、游泳时间和路程(P＜0.05,P＜0.01),且明显延长跳台实验中的潜伏期(P＜0.05,P＜0.01).7,9月龄APP转基因小鼠海马CA1区神经元线粒体均表现出线粒体膜破坏、溶解,内嵴大部分排列轻度紊乱,有的嵴内腔扩张,基质疏松,线粒体肿胀,且随病程进展而损坏加重；还脑益聪方提取物能改善不同月龄APP转基因小鼠海马CA1区线粒体超微结构与数量.结论:APP转基因小鼠AD模型学习记忆能力显著下降,且该模型海马CA1区神经元线粒体数量减少、结构损伤,且随病程进展而均显加剧；还脑益聪方提取物能够改善不同病程APP转基因小鼠的学习记忆能力,其可能与改善海马区神经无线粒体结构、增加线粒体数量而保护脑功能有关.
-
高压氧对新生鼠HIBD模型神经元线粒体的保护作用
目的探讨高压氧对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠海马神经元线粒体的保护作用.方法用新生7日龄大鼠HIBD模型,在缺氧缺血后急性期给予2.0绝对大气压(ATA)的高压氧(HBO)治疗,每次1 h,每日1次,共7 d,在治疗后7 d处死大鼠,用透射电镜观察受损侧脑组织海马神经元线粒体超微结构的改变,Western-blot检测神经元胞浆细胞色素C含量的变化.结果新生大鼠HIBD模型缺氧缺血后7 d神经元线粒体数量明显减少,形态异常,表现为线粒体体积缩小,嵴结构模糊、紊乱,有的呈现空泡样变,且神经元胞浆细胞色素C的含量升高;与HIBD组相比,HBO治疗后神经元线粒体的数量减少较HIBD组轻,线粒体的形态较规则,结构较完整和清晰,神经元胞浆细胞色素C的含量降低.结论新生大鼠HIBD模型缺氧缺血后7 d线粒体的形态和结构有异常改变,从而使线粒体内的细胞色素C释放入胞浆,导致神经元胞浆细胞色素C的含量升高.HBO治疗后神经元线粒体数量的减少和超微结构的改变减轻,神经元胞浆细胞色素C的含量降低,其机制可能与HBO治疗改善了脑组织神经元的能量代谢,使线粒体因能量代谢障碍受到的损害减轻,终使缺氧缺血对脑组织神经元的损伤减轻.
-
加味补中益气汤对少弱精子症小鼠精液质量及线粒体功能的影响
目的:本实验通过观察加味补中益气汤对雷公藤多苷诱导少弱精子症小鼠的精液质量、线粒体膜电位和线粒体超微结构的影响,探讨加味补中益气汤治疗少弱精子症的作用机制.方法:以雷公藤多苷制备少弱精子症小鼠模型,随机分为正常组、模型组、对照组、加味补中益气汤低剂量组、加味补中益气汤高剂量组,每组12只,应用伟力精子测试仪检测小鼠精液质量,应用JC-1荧光染色流式细胞技术测定小鼠精子线粒体膜电位正常的精子百分率(JC-1+％),应用日立HT7700型透射电镜观察附睾精子超微结构.结果:对照组、中药组的A级、A+B级精子的百分比与模型组相比有统计学意义(P＜0.05);对照组与中药低剂量组相比有统计学意义(P＜0.05);中药高剂量组与对照组相比无统计学意义(P＞0.05).对照组、中药组的精子浓度、总数与模型组相比具有统计学意义(P＜0.05);对照组、中药低剂量组、中药高剂量组相互之间无统计学意义(P＞0.05).模型组小鼠精予JC-1+％较正常组显著下降(P＜0.05);中药高剂量组与中药低剂量组和对照组相比有显著性差异(P＜0.05);中药低剂量组与对照组相比有显著性差异(P＜0.05).正常组小鼠精子的尾部中段横切面可见完整的线粒体鞘结构.模型组整个精子线粒体肿胀明显、纤维明显疏松、轴丝断裂.药物干预后各组精子线粒体鞘结构较完整,肿胀较前显著减轻,纤维、轴丝结构较整齐、完整.结论:加味补中益气汤可以显著改善睾丸精子的发生及成熟,其可能的机制是通过调节小鼠精子线粒体功能(改善线粒体膜电位及超微结构)从而改善睾丸精子发生达到提高精子质量的目的.
-
哈巴苷对急性脑缺血小鼠神经保护作用及线粒体保护机制的研究
目的 探讨哈巴苷对急性脑缺血小鼠的神经保护作用及线粒体保护机制.方法 采用脑中动脉阻断复制急性脑缺血模型,将ICR小鼠随机分为假手术组、模型组、尼莫地平组,哈巴苷(5、10、15 mg·kg-1)组;造模后立即腹腔注射给药,考察各组小鼠神经功能评分、脑含水量、脑指数、脑缺血体积及大脑组织结构病理变化;测定脑中动脉阻断小鼠大脑缺血区细胞线粒体内Ca2+-Mg2+-ATPase的活性及缺血区caspase-3蛋白表达水平;透射电镜(TEM)下观察脑中动脉阻断小鼠大脑缺血区细胞线粒体超微结构变化.结果 与模型组比较,哈巴苷各剂量组,均能不同程度降低脑中动脉阻断小鼠神经功能评分、脑含水量、脑指数及脑缺血体积(P＜0.05,P＜0.01);哈巴苷10 mg·kg-1能明显增强Ca2 +-Mg2+-ATPase的活性(P＜0.01),明显下调脑缺血区caspase-3蛋白的表达(P＜0.01);哈巴苷各剂量能不同程度改善脑中动脉阻断小鼠大脑缺血区皮层及海马齿状回病理结构及线粒体超微结构变化,减少线粒体水肿.结论 哈巴苷对急性脑缺血小鼠具有明显的保护作用,其作用机制与保护线粒体损伤、下调细胞凋亡蛋白途径有关.
-
醒脾解郁方对抑郁大鼠行为学及海马与骨骼肌线粒体超微结构的影响
目的 探讨醒脾解郁方对抑郁模型大鼠行为学及海马与骨骼肌线粒体超微结构的影响.方法 将Wister大鼠平均分成5组,即空白对照组、模型组、舍曲林组、醒脾解郁高、低剂量组.采用28 d慢性不可预见应激(CUS)建立抑郁模型,治疗各组给予相应药物灌胃,连续给药28 d.模型组、空白对照组以蒸馏水代替药液.以大鼠体重变化、糖水偏爱及旷场实验进行抑郁行为学评价,采用透射电镜观察大鼠海马神经元、骨骼肌细胞线粒体超微结构变化.结果 与空白对照组相比,模型组大鼠体重增长缓慢、糖水偏爱率下降、旷场运动总路程减少(P<0.01);与模型组相比,醒脾解郁高、低剂量组及舍曲林组大鼠体重、糖水偏爱率、旷场中运动总路程均明显增加(P<0.05).透射电镜观察结果:模型组海马神经元及骨骼肌细胞均出现线粒体数目减少、形态肿胀、空泡变性,内嵴排列紊乱甚至溶解消失.醒脾解郁高剂量组海马神经元及骨骼肌线粒体接近正常,未见肿胀及空泡变性;醒脾解郁低剂量组与舍曲林组海马神经元及骨骼肌的线粒体形态轻度肿胀,内嵴部分紊乱.结论 慢性应激导致抑郁的发生中,海马与骨骼肌均会出现线粒体结构的损伤,这可能是抑郁症极度疲劳和多系统症状的关键因素之一;醒脾解郁方能改善大鼠抑郁行为学及线粒体结构损伤,其中高剂量组一定程度上比舍曲林组有效果更好的趋势.
-
三种脾虚模型小鼠线粒体超微结构改变的比较研究
对番泻叶泻下法、劳倦过度法和番泻叶泻下加劳倦过度法研制的脾虚小鼠在线粒体超微结构改变方面进行了比较研究.旨在探讨单因素和复合因素造模法对脾虚动物模型生物膜结构的影响.结果表明,三种脾虚小鼠模型均出现了线粒体形态的破坏,且各具特征.
-
不同潜伏期致痫大鼠海马神经元线粒体损伤及Fas、Bax、caspase-3的表达
目的 观察不同潜伏期致癫痫状态大鼠海马CA3区神经元线粒体超微结构损伤及Fas、Bax、caspase-3的表达变化.方法 分别采用海人酸腹腔注射(A组)和尾静脉注射(B组)诱发不同潜伏期的大鼠癫痫持续状态(SE).于SE终止后不同时点取海马,电镜观察线粒体的超微结构,半定量RT-PCR检测Fas、Bax的mRNA水平,免疫组化检测caspase-3蛋白的表达.结果 A组潜伏期为97±11min,线粒体肿胀,神经元呈凋亡征;B组潜伏期为48±13min,线粒体肿胀且伴膜的崩解,神经元呈坏死表现.对照组及B组未检测到Fas及Bax mRNA;A组Fas及Bax的mRNA表达均于SE后6h出现,24h增加,48h达高峰,并持续至72h.两组动物均在SE后6h出现caspase3表达增高(P＜0.001),24h达顶峰(P＜0.001);A组高表达持续至72h,B组在48h点急剧降低.结论 不同潜伏期的SE导致了不同程度的线粒体损伤,进而决定了神经元死亡的分子机制.
-
慢性氟中毒大鼠肾脏细胞线粒体分裂蛋白Fis1表达和线粒体超微结构改变
目的 观察慢性氟中毒大鼠肾脏细胞线粒体分裂蛋白Fis1表达和线粒体超微结构改变,探讨其在慢性氟中毒肾脏细胞线粒体损伤中的机制.方法 将60只SD大鼠按性别和体质量随机分为3组:对照组、低氟组、高氟组,每组20只,分别饮用加入0、10、50 mg/L氟化钠的自来水.6个月时,采用实时荧光定量PCR和免疫组织化学技术检测肾脏细胞Fis1 mRNA和蛋白表达,采用电镜观察肾脏细胞线粒体形态.结果 与对照组大鼠(28.70±12.41)比较,低、高氟组大鼠肾脏细胞Fis1 mRNA表达(91.48±34.83和582.09±184.69)明显升高(P均＜ 0.05)；低、高氟组大鼠肾脏Fis1蛋白表达(16.33±10.26和21.50±5.24)与对照组(10.49±7.66)比较,有增高趋势,其中高氟组明显高于对照组(P＜0.05)；电镜下,低、高氟组大鼠肾脏细胞线粒体嵴模糊或消失,出现线粒体分裂截面.结论 慢性氟中毒可致肾脏细胞线粒体损伤,诱导Fis1在转录水平和蛋白水平表达,致线粒体融合分裂障碍和线粒体超微结构异常,该过程在慢性氟中毒大鼠肾脏细胞线粒体损伤的发生机制中可能起重要作用.
关键词： 氟中毒 大鼠 线粒体分裂蛋白Fis1 线粒体超微结构 -
电针对SAMP8小鼠海马神经元线粒体超微结构的影响
目的 观察电针对SAMP8小鼠海马神经元线粒体超微结构及相关凋亡蛋白的影响,从保护线粒体、抑制细胞凋亡的角度探讨电针治疗阿尔茨海默病(AD)的部分作用机制.方法 以SAMP8小鼠为研究对象,依据"补肾通督,醒神益智"的治疗原则,电针"百会"、"涌泉",每日1次,共治疗21天.用Morris水迷宫测试小鼠学习记忆能力的变化,评价电针对AD的治疗效应.用透射电镜观察海马神经元线粒体的超微结构.结果 模型组与空白组相比较,模型组小鼠平均逃避潜伏期明显延长,原平台象限停留时间明显缩短,海马神经元线粒体超微结构不完整,线粒体面密度和体密度减少;模针组与模型组相比较,模针组小鼠治疗后平均逃避潜伏期缩短,原平台象限停留时间延长,学习记忆能力有所提高,海马神经元线粒体超微结构基本正常,线粒体面密度和体密度增加.结论 电针对AD治疗效应的发挥可能与减轻线粒体超微结构损伤,改善线粒体功能,进而改善能量代谢和脑功能有关.
-
莱菔硫烷对急性一氧化碳中毒大鼠脑组织神经细胞线粒体损伤的治疗作用
目的 探讨急性一氧化碳(CO)中毒后脑组织神经细胞线粒体超微结构和功能的损伤机制,明确不同剂量莱菔硫烷(sulforaphane,SFP)对急性CO中毒大鼠海马神经元的保护作用.方法 150只成年健康SD大鼠按数字表法随机分为正常对照组(30只)、CO中毒组(30只)和SFP治疗组90只.用高压氧舱吸入法建立急性CO中毒动物模型,用透射电镜观察大鼠脑组织神经细胞线粒体超微结构,JC-1荧光探针检测线粒体膜电位(MFI)变化,用免疫组化和定量RT-PCR法检测干预前后大鼠脑组织核转录因子红细胞相关因子-2 (Nrf-2)、硫氧还蛋白-1(Trx-1)及其mRNA的表达水平.结果 CO中毒可引起大鼠脑组织神经细胞线粒体超微结构受损,SFP能明显减轻CO中毒后神经细胞线粒体损伤程度.CO中毒后大鼠脑组织MFI值明显下降,SFP给药后3～7 d,神经细胞的MFI值虽有下降,但其水平明显高于同时间点CO中毒组(P＜0.05).与正常对照组相比,CO中毒大鼠脑组织中Nrf-2和Trx-1蛋白及其mRNA的表达水平略有增加,差异有统计学意义(P ＜0.05);SFP治疗后其表达水平明显增加,与同一时间点CO组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 CO中毒早期应用中等或高剂量的SFP能明显改善神经细胞线粒体结构和功能,增强细胞抗氧化应激能力,对急性CO中毒引起的脑损伤有积极的保护作用.
-
异氟醚后处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响
目的 探讨异氟醚后处理对不同年龄大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响.方法 将成年健康雄性SD大鼠18只和老年健康雄性SD大鼠18只采用随机数字表法随机分为3组,对照组(C组)、缺血再灌注组(I/R组)、异氟醚后处理组(IsoPP组).建立Langendorff离体心脏灌注模型,C组持续灌注130 min;I/R组平衡灌注10 min后缺血30 min再灌注90 min;异氟醚后处理组平衡灌注10 min缺血30 min,随后用含有1.5％异氟醚的灌注液灌注15 min,随后再灌注75 min.于平衡灌注末、再灌注30 min和90 min时记录HR、左室舒张末压(LVEDP)、左室发展压(LVDP)、左心室压力上升大速率(+dp/dtmax)和左心室压力下降大速率(-dp/dtmax).灌注结束后,取心尖部心肌组织1 mm3电镜下观察线粒体结构并评分,剩余心脏组织采用TTC染色法测定心肌梗死面积.结果 在成年鼠中,与I/R组相比,异氟醚后处理组心肌再灌注后的心功能指标改善,心肌梗死面积减小,线粒体损伤减轻(P＜0.05);在老年鼠中,与I/R组相比,异氟醚后处理组心肌再灌注后的心功能指标、心肌梗死面积以及线粒体损伤程度均无明显改变(P＞0.05).结论 异氟醚后处理减轻了成年老鼠的心肌再灌注损伤,而未能减轻老年鼠心肌的再灌注损伤.
-
通精灵对精索静脉曲张合并肝气郁结证大鼠生精细胞活性氧含量及线粒体功能的影响
目的:探讨中药复方通精灵对精索静脉曲张(VC)合并肝气郁结证大鼠生精细胞活性氧(ROS)含量、线粒体膜电位(MMP)及超微结构的影响. 方法:SPF级雄性Wistar大鼠72只,随机分成假手术组,模型组,通精灵低、中、高剂量组及对照组(左卡尼汀组),每组12只.Saypol法联合夹尾激怒法建立VC合并中医肝气郁结证候复合大鼠模型.模型建立4周后,通精灵低、中、高组给予不同浓度生药的水煎液(0.6、1.2、2.4 g/ml),假手术组和模型组予以生理盐水,以上各组均按1 ml/100 g体重灌胃,对照组予左卡尼汀口服液灌胃(2.1ml/ks),1次/d,持续8周.流式细胞术检测大鼠生精细胞ROS含量和MMP;透射电镜观察大鼠生精细胞线粒体超微结构.结果:生精细胞ROS含量模型组[(62.72±9.90)％]及通精灵低剂量组[(52.25±8.15)％]显著高于假手术组[(36.53±5.25)％,P＜0.01];ROS含量通精灵中、高剂量组[(41.65±4.89)％、(39.60±5.19)％]及对照组[(38.33±7.46)％]显著低于模型组(P＜0.01).生精细胞MMP水平模型组[(34.80±20.18)％]、通精灵低剂量组[(44.39±l9.60)％]显著低于假手术组[(60.24±22.25)％,P＜0.01、P＜0.05];MMP水平通精灵中、高剂量组[(50.62±14.83)％、(52.42±7.55)％]及对照组[(50.75±15.65)％]均高于模型组(P＜0.05).生精细胞线粒体超微结构显示模型组线粒体出现肿胀,空泡化,线粒体嵴断裂或消失,内部结构崩解碎裂;通精灵各剂量及对照组中线粒体结构的病理损伤均有不同程度的改善. 结论:VC合并肝气郁结证模型大鼠生精细胞ROS含量增高,MMP降低,线粒体结构损伤;通精灵能降低生精细胞ROS含量,提高生精细胞MMP水平,改善线粒体超微结构的病理损伤,这可能是通精灵改善VC不育患者生育能力的分子机制.
-
抗 Eppin 抗体抑制人精子活性运动及相关机制
目的：阐明抗附睾蛋白酶抑制剂（ Eppin ）抗体抑制人精子动力及分析相关机制。方法：将正常男性精子经过percoll分选后分为7组：空白对照组，抗体对照组与40μg · ml -1抗兔多克隆抗体孵育，其余5组分别与不同浓度抗Eppin抗体（浓度分别为2.5、5、10、20和40μg · ml -1）共同孵育4 h后进行精子动力测定，线粒体膜电位（Δψ）、ATP浓度及电镜镜检检测。结果：随着抗Eppin抗体浓度的增加，精子活力下降并呈浓度依赖趋势；当抗Eppin抗体浓度超过5μg · ml-1，精子Δψ及产生ATP浓度显著下降（ P＜0.05）；部分精子线粒体正常环形结构发生异常改变，亚线粒体膜变薄甚至消失。结论：抗Eppin抗体与人精子共孵育后精子线粒体功能及超微结构异常，导致精子活性运动显著下降。
-
哈巴苷对急性脑缺血小鼠神经细胞及caspase非依赖性凋亡通路的影响
目的 研究哈巴苷对急性脑缺血小鼠海马神经细胞、线粒体功能及caspase非依赖性细胞凋亡通路的影响.方法 采用大脑中动脉阻塞法(middle cerebral artery occlusion,MCAO)复制小鼠急性脑缺血模型.造模后,各组分别立即尾静脉注射哈巴苷(4、8、12 mg·kg-1)、依达拉奉(3.2 mg·kg-1),模型组及假手术组同法给予等量生理盐水(10 mL·kg-1).造模6 h后,采用流式细胞术检测MCAO小鼠海马神经细胞凋亡率及线粒体膜电位;透射电镜观察MCAO小鼠海马神经细胞线粒体内外膜的清晰度、线粒体嵴的完整性、线粒体基质电子密度的高低变化及线粒体肿胀情况;采用Western blot法检测MCAO小鼠脑组织线粒体中AIF及Endo G的蛋白表达;采用qPCR法检测MCAO小鼠海马组织中AIF及Endo G mRNA的表达.结果 造模6 h后,与假手术组相比,模型组小鼠脑组织海马神经细胞凋亡率明显增加(P<0.01);海马神经细胞线粒体膜电位明显降低(P<0.01);神经细胞线粒体超微结构受损严重,线粒体结构松散,可见明显肿胀;脑组织线粒体中AIF及Endo G蛋白表达明显降低,线粒体AIF及Endo G蛋白释放增加(P<0.01);海马组织AIF及Endo G mRNA表达明显增加(P<0.01);与模型组相比,哈巴苷各剂量组小鼠脑组织海马神经细胞凋亡率明显降低(P<0.05,P<0.01);海马神经细胞线粒体膜电位明显升高(P<0.01);神经细胞线粒体超微结构明显改善;哈巴苷8、12 mg·kg-1组小鼠脑组织线粒体中AIF及Endo G蛋白表达明显增加,线粒体AIF及Endo G蛋白释放减少(P<0.05,P<0.01),哈巴苷4 mg·kg-1组小鼠脑组织线粒体中Endo G蛋白表达明显增加,线粒体Endo G蛋白释放明显减少(P<0.05);哈巴苷8、12 mg·kg-1组小鼠海马组织AIF及Endo G mRNA表达明显降低(P<0.05,P<0.01).结论 哈巴苷对急性脑缺血有保护作用,其机制可能与保护大脑神经细胞及线粒体生理活性,抑制caspase非依赖性细胞凋亡通路相关.
-
海人酸致痫大鼠海马CA3区神经元线粒体损伤及caspase-3的表达
目的:观察海人酸(kanic acid,KA)诱导的癫痫持续状态(status epilepticus,SE)大鼠海马CA3区神经元线粒体超微结构的损伤及caspase-3表达的变化.方法:用KA诱导大鼠SE 2 h,分别于SE终止后第3、6、24 h取脑,用电镜观察海马CA3区线粒体的超微结构,同时用免疫组化方法检测相同部位caspase-3表达的变化.结果:SE终止后3 h可见到海马线粒体超微结构损伤,从肿胀到膜的完整性破裂.caspase-3的表达在SE后6 h开始增加,于第24小时明显增高.结论:在实验性SE模型中,海马线粒体的超微结构在早期即有损伤,caspase-3在线粒体损伤后数小时才出现表达,并于SE后24 h明显增高.
-
卵巢癌VEGF表达及癌细胞线粒体超微结构的改变
目的:观察卵巢癌血管内皮生长因子(VEGF)表达及癌细胞线粒体超微结构的改变,探讨卵巢癌VEGF表达增强对线粒体的影响及其机制.方法:用免疫组化染色法及电子显微镜技术研究卵巢癌VEGF表达及癌细胞线粒体超微结构的改变及相互关系.结果:免疫组化结果显示,微血管内皮细胞及卵巢上皮细胞VEGF表达呈强阳性.癌变后的卵巢上皮细胞的线粒体数量增多,线粒体明显肿胀、脊断裂明显.结论:卵巢癌线粒体超微结构的改变与VEGF表达有关,其VEGF表达增强可能是癌细胞自我保护机制的反应.
-
浆液性和黏液性卵巢囊腺癌患者线粒体结构和紧密连接蛋白表达的差异比较?
目的：：探讨浆液性卵巢囊腺癌(SC)与黏液性卵巢囊腺癌(MC)细胞线粒体结构及紧密连接(TJ)蛋白occludin/ZO-1表达异常的差异及可能机制。方法：临床确诊30例卵巢囊腺癌患者中15例为 SC(SC 组),15例为MC(MC 组),另选3例子宫肌瘤患者进行对照(对照组)。采用电镜观察各组线粒体超微结构；采用体视学方法分析线粒体面数密度(Nm)、体密度(Vvm)和外膜面密度(Sv)；采用免疫组化方法检测各组卵巢上皮细胞 occludin/ZO-1蛋白的阳性单位(PU)及其强弱程度(用积分光密度值 IOD 表示)。结果：电镜下,对照组线粒体及内质网均未见异常；MC 组线粒体体积小、数量较多,线粒体 Nm、Vvm 和 Sv 较对照组明显降低(P <0.05)；SC 组线粒体体积大,脊断裂显著,线粒体 Nm、Vvm 和 Sv 较 MC 组显著升高(P <0.01)。免疫组化分析显示 MC 组 occludin 和ZO-1 PU 明显高于对照组(24.23±4.74 Vs 21.07±5.51、37.07±3.58 Vs 20.46±4.89,P 均<0.05),IOD 明显低于对照组(72.39±9.86 Vs 92.38±7.17、73.51±6.86 Vs 80.34±7.04,P 均<0.05)；SC 组 occludin 和 ZO-1 PU明显低于对照组(11.50±4.15 Vs 21.07±5.51、16.24±3.61 Vs 20.46±4.89,P 均<0.05),IOD 明显高于对照组(101.38±6.16 Vs 92.38±7.1、92.78±3.07 Vs 80.34±7.04,P 均<0.01)。结论：SC 及 MC 两种卵巢囊腺癌患者线粒体结构和体视学特征明显不同,可能与 TJ 蛋白的 occludin/ZO-1表达异常有关。
