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不同种类酒炮炙对牛膝饮片指纹图谱的影响
目的:比较牛膝生品、蒸馏水炙品及不同乙醇浓度酒炙品指纹图谱差异,研究不同乙醇浓度酒炮炙对牛膝饮片的影响.方法:采用HPLC,以岛津VP-ODS(4.6 mm ×250 mm,5μm)为色谱柱,乙腈-水为流动相梯度洗脱,流速0.8 mL/min,柱温25℃,检测波长243 nm,进样量15 μL,采集90 min.结果:牛膝各酒炙品大部分峰面积较生品的要稍高,蒸馏水炙品的较生品稍低,但不是很明显.结论:酒炙有利于本实验建立指纹图谱中的牛膝大部分有效成分的溶出,高浓度乙醇炙品在有效成分溶出方面优于低浓度乙醇炙品.
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硫磺熏蒸怀牛膝工艺筛选
目的:研究硫磺熏蒸对怀牛膝中蜕皮甾酮的影响.方法:采用高效液相色谱法测定硫磺熏蒸后蜕皮甾酮的含量,XB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-水(15∶85),检测波长250 nm,柱温25℃,流速0.8 mL·min-1.结果:硫磺用量100 g·m-3,熏蒸1次,熏蒸2h,此时蜕皮甾酮的量高；蜕皮甾酮在0.408 ～2.448 μg线性关系良好,回归方程为Y=34.167X +61(r =0.999 6).结论:硫磺熏蒸对怀牛膝中蜕皮甾酮含量有一定影响,随硫磺用量增加、熏蒸时间延长、熏蒸次数增加而呈减少趋势.
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蜕皮甾酮对大鼠心肌再灌注损伤的影响
目的：探讨蜕皮甾酮是否对心肌缺血再灌注损伤有保护作用。方法：采用大鼠冠状动脉结扎致心肌缺血再灌注损伤模型，预防性给予蜕皮甾酮(0.5,5,50 mg*kg-1，iv),测定血清中肌酸磷酸激酶（CPK）、乳酸脱氢酶（LDH）活性、丙二醛（MDA）含量、左心室收缩性、心肌梗死范围。结果：预防性给予较低浓度（0.5～5 mg*kg-1）蜕皮甾酮能明显降低血清CPK，LDH的活性与MDA含量，其作用具有量效关系，以5 mg*kg-1作用佳，该剂量还能改善心肌收缩性，减少心肌梗死面积。结论：蜕皮甾酮对心肌再灌注损伤有保护作用，这可能与其抗氧化有关。
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VEGF在大鼠心肌梗死急性期表达的意义及蜕皮甾酮的促侧支循环作用
目的以急性心肌梗死大鼠为模型,观察血管内皮生长因子(VEGF)在心肌中的表达,探讨急性缺血缺氧刺激与VEGF产生的关系和意义以及蜕皮甾酮(EDS ecdysterone)的促侧支循环作用.方法建立Wistar大鼠急性心肌梗死模型,分为对照组、急性心肌梗死组(1、3、7 d)和蜕皮甾酮干预治疗组(每只0,40mg/d).免疫组化检测VEGF表达;Ⅷ因子相关抗原标记内皮细胞,检测毛细血管密度,比重法测定梗死面积.原代培养大鼠心肌细胞,在常氧与缺氧状态下实验组分别给于蜕皮甾酮治疗(100μg/ml),24h后采用免疫细胞化学法检测心肌细胞中VEGF表达.结果随缺血缺氧时间的延长心肌产生的VEGF增加,与对照组比较各组均有显著差异,缺血时间与VEGF产生量呈正相关;蜕皮甾酮治疗组与对照组相比,血清肌酸激酶同功酶(CK-MB)显著降低(P＜0.01);毛细血管密度增加(P＜0.01);心肌梗死面积减少(P＜0.01).在常氧与缺氧状态下,蜕皮甾酮治疗组心肌细胞VEGF表达显著高于对照组(P＜0.01).结论在心肌梗死急性期缺血心肌通过分泌VEGF对自身产生重要的保护作用;蜕皮甾酮进一步刺激心肌分泌产生VEGF,促进大鼠缺血区血管生成、侧支循环建立、毛细血管密度增加,发挥心肌保护作用.
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20-羟基蜕皮甾酮对大鼠糖尿病心肌病的保护作用
目的 探讨20-羟基蜕皮甾酮(20E)对糖尿病心肌病的保护作用.方法 Wistar大鼠60只随机分为正常组、模型组、对照组和治疗组,每组15只,后3组大鼠用60 mg/kg腹腔注射链脲佐菌素建糖尿病模型,之后分别灌服蒸馏水、5 mg/kg盐酸二甲双胍和10 mg/kg 20E溶液,药物干预6周后,观察心脏形态学改变,测定空腹血糖、心脏糖基化终末产物(AGE)、糖化血红蛋白(HbAlc)、HDL-C和LDL-C含量,实时荧光定量分析线粒体酶complex Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ的表达.结果 与模型组比较,治疗组心肌损伤程度减轻,空腹血糖、AGE、HbAlc和LDL-C分别降低了62.4％ (P＜0.01)、38.8％ (P＜0.05)、51.2％ (P＜0.01)和47.9％ (P＜0.01),complexⅠ、Ⅲ和Ⅳ表达水平分别增加了2.51倍(P＜0.01)、2.81倍(P＜0.01)和2.08倍(P＜0.01).结论 20E对糖尿病心肌病具有保护作用.
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蜕皮甾酮对实验性蛛网膜下腔出血后兔脑微血管内皮细胞与中性粒细胞间黏附的影响
目的采用体外孵育的血性脑脊液模拟蛛网膜下腔出血(SAH)刺激因素,观察实验性SAH后兔脑微血管内皮细胞(microvessel endothelial cells,BmvECs)细胞间黏附分子-1的表达,内皮细胞与中性粒细胞间黏附变化及蜕皮甾酮的干预效应.方法体外培养兔BmvECs,通过免疫细胞化学染色检测对照组、血性脑脊液刺激组和蜕皮甾酮治疗组BmvECs细胞间黏附分子-1表达改变,通过内皮细胞、中性粒细胞黏附模型检测BmvECs与中性粒细胞的黏附率.结果与对照组比较,血性脑脊液刺激组BmvECs细胞间黏附分子-1免疫细胞化学染色增强,BmvECs与中性粒细胞间黏附率增加,蜕皮甾酮治疗组BmvECs细胞间黏附分子-1染色强度、BmvECs与中性粒细胞间黏附率低于血性脑脊液刺激组.结论血性脑脊液刺激可增强内皮细胞细胞间黏附分子-1的表达和对中性粒细胞的黏附作用,蜕皮甾酮对其具有抑制作用,可能对慢性脑血管痉挛具有治疗作用.
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20-羟基蜕皮甾酮对脓毒症小鼠心肌诱导型一氧化氮合酶表达的抑制
目的 探讨20-羟基蜕皮甾酮(20-hydroxyecdysone,20E)对脓毒症小鼠心肌组织诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)表达的影响.方法 选择小鼠180只,随机分成正常组、模型组、地塞米松组、20E低剂量组、20E中剂量组、20E高剂量组,每组30只,腹腔注射戊巴比妥(40 mg/kg)麻醉小鼠,后5组小鼠给予气管内注射4 mg/kg脂多糖诱导建立脓毒症型心肌损伤模型.在0、6、12、24和48 h解剖心脏,观察心脏形态学改变,用实时PCR和分光光度法分别测定心脏组织iNOS mRNA和蛋白含量,分光光度法测定心脏NO浓度.结果 与模型组比较,地塞米松组12、24、48hiNOSmRNA水平明显降低,20E中剂量组24、48 h iNOS mRNA水平明显降低,20E高剂量组12、24、48 h iNOS mRNA水平明显降低;地塞米松组12、24、48 h iNOS蛋白水平明显降低,20E低剂量组24、48 h iNOS蛋白水平明显降低,20E高剂量组6、12、24、48 h iNOS蛋白水平明显降低;地塞米松组、20E中剂量组、20E高剂量组12、24、48 h NO水平明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).在20E低剂量组、20E中剂量组、20E高剂量组中,20E对iNOS mRNA、iNOS蛋白和NO水平下调呈现剂量依赖效应.结论 20E具有抑制脓毒症小鼠心肌iNOS表达和减少NO含量的作用.
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蜕皮甾酮对急性肺损伤大鼠肺组织超微结构及IL-10mRNA表达的影响
目的:探讨蜕皮甾酮(EDS)对脂多糖(LPS)所致大鼠急性肺损伤(ALI)肺组织病理学及IL-10表达的影响.方法:将健康成年雄性Wistar大鼠120只,随机分为空白对照组、ALI模型组(LPS组)和蜕皮甾酮低剂量组(LPS+EDS 20 mg/kg组)、蜕皮甾酮中剂量组(LPS+EDS 30 mg/kg组)、蜕皮甾酮高剂量组(LPS+EDS 40 mg/kg组).经腹腔注射脂多糖(8 mg/kg)复制ALI模型,蜕皮甾酮各剂量组于建模1 h后同时尾静脉注射相应剂量的蜕皮甾酮溶液;在建模后2、4、24 h处死动物,采用实时荧光定量RT-PCR检测肺组织白细胞介素-10(IL-10)mRNA表达的变化,酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清IL-10浓度变化,检测各组肺组织湿重/干重比值(W/D)变化;建模24 h后光镜观察肺组织病理学改变,电镜观察肺泡Ⅱ型上皮细胞(AT-Ⅱ)超微结构变化.结果:与LPS组比较,EDS不同剂量治疗组在同一时间点均不同程度促进肺组织IL-10 mRNA和血清IL-10水平的升高(P<0.05).其中EDS高剂量组(P<0.05)促进作用明显,在各个时间点IL-10 mRNA的表达和注射LPS4 h血清IL-10水平均显著高于低剂量治疗组(P<0.05).而在注射LPS后4和24 h,治疗组W/D均显著低于模型组(P<0.05).光镜、电镜观察结果提示EDS治疗减轻了ALI 造成的肺组织形态学改变:治疗组较模型组肺水肿程度及炎症细胞浸润程度明显减轻,AT-Ⅱ线粒体肿胀、微绒毛减少、板层小体空泡化程度减轻.结论:蜕皮甾酮对脂多糖致急性肺损伤起保护效应,这一作用可能与促进肺组织IL-10 mRNA表达、血清IL-10浓度上调有关,从而调节全身炎症反应和代偿性抗炎反应的动态平衡,抑制肺部炎症反应.
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蜕皮甾酮和骨髓间充质干细胞对早期创面抗炎作用的初步研究
目的:研究蜕皮甾酮(EDS)及骨髓间充质干细胞(BMSC)对烫伤创面的早期抗炎作用.方法:新西兰大耳白兔18只,每只兔用烫伤仪制备4个创面并经病理证实为深Ⅱ度,随机标记为空白对照组(A组)、EDS组(B组)、BMSC(C组)、EDS+BMSC(D组).烫伤后5、10、15 d各处死6只家兔,观察炎性细胞浸润度、创面愈合率和组织病理学评分的变化.结果:烫伤后5 d,B、D组炎性细胞浸润度明显示低于A组(P<0.05),C组变化不明显,B组创面愈合率明显高于A组(P<0.05);烫伤后10 d,各组各指标差异无显著性;烫伤后15 d,各组炎性细胞浸润度差异无显著性,B、C、D组创面愈合率、组织病理学评分均高于A组(P<0.05或P<0.01).结论:EDS对家兔烫伤皮肤有早期抗炎作用,这可能是EDS促进创面愈合的一种机制.EDS联合BMSC亦具有早期抗炎作用,两者联合不存在拮抗作用,是否存在叠加作用还需进一步研究.
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蜕皮甾酮对人脐带间充质干细胞冻存复苏后生物学活性的影响
目的:研究体外条件下蜕皮甾酮(EDS)对冻存复苏后人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)生物学活性的影响.方法:hUCMSCs采用梯度冷冻技术冻存,6个月后复苏,扩增、传代,分3组培养:空白对照组用普通培养基培养；低剂量EDS组在普通培养基中加入100 μg/ml EDS;高剂量EDS组在普通培养基中加入200 μg/mlEDS.显微镜下观察细胞形态,10 d时计算克隆形成能力,绘制细胞生长0～7 d的细胞生长曲线,流式细胞仪鉴定hUCMSCs的细胞表面特异标记(CD34、CD45、CD29、CD105),油红O染色及茜素红染色观察hUCMSCs向脂肪细胞、成骨细胞分化的能力.结果:两EDS组克隆形成率约为75％,空白对照组约为40％.生长曲线显示两EDS组增殖速度较空白对照组快,但两EDS组增殖速度相近.流式检测结果显示两EDS组的CD29、CD105阳性率明显高于空白对照组,CD34、CD45呈阴性表达,其表达明显低于空白对照组(P＜0.05),两EDS组之间差异无统计学意义；成骨、成脂分化能力检测发现,各组细胞均能够向脂肪细胞、成骨细胞分化,而高剂量EDS组细胞在未加诱导培养基的情况下仍出现向成骨细胞分化的趋势.结论:在一定浓度范围内,EDS对细胞复苏后恢复细胞活性以及提高存活率方面具有积极作用,但是较高浓度的EDS有诱导细胞向成骨细胞方向分化的趋势.
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蜕皮甾酮对急性肺损伤大鼠肺组织中Toll样受体4及肺表面活性蛋白A表达的影响
目的:观察蜕皮甾酮(EDS)对脂多糖(LPS)诱导急性肺损伤(ALI)大鼠肺组织中TNF-α、肺表面活性蛋白A(SP-A)、Toll样受体4(TLR4)表达的影响,并探讨其机制.方法:将40只雄性Wistar大鼠随机分成正常对照组、LPS组、EDS低(20 mg/kg)、中(30 mg/kg)、高(40 mg/kg)剂量治疗组(n=8).腹腔注射LPS(10 mg/kg)诱导大鼠ALI模型,3个EDS治疗组于建模1 h后予不同剂量的EDS腹腔注射,其余两组注射等体积生理盐水.24 h后,取肺组织,用光学显微镜观察各组肺组织病理学改变;用Western blot测定肺表面活性蛋白A(SP-A)、Toll样受体4(TLR4)的表达;用ELISA测定各组肺组织中TNF-α含量,RT-PCR检测TNF-α mRNA表达水平.结果:肺组织病理学观察显示:LPS组可见肺间质充血、水肿,大量炎性细胞浸润,而EDS治疗组肺损伤明显改善,效果随EDS剂量的增加而增加.与正常对照组比较,LPS组肺组织的SP-A蛋白表达明显降低(P<0.05),而TNF-α含量、TNF-α mRNA表达、TLR4蛋白表达明显增加 (P<0.05).与LPS组相比较,不同剂量EDS治疗组肺组织SP-A蛋白表达均增加(P<0.05),而TNF-α含量、TNF-α mRNA表达、TLR4蛋白表达明显降低(P<0.05),其中EDS高剂量组比中、低剂量组效果明显 (P<0.05).结论:蜕皮甾酮对LPS诱导大鼠急性肺损伤有保护作用,其机制可能与抑制TLR4通路来降低肺组织中TNF-α炎性因子的表达,并促进抗炎物质SP-A释放有关.
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蜕皮甾酮体外促进人表皮干细胞增殖的实验研究
目的:观察蜕皮甾酮(EDS)对人表皮干细胞增殖的影响.方法: 中性蛋白水解酶-Ⅳ型胶原黏附法分离正常人包皮的表皮干细胞,免疫细胞化学法检测第3代细胞β1整合素、角蛋白19(K19)、K14、K10抗原表达以鉴定表皮干细胞.分别用EDS终浓度为0(对照组)、10、20、40、80、160 mg/L的Epilife培养基培养表皮干细胞,于培养1 d、2 d、3 d、4 d时用 3-(4,5-二甲基-2-噻唑)-2,5二苯基溴化四唑(MTT)法于酶标仪上检测490 nm处的吸光度值(A值),判定EDS对表皮干细胞体外增殖的影响.4 d时采用流式细胞术检测各组细胞的周期改变,计算增殖指数(PI).结果:免疫细胞化学法检测提示β1整合素、K19、K14抗原明显阳性, K10抗原阴性.培养1 d、2 d时,20、40、80 mg/L组吸光度高于对照组(P＜0.05),10、160 mg/L组吸光度与对照组比较差异无显著性(P＞0.05);培养3 d、4 d时,各实验组吸光度均高于对照组(P＜0.05);各时间点所检测的吸光度值均以80 mg/L时高.流式细胞技术检测实验组PI值分别为40.00%、40.41%、40.96%、43.76%、40.87%,均高于对照组35.53%;实验组中以80 mg/L时高.结论:体外培养条件下EDS能促进人表皮干细胞的增殖,该促进作用在80mg/L时为显著.
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蜕皮甾酮对氧化损伤的HLEC线粒体超微结构的影响
目的 探讨植物雌激素蜕皮甾酮(ecdysterone,ECR)保护氧化损伤的人晶状体上皮细胞(human lens epithelial cells,HLEC)亚细胞水平的形态结构的变化.方法 实验分4组:正常对照组、过氧化氢(hy-drogen peroxide,H2O2)组、雌二醇(β-Estradiol,E2)和ECR组.密度梯度离心法分离出HLEC线粒体,透射电镜观察HLEC线粒体超微结构.结果 正常对照组线粒体双层膜结构完整,嵴结构完整,线粒体几乎未受损伤;H2O2组线粒体双层膜结构不完整,嵴结构断裂消失,线粒体受损伤;ECR组和E2组线粒体双层膜结构稍完整,嵴结构断裂,线粒体受损伤,但较H2O2组情况好.结论 植物雌激素ECR对H2O2诱导氧化损伤的HLEC线粒体超微结构有保护作用.
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蜕皮甾酮对家兔蛛网膜下腔出血后神经损害的影响
目的 探讨蜕皮甾酮(EDS)对蛛网膜下腔出血(SAH)后家兔脑组织的影响及其机制.方法 选择6～9月龄雄性日本大耳兔18只,体重2.2～3.4kg,随机分为假手术对照组(L组)、SAH组和ⅡS组,每组6只.采用结扎右侧颈总动脉后二次枕大池注血的方法制作SAH模型,EDS组静脉给予EDS(3mg/kg,4次/d,共3d).通过Strong神经学评分观察各组动物神经功能的变化.3d后处死动物,测定脑含水量,HE染色观察海马组织结构变化,免疫组化染色观察海马组织Bax及Bcl-2的表达变化,TUNEL染色观察海马神经元凋亡情况,并采用PCR和Westem blotting观察海马P13K mRNA和蛋白的表达情况.结果 建模后第1,2,3天SAH组神经功能评分分别为6.00±1.79、8.00±1.90、8.00±2.37,而EDS组分别为4.16±0.75、5.17±0.75、4.83±1.17,其中第2、第3天EDS组神经功能明显优于SAH组(P＜0.05,P＜0.01).3d时测定SAH组家兔脑含水量为78.6％±0.5％,明显高于L组(77.7％±0.4％,P＜0.01),而EDS组经治疗后脑含水量(78.1％±0.5％)明显下降,与SAH组比较差异有统计学意义(P＜0.05).HE染色观察见SAH组家兔海马CA1区神经无排列紊乱,细胞固缩、深染,而EDS组CA1区神经元结构基本正常.免疫组化染色显示,与L组比较,SAH组Bax表达增加、Bcl-2表达减弱,而EDS组Bax、Bcl-2表达水平与L组接近.TUNEL染色显示,SAH组凋亡细胞明显增多,而EDS组凋亡细胞数与L组接近.PCR和Western blotting结果显示,SAH组PI3K mRNA和蛋白表达均明显低于L组和EDS组,后两组比较差异无统计学意义.结论 EDS可减轻家兔SAH后的神经损害,其机制可能与通过PI3K途径抑制神经细胞凋亡有关.
关键词： 蛛网膜下腔出血 蜕皮甾酮 1-磷脂酰肌醇3-激酶 细胞凋亡 -
5种药物对内毒素所致培养脐静脉内皮细胞能量代谢的影响
为探讨山莨菪碱（654-2）、丹参、黄芪皂甙、β-七叶皂甙钠和蜕皮甾酮5种药物干预后，对内毒素（LPS）所致培养脐静脉内皮细胞（HUVECs）能量代谢的影响，建立LPS对体外培养的HUVECs致伤模型，测定培养的HUVECs能量代谢指标（ATP，ADP，AMP，EC）。结果显示，LPS与内皮细胞孵育后低浓度、早期内皮细胞被激活，随刺激时间的延长，培养HUVECs的EC降低，用上述5种药物治疗后各时相点能量负荷明显增加，其中蜕皮甾酮、β-七叶皂甙钠、黄芪皂甙治疗效果优于654-2、丹参。提示LPS对体外培养的HUVECs能量代谢有直接损伤作用，β-七叶皂甙钠、蜕皮甾酮、黄芪皂甙有一定的抗损伤作用，在体外培养的HUVECs能量代谢及能量储备方面优于654-2、丹参。
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HPLC法测定补肾接骨口服液中蜕皮甾酮和柚皮苷的含量
目的 建立HPLC法测定补肾接骨口服液中蜕皮甾酮和柚皮苷的含量.方法 采用SHIMADZU shim-packVP-ODS色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:0.3％冰醋酸溶液-乙腈(79:21),流速:0.8 ml ·min-1,检测波长:263 nm,柱温:30℃,进样量:20μl.结果 蜕皮甾酮、柚皮苷浓度在0.0614 ～0.6138、0.0131 ～0.1312 mg·ml-1(n=7)范围内与峰面积线性关系良好;蜕皮甾酮、柚皮苷平均回收率为99.54％、99.57％(n=9).结论 该方法操作简便、准确、专属性好,可作为补肾接骨口服液质量控制的方法.
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蜕皮甾酮对大鼠心肌再灌注诱发心律失常的影响
目的研究植物药有效成分蜕皮甾酮(Ecdysterone,EDS)是否能纠正再灌注性心律失常.方法蜕皮甾酮(20mg*kg-1,i g,qd,5d)灌胃后,结扎左冠状动脉前降支造成大鼠心律失常,观察心电图病理性Q波、室性早博(VP)、室性心动过速(VT)、心律失常总发生率的变化.常规测定血清乳酸脱氢酶(LDH) 、谷草转氨酶(AST)、肌酸磷酸激酶MB(CK-MB)活性;硫代戊巴比妥酸荧光法测定血清丙二醛(MDA)含量;放射免疫法测定血清超氧化物歧化酶(SOD)的含量.结果与对照组相比,EDS组病理性Q波、VT无明显变化,但VT、心律失常总发生率显著减少 (P<0.01);EDS组的CK-MB、AST、LDH、MDA显著减少(P<0.01),SOD显著增加(P <0.01).结论 EDS对大鼠心肌缺血再灌注诱发室性早博、心律失常总发生率有降低作用,在一定程度上纠正心肌再灌注诱发的心律失常.机理可能在于减轻自由基损伤及稳定心肌细胞膜的通透性,值得进一步研究.
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蜕皮甾酮促进缺血心肌再血管化的实验研究
目的探讨植物药有效成分蜕皮甾酮(Ecdysterone,EDS)是否能促进心肌的再血管化.方法采用冠状动脉左前降支结扎致大鼠心肌缺血性损伤模型,腹腔注射EDS 5mg@kg-1,ip,连续7d.测定心肌毛细血管密度、冠状动脉血流量、心肌营养性血流量、血管内皮生长因子(VEGF)的表达量.结果EDS组心肌毛细血管密度、冠状动脉血流量和心肌营养性血流量增加,VEGF表达量亦增加.结论EDS能产生促进心肌再血管化的效应,机理可能在于促进VEGF的表达,值得进一步研究.
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大鼠海马内注射β-AP25-35后c-fos在脑内的变化及蜕皮甾酮的影响
目的观察大鼠海马内注射β-AP25-35后学习记忆行为、c-fos基因表达变化及蜕皮甾酮的干预作用,以探讨蜕皮甾酮改善学习记忆的机制.方法大鼠双侧海马内微注射β-AP25-35 10 μg,Morris water maze观察其学习记忆行为,免疫组化SABC法观察c-fos基因的表达.结果结果显示,与模型组比较,尼莫地平组及蜕皮甾酮(ECR)组的潜伏期缩短、搜索时间延长;同时模型组大鼠皮层及海马内c-fos蛋白表达明显降低,而高剂量ECR组c-fos蛋白的表达则相对增加.结论海马内注射β-AP25-35可引起大鼠空间学习记忆障碍,并抑制c-fos的表达;ECR酮可改善β-AP引起的大鼠空间学习记忆障碍,并相对增加c-fos的表达.
关键词： 海马 β-淀粉样肽25-35 c-fos 蜕皮甾酮 -
蜕皮甾酮体外抑制β-淀粉样蛋白的纤维形成及神经毒性
目的处于聚集及纤维丝状态的β-淀粉样蛋白片段1-42 (Aβ1-42) 具有神经毒作用,可导致阿尔茨海默病(AD).本文观察蜕皮甾酮体外对Aβ1-42的聚集、纤维丝形成及其神经元毒性的影响,旨在为蜕皮甾酮防治AD提供依据.方法透射电镜观察蜕皮甾酮及维生素E(VitE)对试管内Aβ1-42聚集和纤维丝形成的影响; MTT法及乳酸脱氢酶(LDH)活性法检测培养的胚胎大鼠大脑皮层神经元存活率及神经元受损情况.结果① 100 μmol*L-1 Aβ1-42分别与磷酸盐缓冲液(PBS)、100 μmol*L-1蜕皮甾酮和100 μmol*L-1 VitE孵育3 d时,各组均无纤维丝形成;孵育7 d时,各组均见纤维丝形成,但蜕皮甾酮和VitE组的纤维丝形成较PBS组明显减少,尤以蜕皮甾酮组更明显.20 μmol*L-1的蜕皮甾酮和20 μmol*L-1 VitE对Aβ1-42的聚集及纤维丝形成无明显影响.② 100 μmol*L-1的Aβ1-42作用24 h,神经元存活率明显下降.蜕皮甾酮或VitE 10～100 μmol*L-1预处理30 min,再与100 μmol*L-1的Aβ1-42作用24 h,神经元的存活率呈剂量依赖性增加,LDH活性呈剂量依赖性降低.结论离体条件下,蜕皮甾酮可直接抑制Aβ1-42的聚集及纤维丝形成,减轻Aβ1-42对神经元的毒性,提高神经元的存活率.
