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冬天麻与春天麻的有效成分比较及质量评价
目的:冬天麻和春天麻为不同季节采收的天麻,其价格差异很大,但质量差异不明确.为此,以天麻中具有中枢神经系统活性的天麻素、对羟基苯甲醇和腺苷为指标,评价两者质量.方法:从不同产地收集了15份冬天麻和11份春天麻样品,采用HPLC-DAD法测定这3种有效成分的含量;结合性状鉴定和统计学分析,比较冬天麻和春天麻的质量,分析天麻中这3种有效成分的含量与天麻不同商品规格和产地之间的相关性.结果:春天麻中天麻素和对羟基苯甲醇的含量之和(0.766％,n=11)为冬天麻(0.628％,n=15)的1.22倍;春天麻中天麻素、对羟基苯甲醇和腺苷的含量之和(0.787％,n=11)为冬天麻(0.653％,n=15)的1.21倍;但这两项指标均无统计学意义(P＞0.05).四川产天麻中天麻素和对羟基苯甲醇之和以及这3种有效成分的含量之和均高于陕西和云南.结论:建立的HPLC法可准确测定天麻中天麻素、对羟基苯甲醇和腺苷的含量.以这3种有效成分含量为指标,春天麻质量优于冬天麻,四川产天麻的质量优于陕西和云南.
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RP-HPLC同时测定藏药手掌参中4种活性成分的含量及气候因子相关分析
目的:建立同时测定不同产地手掌参药材中多指标成分的质量控制方法,分析气候因子对手掌参分布活性成分含量的影响.方法:采用HPLC,Kromasil C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),以0.1％醋酸水溶液和甲醇为流动相梯度洗脱,流速1.0 mL· min-,检测波长270 nm,柱温30℃.结果:4种有效成分的线性关系均良好,精密度、稳定性和重复性的RSD均＜2.50％,平均加样回收率为96.97％ ～ 101.55％,RSD均＜1.46％;同时使用Diva-Gis提取不同产地手掌参药材的19个气候数据和3个地理数据进行聚类分析,经与样品有效成分含量测定的计量化学结果比较,表明不同产地手掌参药材各指标成分含量差异较大,通过气候因子的主成分分析和聚类分析,发现其与手掌参的活性成分的含量具有一定的相关性.结论:该方法准确,重复性好,可为科学、全面评价手掌参药材的品质提供参考,对进一步研究手掌参资源的可持续利用具有指导意义.
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蒸制对乌天麻中天麻素和对羟基苯甲醇的含量的影响
目的:通过HPLC法测定蒸制前后乌天麻中天麻素和对羟基苯甲醇的含量,通过对比探索出物理方法蒸制对乌天麻中天麻素和对羟基苯甲醇的含量的影响.方法:色谱柱Agilent XDB-C18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相乙腈-0.05%磷酸溶液(3:97),流速1.0mL/min,检测波长220nm,柱温35℃.结果:乌天麻蒸制后天麻素和对羟基苯甲醇含量有明显的变化,为新鲜乌天麻1.28~1.51倍;对羟基苯甲醇转化为天麻素转化率为0.63~0.86.结论:蒸制后天麻素和对羟基苯甲醇总含量为新鲜乌天麻的1.28~1.51倍,对羟基苯甲醇转化为天麻素的转化率为0.63~0.86.
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白花曼陀罗悬浮培养细胞转化对羟基苯甲醛生成天麻素
目的 研究天麻素在植物细胞的转化合成.方法 利用白花曼陀罗细胞悬浮培养转化外源对羟基苯甲醛合成天麻素,并应用多种色谱技术进行分离纯化,根据转化产物的理化性质和光谱数据分析鉴定结构.结果 利用白花曼陀罗细胞成功地将对羟基苯甲醛转化为天麻素(Ⅱ),并得到由对羟基苯甲醛生成天麻素的转化中间体对羟基苯甲醇(Ⅰ).另外,从细胞培养物中分离得到β-D-吡喃阿洛酮糖(Ⅲ)和5-正丁氧基-β-D-吡喃阿洛酮糖(Ⅳ)两种化合物.结论 白花曼陀罗细胞悬浮培养能转化对羟基苯甲醛合成天麻素.
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中药连翘的酚酸类化学成分研究
目的 对中药连翘的酚酸类化学成分进行研究.方法 通过大孔吸附树脂、Sephadex LH-20、反相HPLC等多种色谱进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据进行鉴定.结果 从连翘的体积分数50％乙醇提物中分离得到了16个化合物,分别为丹参素甲酯(1),原儿茶醛(2),香草酸(3),对羟基苯甲酸(4),对羟基苯甲醇(5),对羟基苯乙醇(6),对甲氧基苯乙醛(7),对羟基苯乙酸(8),4-hydroxyphenethyl 2-(4-hydroxyphenyl) acetate (9),对香豆酸(10),对羟基苯基乙酸甲酯(11),3,4--羟基苯乙醇(12),1,2,4-苯三酚(13),1-(4-羟基苯基)-2,3-二羟基丙酮(14),对羟基苯甲醛(15)和异香草酸(16).结论 化合物1～3,5,7,9,11,14为首次从连翘中分离得到.
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天麻化学成分研究(Ⅱ)
天麻为传统名贵中药,主治头痛眩晕、肢体麻木、癫痫抽搐等症.其有效成分为天麻素、对羟基苯甲醇等酚类成分,为全面阐明天麻的活性成分,前文对天麻的弱极性部位进行了初步研究,本实验继续报道其极性部位成分的结构鉴定工作.
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天麻醋酸乙酯提取物抗ADP诱导的家兔血小板聚集作用及机制
天麻为兰科植物天麻Gastrodia elata Blume的干燥块茎,古名赤箭,是传统的平肝息风药.现代药理学研究表明天麻及其制剂具有镇痛、镇静、催眠、延缓衰老、扩张血管、降低血黏度及抑制血小板聚集等作用[1].本室前期研究发现天麻醋酸乙酯萃取部分(主要成分为以4,4'-二苯酚甲烷、三聚对羟基苯甲醇等为主的酚性化合物)具有较强的抗血小板聚集作用,本研究在前期工作基础上对天麻醋酸乙酯部分进行柱色谱分离,筛选出活性强的b段,观察其对家兔血小板聚集的影响,并探讨其作用机制.
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HPLC-MS法同时测定天麻饮片中8种活性成分
目的 建立同时测定天麻饮片中天麻素、对羟基苯甲醇、香荚兰醇、对羟基苯甲醛、香荚兰醛、巴利森苷B、巴利森苷C、巴利森苷A8种成分的高效液相色谱-质谱(HPLC-MS)分析方法.方法 采用Agilent 1220高效液相系统,Hypersil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为0.5％醋酸水溶液(A)-0.5％醋酸甲醇溶液(B),梯度洗脱:0～10 min,98％A;10～60 min,98％～60％ A;60～75 min,60％ A;分析时间75 min;体积流量0.8 mL/min;柱温30℃;进样量20μL.采用电喷雾离子源进行负离子模式监测,多反应监测模式用于定量分析,源喷射电压为-4 500V,离子源温度为550℃.结果 测定的8种成分在线性范围内均具有良好的线性关系(r≥0.999 2);平均回收率在94.51％～102.70％,RSD＜3.50％.在不同产地的天麻饮片中,8种成分的量差异较大.其中,3种巴利森苷类成分的量较高,香荚兰醇和香荚兰醛的量均较低.结论 建立的测定方法分离效果及重复性好,且快速、简便,可作为天麻饮片的质量控制方法.
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正交试验优选天麻中天麻素与对羟基苯甲醇的提取工艺
目的 优选天麻中天麻素与对羟基苯甲醇的超声提取工艺.方法 采用高效液相色谱法测定天麻中天麻素与对羟基苯甲醇的含量,以乙醇浓度、提取时间、料液比为考察因素,以天麻中天麻素与对羟基苯甲醇的含量为考察指标,采用L9(34)正交试验优选佳提取工艺条件.结果 佳提取工艺为提取溶剂50%乙醇,提取时间15 min,料液比1:20.结论 该提取工艺具有效率高、时间短、能耗低、环保等优点,可为天麻中天麻素与对羟基苯甲醇的工业化生产和新药开发提供依据.
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RP-HPLC法同时测定强力天麻杜仲胶囊中6种成分
目的 建立RP-HPLC法同时测定强力天麻杜仲胶囊(天麻、杜仲、当归等)中6种成分的含有量.方法 分析采用依利特C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相乙腈(A)-0.03％磷酸(B),梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;检测波长220 nm;柱温25℃.结果 天麻素、对羟基苯甲醇、松脂醇二葡萄糖苷、阿魏酸、咖啡酸和绿原酸分别在1.010 0～10.1000 μg(r=0.999 6)、0.012 5 ～0.125 0μg(r=0.999 8)、0.009 8 ～0.098 0μg (r=0.999 1)、0.0320～0.320 0μg (r=0.999 1)、0.049 5～0.495 0μg(r=0.999 2)、0.031 6～0.316 0μg(r=0.999 9)范围内呈良好的线性关系,平均回收率分别为97.9％、97.5％、96.7％、97.8％、96.8％、98.2％,RSD分别为0.25％、1.25％、2.19％、0.59％、1.02％、0.90％.结论 该方法准确可靠,重复性好,可用于强力天麻杜仲胶囊的质量控制.
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对羟基苯甲醇对急性脑缺血损伤大鼠脑内炎症因子的影响
目的 探讨天麻成分对羟基苯甲醇(4-hydroxybenzyl alcohol)是否通过减轻脑内炎症反应而对抗大鼠急性脑缺血损伤.方法 大鼠随机分为假手术组、模型对照组、对羟基苯甲醇治疗组和地塞米松干预组,灌胃给药7d,末次给药后采用颈内动脉注射花生四烯酸诱发同侧大脑半球脑血栓形成方法,复制大鼠急性脑缺血损伤模型,3h后对大鼠神经功能损伤进行评分;ELISA法检测脑组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、血栓素A2(TXA2)、6-酮前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)、半胱氨酰白三烯(CysLTs)、白三烯B4(LTB4)的含有量.结果 对羟基苯甲醇能明显减轻大鼠急性脑缺血损伤的神经功能障碍,降低脑组织中TNF-α、IL-1β的量,抑制花生四烯酸代谢环氧酶途径的炎症因子TXA2、6-keto-PGF1α的释放.结论 天麻减轻大鼠急性脑缺血损伤的作用与抑制花生四烯酸代谢环氧酶途径的炎症反应与对羟基苯甲醇有关.
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RP-HPLC法同时测定7个产地天麻中5种成分
目的 建立RP-HPLC法同时测定7个产地(云南昭通和丽江、安徽六安、陕西汉中、贵州德江、四川广元、湖北宜昌)野生天麻、乌天麻、红天麻、黄天麻中5种成分的含有量.方法 天麻70％甲醇提取物的分析采用Waters Sunfire C1s色谱柱(4.6 mm× 250 mm,5μm);以甲醇-0.1％甲酸为流动相,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;检测波长270 nm;柱温35 ℃.结果 腺苷、天麻素、对羟基苯甲醇、对羟基苯甲醛、巴利森苷A在各自范围内均呈良好的线性关系(r≥0.999 5),平均加样回收率99.34％ ～ 101.33％,RSD 1.85％～3.28％.其含有量分别在昭通(2013年采集)、六安(2013年采集)、宜昌(2013年采集)、昭通(2014年采集)、宜昌(2013年采集)乌天麻中高,总含有量在宜昌乌天麻(2013年采集)中高.结论 该方法准确、灵敏、可靠,可用于天麻的质量控制.
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天麻素在大鼠脑、肝、肾及脑不同区域组织匀浆中的代谢研究
目的 研究天麻素在大鼠脑、肝,肾和脑不同区域组织匀浆中的代谢.方法 采用体外匀浆孵育,高效液相法测定天麻素代谢物.结果 在脑、肝、肾匀浆中,天麻素代谢物苷元(对羟基苯甲醇)的生成反应速度常数分别为0.030 5,0.012 1,0.140 9 μg·mL-1·min-1,天麻素在大鼠脑、肝和肾匀浆中的清除率分别为(29.7±2.1),(10.4±0.8)和(299.5±22.7)μL·min-1·g-1.天麻素在脑、肝匀浆中代谢较慢,在肾匀浆中能被迅速代谢,在脑组织不同区域中,天麻素被代谢生成苷元的反应速度常数以小脑、脑桥与延脑、丘脑3个区比较高,皮层、纹状体、海马3个区比较低,前者为后者的约1.5倍.天麻素在大鼠小脑、丘脑、皮层中的清除率分别为(45.9±7.4),(39.6±5.6)和(24.4±3.0)μL·min-1·g-1.结论 天麻素在非酶体系中稳定,在肝、肾、脑组织匀浆中天麻素可被代谢为天麻苷元.在组织中的代谢,以肾快,脑次之,肝小;在脑组织中,天麻素在小脑、丘脑、脑桥与延脑区域代谢速度快于皮层、纹状体和海马区.
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天麻中对羟基苯甲醇抗血小板聚集的作用及机制研究
目的 探讨对羟基苯甲醇抗血小板聚集作用及机制.方法 以二磷酸腺苷(ADP)、花生四烯酸(AA)为诱导剂,探讨对羟基苯甲醇的体外抗血小板聚集活性;采用下腔静脉结扎致大鼠静脉血栓方法,考察对羟基苯甲醇的体内抗血小板聚集活性;并利用双波长荧光分光光度法测定对羟基苯甲醇对AA诱导的家兔血小板聚集胞浆钙离子浓度的影响.结果 对羟基苯甲醇对AA诱导的家兔体外血小板聚集有明显的对抗作用,其半数抑制率(50％ inhibitory concentration,IC50)为0.107 g· L-1,对ADP诱导的家兔体外血小板聚集有抑制作用,IC50为0.3 g·L-1;天麻成分对羟基苯甲醇能显著对抗大鼠下腔静脉血栓的形成;对羟基苯甲醇对AA诱导的家兔血小板细胞外钙内流与内钙释放和对照组相比差异均有非常显著性意义.结论 天麻成分对羟基苯甲醇在体外、体内均具有显著的抗血小板聚集活性;其作用机制可能是通过抑制外钙内流和内钙释放达到抑制血小板聚集作用.
关键词： 天麻 对羟基苯甲醇 抗血小板聚集 血小板胞浆钙离子浓度 -
对羟基苯甲醇对MCAO/R模型大鼠血脑屏障的保护作用研究
目的:研究天麻酚性成分对羟基苯甲醇(4-hydroxybenzyl alcohol)对血脑屏障的保护作用.方法:雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、对羟基苯甲醇20mg/kg组、对羟基苯甲醇10mg/kg组.采用线栓法复制大鼠脑缺血再灌注(MCAO/R)模型,通过神经学评分观察大鼠神经功能缺失症状;采用伊文思蓝渗透法观察血脑屏障通透性;运用Western Blot技术检测血脑屏障相关蛋白AQP-4、Claudin-5及Occludin的表达.结果:大鼠脑缺血2h再灌注24h后,对羟基苯甲醇20mg/kg、10mg/kg均对模型大鼠的神经功能缺失症状具有改善作用,能够降低缺血侧脑组织中伊文思蓝的含量,降低AQP-4蛋白的表达,对紧密连接蛋白(Claudin-5、Oc-cludin)的表达无明显影响.结论:天麻酚性成分对羟基苯甲醇对大鼠脑缺血再灌注损伤后血脑屏障具有保护作用,作用机制可能与其降低AQP-4蛋白的表达有关.
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云南昭通天麻三种变型中四个成分的含量比较研究
目的 比较云南昭通乌、绿、黄天麻中天麻素、腺苷、对羟基苯甲醇和对羟基苯甲醛的含量.方法 采用AgilentTC-C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),以甲醇-0.1％醋酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速1.0mL/min,检测波长270nm,柱温35℃.结果 四个成分的含量比较,天麻素:黄＞乌＞绿;腺苷:绿＞乌＞黄;对羟基苯甲醇:绿＞黄＞乌;对羟基苯甲醛:黄＞乌＞绿.结论 乌、绿、黄天麻中四个成分的含量有明显差异,天麻素和对羟基苯甲醛的含量以黄天麻高,腺苷和对羟基苯甲醇的含量以绿天麻高.
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天麻成分对羟基苯甲醇抗实验性脑血栓形成及抗炎作用研究
目的 观察天麻成分对羟基苯甲醇抗脑血栓形成及抗炎作用.方法 本实验采用经大鼠一侧颈内动脉注射花生四烯酸诱发同侧大脑半球脑血栓形成方法评价天麻成分对羟基苯甲醇的抗实验性脑血栓形成作用;采用二甲苯诱导小鼠耳廓肿胀模型、花生四烯酸、角叉菜胶诱导大鼠足趾肿胀反应模型考察了天麻成分对羟基苯甲醇的抗炎作用.结果 天麻成分对羟基苯甲醇20 mg/kg和15 mg/kg组均能够降低花生四烯酸注射侧大脑伊文思蓝吸光度与脑重的比值(P＜0.01);天麻成分对羟基苯甲醇30 mg/kg、20 mg/kg和15 mg/kg组均能够显著抑制二甲苯诱导小鼠耳廓肿胀,抑制率分别为60.01％、52.72％、45％(P＜0.01);天麻成分对羟基苯甲醇20 mg/kg组能够抑制大鼠足趾注射角叉菜胶诱导的足趾肿胀反应,抑制率为42.56％ (P＜0.01),对大鼠足趾注射花生四烯酸诱导的足趾肿胀反应无明显影响.结论 天麻成分对羟基苯甲醇具有显著的抑制实验性脑血栓形成及抗炎作用,其抗炎作用与抑制花生四烯酸环氧合酶代谢途径有关.
