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耐亚胺培南鲍氏不动杆菌碳青霉烯酶基因分析
目的 分析医院耐亚胺培南鲍氏不动杆菌(IRAB)的碳青霉烯酶基因型和基因周围环境,为临床用药及医院感染的预防控制提供理论基础.方法 采用VITEK-2药敏分析系统进行药敏试验,用改良Hodge试验和组合纸片法分别检测碳青霉烯酶和金属酶表型,PCR检测KPC、OXA-23组、OXA-24组、OXA-51组、OXA-58组基因及插入序列ISAbal.结果 36株IRAB改良Hodge阳性率33.3％；未检测到金属酶；36株均携带OXA基因,其中32株OXA-23+ OXA-66阳性,2株仅OXA-66阳性,1株仅OXA-23阳性,1株仅OXA-58阳性；所有OXA-23上游均存在ISAbal,未检出KPC、OXA-24组基因.结论 该院IRAB主要携带OXA-23、OXA-66型碳青霉烯酶,OXA-23与ISAbal关系密切,存在OXA-58阳性鲍氏不动杆菌.
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产OXA-23型碳青霉烯酶鲍氏不动杆菌引起医院感染的研究
目的 研究医院鲍氏不动杆菌(ABA)耐药性与分布及产碳青霉烯酶的基因型、分子流行特征,为ABA的医院感染预防控制提供依据.方法 收集医院2007-2009年分离自患者痰液以外不同部位ABA,统计其在各年及临床科室的分布,采用纸片扩散法确定其耐药率,应用WHONET 5.4统计软件进行分析;选取194株多药耐药株,应用多重PCR检测碳青霉烯酶、整合酶基因,选取3年blaOXA-23-like阳性不同耐药克隆菌各1株进行序列测定;脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析菌株同源关系.结果 3年共收集ABA510株,其中多药耐药菌427株,占83.7%,所有菌株除对头孢哌酮/舒巴坦、米诺环素耐药率较低外,对其他11种抗菌药物耐药率在68.6%～84.9%;194株多药耐药菌携带有blaOXA-51-like基因,187株菌携带I类整合子;164株菌携带blaoXA-23-like基因;1株菌检出blaOXA-58-like基因;PFGE图谱显示,A型和B型为主要流行型别,分别为79株和58株,3年A型均有检出,而B型和H型在2008年增加明显,且2009年B型检出占到第1位.结论 鲍氏不动杆菌检出有逐年上升趋势且耐药情况严重,多药耐药株常携带有OXA-23型碳青霉烯酶,科室内与不同科室间存在同型别流行,应引起重视.
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产碳青霉烯酶鲍氏不动杆菌的表型筛选研究
目的 研究产碳青霉烯酶鲍氏不动杆菌的耐药性与耐药表型的关系.方法 采用改良Hodge试验和乙二胺四乙酸(EDTA)协同增强试验法,筛选产碳青霉烯酶鲍氏不动杆菌并进行表型研究.结果 130例鲍氏不动杆菌株中,对碳青霉烯类耐药率40.0%,其中高水平耐药类30.0%;喹诺酮类60.0%;四环素66.9%;大环内酯类62.3%;β-内酰胺类70.0%;改良Hodge试验阳性率69.2%,EDTA协同增强试验阳性率98.0%.结论 鲍氏不动杆菌产金属酶,是对亚胺培南和美罗培南等碳青霉烯类抗菌药物耐药的主要原因之一,但表型筛选不能对耐药机制做出完全确定,必须通过分子生物学检验技术,才能终确定耐药的根本机制.
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大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌产碳青霉烯酶的表型检测及耐药分析
目的 了解临床分离的大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶和金属酶的携带情况,并进行相关耐药机制分析.方法 采用VITEK-2型全自动微生物检测系统鉴定细菌；用微量稀释法筛选耐碳青霉烯类抗菌药物的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌共36株；通过Hodge试验检测碳青霉烯酶,以EDTA/IMP、EDTA/CAZ复合纸片,亚胺培南和头孢他啶为底物,进行协同试验检测B类碳青霉烯酶(金属酶),统计分析16种抗菌药物的MIC.结果 36株病原菌对头孢菌素类、碳青霉烯类和喹诺酮类抗菌药物耐药,有5株肺炎克雷伯菌对氨基糖苷类敏感；Hodge试验通过36株病原菌筛选,阳性菌株共30株,其中大肠埃希菌3株,阳性率为37.5％,肺炎克雷伯菌26株,阳性率为92.8％；只发现1株肺炎克雷伯菌金属酶阳性,A方法对金属酶的检测优于B方法.结论 在ICU和呼吸科产碳青霉烯酶是细菌耐药的主要原因.
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产碳青霉烯酶产气肠杆菌的ERIC-PCR图谱分析
目的 了解医院临床产碳青霉烯酶产气肠杆菌感染流行情况,为医院感染控制提供帮助.方法 对医院检验科微生物实验室在2009年6月-2010年3月临床分离出的16株产碳青霉烯酶产气肠杆菌及1株非产碳青霉烯酶产气肠杆菌,用肠杆菌基因间重复一致序列聚合酶链反应(ERIC-PCR)进行基因分型.结果 17株菌株分为两个克隆型,其中16株产碳青霉烯酶产气肠杆菌为同一型,而另1株非产酶菌株为另一型.结论 医院存在产碳青霉烯酶产气肠杆菌克隆传播现象,医护人员应予以高度关注,并及时采取有效措施.
关键词： 碳青霉烯酶 产气肠杆菌 肠杆菌基因间重复一致序列聚合酶链反应 -
南京地区耐亚胺培南肠杆菌科细菌碳青霉烯酶及整合子调查
目的 了解南京地区耐亚胺培南肠杆菌科细菌碳青霉烯酶(KPC酶)及整合子分布.方法 收集南京地区3所三级甲等医院共55株耐亚胺培南肠杆菌科细菌,进行改良Hodge试验,PCR扩增检测细菌KPC酶与整合子基因并行序列分析.结果 55株待检菌中,改良Hodge试验阳性39株,阳性率为70.9％；KPC酶PCR扩增阳性39株,阳性率为70.9％；整合子PCR扩增阳性19株,阳性率为34.5％.结论 KPC酶引起的碳青霉烯类耐药需引起临床及实验室的关注.
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儿童感染耐碳青霉烯酶肠杆菌耐药基因及临床分析
目的 检测儿童感染耐碳青霉烯酶肠杆菌科细菌耐药基因并分析其临床资料,以了解儿童耐碳青霉烯肠杆菌感染的高危因素.方法 通过药敏分析筛选出医院患儿的多药耐药肠杆菌科细菌；采用PCR法检测编码碳青霉烯酶的耐药基因与编码产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的耐药基因；回顾性分析耐碳青霉烯酶肠杆菌感染患儿的临床特点、治疗经过及预后.结果 分离出6株来自感染患儿送检标本分离的耐碳青霉烯酶肠杆菌科细菌,药敏试验显示,对几乎所有碳青霉烯类及β-内酰胺类抗菌药物耐药,仅对部分喹诺酮类及氨基糖苷类抗菌药物敏感；均携带碳青霉烯酶耐药基因与1～2种ESBLs耐药基因；6例患儿长时间使用广谱抗菌药物,均存在相应感染部位；其中4例由外院转诊；收入院时5例病程迁延较长；5例存在基础疾病；除1例死亡和1例失访外,3例痊愈,1例反复感染间断接受治疗.结论 儿童耐碳青霉烯酶肠杆菌科菌株临床感染病例大多存在基础疾病、较长时间使用广谱抗菌药物(特别是碳青霉烯类)等,可能为其高危因素,尽早明确病原耐药变化,并根据药敏试验选择适宜抗菌药物对改善其预后具有重要意义.
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耐碳青霉烯类鲍氏不动杆菌的耐药机制及同源性分析
目的 调查医院ICU流行的耐碳青霉烯类鲍氏不动杆菌的耐药机制及其同源性,为临床有效防治提供依据.方法 收集北京市海淀医院2011年11月ICU住院患者痰标本分离出的耐碳青霉烯类鲍氏不动杆菌4株,按《全国检验技术操作规程》操作,用全自动微生物分析仪进行细菌鉴定及药敏试验,PCR扩增检测碳青霉烯酶基因,用脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行分型,分析其同源性.结果 4株鲍氏不动杆菌中除对头孢哌酮/舒巴坦(2株敏感、2株中度敏感)、磺胺甲噁唑/甲氧苄啶(2株敏感、2株耐药)、阿米卡星(1株敏感、3株耐药)稍敏感外,对其他各种抗菌药物均耐药；4株菌株均携带blaOXA-23-like和blaOXA-51-like基因；PFGE电泳结果显示,4株鲍氏不动杆菌分为A(A1、A2、A3)和B型,其中A型为主要的流行株.结论 鲍氏不动杆菌为多药耐药菌株；产碳青霉烯酶OXA-23是该菌对碳青霉烯类抗菌药物耐药的主要机制；同一克隆株在同一病房内传播致交叉感染.
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产碳青霉烯酶革兰阴性菌感染的发生及其相关危险因素分析
目的 探讨医院产碳青霉烯酶(KPC)革兰阴性菌的感染状况以及可能危险因素.方法 将2010年1-12月医院住院患者中分离对碳青霉烯类抗菌药物敏感性下降的革兰阴性菌,以PCR法分别进行KPC测定,并分析产KPC革兰阴性菌感染的危险因素.结果 对碳青霉烯类抗菌药物敏感性下降的革兰阴性菌中,肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、阴沟肠杆菌、鲍氏不动杆菌等产KPC检出率分别为57.14％、50.00％、46.67％、46.15％和36.36％;痰液、尿液、血液为检出KPC阳性率的前3位标本,分别占33.85％、24.61％、15.38％；单因素和多因素分析显示,住院时间、1周内有侵入性操作、入住手术科室、入住ICU、再次入院或转院、使用碳青霉烯类抗菌药物均为产KPC阴性酶感染的危险因素.结论 医院对碳青霉烯类抗菌药物敏感性下降的革兰阴性菌中产KPC革兰阴性菌比例较高,合理使用碳青霉烯类抗菌药物、尽量缩短住院时间等是控制产KPC革兰阴性菌感染的重要措施.
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耐碳青霉烯类鲍氏不动杆菌碳青霉烯酶基因型及插入序列ISAba1研究
目的：了解耐碳青霉烯类药物鲍氏不动杆菌的临床分布及耐药特征，探讨插入序列ISAba1和碳青霉烯酶与其耐药的关系。方法收集270株耐碳青霉烯类药物的鲍氏不动杆菌，K-B法检测菌株的药物敏感性；改良Hodge试验检测碳青霉烯酶；双纸片协同试验检测金属酶；多重 PCR检测 OXA-51、OXA-23、OXA-58、OXA-24、IMP、VIM、SIM ，PCR检测ISAbal-OXA-23、ISAbal-OXA-51基因并进行测序分析；采用WHONET 5．6软件对菌株药敏结果进行统计分析。结果在检测的18种药物中，14种药物耐药率超过90．0％，哌拉西林耐药率高为100．0％，头孢哌酮/舒巴坦的耐药率低为48．9％；改良 Hodge试验阳性156株，阳性率57．8％；金属酶表型检测均为阴性；270株菌均检测到了 OX A-51基因，267株菌检测到 OX A-23基因，1株检测到 OX A-58基因，未检测到OXA-24、IMP、VIM、SIM 基因；267株菌的 OXA-23基因上游均检测到插入序列 ISAbal ，所有OX A-51基因上游均未检测到 ISAbal。结论耐碳青霉烯类药物鲍氏不动杆菌耐药十分严重；OX A-51和OX A-23型碳青霉烯酶是本地区鲍氏不动杆菌的主要碳青霉烯酶；ISAba1常在 OX A-23基因上游出现，ISAbal-OX A-23是鲍氏不动杆菌对碳青霉烯类药物耐药的重要机制。
关键词： 鲍氏不动杆菌 碳青霉烯酶 插入序列ISAba1 耐药性 -
耐碳青霉烯类鲍氏不动杆菌OXA型碳青霉烯酶的基因表达研究
目的：检测耐碳青霉烯类鲍氏不动杆菌中 OX A型碳青霉烯酶，探讨鲍氏不动杆菌的耐药机制。方法收集医院2011年1月－2012年12月分离自住院患者痰液标本，经VIT EK‐2 Compact全自动微生物鉴定药敏分析系统鉴定的耐碳青霉烯类鲍氏不动杆菌，采用限制性内切酶分析技术方法进行鉴定，并使用多重PCR方法检测OX A型碳青霉烯酶基因。结果212株鲍氏不动杆菌中200株鉴定为耐碳青霉烯类鲍氏不动杆菌，其对二、三、四代头孢菌素均耐药，对氟喹诺酮类抗菌药物耐药率达98．37％；200株耐碳青霉烯类鲍氏不动杆菌均表达OXA‐51，其中 OXA‐23‐like基因155株；155株 OXA‐23阳性的耐碳青霉烯类鲍氏不动杆菌，104株分离自ICU住院患者，占67．10％。结论表达OX A‐23‐like型碳青霉烯酶是耐碳青霉烯类鲍氏不动杆菌的主要耐药机制，鲍氏不动杆菌的耐药形势严峻，尤其是耐碳青霉烯类鲍氏不动杆菌。
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耐碳青霉烯类鲍氏不动杆菌金属β-内酰胺酶检测与同源性分析
目的：分析医院耐碳青霉烯类鲍氏不动杆菌（CRAB）产金属β‐内酰胺酶及菌株间同源性。方法收集医院2012年8－12月临床分离的耐碳青霉烯类鲍氏不动杆菌共51株，用VIT EK‐2药敏分析系统进行药敏试验，用EDTA纸片协同试验筛查金属酶表型，PCR检测 IMP、SIM‐1、VIM、NDM‐1型金属酶基因；重复序列聚合酶链反应（REP‐PCR）方法分析菌株同源性。结果51株CRAB对多种抗菌药物耐药，EDT A纸片协同试验检测金属酶仅有1株阳性，阳性率1．96％，51株CRAB经 PCR检测后仅有1株携带了 N DM‐1型基因，未检测出IM P、S IM‐1、V IM型基因；用REP‐PCR法可将51株CRAB分为4个基因型（A‐F），其中A型48株，占94．12％，为主要流行株；B、C、D各有1株。结论该院临床分离的CRAB株存在 N DM‐1型金属酶，REP‐PCR法分析CRAB同源性，提示该院CRAB存在水平克隆传播，A型主要流行株。
关键词： 鲍氏不动杆菌 碳青霉烯酶 金属β-内酰胺酶 重复序列聚合酶链反应 -
CarbaNP碳青霉烯酶检测方法在医院感染监测中的应用
目的：研究Carba NP法检测3株产酶菌株同源性及耐药机制，探讨Carba NP 碳青霉烯酶检测方法在医院感染监测中的应用价值，为临床治疗提供参考依据。方法于2012年7月－2013年1月采用Carba NP法对检出3株产碳青霉烯酶克雷伯菌属细菌进行鉴定、药物敏感性、菌株特征及药物敏感谱；PCR扩增和测序碳青霉烯酶的基因型；PFGE电泳探讨3株菌的亲缘关系。结果菌株1为肺炎克雷伯菌，产碳青霉烯酶酶KPC‐2；菌株2为肺炎克雷伯菌，产碳青霉烯酶IMP‐4，菌株3为产酸克雷伯菌，同时产KPC‐2和IMP‐4；PFGE结果表明该3株菌不是近源的克隆株，提示 K PC‐2和 IM P‐4基因元件在该病房的跨种属传播。结论 Carba NP能早期迅速准确的检出菌株是否产碳青霉烯酶，为产碳青霉烯酶菌株的医院感染提供早期线索，在医院感染监测、控制中有重要应用价值，结合PCR及测序，PFGE的结果能在医院获得性感染控制方面发挥积极的作用。
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产KPC型碳青霉烯酶细菌感染的相关因素分析
目的：了解产K PC型碳青霉烯酶细菌感染的相关因素，为临床提供合理的预防控制措施，避免产K PC型碳青霉烯酶流行。方法回顾性分析医院2011年1月-2012年12月产K PC型碳青霉烯酶细菌感染的61例患者临床资料，对检测出产K PC型碳青霉烯酶的科室和月份分布与其他感染K PC酶细菌患者的接触史、检测出KPC酶细菌之前1个月内患者抗菌药物的使用等进行分析，采用SPSS17．0软件对数据进行统计处理。结果61例产K PC酶细菌感染患者中住IC U和神经外科的患者占63．9％；在7～12月份产K PC酶细菌感染的患者占82．0％；55．7％的患者与感染或曾经感染产K PC型碳青霉烯酶细菌的患者同时住在同一病区，患者在检测出产K PC型碳青霉烯酶前1个月内哌拉西林／他唑巴坦和头孢哌酮／舒巴坦使用率分别为55．7％和27．9％。结论入住IC U和神经外科、与感染产K PC酶细菌的患者入住同一病区及7～12月为产K PC酶细菌感染的危险因素，应早期监测、隔离、控制、加强手卫生等措施，防止K PC碳青霉烯酶流行。
关键词： 产K PC型碳青霉烯酶 碳青霉烯酶 相关因素 -
耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌耐药机制研究
目的：研究临床分离的耐亚胺培南肺炎克雷伯菌的分子流行病学及耐药机制，为制定预防控制该类细菌传播提供系统的试验数据和参考依据。方法收集并鉴定碳青霉烯类抗菌药物耐药肺炎克雷伯菌40株，肠杆菌基因间重复性一致性序列‐PCR（ERIC‐PCR）分析菌株的分子流行病学；药敏试验采用琼脂稀释法，改良Hodge方法检测碳青霉烯酶，EDTA‐Na2双纸片协同法检测金属β‐内酰胺酶，PCR及耐药基因克隆测序方法研究细菌的耐药机制，质粒结合试验确定耐药基因的转移性。结果40株肺炎克雷伯菌仅对多黏菌素和替加环素显示了较好的敏感性；改良Hodge试验阳性30株，金属酶检测试验结果均为阴性；ERIC‐PCR将40株肺炎克雷伯菌分为4型，以Ⅰ型为主；PCR结果显示，KPC‐2型32株、CTX‐M‐9型27株、SHV型22株、TEM型19株，其中有25株同时携带≥3种的耐药基因；质粒接合试验显示，3株分离菌株成功传递了对碳青霉烯类的耐药性。结论医院存在质粒介导的碳青霉烯类耐药性的水平传播；耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌耐药机制主要是产KPC‐2碳青霉烯酶，CTX‐M‐9、SHV和TEM型β‐内酰胺酶同时参与其多药耐药机制。
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多药耐药肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶及整合子检测与分析
目的：了解新疆维吾尔自治区多药耐药肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶和整合子分布，为有效控制医院感染提供重要依据。方法收集2010年5月-2011年12月医院各种标本5208份，使用VITEK-2Compact系统进行菌株的鉴定和药敏试验，对14株肺炎克雷伯菌进行改良Hodge试验，亚胺培南-EDTA协同试验，使用PCR技术检测blaNDM、blaIMP、blaIMI、blaVIM、blaGES、blaKPC、Ⅰ～Ⅲ类整合酶及整合子可变区，并测序明确基因型。结果14株肺炎克雷伯菌对阿米卡星和妥布霉素的耐药率均为71．42％，对亚胺培南和美罗培南及其他抗菌药物的耐药率均为100．00％；14株多药耐药肺炎克雷伯菌改良Hodge试验有13株表现为阳性，阳性率92．86％；亚胺培南-EDTA纸条法协同试验检测均表现为阴性；PCR检测多药耐药肺炎克雷伯菌均携带KPC-2基因和Ⅰ类整合子；7株整合子可变区扩增出dfrA12-aadA2基因。结论新疆维吾尔自治区发现的多药耐药肺炎克雷伯菌携带KPC-2基因和Ⅰ类整合子，耐药机制与KPC-2和Ⅰ类整合子有关。
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耐碳青霉烯类鲍氏不动杆菌基因检测与耐药性研究
目的：研究耐碳青霉烯类鲍氏不动杆菌基因及其耐药性，为临床治疗与感染控制提供依据。方法收集医院2013年8－11月临床送检标本分离的非重复耐碳青霉烯类鲍氏不动杆菌26株，采用Phoenix100微生物全自动鉴定系统进行菌株鉴定及药敏试验；PCR方法扩增菌株的碳青霉烯酶B类和D类基因；阳性产物经 ABI基因测序仪测序确认。结果26株耐碳青霉烯类鲍氏不动杆菌对多黏菌素无耐药株，对四环素、阿米卡星、庆大霉素、磺胺甲噁唑／甲氧苄啶耐药率分别为11．5％、73．1％、92．4％、96．2％，对其余11种抗菌药物耐药率均为100．0％；26株鲍氏不动杆菌中检出blaOXA‐64、blaOXA‐51和 blaOXA‐23阳性率100．0％；blaIMP‐1基因阳性率69．2％，未检出 blaOXA‐24、blaOXA‐48、blaOXA‐55、blaOXA‐58、blaOXA‐60、blaOXA‐66、blaVIM‐2和blaVIM‐7基因。结论医院耐碳青霉烯类鲍氏不动杆菌主要碳青霉烯酶基因是 blaOXA‐23、blaOXA‐51、blaOXA‐64及blaIMP‐1；blaOXA‐64、blaIMP‐1耐药基因共存同一菌株，是医院耐碳青霉烯类鲍氏不动杆菌的特点，与其他地区不同，医院鲍氏不动杆菌已呈现多药耐药应引起临床重视。
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医院感染pittii不动杆菌的研究进展
鲍氏不动杆菌、pittii不动杆菌（Acinetobacter pittii）和nosocomialis不动杆菌（Acinetobacternosocomia-lis）是临床送检标本中分离到的主要的不动杆菌；近年来，作为条件致病菌的pittii不动杆菌已经成为重要的医院感染病原菌之一，并在部分文献报道中超过了鲍氏不动杆菌；鉴于这3种不动杆菌表型相近，商品化方法鉴定正确率有限；重要的是，pittii不动杆菌无论在临床价值方面，还是在耐药机制上，均与鲍氏不动杆菌存在较多差异；该综述简述了医院感染pittii不动杆菌的鉴定方法、分子流行病学研究进展、临床预后和产碳青霉烯酶的研究现状，并进行了总结分析，提示使用分子遗传学方法对pittii不动杆菌进行准确鉴定很有必要，临床实验室还应加强对细菌耐药性监测及医院感染的管理控制。
关键词： pittii不动杆菌 鲍氏不动杆菌 医院感染 碳青霉烯酶 -
不动杆菌属对碳青霉烯类抗菌药物的耐药机制与治疗
不动杆菌属是一种条件致病菌,由于广谱抗菌药物的使用,加之不动杆菌属具有多种耐药机制,成为临床上棘手的问题.一直以来,碳青霉烯类抗菌药物是治疗此类耐药菌有效的药物.近年发现,不动杆菌属对以亚胺培南为代表的碳青霉烯类抗菌药物的耐药水平逐年增加,给临床治疗带来严峻的挑战.笔者将不动杆菌属对碳青霉烯类抗菌药物的耐药机制及治疗做一综述.
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KPC型碳青霉烯酶的研究进展
超广谱抗菌药物耐药细菌的出现,直接导致碳青霉烯类抗菌药物的滥用,促使产碳青霉烯酶细菌在世界范围内暴发流行[1].目前,此类耐药细菌已成为医院感染的一个严重问题,引起了世界卫生部门的极大关注.
