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33株艰难梭菌临床分离株的多位点序列分型
目的 了解我国石家庄地区艰难梭菌临床分离株的多位点序列分型(MLST)情况.方法 回顾性研究.收集2010年7月至2011年12月石家庄市两家医院成人腹泻患者分离的33株艰难梭菌,并对其进行PCR毒素基因检测、PCR核糖体分型和MLST.采用START2系统进行统计学分析.结果 所分离的33株艰难梭菌中共检出10种ST型别(ST2/3/4/35/37/53/54/55/102/172)和12种核糖体型别,其中ST37/S Ⅰ(9/33,占27.3％)和ST54/SⅢ(8/33,占24.2％)是该地区流行的主要型别.ST172是新发现的ST型,已被MLST数据库收录.系统发育分析显示,其中6个ST型(ST2、ST3、ST4、ST53、ST54、ST102)位于一个较大组别,而ST35、ST37、ST55、ST172为零散型别.结论 在石家庄地区医院内成人腹泻患者分离的33株艰难梭菌以ST37和ST54型为主,并且医院间无明显的同源性.
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两种产毒型艰难梭菌分子诊断方法的临床应用评价
目的 通过与Xpert C.difficile/Epi检测临床粪便样本中艰难梭菌毒素基因方法的对比,系统评价实验室研发的艰难梭菌毒素基因多重荧光PCR检测方法的性能.方法 2016年8月1日至12月30日采集杭州市余杭区第一人民医院和宁波市鄞州人民医院临床腹泻患者粪便样本176份,平行采用Xpert C.difficile/Epi和实验室研发的检测方法进行检测,同时进行艰难梭菌分离培养和PCR毒素鉴定.采用SPSS 20.0软件对检测结果进行交叉表分析.结果 以Xpert C.difficile/Epi检测结果为标准,本实验室研发方法的敏感度为91.7％(22/24)、特异度为100％(152/152)、阳性预测值为100％(22/22)、阴性预测值为98.7％(152/154),两种方法检测结果的一致性好(Kappa=0.950,P<0.001).以厌氧分离培养和PCR毒素检测结果为标准,本实验室研发方法的敏感度为90.0％(18/20)、特异度为97.0％(152/156)、阳性预测值为81.8％(18/22)、阴性预测值为98.7％(152/154)(Kappa=0.838,P<0.001);Xpert C.difficile/Epi的敏感度为90.0％(18/20)、特异度为96.0％(150/156)、阳性预测值为75.0％(18/24)、阴性预测值为98.7％(150/152)(Kappa=0.792,P<0.001).结论 实验室研发的艰难梭菌毒素基因多重荧光PCR检测方法与Xpert C.difficile/Epi检测性能基本一致,可直接用于临床腹泻标本中产毒型艰难梭菌检测.该方法的临床应用为国内临床艰难梭菌感染病例的诊断提供一种国产化的检测方法.
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727株不同人群艰难梭菌分离株的耐药性特征
艰难梭菌是一种革兰阳性专性厌氧芽孢杆菌，为人类肠道的正常菌群。2003年以来，艰难梭菌感染（ Clostridium difficile infection，CDI）的发病率和疾病严重程度在全球范围内呈上升趋势，尤其是艰难梭菌高产毒株（ BI／NAP1／027／毒素Ⅲ型）的出现和暴发流行，使得艰难梭菌成为医院获得性腹泻的主要病原菌之一。027型高于毒株对多种抗生素耐药，在其暴发流行中起到了一定的作用［1］。近年来有报道称CDI的传统治疗药物甲硝唑和万古霉素的敏感性有所下降，且治愈后复发率高达25％～60％［2］。国内对CDI的关注也逐渐增多［3-4］，但艰难梭菌耐药性方面的相关报道较少，且菌株数量少，标本来源单一。因此，本研究对近年来从河北地区不同人群收集到的艰难梭菌分离株进行抗生素敏感性分析，为临床CDI的预防和治疗提供可靠数据。
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Robinsoniella peoriensis与艰难梭菌鉴别检测方法的研究
目的 探讨Robinsoniella peoriensis(R.peoriensis)与艰难梭菌(Clostridium difficile)的鉴别诊断.方法 2016年12月广州军区广州总医院检验科从1例疑似抗生素相关性腹泻患者的粪便标本中分离到了1株R.peoriensis,采用实验室检测方法与本实验室收集的艰难梭菌(Clostridium difficile)进行鉴别诊断.对分离株进行革兰染色、生长特性、形态特点、生化特征、酶免疫法检测、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)以及16S rRNA序列分析.结果 R.peoriensis是一种革兰阳性厌氧芽孢短杆菌,MALDI-TOF MS与谷氨酸脱氢酶(GDH)均不能将R.peoriensis与艰难梭菌区别开,16 srRNA测序是唯一能准确鉴定R.peoriensis的方法.结论 传统的鉴定系统尚不能识别或错误识别R.peoriensis,易与艰难梭菌产生混淆,干扰艰难梭菌相关性腹泻的诊断.
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艰难梭菌感染的实验室检测技术及临床意义
艰难梭菌（ Clostridium difficile， CD）又称难辨梭状芽孢杆菌，广泛分布于自然环境、人类和动物的粪便中，是医院内肠道感染的重要致病菌之一。艰难梭菌感染（ Clostridium difficile infection， CDI）患者的临床表现可为自限性腹泻，重者可出现伪膜性肠炎，甚至中毒性巨结肠。临床大量不合理使用广谱抗生素、免疫抑制剂、质子泵抑制剂或化疗药物后，破坏人体正常的肠道微生态平衡，致CD过度生长并释放肠毒素、细胞毒素和二元毒素，引起 CD 相关性腹泻（ Clostridium difficile associated diarrhea， CDAD）。
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抗生素相关性腹泻
抗生素相关性腹泻(antibiotic-associated diarrhea,AAD)是指应用抗生素后发生的、与抗生素有关的腹泻.700多种可引起腹泻的药物中25%为抗生素.AAD的发病率因人群及抗生素种类的差异而不同.常见的致病菌是艰难梭菌.按AAD的病情程度不同,可将其分为5种类型.本文对AAD的发病机制、临床表现及诊治作一综述.
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艰难梭菌感染的流行状况及诊治进展
近年来,艰难梭菌感染(Clostridium difficile Infection,CDI)的发生频率在世界各地呈上升趋势,已成为令人担忧的健康问题.高毒力株027/NAP1/BI的出现导致该病在全球特别是欧洲和北美的流行暴发迅速增多,严重病例数、复发率和病死率均明显增高,耐药菌株也在增多.CDI的临床表现多样,可以是轻度水样腹泻,也可以是威胁患者生命的结肠炎、中毒性巨结肠和败血症.实验诊断方法包括艰难梭菌的厌氧培养、细胞毒性试验、菌体及毒素抗原检测、毒素基因扩增检测等.治疗时应首先停用相关的抗生素,应用抗艰难梭菌的抗生素、免疫调节剂及益生菌调节肠道菌群.
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美国艰难梭菌感染临床诊治相关指南摘要
艰难梭菌感染是医源性腹泻的重要原因。本文综合2010年美国卫生保健流行病学会和美国感染病学会制订的《成人艰难梭菌感染临床诊治实践指南》和美国专家2013年形成的《艰难梭菌感染诊治预防指南》，对艰难梭菌感染的诊断、治疗和预防进行摘要介绍。
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伪膜性肠炎10例
目的:探讨伪膜性肠炎(PMC)的临床表现、诊断及治疗情况,提高对PMC的认识.方法:对我院4a来诊治的10例PMC患者进行回顾性分析.结果:10例患者中8例为老年患者,全部患者均在应用抗生素过程中发生腹泻、腹痛、发热,7例有伪膜排出,7例做了结肠镜检查,均提示为PMC,应用万古霉素和甲硝唑治疗后症状消失,全部治愈.结论:PMC多系在应用抗生素后发病,老年人、重症患者和外科大手术等患者为易感人群.结肠镜检查诊断PMC具有快速可靠的优点.对老年人及重症患者在使用抗生素过程中出现腹泻、腹痛、发热和白细胞升高现象,应高度怀疑PMC,及时行结肠镜检查,粪便细菌培养和艰难梭菌毒素检测,以早期明确诊断.
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肠道梭菌在腹泻发生及治疗中的作用机理
梭菌是肠道一大类兼性厌氧细菌,与许多疾病息息相关.其中艰难梭菌和产气荚膜梭菌主要通过产生毒素和气体诱发腹泻.临床主要通过酪酸梭菌、普拉梭菌等益生菌、梭菌疫苗、抗生素以及粪菌移植等手段抑制有害梭菌的增殖,恢复肠道菌群平衡治疗梭菌感染性腹泻.本文主要阐述肠道梭菌对腹泻机理的影响和治疗作用,为探索肠道梭菌感染性腹泻的治疗提供研究思路.
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艰难梭菌感染现状与预防措施
艰难梭菌感染不但是欧美国家常见的医疗保健机构相关性感染，近年来也成为我国面临的公共卫生安全威胁之一。本文以艰难梭菌感染流行病学和预防控制为主题，回顾了 PubMed和中国知网数据库的文献，从艰难梭菌的生存模式和传播、流行情况、疾病负担和危险因素等多角度阐述了国内外艰难梭菌感染的现状，并综述了监测、接触预防和手卫生、抗菌药物使用策略、环境控制、益生菌和疫苗等预防艰难梭菌感染的措施，为进一步防控艰难梭菌感染提供了参考依据。
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重症艰难梭菌感染者诊治研究进展
艰难梭菌感染(CDI)可引起大肠内膜炎,其主要症状可有不同程度的腹泻、发热、腹痛和便血,也可引起败血症、肠穿孔及腹腔感染.重症患者需要接受抗菌药物、支持治疗以及密切监护,部分患者可能需要接受外科手术治疗.其他替代治疗方案目前正在研究中,包括益生菌、粪便灌肠以及其他一些抗菌药物的治疗.
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急性淋巴细胞白血病合并抗菌药物相关腹泻一例
目的 探讨抗菌药物相关腹泻的临床特征、实验室检查及治疗方法.方法 回顾性分析联勤保障部队第960医院2017年收治的1例急性淋巴细胞白血病患者合并抗菌药物相关腹泻患者的病例资料和诊疗过程.结果 患者经过多次化疗,在行造血干细胞移植术前予以抗菌药物治疗以清洁肠道、预防感染,使用抗菌药物后发生腹泻、高热、恶心、呕吐;实验室检查:粪便涂片可见革兰阳性芽孢杆菌,疑似梭样芽孢杆菌;艰难梭菌抗原阳性、毒素阳性.及时停用抗菌药物,加用盐酸万古霉素和相应的补液、营养、调节菌群等对症治疗,腹泻症状逐渐缓解.结论 长期住院、免疫力低下及长期使用抗菌药物为抗菌药物相关性腹泻的重要危险因素,应合理规范的使用抗菌药物,准确及时检查诊断、进行正规治疗.
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老年医学科患者艰难梭菌检测结果与定植危险因素分析
目的 研究医院老年医学科患者粪便中艰难梭菌的检出率,并分析定植危险因素,为制定有效的预防与控制措施提供理论依据.方法 2014年12月14日开展横断面调查,留取老年医学科78例住院患者的粪便标本,用选择性培养基进行厌氧培养,并利用多重PCR技术进行艰难梭菌毒素基因检测,同时收集所有患者的临床资料,进行艰难梭菌定植高危因素分析;采用SPSS18.0软件进行统计分析.结果 78例患者中艰难梭菌培养阳性36例,阳性率46.15％,均为无症状携带患者;36株艰难梭菌中有tcdA +/tcdB+基因14株占38.89％,tcdA— /tcdB—基因18株占50.00％,tcdA— /tcdB+基因4株占11.11％;患者年龄、住院日、1个月内鼻饲管及抗菌药物的使用为其定植高危因素.结论 医院老年医学科住院患者艰难梭菌定植率高,年龄、住院日、1个月内鼻饲管及抗菌药物的使用为其定植高危因素.
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艰难梭菌克隆分布及药物敏感性现状分析
目的 探讨杭州地区医院获得性腹泻患者艰难梭菌的克隆分布及药敏表型特征.方法 对2013年1月-2016年12月间浙江大学医学院附属第一医院及邵逸夫医院医院获得性腹泻患者的粪便标本进行艰难梭菌(Clostridium difficile,CD)培养初筛,初筛阳性菌株通过PCR扩增及测序分析16-23S rRNA基因及毒素基因(tcdA及tcdB基因),以明确CD菌种以及是否为产毒菌株;以MLST技术对产毒CD菌株进行同源性分析;并对CD菌株进行药敏敏感性试验.结果 共培养CD菌株61株,其中54株为产毒菌株,tcdA及tcdB基因阳性菌株数分别为1株(A+B-)和53株(A-B+),未发现毒素基因双阳性菌株;产毒菌株来源于11个不同ST型别,其中7个ST型别为已知的;各ST型别间亲缘关系较远,ST54型别是主要流行克隆型别占38.9％(21/54),其次是ST2、ST35和ST37,各占比13.0％(7/54);万古霉素及甲硝唑为敏感性高的药物,未发现耐药菌株,其次是左氧氟沙星 、四环素和环丙沙星,耐药率分别为16.6％ 、31.4％ 和38.8％,克林霉素及夫西地酸耐药率高均为96.3％.结论 毒素表型A-B+的ST54型艰难梭菌为本地区主要流行克隆,万古霉素和甲硝唑是有效的治疗CDI的抗菌药物.
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老年人群分离艰难梭菌分子型别特征研究
目的 对不同老年人群粪便中艰难梭菌进行分离培养、鉴定以及分子型别特征研究,分析其规律特征,为积极有效地预防与控制老年人群艰难梭菌感染提供数据支持.方法 收集2010年1月～2016年12月不同老年人群的粪便样本,厌氧培养艰难梭菌,并使用多位点序列分型(MLST)、毒素基因A、B和二元毒素检测、核糖体分型的方法,对老年人群分离的艰难梭菌进行研究分析.结果 116名老年人的粪便样品中分离出艰难梭菌;MLST分型得到32个型别,其中ST3、ST2、ST35、ST11为主要型别,新发现型别ST332及ST473;老年人群中艰难梭菌以产A毒素、B毒素并二元毒素阴性的菌株为主;经核糖体分型鉴定其中1株为RT027型(ST1型),发现6株RT078型(ST11型),RT001型为常见.结论 老年住院患者是艰难梭菌感染的高危人群,老年人群分离的艰难梭菌多为产毒株,ST37型非主要型别,与以往报道略有不同,并发现引起暴发流行的高毒株,应注重加强老年人群的艰难梭菌检测和预防措施.
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我国住院腹泻患者艰难梭菌感染率的荟萃分析
目的 运用荟萃分析评价我国住院腹泻患者艰难梭菌的感染情况,为艰难梭菌的医院感染控制提供依据.方法 系统检索PubMed、中国期刊全文数据库(CNKI)、中国生物医学文献数据库、万方数据库以及维普信息资源系统中建库至2016年9月发表的有关我国住院腹泻患者艰难梭菌感染情况的研究文献,参考疾病患病率或发病率研究质量评价准则评价文献质量,采用R软件进行分析,根据患者科室、地区和性别执行亚组分析,通过异质性检验以选择固定效应模型或随机效应模型对感染率进行合并,并用敏感性分析及漏斗图评价发表偏倚.结果 共纳入31篇文献,总样本量为9600人,艰难梭菌整体合并感染率为19%(95%C I:16~22),抗菌药物相关腹泻患者的艰难梭菌感染率为19%(95%C I:13~24);亚组分析显示:不同科室类别、地区、性别的患者,其艰难梭菌感染率存在差异且有统计学意义.结论 我国住院腹泻患者艰难梭菌感染率较高,医院需加强对重点人群艰难梭菌感染的防控与管理.
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艰难梭菌毒素蛋白表达与艰难梭菌感染分级关系的研究
目的 分析医院艰难梭菌感染(clostridium difficile infection,CDI)患者的临床表现与实验室检查结果,初步研究艰难梭菌毒素蛋白表达与CDI严重程度分级的关系.方法 收集2016年3月-2017年5月医院连续采集的860例腹泻便样本,采用Teehlab Cdiff Quik Check Complete试剂盒和艰难梭菌毒素基因试剂盒分别检测艰难梭菌谷氨酸脱氢酶抗原(Clostridium difficile glutamate dehydrogenase antigen,GDH)、艰难梭菌毒素蛋白和艰难梭菌毒素基因,并对CDI患者临床资料和实验室结果进行统计分析.结果 860份腹泻样本中,GDH阳性99例占11.51％,其中艰难梭菌毒素蛋白阳性16例占16.16％,毒素基因阳性94例占94.95％;艰难梭菌毒素蛋白阳性患者的外周血白细胞数量、血清肌酐水平、腹泻次数、CDI分级指数及院内CDI患者概率均高于毒素蛋白阴性患者(P＜0.05).结论 艰难梭菌毒素蛋白阳性患者常伴随严重的艰难梭菌感染临床表现,推测艰难梭菌毒素蛋白可作为一项重度艰难梭菌感染的预测指标,为临床判断CDI分级及合理选择治疗方案提供及时客观的依据.
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艰难梭菌感染与炎症性肠病的关系研究
目的：研究艰难梭菌（CDR ）感染与炎症性肠病（IBD ）发生、发展的相关性，为临床治疗 IBD提供参考。方法选择2015年5月－10月于医院就诊58例IBD患者设为观察组，另选同期42名健康体检人员为对照组；采用两步酶免夹心法以及终点荧光检测两组CDR ，并分析观察组不同临床症状患者CDR感染率及其相关性。结果观察组58例IBD患者中8例发生CDR感染，占13．79％；观察组患有克罗恩病、疾病为活动期、初发型以及累及结肠患者CDR感染率分别为28．57％、20．00％、37．50％、21．88％，显著高于患有溃疡型结肠炎、疾病为缓解期、非初发型以及累及非结肠患者的5．41％、0．00％、10．00％、3．85％，差异均有统计学意义（ P＜0．05）；Pear‐son相关性分析显示，患有克罗恩病、疾病为活动期、初发型以及累及结肠型IBD患者均分别与CDR感染呈正相关（r＝0．684、0．781、0．703、0．639；均 P＜0．05）。结论患者发生CDR感染与IBD的发生、发展密切相关。
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艰难梭菌无症状携带者危险因素分析
目的 探讨艰难梭菌无症状携带者的危险因素,为制定针对性的预防控制策略提供一定理论依据.方法 采用单纯随机抽样,选取2014年9月21-27日于医院住院＞2周的患者128例为研究对象,收集其肛拭子标本,通过厌氧培养,经VIDAS荧光酶联免疫技术进行艰难梭菌毒素A/B检测,利用多重PCR技术进行艰难梭菌毒素基因检测,并利用SPSS 19.0软件进行艰难梭菌无症状携带者危险因素的多因素分析.结果 128例患者肛拭子标本中培养艰难梭菌阳性22株,阳性率为17.19％,均为无症状携带者;单因素分析显示,艰难梭菌无症状携带者在年龄、糖尿病史、使用抗菌药物、抗菌药物使用天数、使用氟喹诺酮类药物等方面差异有统计学意义(P＜0.05);logistic回归分析显示,近期使用抗菌药物和有糖尿病史可能为患者无症状携带艰难梭菌的独立危险因素,OR值分别为5.70(95％CI:1.69～19.21)和3.86(95％CI:1.21～12.26).结论 医院住院患者艰难梭菌培养阳性率较高,应加强对其监测和筛查,特别是对使用抗菌药物或患有糖尿病的患者更应密切关注.
