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肺癌转移相关基因ABCE1的筛选
①目的 从肺癌转移相关的3个候选基因片段(C1、L1、L2)中筛选出目的基因片段,并克隆其基因全长.②方法 3种肺癌细胞株及4种肺癌手术标本总RNA的提取;运用RT-PCR技术中,对肺癌转移相关基因C1、L1、L2片段进行验证,钓取目的片段;运用RACE(cDNA末端快速扩增)技术克隆出其基因全长序列,并登录Genbank,进行序列比对,确定克隆的基因性质.③结果 在NCI-H446细胞和95-D细胞中未得到C1和L1基因目的大小片段,只有L2基因目的片段;从2种细胞株中均得到L2基因的3′端部分未知序列1169 bp;从NCI-H446细胞中得到L2基因的5′端未知序列178 bp,从95-D细胞中145bp.3′、L2基因序列与已知的ABCE1基因序列同源性100%.④结论 从已知的3个片段C1、L1、L2中,成功筛选与肺癌转移相关基因L2即ABCE1基因.
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胃癌淋巴结转移相关基因差异表达分析
[目的]探讨胃癌淋巴结转移过程中相关基因群的表达和功能.[方法]从6例胃癌患者分别抽取胃癌和淋巴结转移组织的总RNA,采用逆转录的方法,制成cDNA链,并以两种荧光Cy5和Cy3标记后做探针,与含有14784条人类14KcDNA基因表达谱芯片进行杂交.以Agilent荧光扫描仪扫描芯片上两种荧光信号,进行计算机处理和分析,筛选出胃癌淋巴结转移组织中差异表达的基因,并用RT-PCR实验对部分差异表达基因进行验证.[结果]在14784条基因中,胃癌原发灶与淋巴结转移组织间存在差异表达的基因共80条,其中59条基因表达显著上调, 21条基因表达显著下调.经RT-PCR验证,差异表达趋势与基因芯片技术检测的结果一致.[结论]胃癌组织和淋巴结转移组织之间存在多个差异表达的基因,胃癌淋巴结转移的发生与发展是多种相关基因表达失常所致.
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应用差异显示法对小细胞肺癌转移相关基因的筛选
目的:筛选与人小细胞肺癌转移相关基因,揭示肺癌的转移机制.方法:采用激光俘获显微切割(LCM)及mRNA差异显示技术(DD)对手术切除的小细胞肺癌、癌转移淋巴结进行筛选并克隆与转移相关的基因片段,测定其序列后在基因库(GenBank)中进行BLAST检索分析其同源性.结果:小细胞肺癌原发灶与癌转移淋巴结的基因表达具有明显差异,共获得差异片段(EST,表达序列标签)24个,选择差异明显的3个片段克隆测序后,发现3片段均位于肿瘤高度相关的3q、7q和10q,均为未知序列,未发现同源基因,可能为新的基因片段.用RT-PCR对位于抑癌基因PTEN上游的L1片段进行验证的结果证实了该片段在小细胞肺癌的高表达率,具有统计学意义(P＜0.05).结论:人小细胞肺癌原发灶与癌转移淋巴结的基因表达存在差异,所测序的3个基因片段均为未知基因序列,这些片段可能为小细胞肺癌的转移相关候选基因,其序列和功能值得进一步深入研究.应用DDRT-PCR技术有望找到调控肿瘤转移的基因,为肿瘤的诊断和治疗提供新的线索.
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MACC1与C-met在食管癌组织中的表达及其临床意义
我国食管癌的发病率和死亡率分别占全球食管癌发病和死亡人数的53．86％和49．26％［1］，早期诊断、治疗对于延长患者的生存期、提高生活质量有着重要的意义。肠癌转移相关基因1（Metastasis-as-sociated in colon cancer 1，MACCl）是近年发现的与结肠癌浸润转移密切相关的基因，在结肠癌组织中表达明显的升高［2］。研究表明，MACCl 与结肠癌、卵巢癌以及肺腺癌等多种肿瘤的生长、转移以及复发的关系较为密切［3，4］。MACCl 是肝细胞生长因子／肝细胞生长因子受体（HGF／C-met）信号转导通路的调节因子，能够独立预测结肠癌形成、转移。本研究检测了食管癌组织及癌旁组织中 C-met 与MACC1的表达，并探讨其表达的临床意义，现报告如下。
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肿瘤转移相关基因的研究进展
肿瘤转移是临床患者死亡的主要原因,近年来对肿瘤转移相关基因的发现、研究增进了人们对肿瘤转移机制的认识,对于改进诊断和肿瘤的个体化治疗有一定的指导意义,本文就几个热点肿瘤转移基因和抑制基因进行了综述.
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人肺癌不同转移表型细胞系的转移相关基因的研究
肺癌是我国高发肿瘤之一,而肺癌转移又是肺癌死亡的主要原因,因此研究肺癌的转移机制,寻找理想的肿瘤标志物,将为肺癌的预防和治疗的改善提供可靠依据.
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Nm23、CD44v6与甲状腺癌的相关性研究
1 Nm23与肿瘤转移肿瘤的浸润转移是一个极其复杂的动态过程,也是恶性肿瘤研究中重要的一个方面.肿瘤的转移受到转移相关基因与肿瘤转移抑制基因的调控,nm23是目前研究深入且有前途的肿瘤转移抑制基因.
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胃癌分化相关基因研究进展
胃癌的发生、发展涉及多种基因,包括癌基因、抑癌基因、细胞周期调节因子和转移相关基因等的改变.按组织病理学分型,胃癌可分为肠型和弥漫型(Lauren分型)、膨胀型和浸润型(Ming分型)或分化型和未分化型(日本分型).
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人肺癌高转移细胞系的转移相关基因观察
目的 观察人肺癌高转移细胞系SPC-A-1sci的转移相关基因表达,同时验证该细胞系的体内高转移特性.方法 通过Western blot,FICC、IHC等方法检测转移相关基因CD44,OPN,MMP-9,EGFR在高、低转移细胞系间的差异表达;采用尾静脉注射方法观察高、低转移细胞系的转移特性.结果 与低转移细胞系相比,转移促进基因CD44,OPN,MMP-9,EGFR在高转移细胞中的表达均显著上调.体内实验表明,8周时高转移细胞系的肺转移率为100%(12/12),而低转移细胞系的肺转移率仅为16.67%(2/12).结论 人肺癌高转移细胞系SPC-A-1sci在转移相关基因表达和动物体内均表现出典型的高转移特性,为该细胞系的推广应用提供了参考依据
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基于基因芯片的前列腺癌转移高表达基因SPP1的生物信息学分析
目的:利用生物信息学方法分析前列腺癌转移高表达基因SPP1以及蛋白的结构,为进一步研究其功能和参与的调控机制提供一定的理论依据. 方法:在公共基因芯片数据库(GEO)中下载前列腺癌转移相关基因芯片数据,利用BRB-ArrayTools软件、protparam、Motif Scan、SignalP4.0、TMHMM、NetPhos2.0、PredictProtein、GO、KEGG、STRING等生物信息学工具进行数据挖掘及生物信息学分析. 结果:共筛选出前列腺癌转移共同差异基因73个,表达上调21个,表达下调52个(P＜0.01),其中对前列腺癌转移高表达基因SPP1进行生物信息学分析发现,SPP1蛋白由314个氨基酸组成,该蛋白含有2个N-连接糖基化位点、8个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点、3个PKC磷酸化位点,主要参与细胞外基质结合、骨化、成骨细胞分化、细胞黏附、PI3 K-Akt信号通路、黏着斑、ECM受体相互作用、Toll样受体信号通路等分子功能和信号通路. 结论:利用生物信息学的方法能有效分析基因芯片数据并获取生物内在信息,SPP1可能在前列腺癌转移中发挥重要作用,有望成为前列腺癌转移的早期诊断标志物和治疗的新靶点.
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ER、PR、c-erbB-2与CD44V6、nm23在乳腺癌组织中的表达
目的探讨ER、PR、c-erbB-2、nm23、CD44V6 五种癌基因在乳腺癌中的表达与有无淋巴结转移的关系及其相互间是否存在某种相关性.方法采用免疫组化两步法对5种基因进行检测.结果 ER、PR、c-erbB-2、nm23、CD44V6表达的阳性率分别为:51.8%、47.3%、58.0%、65.2%、72.3%.ER、PR与淋巴结有无转移没有相关性(P>0.05);c-erbB-2、nm23、CD44V6的表达与有无淋巴结转移密切相关(P<0.05),Spearman等级资料相关分析5种标记之间无明显相关性.结论 ER、PR、c-erbB-2、nm23、CD44V6 五种基因相互之间无必然的相关性,在肿瘤的发生发展中可能有着各自不同的作用机制.ER、PR与淋巴结有无转移无关;c-erbB-2、nm23、CD44V6与淋巴结有无转移有相关性.
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MTA1和VEGF-C在结肠癌组织中的表达及其与淋巴结转移的关系
目的 探讨转移相关基因(MTA1)和血管内皮生长因子C(VEGF-C)在人结肠癌组织中的表达及其与淋巴结转移的关系. 方法 选择78例结肠癌标本,应用免疫组织化学染色方法检测MTA1和VEGF-C在人结肠癌组织中的表达,同时对其与临床病理参数的关系进行统计学分析. 结果 MTA1在结肠癌组织中的阳性表达率为62.8%;在有淋巴结转移的患者中表达率为73.9%,无淋巴结转移的患者中表达率为46.9%,两者差异有统计学意义(P<0.05). VEGF-C结肠癌组织中的阳性表达率为71.8%;在有淋巴结转移的患者中表达率为84.8%,无淋巴结转移的患者中表达率为53.1%,两者差异有统计学意义(P<0.05). MTA1表达与VEGF-C表达呈正相关(r＝0.418,P=0.004). 结论 MTA1和VEGF-C的表达与结肠癌患者的淋巴结转移相关,可作为判断预后的一个观测指标.
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胆囊癌转移相关基因筛选
分析胆囊癌细胞株中不同转移能力亚群细胞的基因表达差异,是了解肿瘤侵袭、转移机制的有效方法[1].因为缺乏高低转移细胞亚群,胆囊癌的相关研究尚未见报道.利用本实验室前期筛选出的高转移表型胆囊癌亚群细胞,采用肿瘤转移相关功能基因芯片,对具有相同遗传背景的高、低转移胆囊癌细胞的96个转移相关基因作多个参量同步研究,筛选胆囊癌转移相关的基因,旨在了解胆囊癌转移分子机制和寻找抑制胆囊癌转移的分子靶点.
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人巨细胞肺癌裸鼠移植瘤中mts1和nm23-H1表达及其与肺癌淋巴结转移关系
目的探讨肿瘤转移相关基因mts1和nm23-H1在人巨细胞肺癌裸鼠移植瘤中的表达及其与肺癌淋巴结转移的关系.方法用高转移的人巨细胞肺癌瘤株PLA-801-D和低转移的人巨细胞肺癌瘤株PLA-801-C在裸鼠中建立转移模型,观察瘤细胞在裸鼠淋巴结及肺中的转移情况;原位杂交检测mts1和nm23-H1 mRNA在移植瘤中的表达.结果 PLA-801-D在12只移植裸鼠中均有淋巴结转移,转移率100%,2只裸鼠中有肺转移,转移率17%;PLA-801-C在12只移植的裸鼠中均无淋巴结及肺转移.mts1 mRNA在PLA-801-D、PLA-801-C裸鼠移植瘤中阳性表达分别为12例、2例;nm23-H1 mRNA在PLA-801-D、PLA-801-C裸鼠移植瘤中阳性表达分别为12例、11例.结论 mts1 mRNA表达与人巨细胞肺癌裸鼠移植瘤淋巴结转移呈正相关,nm23-H1 mRNA表达与人巨细胞肺癌裸鼠移植瘤淋巴结转移不相关.
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土贝母苷甲对小鼠B16黑色素瘤和Lewis肺癌转移的抑制作用
目的:本研究旨在探讨土贝母苷甲对小鼠B16黑色素瘤和Lewis肺癌转移的影响.方法:采用裸BALB/c小鼠B16黑色素瘤实验转移和裸BALB/c小鼠Lewis肺癌自发转移模型研究土贝母苷甲对肿瘤转移的影响;采用免疫组织化学法检测土贝母苷甲对转移相关基因CD44v6、ErbB-2和nm23-H1表达的影响.结果:腹腔注射低于全身中毒水平剂量的土贝母苷甲明显减少接种B16黑色素瘤细胞小鼠的肺重和肺转移灶数量,而对小鼠的健康和活力无明显影响;土贝母苷甲(2、3 mg·kg-1·d-1×14 d)和环磷酰胺(50 mg·kg-1·wk-1×2 d)对B16黑色素瘤细胞肺转移的抑制率分别为 68.8%、82.8%和 49.1%.土贝母苷甲治疗组小鼠Lewis肺癌原发肿瘤的平均瘤重明显低于对照组(P＜0.05).土贝母苷甲(2、3 mg·kg-1·d-1×14 d)和环磷酰胺(50 mg·kg-1·w-1×2 d)治疗组小鼠的肝转移抑制率分别为 46.3%、52.0%和 54.7%.土贝母苷甲显著下调促转移基因CD44v6和ErbB-2的表达,上调抑转移基因nm23-H1的表达.结论:土贝母苷甲对小鼠B16黑色素瘤的实验性转移和Lewis肺癌的自发性转移都有显著的抑制作用.土贝母苷甲对肿瘤转移的这种抑制作用与其抑制原发肿瘤生长、下调促转移基因CD44v6和ErbB-2及上调抑转移基因nm23-H1的表达有关,提示土贝母苷甲是一个阻止癌扩散和转移的候补化合物.
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甲状腺癌分子病理学研究进展
甲状腺癌是一类常见的发生在内分泌腺的恶性肿瘤,也是头颈部常见癌瘤之一.近年来,伴随着其他恶性肿瘤基础和临床研究的发展,甲状腺癌的外科临床和基础研究亦有长足进步,这对于帮助了解甲状腺癌及其诊治开辟了广阔的前景.甲状腺癌的发生、发展与其他恶性肿瘤一样,与多种癌基因、抑癌基因、转移相关基因关系密切[1],现将国内外甲状腺癌的分子病理学研究现状及动态进展介绍如下.
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不同转移潜能大肠癌细胞株基因表达谱的差异分析
目的 从基因表达谱轮廓分析不同转移潜能大肠癌细胞株的特点,探讨大肠癌亲器官转移的分子机制.方法 应用Affymetrix HG-U133 Plus 2.0原位合成寡核苷酸芯片检测同一亲本分别具有不同转移潜能和转移器官亲和性的大肠癌细胞株SW620、SW480和SW480肝转移细胞株基因表达谱差,以SW480为对照细胞株,筛查“大肠癌转移相关基因”和“亲器官转移相关基因”,应用GOTM软件对基因功能进行分析.结果 筛查出SW620、SW480肝转移细胞株两组共同表达的“大肠癌转移相关基因”共422个,筛查出的“亲器官转移相关基因或ESTs”3 054个.“转移相关基因 &ESTs”功能主要涉及细胞代谢、细胞生理进程调节、信号传导、大分子代谢、基本代谢和代谢调节等.“亲器官转移相关基因或 ESTs”的GO分析结果表明SW620、SW480肝转移细胞株在基因表达谱功能分类差异主要表现在细胞黏附、信号传导、细胞运动、调节酶活性、核酸代谢和金属离子结合等方面.结论 不同转移潜能大肠癌细胞株基因表达谱存在差异,通过对基因表达谱轮廓分析,可进一步了解大肠癌转移器官亲和性的分子机制和筛查转移相关基因.
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Fascin、CD24、CD73、Hsp27与大肠癌亲器官转移的相关性探讨
目的 观察CD24、CD73、Hsp27和Fascin蛋白在大肠癌组织中的表达,探讨其与大肠癌亲器官转移的相关性及临床病理意义.方法 应用免疫组织化学技术检测Fascin、CD24、CD73,和Hsp27蛋白在20例无转移大肠癌和19例同时伴有淋巴结和肝脏转移的大肠癌的不同部位癌组织中的表达.结果 转移性大肠癌原发灶与未转移大肠癌比较,CD73、Fascin的表达差异显著(P=0.009,0.009),Hsp27、CD24的表达无明显差异.CD24在淋巴结转移灶的表达与肝转移灶和原发灶比较,差异显著(P=0.000,0.001);原发灶和肝转移灶的表达比较,差异不显著.CD73肝转移灶的表达与淋巴结转移灶和原发灶比较差异显著(P=0.003,0.000);而淋巴结转移灶和原发灶的表达比较无明显差异.Hsp27在肝转移灶的表达与原发灶比较,无明显差异;与淋巴结转移灶比较,差异显著(P=0.001);在原发灶与淋巴结转移灶的表达比较差异显著(P=0.021).Fascin在原发灶的表达与肝转移灶、淋巴结转移灶比较无明显差异.结论 CD24与大肠癌淋巴结转移相关,可能是大肠癌淋巴结转移的预测因子之一;CD73、Hsp27的高表达与大肠癌肝转移有关,Fascin的表达与大肠癌转移有关,但与大肠癌转移至淋巴结或肝脏无相关性.
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乳癌组织中MTA1、MMP-9和TIMP-1蛋白的表达
乳癌临床分期和淋巴结转移有关(P<0.05).乳癌组织中MTA1和MMP-9蛋白表达有关(2=8.151,P<0.05).结论:联合检测MTA1、MMP-9、TIMP-1的表达可为预测乳癌浸润转移的潜能提供参考.
关键词： 乳癌 转移相关基因 基质金属蛋白酶9 组织型金属蛋白酶抑制剂 -
CD44v在胃癌中的表达及其临床意义
我们应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测国人胃癌中的转移相关基因CD44v mRNA表达,并探讨其临床意义,现报道如下.
