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太白楤木的化学成分分离鉴定
目的:对太白楤木Aralia taibaiensis根皮70％乙醇部位进行系统的化学成分研究,从物质基础的角度探寻其作为药用资源的可能性.方法:取太白楤木药材3 kg,70％乙醇浸泡提取,经减压浓缩后得到太白楤木浸膏,将浸膏加适量水分散,得到太白楤木上样液,将上样液经101大孔树脂柱色谱吸附,依次用水和70％乙醇洗脱,得到2个部位.对其70％乙醇部分通过硅胶柱色谱,Sephadex LH-20凝胶柱色谱,半制备HPLC及重结晶等方法进行分离纯化,并且利用NMR,MS等现代波谱技术以及化合物的理化性质并结合参考文献确定化合物的结构.结果:从太白楤木70％乙醇部位中分离得到12个三萜皂苷类化合物,分别鉴定为araliasaponinⅫ(1),竹节参皂苷1(2),竹节参皂苷Ⅳa(3),tarasaponin Ⅴ(4),蓣知子皂苷Ⅳ(5),elatoside F(6),araliasaponinⅡ(7),araliasaponinⅥ(8),araliasaponinⅢ(9),楤木皂苷A(10),银莲花苷(11),3-O-[β-D-rhamnopyranosy(1→2)-α-L-arabinopyranosy]-28-O-[β-D-glucopyrannoside(1 →6)-β-D-glucopyrannoside] oleanlic acid(12).结论:化合物6～9,12为首次从该植物中分离得到,化合物5为首次从楤木属植物中分离得到.
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太白楤木对CCl4诱导肝纤维化大鼠的干预作用
通过40％ CCl4橄榄油剂3 mL·kg-1腹腔注射,2次/周,连续8周诱导的肝纤维化大鼠模型,观察太白楤木对CCl4诱导的肝纤维化模型大鼠肝组织中血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子-β1(TGF-β1)mRNA表达水平及Bcl-2,Bax蛋白表达水平的影响.取雄性SD大鼠60只,将选取的60只SD大鼠随机分为正常组,模型组,太白楤木高、中、低剂量组(10,7.5,5.0 mL·kg-1)和秋水仙碱组.HE及Masson染色观察肝组织病理学改变;RT-PCR检测VEGF,TGF-β1 mRNA表达水平;Western blot检测Bcl-2,Bax蛋白表达水平.实验研究发现:模型组可见明显的肝细胞变性、坏死,大量胶原纤维组织增生,部分可见假小叶形成;太白楤木各剂量组及秋水仙碱组肝细胞变性坏死减轻,胶原纤维组织增生减少,未见明显假小叶形成.与模型组相比,太白楤木各剂量组及秋水仙碱组VEGF mRNA表达均有不同程度减低(P＜0.05),太白楤木高、中剂量组TGF-β1mRNA表达减低(P＜0.05);太白楤木高、中剂量组VEGF mRNA表达较秋水仙碱组减低(P＜0.01);太白楤木高剂量组TGF-β1mRNA表达较秋水仙碱组减低(P＜0.05).与模型组相比,太白楤木各剂量组及秋水仙碱组Bcl-2蛋白表达均减低(P＜0.05),Bax蛋白表达则升高(P＜0.05).太白楤木具有良好的抗肝纤维化作用,可能是通过抑制VEGF,TGF-β1等细胞因子的表达,同时上调肝组织中Bax蛋白及下调Bcl-2蛋白的表达,以调节肝组织胶原纤维代谢,进而改善肝脏纤维化的程度.
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太白楤木总皂苷对糖尿病小鼠血糖血脂及抗氧化作用的影响
目的 观察太白楤木总皂苷对四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖、血脂的调节作用.方法 将小鼠随机分为正常组、模型组、二甲双胍组及太白楤木总皂苷(total saponin of Aralia taibaiensis,SAT)30、60、120mg·kg-1剂量组,连续4周灌胃给药,末次给药后尾静脉取血测定血糖、血脂指标;分离肝组织测定抗氧化指标.结果 太白楤木总皂苷60、120mg·kg-1剂量组可显著降低四氧嘧啶糖尿病小鼠的血糖(P<0.01),且以高剂量120mg·kg-1的降糖作用明显.4周治疗结束后,上述两剂量组的血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、游离脂肪酸(FFA)和丙二醛(MDA)含量显著降低(P<0.01或P<0.05),胰岛素含量、高密度脂蛋白(HDL-c)含量、过氧化物酶(SOD)及及胰岛素敏感指数(ISI)显著升高(P<0.05或P<0.01),但低密度脂蛋白(LDL-c)含量变化不明显(P>0.05).在太白楤木总皂苷的剂量为120mg·kg-1时,其降血糖、降血脂及其抗氧化效果同二甲双胍相当(P>0.05).结论 太白楤木总皂苷可降低糖尿病小鼠的血糖,其降糖机制可能与其提高糖尿病小鼠抗氧化能力,改善血脂代谢紊乱,提高肝脏及外周组织胰岛素敏感性,改善胰岛素抵抗有关.
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中药制剂平肝胶囊的生产工艺及质量标准研究
目的研究中药复方制剂平肝胶囊的生产工艺及质量控制标准.方法用高效液相色谱法定量及化学成分的特征反应定性.结果提出平肝胶囊的生产工艺,建立了HPLC法测定平肝胶囊中齐墩果酸含量的方法及特征成分理化反应鉴别方法.结论平肝胶囊中齐墩果酸含量应控制为4.23%～9.65%,一些特征成分的检识反应可作为该制剂的定性检查标准.
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太白楤木抗肝损伤作用药效物质基础的初步研究
目的 初步确定太白楤木抗肝损伤作用的药效物质基础.方法 采用经典的系统溶剂法(极性由小到大:石油醚-氯仿-乙酸乙酯-正丁醇)依次对太白楤木提取液进行萃取,将各提取液分别灌胃给予四氯化碳(CCl4)致急性肝损伤模型小鼠,检测血清及肝组织中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、超氧化物歧化酶(SOD)的活性和丙二醛(MDA)、谷胱苷肽过氧化物酶(GSH-Px)的水平,比较各部位的抗肝损伤作用；将筛选出的活性部位用大孔吸附树脂进行分离纯化,不同浓度乙醇进行梯度洗脱,洗脱液分别灌胃给予肝损伤模型小鼠,检测血清及肝组织中ALT、AST、SOD的活性和MDA、GSH-Px的水平,比较各洗脱部位的抗肝损伤作用.结果 与模型对照组比较,正丁醇部位可明显降低CCl4引起的ALT、AST、MDA升高,增加肝组织中SOD的活性和GSH-Px的水平；70％乙醇洗脱的正丁醇提取物可明显降低CCl4引起的ALT、AST、MDA升高,增加肝组织中SOD的活性和GSH-Px的水平,且洗脱液剂量与保肝作用有明显的正相关性.结论 太白楤木保肝作用的药效活性物质大多存在于70％乙醇洗脱的正丁醇部位,其抗肝损伤作用的活性成分可能与该部位主要成分皂苷类有关.
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太白楤木活性成分及其药理作用研究进展
太白楤木(A.taibaiensis)是五加科楤木属(Aralia)植物,又名飞天蜈蚣七,是“太白七药”之一,在我国秦巴山区及其余脉野生资源丰富.根皮是太白楤木主要药用部位,又称楤木白皮,药用历史悠久,其性味甘、微苦、微寒、辛平、小毒,入肺、肾、脾、胃四经,具有祛风除湿、利尿消肿、活血止痛、疏肝解郁、温中和胃之功效.2],主要用于治疗风湿痹痛、跌打损伤、肝炎、疮痈等,民间还用于小儿豆疹、干咳等[3].自第二军医大学王忠壮教授等[4-5]首先提出太白楤木的原植物及生药的主要性状鉴别特征并初步查清其分布区后,大量学者对太白楤木进行了研究,现将近年来对太白楤木活性成分及其药理作用研究进展情况综述如下.
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太白楤木对大鼠肝星状细胞核因子-кB活性表达的影响
目的:探讨太白楤木对大鼠肝星状细胞的作用机制.方法:分离大鼠肝星状细胞,采用不同浓度的太白楤木处理后,分别应用MTT法、凝胶迁移法、ELISA法检测大鼠肝星状细胞的繁殖、核因子кB(NF-кB)活性的表达.结果:太白楤木对大鼠肝星状细胞生长具有较强的抑制作用.太白楤木可明显抑制大鼠肝星状细胞核因子кB活性,并且呈剂量依赖性.结论:太白楤木对大鼠HSC增殖具有很强的抑制作用,可能与抑制NF-кB活性有关.
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太白楤木的资源调查及栽培试验
目的:调查太白楤木的资源并研究其繁殖方法.方法:资源调查和栽培试验.结果:发现太白楤木为我国特产,分布中西部秦巴山区及其余脉,资源丰富;野生种群自然繁育存在困难,人工种子繁殖及营养繁殖可获得其幼苗.结论:推行人工种子繁殖和营养繁殖,变野生为人工种植,是对付太白楤木野生资源耗竭的有效办法.
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太白楤木总皂苷体外对乙肝病毒HBsAg、HBeAg的影响
目的 观察太白楤木总皂苷体外对乙肝病毒HBsAg和HBeAg的影响.方法 以HepG 2215细胞为靶细胞,分别用不同浓度的太白楤木总皂苷和拉米夫定培养液培养,采用ELISA法测定细胞培养上清HBsAg、HBeAg 含量,评价太白楤木总皂苷对体外HBV的抑制作用.结果 太白楤木总皂苷对体外培养HepG 2215细胞分泌的HBsAg、HBeAg的50％抑制浓度(IC50)分别为0.1、0.09 g/L,治疗指数(therapeutic index TI)分别为6.12、7.51.0.25g/L拉米夫定组和0.4 g/L太白楤木组在第3、6天对体外培养HepG 2215细胞分泌的HBsAg、HBeAg抑制作用差异无统计学意义(P＞0.05).结论 太白楤木总皂苷具有一定的体外抗HBV作用.
关键词： 太白楤木 HepG 2215细胞 肝炎病毒 乙型 -
太白楤木薄层色谱鉴别方法研究
目的 建立太白楤木根皮的薄层色谱鉴别方法.方法 通过对不同制样方法、点样量、展开系统、展距的比较,优化太白楤木根皮的薄层色谱条件.结果 佳色谱条件为:展开剂∶氯仿∶乙酸乙酯∶甲醇∶水=15∶40∶ 22∶10；展距:15cm；温度:15℃左右；湿度:30％～50％；显色方法:10％硫酸乙醇溶液,105℃加热4min,置紫外光灯(365 nm)下检视.结论 在上述色谱条件下,太白楤木根皮的薄层色谱斑点清晰,信息量较大,且专属性强、重现性好,能有效鉴别太白楤木.
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太白楤木提取工艺研究
目的 对太白楤木的提取工艺进行优化研究.方法 以总皂苷含量为主要指标,采用正交实验设计优选佳提取工艺参数.结果 佳提取条件为8倍量70%乙醇提取3次,2 h/次.结论 该实验研究可为太白楤木的工业化生产提供实验依据.
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太白楤木对肝纤维化模型大鼠的干预作用
[目的]探讨太白楤木对肝纤维化模型大鼠Ⅰ型胶原纤维(Col-Ⅰ)、Ⅲ型胶原纤维(Col-Ⅲ)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的干预作用.[方法]雄性SD大鼠60只,随机分为阴性对照组、模型组、太白楤木大、中、小剂量组和秋水仙碱组,采用40％ CCl4橄榄油腹腔注射诱导肝纤维化模型,2次/周,连续8周.采用苏木精-伊红及Masson染色观察肝组织病理学改变；RT-PCR检测Col-Ⅰ、Col-ⅢmRNA表达水平；Western-blot检测α-SMA的表达水平.[结果]与模型组相比,太白楤木大、中、小剂量组及秋水仙碱组肝细胞变性坏死减轻,纤维条索减少,且秋水仙碱组、太白楤木小、中、大剂量组呈逐渐减轻趋势.与模型组相比,太白楤木大、中、小剂量组及秋水仙碱组Col-Ⅰ、Ⅲ mRNA表达水平均减低(均P＜0.05)；与秋水仙碱组比较,太白楤木大剂量组Col-Ⅰ、Ⅲ mRNA表达减低(均P＜0.05).太白楤木大、中、小剂量组和秋水仙碱与模型组相比,a-SMA表达不同程度减低(均P＜0.05),与秋水仙碱组相比,太白楤木大、中剂量组a-SMA表达均减低(均P＜0.05).[结论]太白楤木可通过抑制肝组织中胶原纤维的增生和肝星状细胞的活化,从而减轻肝纤维化.
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太白楤木对成纤维细胞增殖及形态学的影响
[目的]探讨太白楤木对成纤维细胞增殖及形态学的影响及抗肝纤维化机制.[方法]采用体外培养的NIH3T3成纤维细胞作为肝星状细胞(HSC)的替代模型,常规培养,秋水仙碱、齐墩果酸及太白楤木中药血清作用于细胞,在光镜及电镜下观察药物血清对NIH3T3细胞形态学的影响;用放射免疫法测定培养上清透明质酸(HA)的生成.[结果]太白楤木、齐墩果酸、秋水仙碱血清组细胞与对照组细胞在形态、数目上差别显著;3者均可抑制细胞增殖(P<0.01);显著抑制HA的合成,降低NIH3T3细胞培养上清中HA水平,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01).[结论]太白楤木中药血清可显著抑制NIH3T3细胞增殖和细胞外HA的合成,在体外具有一定的抗肝纤维化作用.
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太白楤木抗肝纤维化的实验研究
目的:探讨太白楤木对成纤维细胞增殖及超微结构的影响,研究太白楤木抗肝纤维化的作用机制.方法:采用体外培养的NIH3T3 (小鼠胚胎成纤维细胞)作为肝星状细胞(HSC)的替代模型,常规培养,秋水仙碱、齐墩果酸及太白楤木中药血清作用于细胞,用MTT(四唑盐比色)法检测各组药物血清对NIH3乃细胞增殖的影响;用放射免疫法测定培养上清液中透明质酸(HA)的生成;电镜下观察药物血清对NIH3T3细胞超微结构的影响.结果:太白楤木、齐墩果酸、秋水仙碱血清组细胞均可抑制细胞增殖(P<0.05);显著抑制HA的合成,降低NIH3T3细胞培养上清中HA水平,与对照组比较差异有显著性意义(P<0.01),而3组之间差异无显著性意义(P>0.05).结论:太白楤木中药血清可显著抑制NIH3T3 细胞增殖和细胞外HA的合成,并可通过诱导HSC细胞凋亡来达到减少细胞数目、促进纤维化的逆转,从而达到抗肝纤维化的作用.
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太白楤木总皂苷对HBV DNA的影响
目的:观察太白楤木总皂苷在体外对乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(HBV DNA)的影响.方法:以HepG2.2.15细胞为靶细胞,分别用不同浓度的太白楤木总皂苷和拉米夫定培养液培养,采用荧光定量PCR测定细胞外HBV DNA含量,评价太白楤木总皂苷对体外HBV DNA的抑制作用.结果:太白楤木总皂苷对体外培养HepG 2.2.15细胞分泌的HBV DNA 50％抑制浓度(IC50)为0.128g/L,治疗指数(TI)为5.11g/L.结论:太白楤木总皂苷具有一定的体外抗HBV作用.
关键词： 太白楤木 皂苷类 HepG2.2.15细胞 肝炎病毒 乙型 乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸 -
太白楤木活性成分竹节参皂苷Ⅳa抗氧化及抗衰老作用研究
目的 探讨太白楤木皂苷中的重要成分竹节参皂苷Ⅳa(CHS)抗氧化及抗衰老作用.方法 取5～8代的小鼠胚胎成纤维细胞(MEFs),使用过氧化氢(H2O2)诱导细胞氧化应激以及细胞衰老模型.MTT法分别检测不同浓度CHS及H2O2对细胞活力的影响;DCFH-DA染色流式细胞仪检测细胞总活性氧(ROS)水平;MitoSOX染色流式细胞仪检测细胞线粒体ROS水平;衰老相关-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色检测细胞衰老状态;Western blot法检测衰老标志蛋白p53、p21蛋白表达水平以及关键抗氧化应激Nrf2通路(Nrf2、HO-1、GCLC、GCLM)蛋白表达.结果 浓度≤160μg·mL-1的CHS对MEFs细胞无明显毒性作用;H2O2能够显著提高细胞总ROS和线粒体ROS水平,诱导细胞衰老指标SA-β-gal活性增加,提高p53、p21表达水平,提高抗氧化信号通路Nrf2通路表达水平.CHS能够剂量依赖地降低H2O2诱导的细胞总ROS和线粒体ROS水平,减轻H2O2诱导的SA-β-gal活性升高,抑制p53、p21以及Nrf2、HO-1、GCLC、GCLM蛋白表达水平的升高.结论 CHS具有显著的抗氧化应激和抗衰老作用.
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太白楤木的化学成分及药理作用研究进展
太白楤木,特产于我国中西部秦巴山区及其余脉,有丰富的野生资源,是一种极具开发潜力的药用植物.研究发现太白楤木主要含有皂苷类、黄酮类、多糖类、挥发油类以及微量元素等活性成分.药理研究发现其具有抗氧化,降血糖,降血脂,保护脑、心脏、肝脏,抗衰老,抗菌,抗病毒以及抗肿瘤等作用.本文通过对太白楤木的化学成分和药理作用的研究进展进行综述,以期为太白楤木的研究开发提供参考依据.
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太白楤木不同部位皂苷类成分分析
目的:对太白楤木皂苷类成分进行分析,为完善太白楤木的药用标准及资源利用提供依据.方法:用薄层色谱法鉴别太白楤木根皮、茎皮、叶子中的皂苷类成分；用紫外分光光度法对太白楤木根皮、茎皮、叶子中的总皂苷进行定量分析；用高效液相色谱法对太白楤木根皮、茎皮、叶子中的游离齐墩果酸和总齐墩果酸分别进行定量分析.结果:太白楤木不同部位定性鉴别均能检出竹节参皂苷Iva,根皮与茎皮中均可检出太白楤木皂苷TA-16；总皂苷含量根皮、茎皮、叶子依次减小；游离齐墩果酸和总齐墩果酸含量根皮、茎皮、叶子依次减小.结论:所建方法有助于进行太白楤木不同部位的皂苷类成分定性分析及定量研究,为进一步完善太白楤木的药用标准及规范太白楤木资源的开发应用奠定基础.
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太白楤木对成纤维细胞增殖及功能的影响
目的探讨太白楤木对成纤维细胞增殖、活力及对培养上清中透明质酸(HA)产生的影响,研究太白楤木抗肝纤维化机制.方法采用体外培养的NIH3T3(成纤维细胞)作为肝星状细胞(HSC)的替代模型,常规培养,太白楤木中药血清作用于细胞,用MTT法检测太白楤木中药血清对NIH3T3细胞增殖的影响;用放射免疫法测定培养上清中HA的生成.结果太白楤木对细胞无明显毒性,5%浓度太白楤木中药血清可显著抑制细胞增殖(P＜0.01),降低NIH3T3细胞培养上清中HA含量,与对照组比较差异显著(P＜0.05).结论太白楤木中药血清可显著抑制NIH3T3细胞增殖和HA的合成,在体外具有一定的抗肝纤维化作用.
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13种太白楤木皂苷单体对α-葡糖苷酶和α-淀粉酶活性的影响
目的:研究13种太白楤木皂苷单体对α-葡糖苷酶和α-淀粉酶的抑制作用.方法:通过体外模型试验测定13种太白楤木皂苷单体对α-葡糖苷酶和α-淀粉酶的抑制率.结果:皂苷单体4、12对α-葡糖苷酶的抑制作用较强,其半数抑制浓度(IC50)分别为(0.83±0.05)、(1.07±0.04) μmol/L;皂苷单体12对α-淀粉酶的抑制作用较强,其IC50为(1.02±0.03)μmol/L.结论:皂苷单体4、12对α-葡糖苷酶,皂苷单体12对α-淀粉酶均具有较好的抑制作用,可为后期试验提供一定参考.
