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麇鹿角中多糖类成分资源化学分析评价
目的:分析与评价麇鹿角中多糖类成分.方法:分别采用Elson-Morgan法、硫酸咔唑法及苯酚硫酸法,以氨基葡萄糖、葡萄糖醛酸和葡萄糖为对照品,测定不同鹿龄及不同角部位麋鹿角样品中的氨基多糖、酸性多糖及中性多糖,并与鹿角进行比较.结果:多糖类成分含量因鹿龄和角部位不同存在较大差异.3种多糖类成分总含量以2岁龄麋鹿角为高,其次为5岁龄,6～8岁龄,3岁龄和4岁龄.不同鹿龄麋鹿角3个角部位平均含量均以中性多糖为高,其次是氨基多糖,酸性多糖含量相对较低.3种多糖在3个角部位中的平均含量均以2岁龄麋鹿角为高,其中氨基多糖和中性多糖的含量与宁夏产鹿角接近,酸性多糖低于宁夏产鹿角.结论:该研究可为麋鹿角药用资源的合理利用及其产业化提供科学依据.
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粘脂贮积症Ⅰ型酶学诊断与产前诊断
粘脂贮积症Ⅰ型是常染色体隐性遗传病,基因定位于10号染色体,是因为溶酶体α神经氨酸苷酶缺乏,导致涎酸大量贮积所致.粘脂贮积症Ⅰ型临床主要表现为Hurler样面容、骨骼发育不良,眼底红斑.该病常规实验室检查可发现,尿中不存在粘多糖,但含大量涎酸寡糖,淋巴细胞和骨髓细胞中有包涵体,皮肤成纤维细胞多含粗包涵体,其中多为中性多糖和粘脂.用检测酶活性的方法可对粘脂贮积症Ⅰ型进行病因学诊断与产前诊断.
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红芪多糖HPS4-1A的化学结构特征研究及分子构象初步分析
目的 研究红芪多糖HPS4-1A的化学结构特征,并初步分析其构象.方法 红芪经水提醇沉法提取、Sevage法脱蛋白、H2O2脱色素、Sephadex G-200色谱柱分离纯化得到均一的红芪多糖HPS4-1A.以GC法、高效液相凝胶色谱(HPGC)法、凝胶渗透色谱-多角度激光散射仪联用(GPC-MALLS)法、元素分析、苯酚硫酸法、Bradford法研究其理化性质；以GPC-MALLS法对其构象进行初步分析.采用甲基化、部分酸水解、以及NMR研究其连接方式、主链和支链结构及分支点状况.结果 HPS4-1A的绝对分子质量为7.386×104,相对分子质量6.68×105以上；由鼠李糖、阿拉伯糖、葡萄糖、半乳糖组成,其摩尔比为1:2:1:2,主链骨架由1,5、1,3,5连接的α-L-呋喃阿拉伯糖和1,6、1,2,6连接的α-D-吡喃半乳糖组成,侧链分支点位于阿拉伯糖的3位与半乳糖的2位.侧链分支由1,4、1,4,6-α-D-吡喃葡萄糖,1,2、1,2,4-α-L-呋喃鼠李糖组成.主链末端连接主要是阿拉伯糖,并且连接在1,5连接的阿拉伯糖的5位.侧链末端连接主要是葡萄糖,还有少量的阿拉伯糖.结论 HPS4-1A为一种新的中性红芪杂多糖,其构象为无规线团状,并且相对分子质量分布呈单分散性.
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菊花多糖的结构特征及其对NF-κB和肿瘤细胞的活性研究
目的 阐明菊花多糖的结构特征,研究其对NF-κB和肿瘤细胞的活性.方法 以杭菊花、怀菊花和亳菊花为原料药材,经水提醇沉、离子交换树脂和凝胶过滤柱色谱分离纯化,获得6种中性均一多糖.应用高效凝胶渗透色谱(HPGPC)、红外光谱(IR)、气相色谱(GC)及气相色谱-质谱联用(GC-MS)等方法对其一级结构特征进行初步分析,同时运用6种菊花多糖对胰腺癌(PANC-1)和肝细胞(LO2)的MTT实验及NF-κB信号激活实验进行了活性测定.结果 6种多糖CMTA0S1、CMTA0S3、CMJA0S1、CMJA0S2、CMBA0S1和CMBA0S3的重均相对分子质量依次为7.52×104、7.80×103、7.80×104、1.04×104、5.79×104和1.35×104,其中CMTA0S1、CMJA0S1和CMBA0S1主要由半乳糖、阿拉伯糖和葡萄糖组成,物质的量比分别为1.23∶1.00∶0.20、2.18∶1.00∶0.53和3.30∶1.00∶0.75；CMTA0S3、CMJA0S2和CMBA0S3主要由半乳糖、阿拉伯糖、葡萄糖和甘露糖组成,物质的量比分别为0.73∶1.00∶0.40∶0.21、1.39∶1.00∶0.84∶0.55和1.19∶1.00∶0.48∶0.19.6种菊花多糖以末端-呋喃阿拉伯糖、1,5-呋喃阿拉伯糖、1,4-吡喃半乳糖、1,3,6-吡喃半乳糖和1,4-吡喃葡萄糖5种连接方式为主.生物活性研究表明菊花多糖均对胰腺癌PANC-1细胞具有明显抑制作用,以杭菊花多糖CMTA0S3和怀菊花多糖CMJA0S2抑制率强,接近70％且呈现出良好的浓度依赖性.针对核因子NF-κB活性实验结果显示,菊花多糖中只有粗多糖CMBA表现出较强的免疫抑制活性,而均一多糖CMTA0S1和CMJA0S1则显示出潜在的免疫激活活性.结论 3种菊花中的6种中性多糖结构具有一定程度的相似性,对胰腺癌PANC-1细胞具有良好的抑制作用,且对NF-κB活性有明显调节作用.
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茶叶中多糖的分离及降血糖活性的研究
目的对茶叶中的水溶性中性多糖(NTPS)和酸性多糖(ATPS)进行分离,以探讨不同结构的茶多糖的降血糖活性.方法采用弱碱性的大孔阴离子交换树脂D315分离出两种带不同电荷的茶多糖NTPS和ATPS,采用气相色谱和离子色谱分析其单糖组成,并采用DEAE-Sepharose FF对其作进一步分离,通过HPGPC法分析其分离产物主要级分的相对分子质量.通过四氧嘧啶ip造成高血糖模型,连续ig茶多糖12 d,对比研究两种茶多糖的降血糖活性.结果NTPS和ATPS都是杂聚糖.NTPS以中性糖为主,含质量分数为6.82%半乳糖醛酸,中性糖部分主要由半乳糖组成;ATPS以酸性糖为主,含质量分数为33.02%半乳糖醛酸,中性糖部分主要由鼠李糖、阿拉伯糖和半乳糖组成.两种茶多糖相对分子质量均小于3×104.NTPS、ATPS按照200和400 mg/kg·d的剂量连续给四氧嘧啶糖尿病小鼠ig 12 d,发现都能抑制四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖的升高.结论首次采用D315阴离子交换树脂从茶叶中分离出了不同结构的多糖NTPS和ATPS,两种多糖都有很好的降血糖效果.
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归芪多糖AAP-2A的结构特征研究
目的 分离纯化归芪多糖AAP-2A,并对其结构特征进行研究.方法 采用水提醇沉法提取归芪多糖(AAP),通过Sevag法脱除蛋白,DEAE-52纤维素柱色谱,葡聚糖凝胶柱色谱纯化等手段,得到1种新的归芪多糖AAP-2A.使用苯酚硫酸法测定了AAP-2A的含糖量,色谱技术检测了多糖紫外及红外性质、相对分子质量、绝对分子质量、分子构象及相对分子质量分布、单糖组成及其摩尔比值等特征.采用甲基化法和NMR法研究了AAP-2A的连接方式、主链和支链结构及分支点特征.结果 AAP-2A总糖量为98.98％,且不含核酸及蛋白质,红外吸收光谱分析表明AAP-2A有明显的多糖特征吸收,AAP-2A的相对分子质量大于6.68×105,绝对分子质量为2.252×106,由鼠李糖、半乳糖、阿拉伯糖、葡萄糖组成,其物质的量比依次为1:2.13:3.22:6.18.主链骨架由1,3-α-L-鼠李糖,1,3-β-D-半乳糖,1,3、1,5、1,3,5-α-L-阿拉伯糖和1,4、1,4,6-α-D-葡萄糖组成,侧链分支点位于阿拉伯糖的3位和葡萄糖的4位,侧链分支由1位连接的α-D-葡萄糖组成.结论 AAP-2A为一种新的中性归芪杂多糖,其构象呈高度支化状.
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凤尾菇水溶性多糖抗衰老作用比较研究
凤尾菇(Pleurotus sajor-caju Sings)为平菇科,平菇属的人工栽培食用菌.抗肿瘤作用已有报道.本文通过观察其对小鼠脑和肝脏超氧化物歧化酶(SOD)活力及过氧化脂质的降解产物丙二醛(MDA)含量的调节对凤尾菇水溶性中性多糖不同组分抗衰老作用进行了比较研究[1].
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天南星炮制前后中性均一多糖的变化
采用高效凝胶排阻色谱法测定天南星炮制前后中性多糖的含量、纯度和重均分子量(Mw)的变化,并采用高效液相色谱法测定天南星炮制前后中性多糖的单糖组成.结果表明天南星炮制前后均存在中性多糖,且生品的中性多糖含量为炮制品的1.4倍.生天南星和制天南星中的中性均一多糖的Mw约17 895和1 8 173,单糖组成为甘露糖∶鼠李糖∶葡萄糖∶半乳糖∶阿拉伯糖∶岩藻糖(1∶0,6∶8.9∶1.5∶0.5∶0.8和l∶0.6∶7.3∶1.5∶0.5∶0.8).结果提示炮制对天南星中性多糖的单糖组成影响不大,也为天南星炮制“减毒存效”研究提供一定的借鉴.
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杜氏藻中性多糖的提取分离及免疫活性初步研究
将提取所得杜氏藻的中性多糖(NPD)粗品经离子交换色谱和分子筛分离,得到提纯品,经柱前PMP(1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮)衍生化HPLC色谱、UV、IR分析,确定其组分为葡聚糖,HPLC测得纯度为98.77%.通过免疫活性研究试验显示该多糖可促进小鼠脾脏淋巴细胞增殖和小鼠白介素(IL-1)的分泌,有免疫增强活性.
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黄附子中性多糖和酸性蛋白多糖的分离、纯化与鉴定
目的:探讨黄附子中的糖复合物,为深入研究和开发利用附子提供有用资料.方法:采用热水抽提、乙醇沉淀、DEAE-C32及SephadexG75柱层析等方法分离黄附子中的糖复合物,用酚-硫酸法、Folin-酚法及硫酸-咔唑法测定其糖、蛋白质、葡萄糖醛酸的含量.结果:从黄附子中得到两种糖复合物,一种为中性多糖,含量为3%;另一种为酸性蛋白多糖,含量为1%(其中糖含量97%、蛋白质含量3%、葡萄糖醛酸含量9%).结论:黄附子中两种糖复合物的获得有助于研究附子抗癌、抗衰老和增强免疫机能的作用.
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铁皮石斛中性多糖分离纯化及其体内免疫调节作用研究
目的 分离鉴定铁皮石斛中的中性多糖,探讨铁皮石斛中性多糖(DOP-1)对环磷酰胺所致免疫功能低下小鼠免疫功能的影响.方法 水提醇沉法提取铁皮石斛粗多糖、酶-Sevage法脱蛋白;DEAE-纤维素52离子交换层析法分离纯化粗多糖;红外扫描和柱前衍生化HPLC法分析多糖组分及构型;选用BALB/c雄性小鼠,采用环磷酰胺建立免疫抑制小鼠动物模型,实验设正常组,模型组,左旋咪唑阳性组,DOP-1高、低剂量组,铁皮石斛全茎高、低剂量组.观察比较各小鼠脾脏和胸腺指数、血清中白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)和干扰素-γ(IFN-γ)含量及血清溶血素水平.结果 铁皮石斛粗多糖经柱层析分离纯化后得到中性多糖(DOP-1),DOP-1主要由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖、木糖和阿拉伯糖组成,其摩尔比分别为3.8∶0.25∶1.5∶3.8∶2.1∶1.3.动物实验表明:与模型组比较,DOP-1及全茎可显著增加胸腺指数,显著下调血清中IL-6 (P＜ 0.05)和IL-10(P＜ 0.05)的含量,DOP-1调节作用优于全茎和阳性组;DOP-1高剂量组的IFN-γ水平也有显著性降低(P＜0.01),并能增强免疫抑制小鼠血清溶血素水平(P＜0.01).结论 铁皮石斛中性多糖可缓解环磷酰胺对小鼠的免疫抑制作用.
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生晒参、红参中中性多糖的分级及体外抗氧化活性研究
目的:研究生晒参和红参中中性多糖及其分级组分的体外抗氧化活性.方法:用煎煮法分别从生晒参、100℃和120℃炮制的红参3个样品中提取粗多糖,粗多糖经离子交换柱分离得到中性多糖,再用Sephadex G-75凝胶层析柱根据分子量大小对中性多糖进行分级得到不同组分.通过1,1-二苯基-2-苦基肼基(DPPH)、OH自由基清除试验和还原能力试验(以FRAP值计)考察3个样品的中性多糖及其组分共9个样品的体外抗氧化活性,并以维生素C为阳性对照.结果:3种中性多糖分级后均得到Ⅰ和Ⅱ2种组分.中性多糖及其分级组分在一定质量浓度范围内均有一定的体外抗氧化活性,且活性随着质量浓度的增加而增强;其中120℃红参的中性多糖及其组分Ⅱ的活性强,其对DPPH的半数清除浓度(IC50)分别为0.258、0.253 g/L,对OH自由基的IC50分别为7.157、6.845 g/L,FRAP值分别为3.0、2.8 mmol/L(质量浓度为1.2 g/L时).结论:120℃红参中中性多糖体外抗氧化活性强于100℃红参和生晒参,其中组分Ⅱ发挥主要抗氧化作用.
