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11个铁皮石斛杂交家系鲜花的挥发性成分分析
目的:为了对铁皮石斛主栽品种森山1号和11个杂交家系鲜花进行挥发性成分分析,并鉴定香气成分组成,比较不同家系铁皮石斛花的挥发性成分差异,同时也能够为进一步完善铁皮石斛新品种选育提供技术支持.方法:采用顶空固相微萃取(solid phase micro-extraction,HS-SPME)技术和气相色谱-质谱联用(GC-MS)法对铁皮石斛花中挥发性成分进行提取分析,将检测到的不同家系铁皮石斛花成分组成及含量通过SPSS 18.0软件进行聚类分析,分析亲缘关系的远近.结果:铁皮石斛花挥发性成分主要以萜类、脂肪族、芳香族化合物为主,各类型成分在不同品种及家系中的分布存在着一定差异.聚类分析结果基于亲缘关系较近的家系在性状及挥发性成分组成上都较为接近,11个家系铁皮石斛按亲缘关系被分为3类.结论:固相微萃取技术在保证充分检测物质含量的基础上,将挥发性物质的流失降低到小,简便精准.同时利用铁皮石斛鲜花挥发性成分组成和亲缘关系聚类可为铁皮石斛杂交选育及品系评价提供理论参考.
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铁皮石斛花挥发性成分研究
目的:研究铁皮石斛花中的挥发性成分.方法:利用有机溶剂-水蒸气蒸馏法提取挥发油,用气相色谱-质谱联用(GC-MS)进行测定,色谱柱为HP-5MS 5%Phenyl Methyl Siloxane(30 m × 0.25 mm × 0.25μm)弹性石英毛细管柱,结合计算机检索技术对分离的化合物进行结构鉴定,应用色谱峰面积归一化法计算各成分的相对百分含量.结果:分离出89个组分,鉴定出59个化学成分,约占76.54%.其中相对百分含量大于2.0%的分别确定为壬醛9.21%、桉叶-5,11-二烯-8,12-交酯5.55%、反-2-癸烯醛4.63%、2,3-脱氢-1,8-叶油索4.39%、正二十五烷4.03%、α-柏木醇3.69%、异土木香内酯3.65%、反式-2-庚醛3.60%、E,E-2,4-癸二烯醛2.14%、B-佛尔酮2.03%.结论:本文首次采用气相色谱-质谱联用法对铁皮石斛花挥发性成分进行提取研究.
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铁皮石斛花对自发性高血压大鼠的降压作用及机制研究
目的:研究铁皮石斛花水提物对白发性高血压大鼠的降压作用,并探讨其降压机制.方法:实验设6组,包括模型组,铁皮石斛花高、中、低剂量组(4.50、1.50、0.50g/kg)、正常对照组和正常给药组(1.50g/kg).每周测量各组大鼠血压,连续给药8周后,检测血管紧张素Ⅱ的含量,肝脏中血管紧张素原和肺脏中血管紧张素转换酶mRNA的表达水平.结果:与模型组比较,铁皮石斛花3个剂量组大鼠血压降低,且高剂量组下降显著(P＜0.05);高剂量组大鼠血浆AngⅡ含量较模型组有所降低,但不显著;高剂量组大鼠肝脏AGT mRNA表达较模型组显著提高(Pp＜0.05);肺脏ACE mRNA表达较模型组显著降低(p＜0.05).结论:铁皮石斛花水提物能有效降低SHR大鼠的血压,降血压幅度和剂量呈正比;高剂量铁皮石斛花水提物能降低血浆血管紧张素Ⅱ含量,同时显著下调肺脏血管紧张素转换酶mRNA的表达水平.
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铁皮石斛花对高糖高脂饮酒致高血压大鼠的降压作用及机制研究
观察铁皮石斛花对高糖高脂饮酒致高血压大鼠的降压作用及可能机制.采用高糖高脂饲料喂养复合梯度饮酒造模4周制备高血压模型大鼠,模型成功后根据血压分为模型对照组、缬沙坦(5.7 mg·kg-1)阳性对照组、铁皮石斛花2个剂量组(3,1 g·kg-1),连续给予相应药物6周.定期测量大鼠血压;末次给药后,检测血浆中内皮素-1(ET-1)、血栓素B2(TXB2)、前列环素(PGI2)、一氧化氮(NO)水平;检测胸主动脉内皮型一氧化氮合酶(eNOS)表达及病变情况;采用离体血管环张力实验检测胸主动脉血管内皮依赖性舒张情况.结果显示,铁皮石斛花能显著降低高血压大鼠收缩压和平均动脉压,并抑制胸主动脉中膜增厚及内皮细胞脱落;减少血浆中ET-1和TXB2含量,升高PGI2和NO含量;长期给药后胸主动脉血管内皮依赖性舒张明显增加,且能被eNOS抑制剂(L-NAME)所阻断,并能增加eNOS表达.因此,铁皮石斛花对高糖高脂饮酒致高血压大鼠具有明显的抗高血压作用,其机制可能是通过保护血管内皮细胞,平衡血管内皮舒缩因子,从而改善血管舒张功能,终起到抗高血压作用.
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铁皮石斛花提取物对甲亢型阴虚小鼠的影响
该文采用甲亢型阴虚模型小鼠,研究铁皮石斛花的滋阴功效并探索其作用机制,为铁皮石斛花资源的开发利用,减少资源浪费提供药理学依据.ICR小鼠分为正常对照组、模型对照组、阳性对照组(六味地黄丸)及铁皮石斛花提取物高、低剂量组(6,4g·kg-1).采用连续灌胃甲状腺素30 d制备甲亢型阴虚小鼠模型.边造模边给药,连续给药30 d.给药4周,测定小鼠体征(面温、痛阈、心率及自主活动),采用激光多普勒技术测定耳面部微循环血流量.末次给药后,禁食不禁水,眼眶取血分离血清,全自动生化分析仪检测血清AST(天冬氨酸氨基转移酶)、ALT(丙氨酸氨基转移酶)、TG(甘油三酯)及TP(总蛋白)水平;酶联免疫法检测血清T3(三碘甲状腺原氨酸)、T4(甲状腺素)及TSH(促甲状腺素)水平.结果显示,①与对照组相比,模型组小鼠耳面部微循环血流量、面温及心率显著升高(P ＜0.05,P＜0.01),痛域显著降低(P＜0.01);血清AST,ALT水平显著升高(P＜0.01),TG水平显著降低(P＜0.01);血清T3水平升高(P＜0.05),TSH水平显著降低(P＜0.01).②与模型组比,铁皮石斛花提取物高剂量不仅能显著降低模型小鼠面部微循环血流量、面温及心率(P ＜0.05,P＜0.01),还能显著升高小鼠痛域值(P＜0.01).铁皮石斛花提取物高剂量显著降低血清AST水平(P＜0.05),升高血清TG水平(P＜0.01);铁皮石斛花提取物低剂量能显著降低血清AST,ALT水平(P＜0.01,P＜0.05).铁皮石斛花提取物高、低剂量均能显著降低模型小鼠血清T3水平、显著升高血清TSH水平(P＜0.05).铁皮石斛花不仅能改善甲亢型阴虚小鼠模型“颧红、心悸”之阴虚症状,还能改善甲状腺轴功能亢进导致的肝功能损伤,其作用机制可能是铁皮石斛花通过影响甲状腺素物质代谢,改善微循、减慢心率而产生滋阴护肝作用.
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铁皮石斛花中花色成分抗氧化性和稳定性研究
为了阐明铁皮石斛花中花色成分的抗氧化活性及其稳定性,该实验选取10个铁皮石斛家系的花为材料,采用紫外-可见分光光度法测定铁皮石斛全花及唇瓣提取液中的花色苷、类胡萝卜素和类黄酮的含量,以及清除DPPH自由基(DPPH·),超氧阴离子自由基(·O-2)和羟基自由基(·OH)的能力,并分析Cu2+,Mg2+,Al3+,K+等金属离子和食品添加剂对铁皮石斛花中花色苷稳定性的影响.结果表明,铁皮石斛花中含有丰富的花色苷,类胡萝卜素和类黄酮等花色相关成分,这些成分在不同家系及不同部位中的分布存在一定差异,其中唇瓣中花色苷(1330.9μg·g-1)含量显著高于全花样本(696.3μg·g-1),且类胡萝卜素含量与花色苷含量呈显著正相关;铁皮石斛花提取液清除3种自由基的能力都与花色苷含量呈显著正相关,相关系数分别为0.384,0.415,0.455,说明花色苷类成分是铁皮石斛花中主要的抗氧化物质.金属离子Cu2+,Mg2+,Al3+,K+使铁皮石斛花提取液吸光度增大,具有增色作用;甜味剂葡萄糖对铁皮石斛花中花色苷有护色作用,而抗坏血酸对铁皮石斛花中花色苷有明显的破坏作用.
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铁皮石斛花多糖相对分子质量及其单糖组成的研究
为了明确铁皮石斛花中多糖相对分子质量分布及其单糖组成,该研究采用高效凝胶色谱和柱前衍生UPLC对11个铁皮石斛花样品的多糖进行了相对分子质量及其单糖组成分析,并利用SPSS 19.0软件根据组成的单糖峰面积进行聚类分析,结果表明11个杂交家系铁皮石斛花的粗多糖均分离为三部分(DOP-1,DOP-2和DOP-3),其平均相对分子质量分别为5.53×105,3.49×105和2.12×105.铁皮石斛花多糖主要由葡萄糖、甘露糖、半乳糖、半乳糖醛酸和阿拉伯糖5种单糖组成,其中甘露糖组成比例高,其与葡萄糖比值为0.302 ～3.335;不同家系样品多糖中各单糖的相对含量存在一定差异,11个家系按单糖组成及相对含量划分为4类,该研究基本明确了铁皮石斛花中多糖相对分子质量分布及单糖构成,为其资源利用打下基础.
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铁皮石斛花对自发性高血压大鼠降压平稳性的实验研究
目的:观察铁皮石斛花水提物对SHR大鼠的降压平稳性和量效关系.方法:自发性高血压大鼠(SHR)32只随机分为四组:模型组,铁皮石斛花高、中、低剂量组(4.5g/kg、1.5g/kg、0.5g/kg).另正常Wistar大鼠16只随机分为正常对照组、正常中剂量组(1.5g/kg)两组.连续灌胃8周,每周测量一次血压.8周后停药1周进入第二阶段,连续倍量灌胃7周,即模型组,铁皮石斛花高、中、低剂量组(9.0g/kg、3.0g/kg、1.0g/kg),正常对照组和正常中剂量组(3.0g/kg)6组,每周测量血压当天均测量给药前(相当于给药24小时水平)、给药1小时和2小时血压,计算降压谷峰比值.结果:16周观察期间血压呈剂量相关性降低.高剂量组SBP给药后1小时较模型组下降44.78mmHg,给药24小时较模型组下降31.54mmHg,降压谷峰比为70.43％,DBP给药后1小时较模型组下降30.73mmHg,给药24小时较模型组下降26.79mmHg,降压谷峰比为87.18％.结论:铁皮石斛花水提物有平稳的降压效果,降压谷峰比值大于50％.连续灌胃可以抑制SHR血压随年龄增长而增加的趋势.
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铁皮石斛花对自发性高血压大鼠降压作用研究
目的:研究铁皮石斛花水提物对自发性高血压大鼠(SHR)的降压作用.方法:SHR大鼠32只随机分为4组:模型组,铁皮石斛花高、中、低剂量组(4.5g/kg,1.5g/kg,0.5g/kg),正常Wistar大鼠16只随机分为2组:正常对照组和正常中剂量组(1.5g/kg).连续给药8周后停药l周,然后各组均倍量给药7周.每周测量一次各组血压和心率(HR),共16周.结果:随着鼠龄的增加,SHR各组血压均有所上升,但铁皮石斛花高、中、低三组血压上升幅度明显低于模型组,且高剂量组显著低于中低剂量组.第二阶段的降压幅度大于第一阶段.铁皮石斛花对正常大鼠血压没有作用.结论:铁皮石斛花水提物可显著降低SHR大鼠血压,且降压效果随剂量提高而增大,随疗程加长而提高.
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铁皮石斛花总黄酮提取工艺优化及体外抗氧化活性研究
[目的]确定铁皮石斛花中总黄酮超声辅助提取佳工艺条件,并对其抗氧化活性进行评价.[方法]采用正交试验方法,以总黄酮提取率为考察指标,对铁皮石斛花总黄酮提取方法的影响因素进行探讨,并对铁皮石斛花总黄酮提取工艺进行优化.以羟自由基清除率、DPPH和ABTS自由基清除率为指标,对铁皮石斛花总黄酮的体外抗氧化活性进行评价.[结果]铁皮石斛花总黄酮的佳提取条件:乙醇体积分数80％,料液比1:50,提取温度55℃,提取次数2次,在以上条件下,总黄酮提取率达1.99％.铁皮石斛花总黄酮对羟自由基、DPPH和ABTS自由基有较强的清除作用,且羟自由基抗氧化活性与总黄酮含量呈正相关.[结论]利用正交法分析结果可靠,得到了铁皮石斛花总黄酮超声提取的佳工艺条件,且实验结果还表明铁皮石斛花具有较强的抗氧化活性.
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铁皮石斛花对肾上腺皮质激素致肾阴虚模型小鼠的影响
目的:探讨铁皮石斛花“滋阴功效”对肾上腺皮质激素致肾阴虚模型小鼠的作用.方法:采用ICR小鼠皮下注射氢化可的松3次造成肾阴虚模型小鼠,连续灌胃给予铁皮石斛花21 d.给药期间观测小鼠体重、摄食量、饮水量;末次给药后检测小鼠面温、抓力、痛阈和自主活动;取血测定血清中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、环磷腺苷(cAMP)和环磷鸟苷(cGMP)水平.结果:①与正常对照组比较,模型对照组小鼠体重、摄食量、痛阈值、抓力及血清SOD活力明显降低,饮水量、自主活动次数、面温、MDA、cAMP含量及cAMP/cGMP比值明显升高.②与模型对照组比较,铁皮石斛花各剂量均能明显减少模型小鼠自主活动次数,降低面温,升高病阈值、抓力及血清SOD活力;1.0 g/kg和4.0 g/kg剂量能明显增加摄食量;1.0 g/kg和2.0 g/kg剂量能明显降低饮水量、血清cAMP水平及cAMP/cGMP比值.③铁皮石斛花与茎相比,铁皮石斛花在减少饮水量,升高痛阈值及血清SOD活力方面略优于茎;而铁皮石斛茎在调节环核苷酸系统,降低血清MDA含量方面优于花.结论:铁皮石斛花具有传统滋阴功效,可改善肾阴虚模型小鼠肾上腺皮质功能亢进症状,其作用机制可能与调节机体环核苷酸系统及清除体内自由基有关.
