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黑骨藤追风活络胶囊治疗风寒湿痹型类风湿关节炎的临床疗效及机制
目的:探讨黑骨藤追风活络胶囊治疗风寒湿痹型类风湿关节炎的临床疗效及深层作用机制.方法:将80例宜宾市第二人民医院确诊的风寒湿痹型类风湿关节炎患者随机分为观察组与对照组,各40例,对照组给予口服洛索洛芬钠,60 mg/次,3次/d,氨甲蝶呤(MTX)7.5～2 mg/次,1次/周;观察组在口服洛索洛芬钠基础上加用黑骨藤追风活络胶囊治疗,0.9g/次,3次/d,连续服药3个月;采用视觉模拟评分法(VAS)观察治疗前后关节压痛数、关节肿胀数、关节肿胀指数、双手平均握力、静息痛、晨僵时间变化;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测两组患者治疗前后血清中血沉(ERS),C-反应蛋白(CRP),类风湿因子(RF)含量变化;ELISA法检测两组患者治疗前后关节液中白细胞介素(IL)-17A,IL-18,IL-27含量变化;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测两组患者治疗前后关节液微小mRNA(microRNA,miR)-146a,miR-16表达变化.结果:经Ridit分析,观察组临床疗效优于对照组(P＜0.05);观察组治疗后关节压痛数、关节肿胀数、关节肿胀指数、双手平均握力、静息痛、晨僵时间改善程度均显著优于对照组(P＜0.01);观察组治疗后血清ERS,CRP,RF含量明显低于对照组;观察组治疗后关节液IL-17A,IL-18,IL-27含量及miR-146a,miR-16表达明显低于对照组.结论:黑骨藤追风活络胶囊可能通过降低miR-146a,miR-16表达,调控炎症因子释放,进而减轻自身免疫因子的表达,从而达到改善风寒湿痹型RA患者体征及症状的作用.
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黑骨藤追风活络胶囊联合甲氨蝶呤治疗类风湿关节炎的临床分析
目的 临床随机对照,分析黑骨藤追风活络胶囊联合甲氨蝶呤、洛索洛芬钠治疗类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)的疗效与安全性.方法 选择我院2016年9月至2017年1月初治的RA患者80例,随机分为观察组和对照组,观察组黑骨藤追风活络胶囊联合甲氨蝶呤和洛索洛芬钠治疗;对照组甲氨蝶呤加洛索洛芬钠治疗,疗程4个月,采用x2和t检验对实验数据进行统计分析,比较两组患者ACR达标率、DAS28有效率及治疗前后血和小便常规、肝肾功能、血糖血脂等方面的差异.结果:观察组、对照组第1个月ACR20达标率为55.3％、28.2％,第4个月ACR50达标率为63.2％、30.8％,DAS28好转率为76.3％、51.3％,P＜0.05;治疗前后血白细胞、小便常规、肝肾功能、血糖、血脂无统计学差异,P＞ 0.05,不良反应发生率无统计学差异,P＞0.05.结论 黑骨藤追风活络胶囊联合甲氨蝶呤加洛索洛芬钠治疗,可显著缓解RA患者病情,起效时间更早,且安全性好.
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黑骨藤追风活络胶囊对斑马鱼发育毒性及急性毒性的初步研究
目的:黑骨藤追风活络胶囊是一种市售抗风湿成药,本研究旨在初步评价该药对斑马鱼的发育毒性.方法:空白对照组斑马鱼予生理盐水干预,另拆解黑骨藤追风活络胶囊,将内容物溶于生理盐水,配置成100μg/ml、200μg/ml、400μg/ml、800μg/ml、1000μg/ml共5个浓度的黑骨藤追风活络胶囊内容物培养液(HZHC)干预试验组斑马鱼,进行以下两步试验:1)成年斑马鱼的急性毒性初步观察:将180条雌雄各半的成年斑马鱼简单数字化随机分配到6个组别,每组30条,记录空白对照组和5个浓度HZHC试验组斑马鱼5个时点(24h,48h,72h,96h,120h)的死亡率.2)斑马鱼发育毒性观察:选取正常发育6h的斑马鱼受精卵分6组,每组30枚,干预措施同前,记录各组斑马鱼3个时点(72h,96h,120h)的孵化数,死亡数和120h后的畸变数并拍下典型畸形照片,同时记录120h后各组存活斑马鱼的身长、身宽和体重进行组间比较.结果:在干预24-120h期间,与对照组相比,浓度≤400μg/ml的药物黑骨藤追风活络胶囊干预组对斑马鱼成鱼及胚胎的死亡率,发育畸形率没有明显影响(P＞0.05),但在干预48h,96h,120h后,800μg/ml和1000μg/ml两个浓度组的斑马鱼的死亡率和畸形率、体重、身宽较之其余各组显著增高(P＜0.05),畸变以心脏水肿为主.结论:以斑马鱼作为实验动物,发现黑骨藤追风活络胶囊内容物培养液在800μg/ml,1000μg/ml浓度时干预72h即有明显的发育毒性和致死毒性,影响斑马鱼的生存安全,畸变表现为心脏水肿,但在400μg/ml以内的浓度范围内干预120h未见明显死亡和发育毒性,可能相对安全,这对完善黑骨藤追风活络胶囊的用药安全认识提供了一定实验依据.
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黑骨藤追风活络胶囊防潮辅料的优化
目的 筛选黑骨藤追风活络胶囊(主要成分为黑骨藤、青风藤、追风伞等)的防潮辅料及优配比.方法 利用软件Design Expert 8.06对辅料进行优选,以辅料的种类和用量作为考察因素,以制剂的吸湿率和成型率作为评价指标,进行优化.结果 优化后辅料的佳配比为0.701∶0.299(乳糖∶甘露醇).佳组合试验结果发现,吸湿率从原来的10.56％降至7.76％,明显降低了原胶囊内容物的吸湿性,且与软件预测结果相吻合.结论 经软件优化后筛选出的辅料配比能提高黑骨藤追风活络胶囊的防潮性能.
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苗药黑骨藤追风活络胶囊治疗类风湿关节炎的靶基因预测分析
目的 利用公共基因芯片数据库GEO、中药有效成分数据库BATMAN-TCM、生物信息分析平台GCBI等在线资源对上市抗风湿苗药黑骨藤追风活络胶囊已知有效成分进行分析,预测分析该药治疗人类类风湿关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)的潜在效应靶基因和通路.方法 从BATMAN中药化合物数据库搜寻苗药黑骨藤追风活络胶囊(黑骨藤,追风伞,青风藤)所含有效成分作用的效应基因数据集Ⅰ;从GEO筛选符合纳入条件的人RA滑膜组织全基因组RNA芯片(样本为RA患者和正常人的滑膜组织)利用GCBI在线实验室筛选出RA与正常组织的差异基因数据集Ⅱ;分别对上述两个数据集及两者的交集通过GCBI进行GO富集分析、KEGG通路分析以及参与生物功能的蛋白相互作用网络分析(PPI分析).结果 从符合研究纳入条件的3块RA患者与常人滑膜组织基因芯片数据集终得到455个差异性基因,从BATMAN中药化合物数据查到黑骨藤追风活络胶囊的药物组分调节基因432个,交集得到共27个潜在效应靶基因,后续生信分析及文献回溯证实其中STAT1、MAPK1、RAC2、CDK1、PRKCB与周围基因蛋白互作关系较为突出,STAT1-ERKs相关通路可能是黑骨藤追风活络胶囊抗RA潜在作用方向.结论 利用生物信息学有助于黑骨藤追风活络胶囊成分针对RA滑膜组织的治疗效应靶基因探索,为进一步的实验研究指明方向,提供理论依据.
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中药内服熏蒸二联疗法治疗膝关节骨性关节炎的疗效观察与机制研究
目的 观察黑骨藤追风活络胶囊联合中药熏蒸治疗膝关节骨性关节炎(风寒湿痹证)的临床疗效及作用机制.方法 选取武汉市中西医结合医院骨科门诊就诊的膝关节骨性关节炎患者162例.随机分为三组,二联组给予黑骨藤追风活络胶囊与中药熏蒸的联合治疗方案,中药组给予黑骨藤追风络胶囊口服治疗,对照组给予双氯芬酸钠缓释片口服治疗,治疗前后抽取患者血液与关节液,使用WST-1法测定超氧化物歧化酶(SOD)活性、化学法测丙二醛(MDA)和氧化型谷胱甘肽(GSH)水平,并统计和分析三组的指标变化、临床疗效和临床用药安全性.结果 (1)二联组的临床疗效明显优于中药组及对照组,而中医证候评分也明显下降,差异有统计学意义(P＜0.05);中药组与对照组相比临床疗效和中医证候评分无明显差异;(2)与治疗前相比,三组血清MDA明显增高,而血清SOD、GSH没有明显差异,而关节液中的MDA明显降低,二联组与对照组的SOD、GSH增高,差异具有统计学意义(P＜0.05);组间比较,与对照组、中药组相比,二联组关节液中MDA降低,SOD、GSH明显增高,差异具有统计学意义(P＜0.05);而血清MDA、SOD、GSH均没有明显差异(P＞0.05);中药组与对照组相比,关节液中MDA、SOD、GSH差异也没有统计学意义(P＞0.05).结论 黑骨藤追风活络胶囊联合中药熏蒸治疗膝关节骨性关节炎疗效显著,其作用机制同改善关节局部的氧化应激状态有关.
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黑骨藤追风活络胶囊抗类风湿性关节炎的药理作用及机制
目的：探讨苗药黑骨藤追风活络胶囊的抗类风湿关节炎的药理作用及机制。方法将雄性Spra-gue Dawley( SD)大鼠50只分为正常SD大鼠10只正常为对照组，另40只建立关节炎大鼠后分为模型非给药组、黑骨藤追风活络胶囊组(给予黑骨藤追风活络胶囊)、两种阳性药物对照组(分别以强的松及吲哚美辛治疗)，每组10只；观察黑骨藤追风活络胶囊对关节炎大鼠足肿胀、脏器指数，以及血浆、关节液中白细胞介素( IL)-1β、白介素-10和肿瘤坏死因子( TNF)-α等炎症因子水平的影响。结果与正常对照组相比较，关节炎模型组大鼠足肿胀程度逐渐增加，胸腺、脾脏、肾上腺和肾脏指数增加( P<0.05)；同时，关节炎大鼠血浆、关节液中IL-1β、IL-10、TNF-α等炎症因子水平明显升高。给予药物黑骨藤追风活络胶囊治疗后，足肿胀程度、胸腺和脾脏指数显著降低(P<0.05)，肾上腺、肾脏指数无明显改善，效果与强的松、吲哚美辛对照药组相当。炎症因子IL-1β、TNF-α水平在药物治疗组显著降低( P<0.05)，但IL-10水平较给药后有进一步升高。结论黑骨藤追风活络胶囊能够起到抗风湿性关节炎的作用，其作用机制可能与调节免疫器官功能有关。
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黑骨藤追风活络胶囊对胶原诱导性关节炎大鼠IL-1β、IFN-γ、IL-15的影响
目的 观察黑骨藤追风活络胶囊对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠关节炎症的缓解作用及对血清白细胞介素-1β(IL-1β)、干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-15(IL-15)表达水平的影响.方法 将40只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、雷公藤多苷片组和黑骨藤追风活络胶囊组,每组10只,对除正常组外,其余3组建立CIA模型,于初次免疫后10 d开始,给各组大鼠进行相应药物灌胃处理以延缓炎症进展,并每隔7 d评定一次各组大鼠的关节炎指数(AI),给药21 d后处死大鼠检测各组大鼠血清中IL-1β、IFN-γ和IL-15的表达水平.结果 正常组大鼠关节正常,而模型组关节红肿较为明显,AI指数评分较高(P<0.001),雷公藤多苷片组和黑骨藤追风活络胶囊组大鼠AI均较模型组有所缓解(P<0.01).模型组大鼠血清IL-1β、IFN-γ、IL-15水平均较正常组升高(P<0.01),雷公藤多苷片组及黑骨藤追风活络胶囊组大鼠IL-1β、IFN-γ、IL-15水平均显著低于模型组(P<0.05或P<0.01).结论 黑骨藤追风活络胶囊可在一定程度上抑制CIA大鼠促炎因子分泌,缓解关节炎症,可作为临床上治疗类风湿关节炎的辅助用药.
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Toll样受体4在肾间质纤维化中的表达及意义
目的：探讨Toll样受体4（toll-like receptor 4，TLR4）在肾间质纤维化大鼠模型中的表达及意义；研究黑骨藤追风活络胶囊对肾间质纤维化的作用及可能的机制。方法采用单侧输尿管梗阻（UUO）致肾间质纤维化大鼠模型。将36只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、黑骨藤追风活络胶囊（HGT ）治疗组（243 mg/kg/d），手术后第7天、第14天分别处死各组中6只大鼠。用HE染色方法观察各组大鼠肾小管间质损伤程度，免疫组化方法观察各组大鼠肾组织中 TLR4、转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1，TGF-β1）的表达情况。结果模型组 TLR4、TGF-β1的表达及肾小管间质损伤指数明显高于同期假手术组（P＜0．01）；黑骨藤追风活络胶囊治疗组 TLR4、TGF-β1的表达及肾小管间质损伤指数明显低于模型组（P＜0．01）。结论 TLR4及其介导的信号通路可能在肾间质纤维化中起促进作用；黑骨藤追风活络胶囊对肾间质纤维化有一定的防治作用。
