首页 > 文献资料
-
三叶青提取物对肝癌细胞HepG2及原代大鼠肝细胞的体外毒作用研究
目的探讨三叶青提取物对肝癌细胞Hep G2及原代大鼠肝细胞的体外毒作用.方法采用体外细胞培养技术,以细胞活性、细胞乳酸脱氢酶(LDH)活力的改变为指标,观察三叶青提取物对肝癌细胞Hep G2,体外毒作用的时效、量效关系,共观察其对正常原代培养大鼠肝细胞的影响.结果三叶青提取物以1×10-4g/L的浓度与Hep G2共同培养,在24h较空白对照组的细胞活性有显著降低;不同浓度的提取物和Hep G2共同培养,乙酸乙酯提取部位对细胞活性及酶学改变有显著性影响;对原代培养大鼠肝细胞活性及LDH也有一定的影响.结论三叶青提取物对Hep G2细胞具有明显的体外细胞毒作用,其毒性作用与药物的浓度和作用时间呈明显正相关,但对正常原代大鼠细胞毒性较小.
-
不同工艺三叶青制剂对人肺癌A549裸鼠移植瘤生长抑制作用比较研究
目的:观察不同工艺加工的三叶青制剂抗人肺癌A549裸鼠移植瘤的作用.方法:将相同生药剂量的三叶青冻干粉、水煎剂和饮片粉灌胃人肺癌A549移植瘤裸鼠,测定其肿瘤生长动态体积和抑瘤率.结果:三种不同工艺制备的三叶青对人肺癌A549裸鼠移植瘤均有一定的抑制作用,抑瘤率在10.5％～28.0％之间,其中三叶青冻干粉和饮片粉高、中剂量均可明显抑制人肺癌A549裸鼠移植瘤的生长(P＜0.05),但肿瘤体积的动态测定表明三叶青冻干粉发挥抑瘤作用的时间要早于饮片粉.水煎剂的抑瘤作用不显著(P＞0.05).结论:三叶青冻干粉和饮片粉抗人肺癌A549裸鼠移植瘤的作用强于水煎剂,而冻干粉发挥抑瘤效果的时间要早于饮片粉.
-
三叶青的高效液相色谱指纹图谱研究
目的:应用RP-HPLC建立三叶青的色谱指纹图谱.方法:色谱柱:YMC-Pack ODS-A柱(C18,250×4.6mm,5μm)；流动相A:甲醇；流动相B:水；流速:1.0ml/min;检测波长:300nm;柱温:25℃；记录时间:112min.结果:获得了该药材的HPLC色谱指纹图谱,含有共有峰7个.结论:本方法样品处理简便,重复性好,可为三叶青的质量控制提供参考.
-
三叶青的组织培养与快速繁殖研究
三叶青又名有角乌蔹莓、石老鼠,为葡萄科崖爬藤属植物三叶崖爬藤.主要分布于长江以南地区,但多年来三叶青被毁灭性挖取,种源稀少.笔者应用组织培养进行快速繁殖研究,以期解决资源紧缺问题.
-
闽产三叶青地上部分提取物体内抗炎镇痛作用研究
目的 研究闽产三叶青地上部分提取物体内抗炎镇痛作用.方法 分别采用低、中、高剂量的闽产三叶青地上部分提取物,抗炎作用实验以二甲苯致小鼠耳肿胀急性炎症模型并以醋酸泼尼松为阳性药、角叉菜胶致大鼠足肿胀急性炎症模型并以醋酸地塞米松为阳性药、大鼠棉球肉芽组织增生慢性炎症模型并以醋酸地塞米松为阳性药,镇痛作用实验以化学刺激法(扭体法)及热刺激法(热板法)并以罗通定为阳性药.结果 与模型组比较,闽产三叶青地上部分提取物中、高剂量组及粗提物组对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀有明显的抑制作用(依次为P＜0.05,P＜0.01,P＜0.05),耳肿胀抑制率分别为22.86％,38.79％,20.62％;提取物中、高剂量组及粗提物组对角叉菜胶致大鼠足肿胀急性炎症有明显的抑制作用(P＜0.05或P＜0.01);提取物低、中、高剂量组及粗提物组均能显著减少大鼠棉球肉芽组织增生慢性炎症模型中大鼠肉芽肿的重量(依次为P＜0.05,P＜0.01,P＜0.0l,P＜0.01),其抑制率分别为28.12％,46.41％,59.58％,44.50％.与模型组比较,在60,90 min,提取物高剂量组能有效提高小鼠的痛阈值延长率(P＜0.05,P＜0.01),痛阈值延长率高达65.58％;提取物中、高剂量组及粗提物组能有效抑制醋酸致痛的小鼠扭体次数(依次为P＜0.05,P＜0.01,P＜0.05),小鼠扭体潜伏期明显延长(依次为P＜0.05,P＜0.01,P＜0.05),扭体次数明显减少(依次为P＜0.05,P＜0.01,P＜0.05),镇痛抑制率高达51.80％.结论 闽产三叶青地上部分提取物具有明显的体内抗炎镇痛作用.
-
正交试验法优选三叶青中总黄酮的提取工艺
目的 优选三叶青中总黄酮的提取工艺.方法 以三叶青总黄酮为指标,采用单因素考察和正交试验相结合的方法,对乙醇浓度、乙醇用量、提取时间、提取次数4个影响因素进行研究,优选提取工艺.结果 乙醇浓度对三叶青总黄酮的提取影响较大,其他3个因素影响程度排序为:提取次数﹥提取时间﹥乙醇用量.结论 佳提取工艺参数为:50%乙醇、15倍量、回流提取3次、以及每次2 h.
-
HPLC同时测定三叶青中5种黄酮类成分的含量
目的 建立HPLC同时测定三叶青中5个黄酮类化合物芦丁、异槲皮苷、山奈酚-3-O-芸香糖苷、槲皮素和山奈酚的含量.方法 Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-0.2％磷酸溶液,梯度洗脱,流速为1.0 mL·min-1,检测波长为360 nm,柱温为35℃.结果 芦丁、异槲皮苷、山奈酚-3-O-芸香糖苷、槲皮素和山奈酚分别在0.0878～0.878 μg、0.0696～0.696 μg、0.1629～1.629 μg、0.0027～0.027 μg、0.00723～0.0723 μg内与峰面积呈良好的线性关系,r≥0.999 7;平均加样回收率分别为97.44％,96.88％,97.00％,96.42％,96.24％.结论 该方法简便、高效,可作为三叶青的质量控制提供参考.
-
浙江三叶青与广西三叶青的生药学鉴别
从性状特征、显微特征及一般理化鉴别等方面对两种不同产地(浙江及广西)三叶青进行生药学鉴别,为鉴别三叶青及制定三叶青药材质量标准提供实验依据.
-
中药三叶青及其组方干预荷MFC胃癌小鼠调节性T细胞和相关细胞因子表达的研究
[目的]研究中药三叶青及其与人参、莪术配伍对荷MFC615小鼠的调节性T细胞和相关细胞因子表达的影响.[方法]皮下接种法建立小鼠前胃癌肿瘤动物模型,随机分为8组,分别为荷瘤未用药7d组、三叶青7d组、三叶青+人参7d组、三叶青+莪术7d组,荷瘤未用药14d组、三叶青14d组、三叶青+人参14d组、三叶青+莪术14d组,每组9只.设正常组18只为对照.接种7d后灌胃给药,每日1次,正常组及荷瘤未用药组不灌胃.观察不同时期平均肿瘤体积、小鼠死亡情况;给药7d后,处死7d组及一半正常组动物.给药14d后,处死剩余全部,取外周血、脾脏,流式细胞术测定外周血及脾脏淋巴细胞中Treg细胞比例,ELISA法测定血清COX-2、PGE2含量.[结果]①抑瘤率:三叶青组、三叶青+人参组、三叶青+莪术组抑瘤率分别为20.84％、32.26％、8.81％;②外周血Treg细胞比例:14d时,三叶青+人参组Treg比例明显低于荷瘤未用药组;③脾脏Treg比例:三叶青+人参组Treg比例14d较7d未明显升高;④血清COX-2、PGE2含量:14d时,三叶青+人参组COX-2、PGE2含量明显低于荷瘤未用药组.[结论]①抑瘤效果从高到低依次为:三叶青+人参、三叶青、三叶青+莪术;②三叶青+人参组14d给药效果优于7d;③三叶青与人参配伍可以显著降低荷瘤鼠脾脏及外周血Treg比例及血清中COX-2、PGE2含量,延缓肿瘤进展,逆转肿瘤免疫逃逸.
-
三叶青的化学成分及药理作用研究进展
三叶青是一种重要中药,其主要活性成分是黄酮类化合物,具有抗肿瘤、保肝、抗病毒、抗炎、调节免疫等药理作用,并基本无毒.随着对三叶青研究的不断深入,其药用价值的开发和利用将有着广阔的前景.现就三叶青的化学成分和药理作用研究作一综述,为今后进一步的研究提供资料依据.
-
正交法优化兰叶青继代增殖与生根培养的条件
目的 探究三叶青的组培快繁技术.方法 通过正交试验对三叶青的腋芽增殖、生根培养条件进行优化,得出三叶青的快速繁殖的适培养基.结果 在MS培养基上附加2 mg·L-16-BA+0.5 mg·L-1ZT+1mg·L-1IBA时芽的增殖效果好；而在1/2MS培养基上附加1.0 mg·L-1IBA+20 g·L-1蔗糖时,生根效果佳.结论 通过腋芽增殖快繁育苗技术可获得完整植株,达到快速繁殖的目的.
-
三叶青扦插繁殖技术研究
目的 研究三叶青扦插育苗技术.方法 研究了生根剂、插穗年龄和基质对插穗生根的影响.结果 生根剂、插穗年龄对插穗生根的影响明显,基质对插穗生根的影响不明显.结论 2～3年生老枝1 000mg/LIBA浸溃10s后扦插于黄土中生根效果佳.
-
三叶青黄酮抑制肺癌A549细胞生长与蛋白酶体活性的关系研究
目的:探讨三叶青黄酮对非小细胞肺癌A549细胞增殖抑制作用及其机制.方法:采用MTT法检测三叶青黄酮对A549细胞增殖的抑制作用;酶标仪检测细胞蛋白酶体和DUB活性;Real-time PCR和Western blot法检测细胞泛素-蛋白酶体途径相关蛋白ub-prs、USP14、UCHL5、POH1等表达变化.结果:体外实验MTT法检测三叶青黄酮对非小细胞肺癌A549细胞增殖的抑制作用,显示三叶青黄酮各浓度组的抑制率比较,差异具有统计学意义,并呈剂量依赖性.酶标仪检测结果显示随三叶青黄酮浓度升高,细胞蛋白酶体和DUB活性逐渐降低,呈明显的量-效关系.Real-time PCR和Western blot法检测表明三叶青黄酮可以上调A549细胞中ub-prs蛋白表达,下调USP14、UCHL5、POH1蛋白表达,呈剂量依赖性.结论:三叶青黄酮对非小细胞肺癌A549细胞具有明显抑制增殖作用,其机制可能与调节泛素-蛋白酶体途径有关.
-
三叶青黄酮抗肺癌作用研究
目的：研究三叶青黄酮对肺癌A549细胞增殖抑制和侵袭转移作用及其机制。方法采用MTT法检测三叶青黄酮对A549细胞增殖的抑制作用；集落形成试验检测三叶青黄酮对A549细胞抗癌活性的影响；划痕试验检测三叶青黄酮对细胞迁移力的影响；Transwell实验检测三叶青黄酮对A549细胞侵袭力变化；Western blot法检测MMP-2、MMP-9、TIMP-2等侵袭转移相关蛋白表达水平。结果三叶青黄酮抑制A549细胞增殖程度与用药浓度、时间呈正相关；随着药物浓度的增高，细胞集落形成的数量明显减少，细胞向划痕区的迁移速度不断减慢；穿过Transwell小室的侵袭细胞亦明显减少；MMP-2、MMP-9蛋白表达逐渐降低， TIMP-2蛋白表达升高，呈浓度依赖性。结论三叶青黄酮能够抑制肺癌A549细胞的侵袭转移，可能与降低 MMP-2、MMP-9蛋白表达有关。
-
三叶青黄酮对肺癌A549细胞生长抑制与MAPKs通路关系的研究
目的 探讨三叶青黄酮对人非小细胞肺癌A549细胞增殖抑制、凋亡作用及其机制.方法 采用CCK-8检测三叶青黄酮对A549细胞增殖的抑制作用;荧光显微镜观察Hoechst 33258染色的细胞凋亡形态变化;流式细胞仪检测细胞凋亡率;Western blot法检测p-p38、p-ERK,p-JNK蛋白表达变化.结果 体外实验CCK-8检测显示三叶青黄酮各浓度组作用不同时间点细胞的抑制率比较,差异有显著性;呈剂量、时间依赖性.荧光显微镜观察经Hoechst 33258染色的细胞凋亡形态变化,显示细胞减少,细胞核改变和凋亡小体形成.流式细胞仪检测结果 显示细胞凋亡率呈明显的量-效关系.Western blot法检测表明三叶青黄酮可以上调A549细胞中p-p38和p-ERK蛋白表达,且与浓度呈正相关.结论 三叶青黄酮对人非小细胞肺癌A549细胞具有明显抑制增殖,促进凋亡作用,其机制可能与激活p38MAPK途径和ERK途径有关.
-
三叶青黄酮经 p38MAPK 和 NF-κB 途径抑制老年小鼠急性肺损伤
目的：探讨三叶青总黄酮（RTFs）对老年小鼠急性肺损伤（ALI）的保护作用及可能机制。方法采用老年C57BL／6J 小鼠支气管滴注脂多糖（LPS）诱导 ALI 模型，三叶青黄酮灌胃给药3 d。取支气管肺泡灌洗液（BALF），瑞氏－吉姆萨染色计算白细胞数，ELISA 检测炎症因子水平；ELISA 和 Western blot 分析肺组织 MAPKs、NF-κB 蛋白表达， TransAM检测核蛋白 NF-κB 活性。结果支气管滴注 LPS成功诱导 ALI 模型，三叶青黄酮可明显减少 BALF 中白细胞和中性粒细胞数（P ＜0.01），降低 IL-1β、IL-6、IL-12p40、TNF-α和 sTNF-R1的分泌水平（P ＜0.01），改善肺组织病理损伤。三叶青黄酮明显抑制肺组织 p38MAPK、NF-κB 的磷酸化及 NF-κB 的 DNA 结合活性（P ＜0.01）。结论三叶青黄酮抑制 p38MAPK、NF-κB 炎症通路，保护 LPS 诱导的老年小鼠 ALI。
-
HPLC-ELSD法同时测定三叶青中胡萝卜苷和β-谷甾醇的含量
目的 建立同时测定三叶青药材中胡萝卜苷和β-谷甾醇含量的方法.方法 采用HPLC-ELSD法,岛津VPN-ODS C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,以甲醇为流动相,体积流量为0.7 mL·min-1,柱温为30℃;漂移管温度60℃,氮气体积流量1.8L ·min-1.结果 胡萝卜苷和β-谷甾醇分别在0.1～2.0 μg和0.2 ～4.0 μg范围内呈良好线性关系,回归方程分别为Y=0.696X+2.737,r =0.999 7;Y=0.752 X+2.909,r =0.999 6.平均回收率分别为99.32％、100.13％.结论 该方法简便,结果准确、可靠,可作为三叶青药材中胡萝卜苷和β-谷甾醇的含量测定方法,为三叶青质量控制提供依据.
关键词： 三叶青 HPLC-ELSD法 胡萝卜苷 β-谷甾醇 -
三叶青总黄酮提取工艺研究
目的 优选三叶青总黄酮的佳提取工艺.方法 通过回流提取法、起声提取法及微波法提取法的比较,优选三叶青总黄酮佳提取方法,且通过单因素考察和正交试验,优化佳工艺条件,用紫外分光光度法测定总黄酮含量.结果 佳提取方法为微波提取法,佳工艺条件为:料液比1:25,60％乙醇,微波功率450w,微波时间15min.结论 优选得到的提取工艺合理、操作可行、质量可控.
-
响应面法优化三叶青总黄酮的提取工艺研究
目的：优选三叶青总黄酮的提取工艺。方法以液料比、乙醇浓度、提取时间、提取温度4个单因素为考察基础，利用响应面法优化并建立了三叶青总黄酮佳的回流提取工艺。结果液料比对总黄酮提取量的影响大，提取时间次之。佳工艺条件为：液料比14.25mL· g －1，乙醇浓度：50.7％，提取时间：1.975h，提取温度：89.4℃。结论采用响应面分析法优选三叶青总黄酮的提取工艺稳定、合理、可行。
-
三叶青抗肿瘤活性部位的筛选研究
目的 研究三叶青乙醇提取物及其不同溶剂萃取部分对不同肿瘤细胞的体外抑制作用,筛选三叶青抗肿瘤活性部位.方法 采用四甲基偶氨唑盐(MTT)比色法.结果 三叶青乙醇提取物和其4个提取部位对肿瘤细胞均有不同程度的抑制作用.其中,三氯甲烷部位和石油醚部位在一定浓度下可有效抑制肿瘤细胞的活性,乙酸乙酯部位和正丁醇部位对肿瘤细胞的抑制作用均较弱.结论 三叶青中抗肿瘤的活性部位是三氯甲烷部位和石油醚部位,而且其对不同肿瘤细胞的体外抑制作用呈一定的浓度依赖作用.
