首页 > 文献资料
-
两种补肾法治疗绝经后骨质疏松症的分子机制差异
目的:观察两种补肾法对去势大鼠骨代谢和Ⅰ型胶原合成、交联及基质矿化相关基因表达的影响.方法:建立SD大鼠去势模型,给予补肾阳法和补肾阴法干预,观察骨组织形态学,检测骨密度及血清骨组织特异性碱性磷酸酶(B-ALP)、Ⅰ型前胶原氨基末端前肽(PINP)、Ⅰ型胶原氨基末端肽(NTX)和Ⅰ型胶原羧基末端肽(CTX),测定Ⅰ型胶原合成、交联与基质矿化相关调控基因COLIA-1、COLIA-2、Lhx9、Bglap、Ibsp、Runx-2和Smad3的表达.结果:补肾阳法和补肾阴法均可明显提高大鼠骨密度并改善骨组织微观结构,同时通过不同的方式影响骨代谢和Ⅰ型胶原合成、交联及基质矿化相关基因的表达.结论:补肾阴法和补肾阳法均可有效治疗大鼠绝经后骨质疏松症,但二者的作用机制存在明显差异.
-
柚皮苷对小鼠成骨细胞MC3T3-E1增殖、分化和矿化的影响
目的:检测骨碎补有效成分柚皮苷对成骨细胞株MC3T3-E1细胞增殖、分化和矿化的影响.方法:以成骨细胞株MC3T3-E1细胞为体外药效的试验模型(药物组和对照组),通过CCK-8法观察10,1,0.1,0.01,0.001,0.000 1μmol·L~(-1)的柚皮苷溶液对MC3T3-E1细胞增殖能力的影响;通过乳酸脱氢酶(LDH)细胞毒性试验观察以上浓度的柚皮苷溶液对细胞毒性能力的影响.通过骨形成蛋白-2(BMP-2),碱性磷酸酶(ALP)活性测定和骨钙素(OC)含量测定观察柚皮苷对MC3T3-E1细胞分化能力的影响;通过Von kossa钙化染色法观察柚皮苷对MC3T3-E1细胞钙化能力的影响.结果:高浓度的柚皮苷溶液在12 h和24 h时能促进MC3T3-E1细胞的增殖作用.而低浓度的柚皮苷溶液则无此作用.所测的各个组别细胞毒性百分比都较小,且随着时间的推移(12,24,48 h)变化较小.光镜下观察各个时间点细胞的密度和形态也未发生明显的变化.BMP-2细胞免疫化学结果表明,24,48 h时柚皮苷浓度10,1,0.1μmol·L~(-1)包浆内棕色着色比对照组明显.ALP检测结果表明48 h时,1,0.1μmol·L~(-1)的柚皮苷溶液可提高MC3T3细胞的ALP活性(P<0.05).72 h时,0.1 μmol·L~(-1)的柚皮苷溶液可提高MC3T3细胞的ALP活性(P<0.05).OC检测结果表明12 d时,10,1μmol·L~(-1)柚皮苷溶液作用组与对照组相比OC活性明显提高(P<0.05).Vonkossa染色钙化面积百分比结果表明3组柚皮苷溶液作用组与对照组相比无明显区别.结论:柚皮苷溶液可以提高成骨细胞株MC3T3-E1增殖能力和分化能力.
-
PiT-1在血管平滑肌细胞中的磷摄取非依赖信号转导作用
血磷升高与慢性肾病患者血管钙化的发生密切相关。高磷诱导血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cell，VSMCs）向成骨表型转化及基质矿化需要Ⅲ型钠磷共转运体 PiT-1的参与，但 PiT-1在其中的具体作用机制尚不清楚。日前，美国华盛顿大学 Giachelli 的研究小组发现，诱导 VSMCs 向成骨表型转化及基质矿化所需要的磷浓度远远高于大量磷摄取所需要的磷浓度，提示除磷转运外 PiT-1可能还存在其他信号转导作用。进一步研究发现，高磷并不能诱导 PiT-1缺陷的 VSMCs 发生ERK1／2磷酸化，但转染野生型 PiT-1或磷转运缺陷 PiT-1突变体逆转录病毒后可活化 ERK1／2。野生型 PiT-1或磷转运缺陷PiT-1突变体均可促进 VSMCs 向成骨表型转化。磷转运缺陷 PiT-1突变体也可促进 VSMCs 基质矿化，但程度低于野生型 PiT-1。该研究表明，PiT －1所介导的磷摄取依赖性和非依赖作用，对于磷诱导的 VSMCs 钙化都是非常重要的。当细胞外磷浓度高于生理浓度时，PiT-1可作为一个磷感受器在调节 ERK1／2激酶的活性、VSMCs 向成骨表型转化及钙化中发挥信号转导作用。进一步阐明 PiT-1作为磷感受器的具体作用机制，有望为临床治疗血管钙化提供新的靶点。
-
骨桥蛋白与血管损伤的研究进展
骨桥蛋白(osteopontin,OPN)是早从骨基质分离出的一种磷酸化糖蛋白,富含唾液酸.因其介导骨组织细胞与骨基质的连接,参与骨基质矿化和重吸收过程而得名.OPN作为一种新型的细胞因子,骨桥蛋白参与多种生命现象,如骨代谢、肿瘤的生长转移、炎症与免疫等,近年来的研究表明OPN在大鼠血管损伤后新生内膜中的表达明显上调,而且它能促进血管平滑肌细胞、外膜细胞的迁移,被认为是血管损伤修复过程中重要的始动因素[1].本文对OPN的基本性征以及它在血管损伤中的作用予以综述.
-
骨桥蛋白与血管再狭窄的关系
骨桥蛋白(osteopontin,OPN)是细胞外基质中一种重要的功能性蛋白,因其介导骨细胞与骨基质的连接、参与骨基质矿化和重吸收过程而得名,它在巨噬细胞、内皮细胞、血管平滑肌细胞(VSMC)及上皮细胞等中也有表达.作为一种新型的细胞因子,OPN参与多种生命现象,如骨代谢、肿瘤的生长转移、炎症与免疫等,尤其在组织的损伤与修复中受到广泛的关注.近年来的研究表明OPN在血管损伤后新生内膜中的表达明显上调,而且它能促进VSMC和外膜细胞的迁移,被认为是血管损伤修复过程中重要的始动因素[1].本文对OPN的基本特征以及它在血管再狭窄中的作用予以综述.
-
microRNA?494通过TLR?4通路抑制成骨细胞分化及基质矿化的分子机制
目的 探讨microRNA?494(miR?494)通过Toll样受体?4(TLR?4)通路抑制成骨细胞分化及基质矿化的分子机制.方法 选用小鼠成骨细胞株MC3T3?E1作为体外模型,采用miR?494 mimic转染小鼠成骨细胞株MC3T3?E1,采用qRT?PCR法测定miR?494在小鼠成骨细胞株MC3T3?E1转染前后的表达情况;通过MTT法检测转染前后小鼠成骨细胞株MC3 T3?E1的增殖情况;通过测定碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性,研究小鼠成骨细胞株MC3T3?E1的分化情况;通过骨钙素(osteocalcin,OC)定量检测分析和Von Kossa钙化染色检测小鼠成骨细胞株MC3 T3?E1的基质矿化情况;通过Western blot等检测转染前后TLR?4蛋白的表达差异.结果 qRT?PCR测定结果显示,与阴性对照组相比,小鼠成骨细胞株MC3 T3?E1转染后的miR?494的mRNA的表达量升高(P<0.05),说明miR?494 mimic转染小鼠成骨细胞株MC3T3?E1,成功使miR?494过表达.与阴性对照组相比,经过miR?494 mimic转染后,小鼠成骨细胞株MC3T3?E1的增殖能力受到抑制(P<0.05).转染后的小鼠成骨细胞株MC3T3?E1中ALP的活性降低(P<0.05).同时,转染后的小鼠成骨细胞株MC3T3?E1中OC的活性显著降低(P<0.05),矿化结节的数目、减少(P<0.05).Western blot结果显示,与阴性对照组相比,miR?494 mimic转染组细胞中的TLR?4蛋白表达量显著升高(P<0.05).结论 miR?494能够通过TLR?4通路抑制小鼠成骨细胞株MC3T3?E1的增殖活力,降低细胞中ALP、OC的活力,减少成骨细胞中的矿化结节数,抑制成骨细胞分化及基质矿化.
关键词： microRNA?494 成骨细胞 基质矿化 TLR?4 -
新疆马鹿角提取物对成骨细胞MC3T3-E1增殖、分化和矿化的影响
目的 研究新疆马鹿角提取物对体外培养成骨细胞株MC3T3-E1细胞增殖、分化和矿化的影响.方法 以MC3T3-E1细胞作为药物筛选模型,用MTT法测定不同浓度的新疆马鹿角提取物促细胞增殖作用,采用碱性磷酸酶活性测定和骨钙素含有量检测,观察不同浓度的新疆马鹿角提取物促细胞分化作用,以Von kossa钙化染色法观察新疆马鹿角提取物溶液对MC3T3-E1细胞钙化能力的影响.结果 MTT检测结果表明5×102、5×101、5 μg/mL新疆马鹿角提取物溶液在24、48、72 h均可促进MC3T3-E1细胞增殖,且呈时间依赖性.ALP检测结果表明5×102、5×101 μg/mL新疆马鹿角提取物溶液在24、48、72 h可提高MC3T3-E1细胞内ALP的活性.BGP检测结果表明5×102、5×101 μg/mL新疆马鹿角提取物溶液在8、12 d可促进MC3T3-E1细胞内BGP的合成和分泌.Von kossa染色钙化面积百分比结果表明3组新疆马鹿角提取物溶液与对照组比较无明显区别.结论 新疆马鹿角提取物可促进成骨细胞株MC3T3-E1的增殖和分化能力.
-
牙本质形成的研究进展
牙本质形成包括细胞分化、成牙本质细胞分泌细胞外基质及基质矿化.目前认为这一过程有很多因素参与调控,如特异性蛋白、骨形成蛋白(BMP)及多种生长因子.现就近年牙本质形成有关影响因素的报道作一综述.
-
骨碎补提取液及柚皮甙对小鼠成骨细胞MC3T3-E1基质矿化作用影响的比较研究
目的 比较骨碎补水、醇提取液及柚皮甙对小鼠成骨细胞MC3T3-E1基质矿化作用的影响.方法 制备骨碎补的水、醇提取液.以小鼠成骨细胞株MC3T3-E1为细胞模型,用Von kossa钙化染色法了解上述药物提取液埘成骨细胞摹质矿化作用的影响.结果 1 mg/L骨碎补水提液及0.01 mg/L骨碎补醇提液均可提高MC3T3-E1细胞体外钙化点面积百分比(P<0.05).三组柚皮苷溶液作用组与对照组相比无明显区别.结论 骨碎补水相和醇相提取物中分别存在有较高活性的促成骨细胞基质矿化的物质.
-
地黄活性成分梓醇对小鼠成骨细胞MC3T3-E1增殖、分化和矿化的影响
目的 检测地黄活性成分梓醇对成骨细胞株MC3T3-E1细胞增殖、分化和矿化的影响.方法 制备不同浓度地黄活性成分梓醇提取液.以小鼠成骨细胞株MC3T3-E1作为药物筛选的细胞模型;用MTT法测定不同浓度的梓醇溶液的促细胞增殖作用;采用ALP活性和骨钙素定量检测分别观察不同浓度的梓醇溶液的促细胞分化作用;以Von kossa钙化染色法了解不同浓度的梓醇溶液的促细胞钙化作用.结果 梓醇在1×10~(-7)～1×10~(-9) mol·L~(-1)浓度范围内培养24及48 h促进成骨细胞株MC3T3-E1细胞增殖.梓醇在浓度1×10~(-5)～1×10~(-6) mol·L~(-1) 48及72 h提高成骨细胞株MC3T3-E1细胞内碱性磷酸酶的活性.梓醇在浓度1×10~(-5)～1×10~(-6) mol·L~(-1)培养8及12 d 时能明显促进成骨细胞MC3T3-E1骨钙素合成和分泌.梓醇在浓度1×10~(-5)～1×10~(-6) mol·L~(-1)培养19 d 时成骨细胞株MC3T3-E1细胞的矿化结节(mineralized bone nodular structure,MBNS)数目增多.结论 梓醇可以提高成骨细胞株MC3T3-E1增殖和分化能力,梓醇可能是地黄治疗骨质疏松作用的活性成分之一.
-
骨桥蛋白在心脏重构中的作用研究进展
骨桥蛋白(osteopontin,OPN)为磷酸化糖蛋门,在多种细胞有表达.Oldberg等[1]通过对大鼠骨肉瘤涎蛋白互补脱氧核糖核酸克隆而分离出来的一种酸性蛋白并命名为OPN.初了解其介导骨细胞与骨基质的连接,在骨基质矿化及重吸收过程的作用.
-
特发性低血磷性骨软化症1例
成年人的骨软化症是一种罕见的以骨基质矿化障碍为特点的一种慢性骨骼疾病,其结果导致非矿化的骨样组织(类骨质)堆积,骨质软化,而产生肌无力、骨痛、骨畸形、骨折等一系列临床症状和体征.病因复杂,临床上易被误诊、漏诊,甚至造成严重后果,现将中山大学附属汕头市中心医院收治的首例特发性低磷血致全身骨软化病例报告如下.
