首页 > 文献资料
-
针刺百会穴对氯化锂-匹鲁卡品诱发癫痫大鼠海马组织IgA、IgG2a表达的影响
目的:观察针刺百会穴对氯化锂-匹鲁卡品诱发的癫痫大鼠海马组织中免疫球蛋白A (IgA)、IgG2a表达的影响,探讨百会穴治疗癫痫的作用机制.方法:将雄性SD大鼠随机分为正常空白组、正常百会组、模型空白组、模型百会组.制备氯化锂-匹鲁卡品癫痫大鼠模型,于造模成功后第2天开始针刺,连续治疗10d,第1 1天取材,运用液相芯片技术检测各组大鼠海马组织中IgA、IgG2a的表达情况.结果:模型空白组的IgA、IgG2a蛋白表达量明显高于正常空白组(P＜0.05);模型百会组较模型空白组显著降低(P＜0.05);与正常百会组比较,模型百会组的IgA、IgG2a蛋白含量显著增高(P＜0.05).结论:大鼠海马组织中免疫因子IgA、IgG2a参与了癫痫疾病的发生和发展过程;针刺百会穴可能通过降低IgA、IgG2a的表达量来达到治疗癫痫的目的.
-
用液相芯片方法同时检测流感病毒H5N1和H7N9亚型
基于液相芯片(Multi-analyte suspension array,MASA)技术建立一种同时对H5N1和H7N9亚型流感病毒进行快速检测的新方法.对国家生物技术信息中心(National center for biotechnology information,NCBI)和欧洲生 物信息学中心(The european bioinformatics institute,EBI)核酸数据库中已有的H5、N1、H7和N9核酸片段进行比对分析,并参考世界卫生组织,美国疾病预防控制中心和中国疾病预防控制中心等的相关资料,设计简并引物和探针,将合成的探针与荧光编码微球进行偶联,建立检测方法.利用该方法检测H5N1和H7N9亚型流感病毒和其它常见亚型(H1N1、甲流H1N1、H5N2、BH3N2和H9N2)的标本.建立了一种快速的流感病毒分型方法.这种方法可以同时检测H5N1和H7N9,用已知基因型的样本对这种方法进行验证显示它的特异性很好.灵敏度分析实验也表明这种方法具有很高的灵敏度,可以对含有5个拷贝的样本进行有效的检测.利用液相芯片技术研制的H5N1和H7N9亚型流感病毒检测方法能够用于流感病毒H5N1和H7N9亚型的快速、灵敏、特异性的检测及鉴定.
-
健康青年正常牙本质中基质金属蛋白酶2的定量检测初探
目的 定量检测青年人群正常牙本质中基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)的含量及分布情况.方法 选择离体前磨牙30颗和第三磨牙27颗(患者年龄20 ～ 30岁),纵切成1.5 mm厚的牙本质片,磨除釉质后将冠部牙本质分成浅层和深层两部分,分别制备成牙本质粉,脱矿、提取蛋白后利用液相芯片技术定量检测MMP-2含量.结果 青年人群前磨牙牙本质浅层和深层MMP-2分别为(0.022±0.006)和(2.087±0.090) ng/mg,磨牙牙本质浅层和深层MMP-2含量分别为(0.336±0.037)和(3.312±0.308) ng/mg;各牙位深层牙本质MMP-2含量均显著高于浅层,磨牙同层次牙本质MMP-2含量均显著高于前磨牙(P＜0.05).结论 健康青年正常牙本质中含MMP-2,不同牙位及牙本质层次MMP-2含量不同.
-
重症手足口病患儿血清细胞因子检测分析
目的 探讨重症手足口病(HFMD)患儿血清多种细胞因子的变化水平,了解患儿的免疫功能状态.方法 重症HFMD患儿34例,根据病情分为重型组和危重型2组;选择16例健康儿童作为对照组.总结HFMD患儿的临床特点,进行病原学检测,同时采用Luminex液相芯片方法检测3组患儿血清中的8种细胞因子,包括白细胞介素(IL)-2、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、粒细胞/巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和干扰素-γ(IFN-γ).结果 重型组25例,危重型组9例.与对照组比较,重型组IL-2和IL-10明显升高(P＜0.05)；除IL-8外,危重型组中的7种细胞因子与重型组和对照组比较,均显著升高(P＜ 0.005,P＜ 0.001);脑炎合并肺炎组(13例)与脑炎组(17例)比较,IL-6显著升高(P＜ 0.05)；EV71阳性组(8例)与病原学未检出组(16例)比较,IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、GM-CSF、IFN-γ和TNF-α明显升高(P＜0.05).结论 多种细胞因子参与了HFMD重症病例的发病和发展,产生严重的炎症和抗炎反应.EV71阳性病例具有更加明显的免疫反应.
-
RRM1 mRNA与吉西他滨药物膀胱灌注治疗膀胱癌疗效的关系
目的:研究分析RRM1mRNA在膀胱癌患者中的表达及其与吉西他滨药物膀胱灌注化疗效果敏感性的关系,旨在为临床膀胱癌患者术后辅助化疗提供个体化治疗方案.方法:采用液相芯片技术检测RRM1mRNA在膀胱癌患者中的表达,并分析其临床意义.结果:RRM1mRNA在高级别膀胱尿路上皮癌患者中呈现高表达为12例(30％),呈现低表达为6例(15％);在低级别尿路上皮癌患者中高表达为4例(10％),低表达为18例(45％);应用吉西他滨药物膀胱灌注的膀胱癌患者术后随访1年,其中RRM1mRNA低表达的患者复发1例(2.5％),RRM1mRNA高表达的患者复发5例(12.5％).结论:RRM1 mRNA在膀胱癌患者中的表达与肿瘤病理分级呈正相关关系.RRM1mRNA表达与吉西他滨膀胱灌注辅助化疗药物敏感性呈负相关关系.RRM1mRNA在膀胱癌患者中的表达对膀胱癌患者术后辅助化疗药物的选择具有重要指导意义.
-
结直肠癌组织与血液 KRAS／BRAF 基因突变表达一致性检测分析
目的：我国大部分结直肠癌患者发现的时候已经是中晚期，很难取到病理组织行KRAS、BRAF基因检测，故限制靶向药物应用，此实验研究目的是对原发肿瘤和血清KRAS/BRAF基因突变一致性进行研究。方法共纳入48例患者，分别对血清和肿瘤组织中KRAS及BRAF基因表达情况采用液相芯片技术进行检测。结果原发肿瘤组织KRAS突变率40％（19/48），血清42％（20/48）。在19例肿瘤组织样本KRAS突变，14例血清样本中的相同的突变，符合率73灋．7％（14/19）。在1个肿瘤组织检测到BRAF基因突变，在血清样本中未发现BRAF基因突变。结论在KRAS基因的原发肿瘤和配对血清样本之间突变率有很好的一致性。
-
液相芯片技术在公共卫生领域应用研究进展
液相芯片技术即多功能悬浮点阵仪(Multi-Analyte Suspensopn Array,MASA或Flexible Multi-Analyte Profiling,Xmap)[1-3],是近几年来生命科学领域中发展起来的一项新技术,其在保持高通量检测的同时,将反应体系由液相-固相反应改变为接近生物系统内部环境的完全液相反应体系,而逐渐成为国内外生命科学领域研究的热点.
-
针刺百会穴对癫痫大鼠行为学、体质量及IL-6表达的影响
目的:观察针刺百会穴对癫痫大鼠行为学、体质量的影响及海马组织中IL-6含量的表达差异,探讨百会穴抗癫痫的作用机制.方法:将200 ～ 250 g左右的雄性SD大鼠随机分为正常空白组、正常百会组、模型空白组、模型百会组.采用氯化锂-匹鲁卡品癫痫大鼠模型,于造模成功后第2天开始针刺,连续治疗10 d后取材,期间记录各组大鼠的行为学变化以及针刺第1天、第5天、第10天的体质量情况,并运用液相芯片技术检测各组大鼠海马组织中IL-6的表达情况.结果:(1)针刺前,模型组大鼠精神萎靡、双眼无神、活动性差、拒饮食水、大便稀溏、小便短少,一般情况差;针刺后,模型组大鼠的一般情况逐渐好转.(2)针刺百会穴对各组大鼠体质量的影响无统计学意义(P＞0.05).(3)与正常空白组相比,模型空白组的IL-6含量明显升高(P＜0.05);模型百会组较模型空白组略有下降,差异无统计学意义(P＞0.05).结论:IL-6参与了癫痫疾病的发生与发展,针刺百会穴可能难以通过降低IL-6的表达量来达到治疗癫痫的目的.百会穴对大鼠的体质量无明显影响,但可以改善癫痫大鼠的一般情况,降低癫痫发作程度.
-
液相芯片在前列腺癌中的应用
液相芯片技术是一种生物检测技术,可对临床大多数生物分子进行高通量分析,如核酸、蛋白质等生物分子.该技术利用了发展成熟的流式细胞术检测原理,以混悬在液相中的分类编码微球为反应及信号检测载体.目前已广泛应用于研究和临床检测中.本文就液相芯片技术的技术原理、特点以及临床应用,尤其是在前列腺肿瘤中的临床应用进行简要介绍.
-
液相芯片技术检测糖尿病患者血清中的多重脂肪因子:应用与优势
[目的]利用液相芯片技术检测多重脂肪因子在老年糖尿病患者和对照人群血清中的水平差异.[方法]采用Magpix液相芯片仪对28名老年糖尿病患者和22名正常对照者血清中的脂联素、抵抗素、脂肪酶、脂质运载蛋白-2及纤溶酶原激活物抑制剂-1的表达水平进行检测,并分析两组人群各种脂肪因子水平差异. [结果]在糖尿病患者血清中纤溶酶原激活物抑制剂-1浓度是对照组的1.29倍(P＜0.05),其他4种脂肪因子水平在两组间差异无统计学意义(P＞0.05). [结论]血清纤溶酶原激活物抑制剂-1浓度与糖代谢密切相关,液相芯片技术的应用为慢性病的生物监测和控制提供了极大的便利条件.
关键词： 液相芯片技术 Magpix液相芯片仪 2型糖尿病(T2MD) 脂肪因子 -
用液相芯片方法检测禽流感病毒H5N1亚型的研究
目的 基于液相芯片(MASA)技术建立一种对H5N1亚型禽流感病毒进行快速检测的新方法.方法 对GenBank上已有H5和N1核酸片段进行比对分析,设计简并引物和探针,将合成的探针与荧光编码微球进行偶联,建立检测方法.利用该方法检测H5N1亚型禽流感病毒和其他常见亚型(H1N1、H2N2、H3N2、H9N2)的标本.结果 利用该方法能够特异性地检测出H5N1标本,检测信号具有较高荧光强度,对其他亚型标本的检测则为阴性结果.该方法对H5N1亚型RNA的低检出量为10 pg.结论利用液相芯片技术研制的H5N1亚型禽流感病毒检测方法能够用于禽流感病毒H5N1亚型的快速、灵敏、特异性检测及鉴定.
-
液相芯片技术联合等位基因特异性引物延伸反应检测结核分枝杆菌耐多药突变
目的 建立一种耐多药结核分枝杆菌检测方法.方法 设计并构建含有katG315、rpoB526、rpoB531耐药基因突变位点的质粒;通过PCR扩增及纯化、等位基因特异性引物延伸反应(ASPE)、荧光微球杂交反应及液相芯片系统Luminex 200检测;并对该方法反应条件进行探索及方法学评价.结果 ASPE反应中Tsp DNA聚合酶适浓度为0.025U/μL,杂交荧光微球浓度为每μL 100个,链霉亲和素藻红蛋白浓度及杂交时间分别为2μg/mL和20 min;所建立方法的检测灵敏度低可达1ng/mL;当质粒浓度为1.5×105 ng/mL时,批间和批内变异系数(CV)分别为6.48％～12.15％和0.35％ ～6.92％;当质粒浓度为2 ng/mL时,批间和批内变异系数(CV)分别为5.73％ ～ 10.77％和0.97％ ～ 8.91％;特异性引物探针与其他突变位点均无交叉反应.结论 液相芯片技术联合等位基因特异性引物延伸反应检测耐多药结核分枝杆菌灵敏且具有成本低、高通量等特点,极具临床应用潜力.
关键词： 液相芯片技术 等位基因特异性引物延伸反应 结核分枝杆菌 耐多药性 -
AFP/CEA国产试剂在Luminex 200流式分析仪上的准确性与定标周期研究
肿瘤标志物在临床辅助诊断、治疗及术后疗效观察中发挥重要作用.液相芯片技术可在同一个实验中检测数种甚至几十种项目,临床应用广泛[1].在液相芯片系统上应用商品化试剂,必须对商品试剂的主要分析性能进行验证,即正确度、精密度等,有关这方面的报告也多见报道[2-3].本文对国产甲胎蛋白(AFP)/癌胚抗原(CEA)试剂在Luminex 200流式分析仪上的准确性与定标周期展开相关研究,报道如下.
-
液相芯片技术在检测肺癌患者血清VEGF中的应用
目的 探讨用液相芯片技术检测肺癌患者及健康人血清中血管内皮生长因子(VEGF)的表达水平.方法 用LuminexFLEXMAP3D仪和Human Cytokine/Chemokine试剂盒检测血清VEGF的表达水平,并确立其适条件,对120例肺癌患者和348例健康人血清VEGF水平进行检测,分析两组对象血清VEGF水平的差异.结果 确立了液态芯片技术检测血清VEGF的适条件.肺癌患者血清VEGF均值为(295±205) pg/mL,明显高于健康人的(160±154) pg/mL,差异具有统计学意义(t=9.119,P＜0.01).结论 确定的液态芯片技术检测血清VEGF的适条件,且肺癌患者血清VEGF表达水平显著高于健康人.
-
液相芯片技术检测宫颈HPV感染及基因型分布
目的 探讨液相芯片(Luminex)技术检测宫颈人乳头瘤病毒-(HPV)基因型的应用价值.方法 用液相芯片技术对1450例妇女进行宫颈脱落细胞HPV DNA基因分型检测,并对HPV感染率、亚型分布进行统计分析.结果 1 450例妇女中共检出404例HPV DNA阳性,总检出率为27.9％；共检出25种亚型(HPV 73型未检出),其中高危亚型感染占83.4％ (337/404),低危亚型感染占10.6％ (43/404),高危亚型、低危亚型混合感染占5.9％ (24/404)；HPV 16、58、52型是常见的高危亚型,感染率分别为5.7％(83/1 450)、4.7％(68/1 450)、4.6％ (66/1 450),HPV 61和6型是常见的低危亚型,感染率分别为1.6％(23/1 450)和1.2％(17/1 450)；≤24岁组妇女宫颈HPV感染率(46.0％)及HPV多重亚型感染率(47.8％)均为高,各年龄组间HPV感染率差异显著(P均＜0.01).结论 液相芯片技术可用于检测宫颈HPV感染及基因型分布.
-
两种不同来源血小板进行基于光子晶体技术的血小板抗体检测的对比研究
目的：比较分别由浓缩血小板、新鲜血液分离血小板所得血小板裂解液，行光子晶体技术检测血小板抗体的效率。方法：检测样本为原发免疫性血小板减少症（ ITP）患者32例和正常健康人对照31例。对来源于浓缩血小板和新鲜血液分离的血小板同时进行基于光子晶体技术的血小板特异性抗体检测及单克隆抗体特异性血小板抗原固定术（ MAIPA）检测，以MAIPA检测结果作为光子晶体技术检测结果的参照。结果：两组不同来源的血小板行光子晶体的血小板抗体检测敏感性均高于MAIPA，且浓缩血小板组更高。新鲜血液分离组特异性高于MAIPA，浓缩血小板组低于MAIPA。结论：使用新鲜血液分离采集血小板行光子晶体技术检测血小板特异性抗体效率较高。
-
4种常见呼吸道病毒快速分子检测方法的建立
目的 建立一种基于液相芯片系统的4种常见呼吸道病毒快速分子检测方法,为有效防控其发生和流行提供有力手段.方法 针对A型流感病毒(influenza A virus,FluA)、B型流感病毒(influenza B virus,FluB)、呼吸道合胞病毒A型(respiratory syncytial viruse types A,RSVA)和B型(respiratory syncytial viruse types B,RSVB)的保守区序列分别设计并合成了特异性引物、探针和通用引物,构建4种病原体阳性参比品,通过对扩增和杂交条件的优化,建立了靶序列富集多重 PCR(target enriched multiplex PCR,Tem-PCR)和Luminex液相芯片(xMAP)技术相结合的检测系统,并对该检测系统进行了方法学评价.结果 该检测方法可以特异性区分4种病毒的RNA靶标分子,检测下限均为10拷贝/μl.结论 该种基于液相芯片系统的新方法灵敏度高、特异性好,为实现在临床呼吸道样品中同时快速检测4种常见呼吸道病毒提供了技术基础.
关键词： 呼吸道病毒 液相芯片技术 靶序列富集多重-聚合酶链反应 -
靶序列富集多重 PCR-液相芯片联合检测4种常见呼吸道病毒的初步应用
目的：呼吸道病毒是引起婴幼儿呼吸道感染的主要病原体，为快速准确诊断其感染，文中建立一种基于液相芯片系统的4种常见呼吸道病毒快速分子检测方法，为有效防控其发生和流行提供有力手段。方法采集南京总医院儿科就诊的有急性呼吸道感染症状的患儿咽拭子标本120例及30例正常对照标本，分别纳入患儿组和对照组。针对A型流感病毒（ FluA ）、B型流感病毒（ FluB）、呼吸道合胞病毒A型（ RSVA）和B型（ RSVB）的保守区序列分别设计并合成了特异性引物、探针和通用引物，构建4种病原体阳性参比品，通过对扩增和杂交条件的优化，建立了靶序列富集多重PCR （ Tem-PCR）和Luminex液相芯片（ xMAP）技术相结合的检测系统，并对该检测系统进行了特异性、灵敏度评价。收集以急性上呼吸道感染为主要表现的患儿咽拭子标本，用上述建立的方法进行检测分析，分别与单病毒基因荧光定量PCR检测方法及xTAG液相芯片法进行比对检测。结果建立了FluA、FluB、RSVA和RSVB4种呼吸道病毒的特异性快速分子检测方法且灵敏度可达10拷贝／μL。用快速分子检测方法和单病毒基因荧光定量PCR法对120例疑似患儿咽拭子标本进行检测，快速法阳性检出率为31．7％（38／120），荧光定量法阳性检出率为29．2％（35／120）。经一致性检验分析提示2种方法一致性较强（k＞0．7）。部分标本同时采用xTAG液相芯片试剂盒进行检测，经一致性检验分析提示2种方法一致性较好（k＞0．6）。结论临床的初步应用证实了4种常见呼吸道病毒快速分子检测方法具备灵敏、特异、快速等优点，为临床早期、准确判断呼吸道感染的病原体提供实验依据。
关键词： 呼吸道病毒 靶序列富集多重-聚合酶链反应 液相芯片技术 -
ERCC1联合TYMS检测对晚期胃癌化疗的指导意义
目的 通过检测胃癌组织中切除修复交叉互补基因I(ERCC1)、胸苷酸合成酶基因(TYMS) mRNA的表达水平,分析其对化疗效果及预后的指导意义.方法 选取晚期胃癌患者60例,均给予氟尿嘧啶、亚叶酸钙联合奥沙利铂进行化疗.采用分支DNA-液相芯片技术定量检测胃癌组织ERCC1、TYMS mRNA表达水平,并将患者分为ERCC1和TYMS共同中低表达组、ERCC1中低表达及TYMS高表达组、ERCC1高表达及TYMS中低表达组.随访3年,观察并比较3组患者的化疗有效率及生存率.结果 3组患者化疗有效率分别为62.86％(22/35)、35.71％(5/14)、36.36％(4/11),差异无统计学意义(P＞0.05);中位生存时间分别为20、10、10.5个月,1年生存率分别为65.71％、38.46％、40.00％,2年生存率分别为37.14％、0.00％、10.00％,3年生存率分别为14.29％、0.00％、0.00％,ERCC1和TYMS共同中低表达组患者1、2、3年生存率均高于另外两组(均P＜0.05).结论 晚期胃癌患者应用氟尿嘧啶、亚叶酸钙、奥沙利铂联合化疗,ERCC1和TYMS共同中低表达的患者生存率优于仅其中1个基因高表达的患者,而化疗效果差异尚不明显.
-
液相芯片技术在妇科肿瘤中的应用
液相芯片技术作为新型生物分子检测技术,具有重复性好、灵活性好、灵敏度高等优点,可以简便、快速、经济地筛查正常组织与肿瘤组织基因及蛋白表达的差别,有助于研究妇科肿瘤发生、发展的分子机制,为妇科肿瘤的早期诊断和治疗提供新的途径.
