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不同淫羊藿中4种黄酮苷的含量及体外促成骨细胞增殖作用比较研究
目的:研究不同品种的淫羊藿中4种单体成分的含量差异,及体外促大鼠颅骨成骨细胞增殖的作用.方法:采用HPLC法,测定淫羊藿样品中淫羊藿苷和朝藿定A、B、C的含量;以SD乳鼠颅骨二次酶消化法培养成骨细胞,采用MTT法,测定4种单体,模拟不同淫羊藿含量配比的单体组合物对成骨细胞的增殖作用.结果:8个药材中湖北朝鲜淫羊藿含淫羊藿苷和朝藿定A高;在1.0-100.0μg/mL浓度范围内,淫羊藿苷显著促进成骨细胞的增殖,作用呈浓度依赖性,朝藿定A显著促进成骨细胞的增殖,作用与浓度负相关,朝藿定B能促进成骨细胞增殖,朝藿定C对成骨细胞的增殖影响不大;各药材模拟组在0.1-10.0mg/mL生药浓度范围内,淫羊藿苷低浓度时能显著促进成骨细胞增殖,高浓度时增殖作用有所抑制,朝藿定B对成骨细胞增殖作用随浓度增大而增强,朝藿定C无明显增殖活性.结论:淫羊藿苷和朝藿定A、B单体均具有促进成骨细胞增殖活性;淫羊藿促成骨细胞增殖作用与4种成分的含量以及配比密切相关.
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巫山淫羊藿药材及饮片中朝藿定C含量测定
2005年版<中国药典>一部淫羊藿项下规定了总黄酮及淫羊藿苷的含量限度,但作者在实际临床应用中发现,巫山淫羊藿中淫羊藿苷含量极低,达不到药典要求,不足以全面反映此种饮片质量.
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淫羊藿属9种淫羊藿叶中朝藿定C和淫羊藿苷量的考察
淫羊藿属 Epimedium L.药用植物,在我国有29种,产于川陕者14种[1],具有多方面的药理活性.《中国药典》作为淫羊藿药材的有5种,分别为淫羊藿、朝鲜淫羊藿、箭叶淫羊藿、巫山淫羊藿和柔毛淫羊藿[2],笔者在进行淫羊藿成分系统分离研究的基础上,对采集的川陕豫产9种习惯人药的淫羊藿品种[3],将其叶中的主要成分朝藿定C和淫羊藿苷的量进行了考察,结果表明大部分品种朝藿定C量大于淫羊藿苷.
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4种淫羊藿黄酮苷在成骨细胞中的吸收利用度比较
目的 建立用于测定成骨细胞内外淫羊藿苷和朝藿定A、B、C含量的方法,并比较成骨细胞对这4种成分的吸收利用差异.方法 采用UPLC法测定含量.色谱条件:Capcell C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),乙腈-3％醋酸(24:76)为流动相,流速为1 mL· min-1,检测波长为270 rn.采用外标法定量.结果 4种淫羊藿黄酮苷与培养基及细胞中的其他成分能很好分离.朝藿定A、B、C和淫羊藿苷分别在0.912～ 18.24 mg·L-1、1.032～20.64 mg·L-1、1.320 ～ 26.40 mg·L-1和1.024 ～ 20.48mg·L-1内线性关系良好,平均回收率分别为97.92％、98.87％、96.36％和96.54％.给药培养24h的成骨细胞对朝藿定A、B、C和淫羊藿苷的平均吸收率为11.94％、17.58％、37.69％和32.30％,平均转化利用率为80.49％、92.21％、87.50％和95.23％.结论 建立的方法准确、灵敏,可为淫羊藿在成骨细胞内的药动学研究提供检测方法;4种黄酮苷中,成骨细胞对淫羊藿苷的吸收和利用好.
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薄层扫描法测定淫羊藿中朝藿定C的含量
淫羊藿为常用中药,具有补肾阳、强筋骨、祛风湿功效,其所含总黄酮类成分为有效部位之一,包括淫羊藿苷等至少六种以上的黄酮类成分,朝藿定C(epimedin C)是其中一种[1].对一种药材进行多种指标物的测定,可以更全面地反映药材的内在质量,对质量控制有着重要意义.淫羊藿苷的含量测定方法已有许多报道[2,3],但用薄层色谱法对淫羊藿中其它成分进行含量测定的研究尚未见报道.本文用薄层扫描法定量分析淫羊藿中朝藿定C的含量,实验结果重现性好,平均回收率为99.04%.本法对淫羊藿制剂中黄酮类成分的测定亦有应用价值.
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HPLC法同时测定淫羊藿-川芎药对8种化学成分的含量
目的:建立补肾活血药对淫羊藿-川芎中淫羊藿苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、宝藿苷-Ⅰ、川芎嗪、阿魏酸和藁本内酯8种成分的HPLC含量测定方法,明确配伍对8种成分含量变化的影响.方法:采用RP-HPLC多波长切换梯度洗脱技术.色谱柱:Waters X Bridge-C18 (4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:乙腈-1％醋酸梯度洗脱;流速:1.0 mL·min-;分别以各成分大吸收波长为检测波长;柱温:30℃.结果:淫羊藿-川芎药对中淫羊藿苷、川芎嗪、阿魏酸等8成分均呈良好的线性关系(r≥0.999);平均加样回收率(n=6)为97.7％～103.8％ (RSD ＜3％,n=6).淫羊藿、川芎配伍后川芎嗪、阿魏酸、藁本内酯的含量分别由0.714、2.701、12.930 mg ·g-1变成1.492、3.032、13.97 mg·g-1,含量显著增加,而淫羊藿苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C和宝藿苷-Ⅰ的含量分别由5.190、1.762、2.423、1.965、0.712 mg·g-1变成5.475、1.645、2.440、2.035、0.729 mg·g-1,含量则无明显变化.结论:该方法简便快速,结果准确可靠,方法重复性好,可用于淫羊藿-川芎药对及其制剂的质量控制,并为淫羊藿、川芎的临床配伍应用及其研究提供科学依据.
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RRLC-DAD-ESI-MS2分析天平山淫羊藿中的11个化学成分
目的:分析鉴定天平山淫羊藿叶片部位的化学成分.方法:采用高分离度快速液相色谱-离子阱质谱联用法.选用Agilent Proshell 120 C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,2.7 μm),以0.1％甲酸水-乙腈为流动相,梯度洗脱(0 ～ 10 min,10％ B→22％B;10 ～ 30 min,22％ B→27％B;30 ～ 35 min,27％ B→42％B;35 ～ 40 min,42％ B→45％B;40～55 min,45％B→75％B),流速0.4 mL· min-1,柱温25℃,270 nm、正离子模式检测.结果:从天平山淫羊藿叶片部位鉴定出11个化合物,木兰花碱(magno-florine)、朝藿定A1(hexandraside F)、朝藿定B(epimedin B)、朝藿定C(epimedin C)、宝藿苷Ⅵ(baohuoside Ⅵ)、淫羊藿苷(icariin)、淫羊藿素-3-O-α-鼠李糖苷(icaritin-3-O-α-rhamnoside)、箭藿苷A(sagittatoside A)、箭藿苷B(sagittatoside B)、鼠李糖淫羊藿次苷(2''-O-rhamnosylicariside Ⅱ)、宝藿苷Ⅰ(baohuoside Ⅰ),其中10个黄酮苷类成分和1个生物碱类成分.结论:RRLC-MS2能快速地鉴定出天平山淫羊藿中的化学成分,为进一步阐明该品种物质基础,提高其质量控制水平,提供了实验基础.
