首页 > 文献资料
-
神经节苷脂对急性脊髓损伤大鼠Caspase-3表达的影响
目的 研究单唾液酸神经节苷脂(GM1)对急性脊髓损伤大鼠Caspase-3表达的变化.方法 选取72只成年健康SD大鼠,按Nystrom法建立大鼠脊髓损伤模型,按随机数字表法分为假手术组、脊髓损伤组和M1组,每组各24只,脊髓损伤组和GM1治疗组依据脊髓损伤后的不同时间点再细分为1、7和14 d三个亚组.伤后第1、7和14天分别用BBB评分和斜板试验观察大鼠运动功能的恢复情况.免疫组化方法和Western blot方法检测三组大鼠脊髓损伤部位Caspase-3的表达.结果 术后7和14d,GMI治疗组BBB评分和斜板试验明显优于脊髓损伤组,差异有统计学意义(P＜0.05).免疫组化检测发现假手术组大鼠脊髓仅有少量Caspase-3阳性表达细胞;在脊髓损伤后1d时,Caspase-3阳性细胞数明显增多,7d表达开始减弱(P＜0.05).与相同时间点的SCI组比较,GM1组大鼠脊髓损伤部位的Caspase-3阳性细胞明显减少(P＜0.05).Western blot结果与免疫组化结果一致.结论 下调Caspase-3蛋白的表达可能是GM1治疗急性脊髓损伤的机制之一.
-
LY-294002对大鼠急性脊髓损伤后Caspase-3表达的影响
目的 研究LY-294002对急性脊髓损伤大鼠Caspase-3表达的变化.方法 选取104只成年健康SD大鼠,按Nystrom法建立大鼠脊髓(T8～9)急性压迫损伤模型,按随机数字表法分为假手术组8只、损伤组48只、LY-294002组48只.免疫组化和Western blot方法检测各组大鼠脊髓损伤部位Caspase-3的表达.结果 免疫组化结果发现假手术组大鼠脊髓神经细胞中Caspase-3阳性细胞较少;在脊髓损伤后8h时,Caspase-3阳性细胞数明显增多,3d达高峰,7d表达开始减弱.在经LY-294002处理后的各时间点大鼠脊髓损伤部位的Caspase-3阳性细胞明显少于相同时间点的脊髓损伤组大鼠.Western blot方法发现假手术组大鼠脊髓损伤部位的Caspase-3的表达量很少,而在脊髓损伤后8h时,Caspase-3蛋白表达量明显增多,3d达高峰,7d表达开始减弱,在经LY-294002处理后的各时间点大鼠脊髓损伤部位的Caspase-3蛋白表达则明显少于相同时间点的脊髓损伤组大鼠,与免疫组化结果一致.结论 LY-294002能够下调急性脊髓损伤大鼠Caspase-3蛋白的表达.
-
三尖瓣关闭不全患者右心房心肌AT-1、AT-2及基质金属蛋白酶的表达
目的 检测慢性三尖瓣关闭不全(tricuspid incompetence,TR)患者右心房心肌组织中血管紧张素受体(angiotensin receptor,AT)-1、AT-2及基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)1、MMP2、MMP9的表达,探讨TR患者右心房重构的分子生物学特征.方法 选择左心瓣膜病变合并TR患者60例,术前按照心脏超声心动图显示TR面积的大小将患者分为3组:A组为轻至中度TR组(1 cm2＜TR≤10 cm2)；B组为重度TR组(TR＞10 cm2)；C组为对照组(TR≤1 cm2).取患者右心房心肌组织标本,置于液氮中保存,western-blot检测AT-1、AT-2和MMP1表达,酶谱法检测MMP2、MMP9活性.结果 随着TR面积增加,肺动脉高压、三尖瓣瓣环收缩期内径及舒张期内径显著增大,差异有统计学意义(P＜0.05).与C组相比,A、B两组AT-1及MMP1表达明显增加,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 随着TR程度增加,AT-1、MMP1的表达发生了改变,提示其参与了TR患者右心房重构.
-
Rac1在人神经胶质瘤组织中的表达及其与病理分级的相关性研究
目的 观察Rac1 mRNA及蛋白在神经胶质瘤组织中的表达情况,探讨Rac1与病理分级的相关性.方法 应用免疫荧光组织化学、RT-PCR和Western blotting方法检测45例神经胶质瘤组织和10例正常脑组织标本中Rac1 mRNA及蛋白水平.结果 3种检测结果均表明,Rac1在正常脑组织中无表达,45例脑胶质瘤中多42例有Rac1表达,表达率与病理分级呈正相关,即脑胶质瘤病理级别越高,Rac1阳性表达率越高.结论 Rac1在脑胶质瘤中的高表达与神经胶质瘤的侵袭、转移密切相关,可做为一个反映脑胶质瘤增殖能力和恶性程度的指标.
-
Sombati癫痫细胞模型中高迁移率族蛋白1的表达变化
目的 研究Sombati癫痫细胞模型中高迁移率族蛋白1(HMGB1)的变化规律. 方法 新生SD乳鼠断头后迅速钝性分离出双侧海马,取海马神经元体外培养至第9天,将神经元分为模型组(无镁细胞外液处理)和对照组(正常细胞外液处理),应用Wester blotting技术检测海马神经元在接受相应处理12、24、72 h后HMGB1蛋白的表达变化情况. 结果 Wester blotting显示,在神经元接受相应处理后12、24 h,模型组细胞所含HMGB1量均明显低于对照组,差异有统计学意义(t=2.783,P=0.012;t=2.509,P=0.021); 72 h时模型组HMGB1表达量却明显高于对照组,差异具有统计学意义(t=4.112,P=0.006).模型组HMGB1蛋白表达量于造模后12h、24 h、72 h呈现逐渐增高趋势. 结论 Sombati癫痫细胞模型中HMGB1的表达呈时间依赖性,随时间延长表达增加,可能在癫痫的病理生理中起重要作用.
关键词： 高迁移率族蛋白1 Sombati癫痫细胞模型 蛋白免疫印迹 -
银杏叶提取物诱导大鼠肝脏细胞色素P450酶蛋白的表达
[目的]研究银杏叶提取物对大鼠肝脏细胞色素P450酶CYP1A1、CYP1A2、CYP2B1/2、CYP3A1蛋白表达的影响.[方法]银杏叶提取物10mg/kg和100mg/kg两个剂量,大鼠经灌胃处理10 d后,取出肝脏,称重,制备肝微粒体,以未经处理者为对照组,测定CYP1A1、CYP1A2、CYP2B1/2、CYP3A1的蛋白表达.[结果]CYP1A1、CYP1A2、CYP2B1/2、CYP3A1的蛋白表达在给药后比对照组显著升高,且存在明显的剂量依赖性.[结论]银杏叶提取物能显著诱导大鼠CYP1A1、CYP1A2、CYP2B1/2、CYP3A1的蛋白表达水平,故有可能影响与之同时服用的药物的疗效.
-
TGF-β受体1在肝癌组织中的表达及意义
目的 探讨TGF-β受体1(TGF-β R1)在肝癌组织中的表达情况.方法 经根治性手术切除的肝癌病理标本50例,通过免疫组织化学方法检测肝癌组织及其匹配癌旁组织中TGF-β R1蛋白表达情况.蛋白质免疫印迹法检测肝癌组织与癌旁正常肝组织TGF-βR1蛋白的表达量.结果 肝癌组织中TGF-β R1蛋白的表达水平显著低于癌旁组织(P＜0.01).结论 TGF-βR1在肝癌组织中表达显著下降,并可能与肝癌的发生发展相关.
-
贵州某38°食用白酒对大鼠血清睾酮水平及睾丸间质细胞内StAR、EGF、CgA表达的影响
目的：探讨摄入贵州某品牌38°食用白酒后，不同剂量和不同时长对血清睾酮水平及大鼠睾丸间质细胞内类固醇激素急性调节蛋白（ StAR）、表皮生长因子（ EGF）、嗜铬颗粒素A （ CgA）表达的影响，为科学健康饮酒提供基础实验依据。方法健康成年雄性SD大鼠69只，随机分为正常对照组（n＝15）和实验组（n＝54）。实验组随机分为4周组、8周组、12周组，每组18只大鼠，每个时间点又分为3个剂量组，即低剂量组、中剂量组、高剂量组。实验组大鼠每天灌胃2次，正常对照组正常喂养。分别在第4、8、12周末，采血清，取睾丸组织。采用免疫组化SABC法、图像分析、蛋白免疫印迹、化学发光法进行研究。结果各实验组的血清睾酮水平与正常对照组比较未见明显异常，差异无统计学意义（ P＞0.05）。与正常对照组相比，4周、8周、12周各实验组StAR的表达有所增强（P＜0.05）；4周、8周、12周各实验组EGF、CgA的表达无明显差异（P＞0.05）。结论在本实验设定的剂量和时程内用该白酒灌胃后，血清睾酮水平并无明显变化，大鼠睾丸间质细胞内StAR表达水平有所增强，EGF、CgA的表达水平无明显变化。
-
RBM8A在人结肠癌细胞株中的表达及其意义
目的 检测RBM8A在不同结肠癌细胞株中的表达,为进一步体外实验筛选靶细胞.方法 采用实时定量反转录聚合酶连锁反应(qRT-PCR)法以及蛋白免疫印迹(Western-blot)法检测RBM8A在结肠癌细胞株SW480、SW620、HT29、LOVO、COLO320DM、T84及人正常结肠上皮细胞株NCM460中的表达.结果 RBM8A在7株细胞株中均有表达,其中在结肠癌细胞株SW620和COLO320DM中的表达高于正常细胞株,差异有统计学意义(P＜0.05),而其余细胞株中RBM8A的表达与正常细胞株差异无统计学意义(P＞0.05).结论 RBM8A在结肠癌细胞株SW620和COLO320DM中高表达,SW620和COLO320DM细胞株或可作为靶细胞.
关键词： 结肠肿瘤 结肠癌细胞系 RBM8A 实时定量反转录聚合酶连锁反应 蛋白免疫印迹 -
动粒蛋白与人外周血淋巴细胞增殖关系的研究
笔者以正常人外周血淋巴细胞为实验材料,加入2 μg/ml的PHA刺激,用3H-TdR标记,通过放射自显影,测定培养不同时间后进入细胞周期的淋巴细胞数量及M期的细胞数量,探讨细胞内动粒蛋白含量变化与淋巴细胞增殖的关系.ACA间接免疫荧光染色显示,正常未经转化的淋巴细胞和加PHA刺激培养至48 h的淋巴细胞内动粒荧光斑点小而微弱,加PHA刺激培养54～72 h的淋巴细胞内动粒荧光斑点亮度逐渐增强,体积逐渐增大.Western blot表明,17KD和52KD两种动粒蛋白在对照组和培养不同时间的各组淋巴细胞内均存在,且含量保持相对稳定,80KD和56KD两种动粒蛋白在未经培养和培养至48 h的淋巴细胞内不出现,80KD蛋白在培养54 h的细胞内可见.培养60～72 h,淋巴细胞内可被ACA特异识别的动粒蛋白共四种:80KD、56KD、52KD和17KD.
-
某品牌白酒对大鼠肝细胞金属硫蛋白表达的影响
目的:探讨大鼠摄入不同剂量的某品牌54度食用白酒后,不同时点大鼠肝细胞金属硫蛋白(MT)表达的变化.方法:115只正常雄性SD大鼠分为正常对照组(n=25)和低剂量组[灌胃白酒0.8 mL/(kg·d)]、中剂量组[灌胃白酒1.6 mL/(kg·d)]及高剂量组[灌胃白酒2.4 mL/(kg·d)]实验组,各组大鼠均给予正常饲料喂养,各白酒组还给予相应剂量的白酒灌胃;所有大鼠分别于灌胃第4、8、12、16及20周取肝脏组织,采用免疫组化SABC法、免疫蛋白印迹(Western Blot)检测肝细胞及肝组织匀浆中MT蛋白表达.结果:正常组及各实验组肝细胞MT免疫反应的阳性产物主要集中在胞浆,呈棕褐色细颗粒状;而肝小叶之间的结缔组织,血管、Kuffer细胞、胆管组织未见MT着色,所有阴性对照未见MT阳性产物;与正常对照组比较,第4、8、12、16及20周各实验组大鼠肝细胞内MT免疫反应阳性产物定位及免疫反应染色强度未见明显变化;MT、3-actin蛋白分别在15 kD、42 kD处显示出特异性条带;第4、8、12、16及20周各实验组MT蛋白表达水平与正常对照组相比,差异无统计学意义(P＞0.05).结论:在本实验设定的剂量和时程内,用该白酒灌胃后,对大鼠肝细胞MT表达水平无明显影响.
-
PTEN蛋白在大肠癌癌变过程中的表达及其意义
目的:研究PTEN蛋白在大肠癌癌变过程中的表达及其意义.方法:蛋白免疫印迹法检测107例大肠病变组织标本PTEN的表达情况,应用单因素方差分析及等级相关的秩和检验分析PTEN在大肠病变组织中的表达情况及其与临床病理特征间的关系.结果:PTEN蛋白在大肠癌癌变过程中,即在大肠正常组织、大肠增生性息肉、大肠腺瘤、大肠癌中表达阳性率呈递减趋势,差异有统计学意义(P＜0.05).大肠癌中PTEN蛋白与患者的肿瘤分化程度无关(P＞0.05).但是与临床分期相关(P＜0.05).结论:PTEN蛋白在大肠癌癌变过程中表达阳性率呈递减趋势,PTEN蛋白的低表达与大肠癌的发生和浸润转移相关.
-
Ets-1在卵巢浆液性腺癌中的表达及意义
目的:探讨E26转录因子(E26 transformation-specific-1,Ets-1)在卵巢浆液性腺癌组织中的表达及意义.方法:收集2014年12月至2016年5月在中国医科大学附属盛京医院妇科住院手术的浆液性卵巢癌患者新鲜组织30例、石蜡组织40例、正常卵巢组织30例.分别采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)、蛋白免疫印迹及免疫组织化学方法检测组织中Ets-1 mRNA及蛋白表达情况,并分析其与临床病理参数之间的关系.结果:Ets-1蛋白在卵巢浆液性腺癌组织中的阳性表达率(75%)明显高于正常卵巢组织(13.3%),两组比较差异有统计学意义(P<0.05).临床病理参数分析发现:Ets-1表达量与卵巢癌FIGO分期及淋巴结是否转移有关(P<0.05),与患者年龄、分级、CA125水平及腹水量均无明显统计学差异(P>0.05).RT-PCR显示正常卵巢组织和卵巢浆液性腺癌组织中Ets-1 mRNA相对表达量分别为1.549±0.252、0.644±0.091,两组比较差异有统计学意义(P<0.05).Western blot结果显示Ets-1蛋白相对表达分别为3.967±0.787、0.970±0.198,两组比较差异有统计学意义(P<0.05).结论:Ets-1在卵巢癌组织中不同表达水平可能与其不同作用机制有关,Ets-1可能参与卵巢癌的发生.
-
烟酰胺磷酸核糖转移酶在子宫内膜癌中的表达及临床意义
目的:探讨烟酰胺磷酸核糖转移酶(Nampt)蛋白的表达与子宫内膜癌生物学行为之间的关系.方法:选取中国医科大学附属盛京医院2013年5月-2014年5月手术切除的40例子宫内膜癌组织(均为腺癌)及30例正常子宫内膜组织.采用实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测其Nampt mRNA的表达、免疫组织化学SP法及蛋白免疫印迹检测Nampt蛋白的表达水平,并分析其表达量与子宫内膜癌临床病理学参数的关系.结果:Nampt mRNA在子宫内膜癌组织和正常子宫内膜组织中的相对表达量分别为3.774±2.399和1.286±0.762,差异有统计学意义(P＜0.05).Nampt蛋白在子宫内膜癌组织和正常子宫内膜组织中的相对表达量分别为0.426±0.16和0.203±0.129,差异有统计学意义(P＜0.05).在不同临床分期、不同肌层浸润的子宫内膜癌组织中Nampt蛋白的表达量有统计学差异(P＜0.05).结论:Nampt蛋白的过度表达在子宫内膜癌的发生、发展过程中可能起到一定的作用.
-
Cpne5蛋白在新生及成年小鼠各组织及其在不同胎龄胎鼠脑组织中的表达
目的:检测小鼠Cpne5蛋白在脑发育过程及不同组织中的表达水平,为Cpne5基因的功能研究提供线索.方法:提取新生、成年小鼠多种组织蛋白及11.5,12.5,13.5,14.5,15.5,17.5 d胎鼠脑组织蛋白,用免疫印迹法检测Cpne5蛋白表达量.结果:Cpne5蛋白表达于新生4d小鼠的全部受检组织,大、小脑表达量少,眼和肺的表达量高.成年小鼠检测结果相似,Cpne5蛋白的组织分布广泛,但脑组织含量低,表达量以卵巢、睾丸为高,其次为肺和心脏.胎脑的Cpne5蛋白表达量在胎鼠11.5、12.5 d较高,13.5 d降低,14.5至17.5 d再次升高,出生后又降低.结论:Cpne5蛋白在新生和成年小鼠广泛表达于各种受检组织,脑组织表达量低;小鼠胎脑发育过程中Cpne5蛋白表达呈现先高后低,再升高再降低的变化趋势.
-
ATP敏感性钾通道亚基Kir6.1、Kir6.2在MPTP诱导帕金森病小鼠纹状体和黑质内的改变
为探讨ATP敏感性钾通道(K<,ATP>)亚基Kir6.1、Kir6.2在帕金森病(PD)病理生理机制中的可能作用.本研究采用蛋白免疫印迹分析(Western blot)对1-甲基4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导的PD小鼠模型黑质、纹状体Kir6.1、Kin5.2在不同时间点表达变化进行检测,并与酪氨酸羟化酶(TH)的变化进行比较.结果发现:(1)与正常对照组相比,黑质、纹状体TH蛋白的表达在给药后第1 d即开始下降,且呈时间依赖性下降(P<0.01);(2)黑质Kit6.1蛋白的表达在给药后第5 d才开始下降(P<0.01);而纹状体Kit6.1蛋白的表达在给药后第5 d才开始升高(P<0.01);(3)黑质Kir6.2蛋白的表达在给药后第5 d才开始明显升高(P<0.01);而纹状体Kir6.2蛋白的表达在给药后第3 d轻度升高(P<0.05),第5 d又明显降低(P<0.01).以上结果提示作为K<,ATP>通道亚基的Kit6.1、Kit6.2在MPTP的作用下,可能通过参与星形胶质细胞的活化、胆碱能突触传递的抑制以及自身代偿和修复在PD的病理生理过程中发挥了重要的角色.
-
IGFBP-3在唾液腺多形性腺瘤中的表达及意义
目的:研究胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)在唾液腺多形性腺瘤(SPA)中的表达.方法:采用Western blot检测IGFBP-3在40例SPA、40例正常腺体组织及10例恶性唾液腺肿瘤组织中的表达.采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测IGFBP-3 mRNA在50例SPA组织、50正常腺体组织及10例唾液腺恶性肿瘤中的表达.结果:IGFBP-3蛋白在唾液腺正常组织(N组:8.54 ±3.95)的表达(A值)显著高于多形性腺瘤组(PA组:4.78 ±2.07)及恶性肿瘤组(CA组:3.63 ±2.27)(P＜0.05).而PA组与CA组之间则不存在显著差异(P＞0.05).IGFBP-3 mRNA在SPA组织与恶性肿瘤组织中的表达均低于正常组织(PA/N组:0.654 ±0.387,CA/N组:0.452±0.229),PA组与CA组不存在显著差异(P＞0.05);不同包膜浸润程度的多形性腺瘤组织中相对含量的差异有统计学意义(P＜0.05),在年龄、性别及有无复发上无明显差异.结论:IGFBP-3在多形性腺瘤中的低表达可能减低了拮抗IGF-1R的作用,引起肿瘤细胞的增殖,促进肿瘤形成.
-
水通道蛋白1、3在非肌层浸润性膀胱癌组织中的表达及其与复发现象的相关性
目的 研究水通道蛋白1、3 (AQP1、AQP3)在非肌层浸润性膀胱癌组织中的表达及其与膀胱癌复发现象的相关性.方法 采用免疫组织化学S-P法、Wester blot 蛋白免疫印迹法检测15例经尿道膀胱癌电切术后非肌层浸润性膀胱癌组织及15例复发组织水通道蛋白1、3的表达量,分析两者在复发前及复发前后表达量的差异与复发时间的相关性.结果 复发后水通道蛋白1、3的表达量较复发前有所增加,且复发前蛋白表达量高的容易复发,其蛋白表达增加的量与随访的复发时间之间呈负相关.结论 水通道蛋白1、3的表达量在复发后的明显增加,其增加的量及初发后蛋白表达量与随访的复发时间相关,AQP1、AQP3可成为检测膀胱癌早期复发的有效指标之一.
-
食管癌患者XRCC1, XRCC3及hOGG1蛋白的表达与临床因素的相关性研究
目的 检测人类X射线交错互补修复基因(X-ray repair cross-compplementing gene1,XRCC1)、人类8-羟基鸟嘌呤糖苷酶1(human 8-hydroxyguanine glycosylase 1,hOGG1)基因和人类X射线交错互补修复基因(X-ray repair cross-compplementing gene 3,XRCC3)蛋白在食管癌和癌旁组织中的表达,探讨3种蛋白与食管癌发生及发展的关系.方法 采用蛋白免疫印迹法检测XRCC1、XRCC3及hOGG1蛋白在食管癌与癌旁组织中的表达,应用ECL法显影并以其灰度值来表示蛋白表达的量.结果 XRCC1、XRCC3及hOGG1蛋白在癌组织中的表达高于癌旁组织(P均＜0.05).同时XRCC1蛋白在癌组织与癌旁组织中的差异程度与民族有相关性(P＜0.05).结论 XRCC1、XRCC3及hOGG1蛋白表达水平与食管癌的发生可能具有相关性,并且XRCC1蛋白还可能参与食管癌的进展.
-
SASH1在卵巢癌中的表达及意义
目的:探讨SASH1在卵巢癌中的表达和意义.方法:选取妇产科手术收集的79例卵巢癌组织和癌旁组织.通过实时定量PCR(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测SASH1mRNA和SASH1蛋白的表达水平.结果:SASH1 mRNA的表达明显低于癌旁组织(p<0.05).SASH1在卵巢癌伴淋巴结转移或处于FIGO晚期的患者中较无淋巴结转移或FIGO早期患者中的表达水平降低(p<0.05).SASH1和Ki-67在卵巢癌中的mRNA表达水平呈负相关(p=0.005).结论:SASH1 在抑制卵巢癌细胞扩散中起重要作用,可有助于解释 SASH1 在卵巢癌组织中表达下调的原因,在卵巢癌的防治过程中起重要作用.
