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炎症大鼠中脑导水管周围灰质注射降钙素基因相关肽对痛觉的影响
目的在炎症大鼠上研究中脑导水管周围灰质注射降钙素基因相关肽(CGRP)对痛觉的影响.方法大鼠左侧足底皮下注射0.1 mL 2% 的鹿角菜碱致炎后,观察中脑导水管周围灰质(PAG)注射CGRP对伤害性热刺激和机械刺激引起的后爪缩爪反应潜伏期的影响.结果 (1)大鼠左侧足底皮下注射0.1 mL 2% 的鹿角菜碱引起同侧爪体积增加,双侧后爪对热刺激引起的缩爪潜伏期和机械刺激引起的缩爪阈值缩短,尤以同侧为甚;(2)PAG注射0.26 nmol/μL和0.52 nmol/μL的CGRP能引起大鼠双侧后爪对热刺激引起的缩爪潜伏期和机械刺激引起的缩爪阈值延长,但0.13 nmol/μL 的CGRP没有显著性影响.结论:PAG注射CGRP有镇痛作用.
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降钙素基因相关肽对新生鼠HIE脑组织内皮素及脑细胞内钙的影响
[目的]研究降钙素基因相关肽(calcium gene-related peptide,CGRP)对新生鼠缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemic encephlopathy,HIE)脑组织内皮素(endothelin,ET)及脑细胞内游离钙离子(intracellular free calcium,IFCa)的影响.[方法]将45只7日龄SD(Spraque-Dawley)大鼠平均分成3组:①CGRP治疗组于HIE模型后即给予CGRP 3μg/(kg·d)加生理盐水(NS)2 ml稀释后,腹腔内注射,共3 d;②NS组于HIE模型后即给予NS 2 ml/d,腹腔内注射,共3 d;③正常对照组(假手术组).各组于3 d后断头取脑,采用放射免疫法检测脑组织ET含量,应用钙荧光指示剂Fura-ZAM法测定IFCa.[结果]NS组ET及IFCa含量[(93.41±12.73)ng/L及(129.47±17.21)nmol/L]明显高于正常对照组[(57.58±6.31)ng/L及(93.72±24.16)nmol/L]和CGRP治疗组[(61.68±6.83)ng/L及(103.35±12.46)nmol/L](P＜0.01),而CGRP治疗组ET及IFCa含量与正常对照组比较差异无显著性(P＞0.05).[结论]CGRP能拮抗ET收缩血管的作用,改善脑循环,抑制ET的合成及释放,同时能阻止脑细胞钙内流,保护缺氧缺血性脑损伤.
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CGRP-shRNA慢病毒载体的构建与鉴定
目的:构建针对CGRP基因的shRNA载体并进行鉴定.方法:针对小鼠CGRP的mRNA序列,设计并合成编码的shRNA的两条寡核苷酸序列,经退火成互补双链,再克隆至质粒,构建重组体pLLU2G/CGRP,转化至stbl3细菌,挑选阳性克隆测序鉴定.慢病毒包装后,脂质体转导至neuro2A,显微镜观察荧光蛋白的表达.结果:测序证实质粒为所需的序列,脂质体转导至neuro2A 48 h后可见绿色荧光蛋白,转导率达90％.结论:成功地构建了针对CGRP基因的shRNA表达载体,为下一步进行RNAi的相关研究奠定了基础.
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类风湿性关节炎患者血浆中ET和CGRP的变化及意义
目的探讨内皮素(ET)及降钙素基因相关肽(CGRP)在类风湿性关节炎(RA)发生、发展过程中的作用.方法采用放射免疫分析法,对30例RA患者及20例正常对照组血浆中ET及CGRP的水平进行检测.结果RA患者血浆中ET的水平及ET/CGRP的比值明显升高,CGRP水平明显降低,与正常对照组相比较差异显著(P＜0.01).进一步分析表明,活动期RA患者及关节x线改变为Ⅲ～Ⅳ期的RA患者,血浆ET的水平及ET/CGRP的比值明显高于稳定期及关节改变为Ⅰ～Ⅱ期的RA患者;而血浆CGRP的水平明显低于后者(P＜0.01).结论RA患者体内存在明显地ET及CGRP的平衡失调,且与RA患者的病情严重程度密切相关,提示ET及CGRP参与了RA的发病过程.
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正常人淋巴结中CGRP、ACTH和5-HT的表达
目的: 检测降钙素基因相关肽(CGRP) 、促肾上腺皮质激素 (ACTH)、 5-羟色胺(5-HT) 在正常人淋巴结中的表达, 并探讨它们对免疫系统的影响. 方法: 采用免疫组织化学SABC染色法, 检测35例正常人淋巴结(包括反应性增生淋巴结)中CGRP、ACTH、5-HT的表达. 结果: 35例正常人淋巴结中, CGRP、 ACTH及5-HT表达阳性率依次为: 88.5%(31/35)、85.4%(30/35)及94.2%(33/35).3种标记物在淋巴结中的分布大致相同, 主要分布在副皮质区的T细胞、淋巴滤泡生发中心B细胞及巨噬细胞等部位. 结论: 人外周淋巴结中CGRP、ACTH、5-HT的表达率很高, 且其分布与免疫细胞的分布基本一致.
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PPD免疫小鼠胸腺内降钙素基因相关肽能神经纤维的可塑性
目的观察免疫应答时胸腺内降钙素基因相关肽(CGRP)能神经纤维的可塑性,为CGRP在胸腺的调节作用提供线索.方法用PPD免疫Balb/c小鼠 ,胸腺切片用免疫组织化学法处理,光镜下观察.结果在正常Balb/c小鼠胸腺被囊、小梁内有较丰富的CGRP能神经纤维分布,胸腺实质中也有阳性纤维存在.用 PPD免疫28d后,胸腺被囊、小梁内血管周围的CGRP阳性纤维明显增加,这些纤维直径较粗、膨体少,多数围绕血管形成网状;有的聚集成束直行.胸腺实质内阳性纤维的数量少,免疫后较对照组略有增加,分布不均.此外,胸腺髓质中的一些较大的、三角形或椭圆形的上皮样细胞,亦呈CGRP免疫反应阳性.结论 CGRP与胸腺在免疫应答时的结构、机能变化有关.
关键词： 降钙素基因相关肽 结核菌素纯蛋白衍生物 胸腺 小鼠 免疫组织化学 -
心包积液患者心包液中CGRP和内皮素水平与积液量和心功能有关
目的 探讨心包积液患者心包液中降钙素基因相关肽(CGRP)、内皮素(ET-1)与积液量、心功能的关系.方法 35例心包积液患者按NYHA标准分为心功能Ⅲ、Ⅳ级,行超声心动图检查,计算积液量.行经皮穿刺心包腔内留置导管引流术时,取心包液及静脉血.正常对照组(血浆)30例.用放射免疫分析法测定心包液和血浆中CGRP、ET-1的浓度.结果 心包液CGRP、ET-1的浓俊显著高于血浆中的浓度(P<0.01),血浆中CGRP、ET-1含量较正常对照组明显升高(P<0.01),且心包液和血浆中CGRP、ET-1水平均与心功能相关(分别为P<0.01和P<0.05),心包液中CGRP、ET-1浓度与积液量呈正相关(分别为r=0.43、r=0.38,P<0.05).结论 心包积液患者心包液中CGRP、ET-1的浓度与心功能、积液量密切相关.
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冠心病患者血浆降钙素基因相关肽和内皮素-1水平的临床研究
目的:观察冠心病患者血浆降钙素基因相关肽(CGRP)和内皮素-1(ET-1)在发病时和治疗后含量的变化.方法:以放射免疫法测定12例急性心肌梗死(AI)、33例心绞痛(AP)患者发病第1天和治疗后第7天的CGRP及ET-1含量,并与20例正常人对照.结果:AMI组和AP组第1天CGRP较对照组增高(P<0.05),两组的ET-1明显增高,有非常显著差异(P<0.01).治疗后第7天两组数据与对照组相比无明显差异(P>0.05).结论:CGRP与ET-1在冠心病发病早期均有不同程度地增高,两者之间显著正相关,并与冠心病的严重程度相关.
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比索洛尔对慢性心功能不全患者血浆中降钙素基因相关肽和内皮素的影响
目的: 探讨β受体阻制剂(比索洛尔)对慢性心功能不全(心衰)患者血浆降钙素基因相关肽(CGRP)和内皮素-1(ET-1)的影响. 方法: 将符合本试验纳入标准的68例心衰患者分成试验组30例和对照组38例,两组患者均口服相同的或同类的基本抗心衰药物的治疗,在此基础上试验组加服比索洛尔.测定患者试验初始时和服药6个月后血浆CGRP和ET-1浓度. 结果:两组患者血浆CGRP和ET-1的浓度初始时无显著差异(P>0.05),试验组在6个月后血浆CGRP和ET-1浓度与初始时比较,均出现显著性差异(P<0.01),而对照组则均无显著性差异(P>0.05).结论: 慢性心衰患者在原有基本药物治疗的基础上加用比索洛尔,可以降低心衰患者血浆中CGRP和ET-1浓度,对心衰患者的临床预后有益.
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CGRP对大鼠急性心肌梗死后心脏干细胞募集及心功能的影响
目的 观察降钙素基因相关肽(calcitonin gene related peptide,CGRP)对心脏干细胞(cardiac stem cells,CSCs)募集及心功能的影响.方法 建立大鼠急性心肌梗死(AMI)模型,随机分为假手术组、CGRP注射组(CGRP组)和等体积磷酸盐缓冲液(PBS)注射组(对照组),每组30只.模型建立后于不同时间点获取标本,采用免疫荧光染色法观察CSCs募集情况,超声心动图评估大鼠心肌梗死后心功能,苏木素-伊红(H-E)染色、Masson染色评估心脏病理学改变,2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色测定心肌梗死面积.结果 免疫荧光染色显示,与假手术组相比,对照组和CGRP组CSC细胞数均在第3天增加,7d达高峰,14 d明显减少,其中,CGRP组较对照组增加更明显(均P ＜0.05).术后28 d大鼠超声心动图检测大鼠心功能提示CGRP组较对照组心功能各项指标明显改善(均P ＜0.05),形态学分析显示术后28 d CGRP组心肌纤维化程度及梗死面积明显小于对照组(P＜0.05).结论 CGRP可促进AMI后CSC在梗死区域募集,于第7天达高峰,并能改善大鼠心功能.
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内毒素诱导lrg表达对大鼠急性缺血/再灌注心肌的保护作用机制
目的:通过测定大鼠急性心肌缺血/再灌注损伤模型中lrg表达水平与血浆降钙素基因相关肽(CGRP)、内皮素(ET-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平及心肌梗死而积的变化,探索内毒素对缺血/再灌注心肌保护的分子机制.方法:将30只SD大鼠随机分为单纯缺血/再灌注模型组、内毒素预处理组和手术对照组,每组10只.采用戊巴比妥钠(40 mg/kg)腹腔注射麻醉大鼠,采用穿线结扎左冠状动脉前降支制备大鼠心肌缺血/再灌注模型.采用免疫印迹法结合图像分析软件半定量计算Irg分子表达水平的动态变化,放射免疫法测定血浆CGRP、ET-1和TNF-α浓度,用氯化三苯四唑(TTC)染色法和计算机图像分析系统计算心肌梗死面积.结果:大鼠左冠状动脉前降支缺血/再灌注1.5 h内毒素预处理组血浆ET-1和血清TNF-α浓度较缺血/再灌注组显著降低,心肌梗死面积也显著缩小(P<0.01);而血浆CGRP浓度则显著增高(P<0.01).结论:内毒素预处理可诱导lrg分子表达水平上调,并显著降低ET-1而增加CGRP浓度,减小心肌梗死面积,对急性心肌梗死后再灌注心肌产生一定的保护效应.
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CGRP在慢性低氧性肺动脉高压大鼠肺中的表达
本研究观察慢性低氧性肺动脉高压大鼠肺中CGRP表达的相对含量及其动态变化.应用免疫组织化学ABC染色法观察大鼠在减压低氧条件下1周,2周,4周及正常大鼠肺组织CGRP的相对含量.结果显示:低氧使大鼠肺动脉压显著增加,且随低氧时间的延长而进一步增高,第1周增加的速率明显加快;低氧大鼠肺中CGRP的表达量明显高于正常对照大鼠(P<0.01),CGRP的表达量依次为低氧4周>低氧1周>低氧2周>正常对照.提示:CGRP参与慢性低氧性肺动脉高压形成过程中的调节;CGRP在慢性低氧中的表达呈阶段性增加,可能与低氧早期CGRP大量释放后造成暂时性耗竭有关.
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不稳定性心绞痛与血管活性肽的相关性
目的:探讨不稳定性心绞痛(UAP)与血管活性肽的相关性.方法:观察42例UAP患者心绞痛发作前后血浆内皮素(ET)、降钙素基因相关肽(CGRP)、神经肽Y(NPY)及P物质(SP)的变化,并和20例正常人对照.结果:当心绞痛发作时,UAP患者血浆ET,NPY,SP均较前明显升高(P<0.05),CGRP含量下降;随着心绞痛的缓解,血浆CGRP开始升高,ET,NPY和SP均于3 d后恢复至发作前水平.结论:UAP的发生与血管活性肽的变化密切相关,血管活性肽对维持冠脉舒张和循环有重要意义.
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降钙素基因相关肽对血管升压素缩血管效应的影响
目的:探讨降钙素基因相关肽(CGRP)对血管升压素(AVP)缩血管效应的影响.方法:培养大鼠主动脉血管平滑肌细胞(VSMC),给予AVP和CGRP干预,检测VSMC的细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i).结果:AVP增加VSMC的[Ca2+]i,而CGRP明显抑制AVP的这一作用.结论:CGRP可能通过抑制VSMC的[Ca2+]i的升高而发挥其对AVP所致缩血管效应的抑制作用.
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不同胶体液用于急性等容性血液稀释时对血浆内皮素和降钙基因相关肽的影响
目的 观察不同胶体液用于急性等容性血液稀释时对血浆内皮素和降钙基因相关肽水平的影响.方法 选择非心脏手术ASAⅠ～Ⅱ级成年患者20例,随机分为两组,两组均于麻醉前快速输入复方乳酸钠10～15 ml/kg.麻醉后从桡动脉放血10 ml/kg,同时分别经静脉输入等量的4%琥珀酰明胶或羟乙基淀粉.观察两组急性等容性血液稀释麻醉前(T0)血液稀释完成后10 min(T1) 、20 min(T2)、30 min(T3)的血液动力学及血浆内皮素和降钙基因相关肽浓度的变化.结果 两组急性等容性血液稀释前后MAP,HR,SpO2和ECG均较稳定.急性等容性血液稀释后10 min、20 min血浆内皮素及降钙基因相关肽水平明显高于急性等容性血液稀释前,而内皮素和降钙基因相关肽比值无明显变化.结论 急性等容性血液稀释时4%琥珀酰明胶和羟乙基淀粉对血浆内皮素和降钙基因相关肽的影响无统计学意义,急性等容性血液稀释近期血浆内皮素和降钙基因相关肽水平均有一定的增加,但内皮素和降钙基因相关肽比值的变化无统计学意义,同时心血管反应不明显,表明血浆内皮素和降钙基因相关肽的动态平衡对急性等容性血液稀释时的循环稳定起着重要的作用,与扩容剂的种类无关.
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空气喷砂技术对牙髓组织中P物质作用的实验研究
目的:观察空气喷砂技术去龋时对牙髓组织的SP、CGRP神经反应性的影响.方法:实验组为空气喷砂技术组及高速涡轮机组,未制洞大鼠为空白对照组,制备雌性SD大鼠上颌磨牙,ABC免疫组织化学染色法观察牙髓组织内P物质的反应.结果:空气喷砂组大鼠牙髓SP、CGRP强阳性染色,高速涡轮机组大鼠牙髓SP、CGRP弱阳性染色,实验组间,实验组与对照组间均有差别,差别具有统计学意义(P<0.05).结论:空气喷砂技术刺激牙髓神经合成SP、CGRP增多,推论该技术在制备窝洞时对牙髓组织刺激性相对较小.
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SP和CGRP在大鼠牙髓组织中的分布及意义
目的:研究大鼠牙髓组织中神经肽SP和CGRP免疫阳性神经纤维的分布及意义.方法:利用免疫组织化学方法对大鼠牙髓组织切片进行染色,在显微镜下观察SP和CGRP免疫阳性神经纤维的分布.结果:SP阳性神经纤维分布在牙髓组织,并主要伴随在血管周围,CGRP阳性神经纤维与SP阳性神经纤维分布类似,但数量较多.结论:CGRP与SP在牙髓组织中分布类似,可能包含在同一种神经纤维中,二者协同作用,调节牙髓血管的血流分布.
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周围神经和神经肽与创伤修复及瘢痕增生
在创伤修复及瘢痕增生过程中,神经系统、特别是感觉神经系统扮演什么角色,也是学者们关注的课题之一.当软组织、特别是皮肤组织受到创伤后,周围神经会释放出多种神经肽,如:P物质(substance P,SP)、降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptid,CGRP)、神经肽Y(neuropeptid Y,NPY)、血管活性肠肽(vasoactive intestinapolypeptide,VIP)、脑啡肽(enkephalin,EP)、阿片促黑激素皮质素原(proopiomelancortin,POMC)以及多巴胺β-羟化酶(enzyme dopamine beta-hydroxylase,EDBH)等.
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电针对内脏痛模型大鼠结肠壁、背根节和脊髓内AchE和CGRP表达的影响
目的:观察电针治疗内脏痛对结肠壁、背根节和脊髓内胆碱酯酶(AchE)和降钙素基因相关肽(CGRP)免疫阳性物质表达的影响,以探讨AchE和CGRP免疫阳性物质在痛觉传递中的作用及电针镇痛的机制.方法:26只SD大鼠随机分为正常对照组(6只)、内脏痛组(VP组,10只)和电针+内脏痛组(EA+ VP组,10只).电针取双侧“足三里”穴刺激60 min,运用酶组织化学技术和免疫组织化学技术,观察电针刺激对福尔马林所诱发的大鼠盆腔内脏痛时,结肠壁、背根节和脊髓内AchE和CGRP免疫阳性物质表达的影响.结果:内脏痛组大鼠在注射福尔马林后,结肠壁、背根节和脊髓内AchE免疫阳性物质的表达显著高于正常组(P＜0.01),CGRP免疫阳性物质的表达显著低于正常组(P＜0.01)；而电针+内脏痛组,结肠壁、背根节和脊髓内AchE免疫阳性物质的表达显著低于内脏痛组(P＜0.01),CGRP免疫阳性物质的表达又显著高于内脏痛组(P＜0.01).结论:电针对大鼠急性盆腔内脏痛具有预防性治疗作用,Ach和CGRP可能参与了电针对内脏痛的调节作用.
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外源性bFGF对坐骨神经钳夹损伤后脊髓DRG感觉神经元CGRP变化的影响
目的:观察外源性碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对坐骨神经损伤后大鼠背根神经节(DRG)和脊髓后角内降钙素基因相关肽(CGRP)变化的影响.方法:成年雄性Wistar大鼠随机分成正常组、阳性对照组和bFGF组.阳性对照组动物右侧坐骨神经钳夹损伤,bFGF组动物右侧坐骨神经损伤后给予bFGF,在不同时间点运用免疫荧光技术结合图像分析检测相应背根节和脊髓后角CGRP的变化.结果:bFGF处理组术侧DRG内中小型神经元和脊髓后角内的CGRP表达明显高于阳性对照组,积分光密度值相比(P＜0.05)；但DRG内大型神经元内CGRP表达没有明显变化.结论:结果提示外源性bFGF能明显促进损伤后同侧DRG中小型神经元和脊髓后角CGRP的合成,对DRG内大型神经元中CGRP的表达没有明显影响.
关键词： 碱性成纤维细胞生长因子 降钙素基因相关肽 背根节 坐骨神经
