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  • 实验性家兔缺血预适应对心肌缺血再灌注损伤的保护作用

    作者:李春杰;陈治水;曹洪欣;余柏林;孙旗立;周丽娟

    目的采用家兔心肌缺血再灌注损伤动物模型,观察缺血预适应对心肌缺血再灌注损伤的心肌保护作用.方法将家兔随机分成3组,即假手术组、缺血再灌注组、缺血预适应组,观察血清心肌酶学变化及心肌细胞的超微结构.结果(1)缺血预适应组心肌酶水平与缺血再灌注组相比差异均极为显著(P<0.01);(2)缺血预适应可明显改善亚细胞结构损害.结论缺血预适应可以降低心肌酶活性,缩小梗死面积,改善亚细胞结构损害,对心肌缺血再灌注损伤有保护作用.

  • 电镜技术在临床病理诊断中的应用

    作者:胡秀

    电子显微镜在医学领域有着非常重要的应用,其作用极为重要,是其他任何领域都不能相提并论的,电子显微镜技术在临床诊断中有广泛的运用,为解决临床遇到的疑难杂症的诊断鉴别提供科学的依据.本文主要介绍了电镜在临床诊断中的运用,从血液疾病诊断、肿瘤诊断、活检病理诊断等几个方面进行阐述.

  • 电磁脉冲辐射对小鼠生精细胞超微结构的改变

    作者:王水明;王德文;彭瑞云;高亚兵;胡文华;杨怡;陈浩宇;崔雪梅;谷庆阳

    目的探讨电磁脉冲辐射对小鼠生精细胞超微结构的改变. 方法二级昆明雄性小鼠138只,随机分为辐射组和对照组.辐射组小鼠分别接受8×103V/m 、2×104V/m、6×104V/m电磁脉冲5次重复全身照射,于照射后6 h和1、3、7、14、28、90 d观察生精细胞超微结构的改变. 结果电磁脉冲照射后6 h~28 d, 精原细胞、精母细胞和精子细胞均出现核膜间隙增宽、线粒体肿胀或灶性空化、内质网扩张,而精原细胞还出现异染色质凝集或边移,核膜局灶性溶解,糖原颗粒减少;精子细胞高度水肿、核膜膨出或灶性溶解、线粒体高度肿胀、内质网显著扩张;精子头部形态异常、染色质浓缩不良、顶体形态结构异常等. 结论电磁脉冲照射可引起小鼠各级生精细胞超微结构的明显损伤,精原细胞、精子细胞和精子是电磁脉冲辐射敏感的靶细胞.

  • 纤毛不动综合征伴男性不育的诊断和治疗探讨(附6例报告)

    作者:费前进;黄学锋;张李雅;吴永根;李澄棣

    目的 探讨纤毛不动综合征(ICS)伴男性不育的临床特点、诊断和治疗方法.方法 回顾性分析6例ICS伴男性不育患者的临床资料.结果 患者临床特点均表现为反复上下呼吸道感染和男性不育.6例均患有鼻窦炎、支气管炎或支气管扩张,2例有全内脏反位.患者性激素水平、染色体核型和无精子症因子(AZF)均正常.6例均为严重弱精子症,5例精液无活动精子,1例精液偶见活动精子.电镜检查发现6例精子尾部鞭毛轴丝"9+2"结构排列紊乱或缺失、内外动力蛋白臂缺失,1例支气管纤毛内动力臂缺失.5例患者共行6个周期卵胞浆内单精子注射(ICSI)治疗,受精率、卵裂率和优质胚胎率分别为50.0、69.2和55.6%,2例获得临床妊娠,1例生化妊娠,其中1例已分娩1健康男婴.结论 纤毛的超微结构缺陷是ICS的重要诊断依据,而ICSI是治疗ICS伴男性不育的有效方法.

  • 不育症患者精子尾部超微结构改变的观察

    作者:党连凯;陈生;巫广腾;姜琳;王彤

    目的 观察男性不育患者精子尾部超微结构改变,探讨精子运动障碍导致男性不育的机理. 方法 选择男性不育精液,制备精子超薄切片、冷冻蚀刻复型膜和表面喷塗样品,在透射电子显微镜和扫描电子显微镜下观察. 结果 1.精子尾部线粒体排列紊乱,外膜内嵴破裂;2.密纤维分离,密纤维与轴丝二联管颠倒,轴丝二联管缺损,放射辐、近邻连接断裂,内外动力臂缺损;3.膜结构凹凸不平,膜蛋白脱落或凝聚等. 结论 精子尾部中段线粒体结构破坏是精子丧失运动能力的关键;精子尾部轴丝密纤维等病理改变不能有效利用ATP,导致精子死亡;不育患者精子均出现磷脂双分子层结构改变和膜蛋白变性造成的脱落和凝聚.

  • 体外成熟的卵母细胞胞质成熟的评价指标

    作者:宣恒华;冯定庆;赵卫东

    卵母细胞的体外成熟培养(in vitro maturation,IVM)是辅助生殖技术的重要过程之一.优质的IVM的卵母细胞必须是细胞核和细胞质同步成熟,以保证成功受精、胚胎正常发育乃至健康子代的出生.目前,细胞核成熟的评价标准已得到共识,而细胞质的成熟却表现复杂,尚缺乏有效的观察评价指标.近年来研究发现,卵母细胞成熟时其超微结构、一些信号分子和细胞因子均发生某些变化,这为评价细胞质成熟提供了依据.

  • 子宫内膜三维模型上小鼠囊胚着床的扫描电镜观察

    作者:王丽;周剑萍;张炜;刘银坤

    目的观察胚胎与体外子宫内膜三维模型共培养时,子宫内膜上皮细胞与胚胎的超微结构变化. 方法将妊娠第4天的小鼠囊胚在已建立的体外子宫内膜三维模型上进行培养,扫描电镜(SEM)观察胚胎着床时子宫内膜上皮细胞及胚胎的超微结构. 结果小鼠囊胚能正常脱透明带、粘附和扩展.电镜扫描显示体外培养的子宫内膜可形成胞饮突,但数量比体内子宫内膜少,胚胎粘附于胞饮突上. 结论体外子宫内膜三维模型可形成胞饮突,且胞饮突可能直接参与了囊胚与子宫内膜的粘附.

  • 丁内酯-I对小鼠卵母细胞体外成熟、染色质构型和超微结构的影响

    作者:张玲;朱桂金;魏玉兰

    目的观察 100 μmol/L丁内酯-I(BL-I)对小鼠卵母细胞的体外成熟、染色质构型及超微结构的影响. 方法实验组小鼠未成熟卵用"两步法"培养,先用BL-I培养液培养6 h,然后再用成熟培养液培养;对照组直接用成熟培养液培养,观察其生发泡破裂(GVBD)和第一极体形成的过程.将BL-I培养液培养6 h前后的卵母细胞分别固定行Hochest33342染色及制作电子显微镜标本,比较染色质构型及超微结构的变化. 结果 BL-I培养液培养小鼠未成熟卵6 h,实验组卵母细胞GVBD的发生率(21.5%)明显低于对照组(82.3%)(P=0.001).BL-I的抑制作用消除后,实验组卵母细胞GVBD发生率(96.9%)和成熟率(86.1%)与对照组(分别为97.3%和83.3%)无差异,但GVBD和成熟过程明显加速.BL-I抑制卵母细胞核成熟6 h,部分卵母细胞(32.8%)的染色质凝集,染色质围绕核仁型(SN)和非围绕核仁型(NSN)卵母细胞的比例(50.8%和16.4%)较培养前(69.2%和30.8%)明显下降;卵丘颗粒细胞的伸展未受影响,卵母细胞胞质的超微结构未出现明显异常,皮质颗粒和线粒体的形态及分布与对照组相似. 结论 BL-I能可逆性抑制体外培养的小鼠卵母细胞的核成熟,抑制作用消除后,卵母细胞成熟能力不受影响,但GVBD和第一极体的形成过程明显加速;在BL-I抑制卵母细胞核成熟的过程中,染色质构型发生变化,部分NSN型转化为发育能力更高的SN型,而胞质的超微结构未出现明显异常,有待进一步研究.

  • 冻融和移植过程对人胎儿卵巢组织及超微结构的影响

    作者:吴丹丹;周颖;童月红;徐炳森;叶碧绿

    目的 探讨冻融和移植过程对人胎儿卵巢组织超微结构的影响.方法 6例23~34w引产的胎儿卵巢慢冻速融,并移植到裸鼠肾被膜下,分别于移植后48 h、7和28 d回收移植物.卵巢组织分为新鲜对照组、冻融组、移植后48 h、7 d及28 d组.电镜和光镜下观察各组形态学改变.结果 胎儿卵巢组织冻融前后光镜下的卵泡密度(23.92±3.94)及(22.70±4.18)无显著差异,移植后48 h卵泡密度(16.70±3.98)与移植前比较显著下降(P<0.01).各组卵泡超微结构整体上保存良好.冷冻对卵巢问质损伤较大且局部差异大,移植后48 h间质细胞稀疏,白细胞浸润;移植后7及28 d,间质内可见较多胶原纤维束,大量微小血管生长.结论 人胎儿卵巢组织的冻融损伤主要表现在间质,而移植损伤在移植后48 h内严重;结合光镜和电镜观察手段能更全面评价冻融过程和移植过程对胎儿卵巢组织的影响.

  • 玻璃化冻融小鼠囊胚的超微结构观察

    作者:付敏;李永刚;李蓉;章晓梅

    目的 观察冻融小鼠囊胚的超微结构改变情况,研究冷冻对囊胚的冷冻损伤.方法 采用6组玻璃化溶液对小鼠囊胚进行冷冻保存,复苏后通过透射电镜观察超微结构改变情况.结果 各组小鼠囊胚均表现相似的超微结构损伤:线粒体肿胀、粗面内质网脱颗粒、高尔基复合体扩张、含有絮状物或膜性结构的小泡增多、微丝结晶的出现、细胞间紧密连接和桥粒减少.结论 冷冻对于小鼠囊胚的冷冻损伤主要是细胞膜性结构和细胞骨架系统的损伤.

  • 家兔卵巢组织玻璃化冷冻保存的实验研究

    作者:覃颖;李慕军

    目的 采用直接覆盖玻璃化冷冻(DCV法)和半麦管法玻璃化冷冻(HS法)处理家兔卵巢组织,探讨两种冷冻方法对卵泡组织形态学及超微结构的影响.方法 将10只健康雌性新西兰家兔的卵巢组织块随机分配组成新鲜对照组、DCV法和HS法玻璃化冷冻组3个实验组,观察和比较各组间卵巢内卵泡的组织形态学和超微结构变化.结果 (1)与对照组卵巢组织中的原始卵泡及初级卵泡的形态正常率(分别为88.11%和72.86%)相比,冷冻复苏后的原始卵泡及初级卵泡形态正常率在DCV法(分别为72.66%和55.08%)和HS法(分别为71.73%和56.18%)均显著降低(P<0.05),且初级卵泡的形态正常率均显著低于原始卵泡(P<0.05),但两个冷冻组间无显著差异(P>0.05);(2)观察卵泡超微结构的改变:两种玻璃化冷冻法主要损伤的是细胞浆中的线粒体,细胞核也会出现核固缩现象.结论 DCV法和HS法玻璃化冷冻均能保存家兔卵巢组织内的卵泡,但冷冻所导致的原始卵泡和初级卵泡损伤仍不可避免,其中初级卵泡损伤更明显.这两种冷冻法处理后的卵泡组织形态学无显著性变化,但在一定程度上会损伤卵泡中各组成部分的细胞超微结构.

  • 移植冻融小鼠卵巢组织后显微及超微结构的变化

    作者:唐飞;吴丹丹;周颖

    目的 探讨移植过程对冻融小鼠卵巢组织光镜结构及超微结构的改变情况,研究其对小鼠卵巢组织的影响.方法 采用4周龄小鼠全卵巢慢冻速融,并移植到同种异体小鼠肾脏被膜下,分别于移植后24 h、48 h、7 d回收移植物.卵巢组织分为新鲜组、冻融组、移植后24 h、48 h及7 d组.光镜和电镜下观察各组形态学的改变. 结果 光镜下各组小鼠卵巢各级卵泡数具有显著性差异(P<0.01),随着移植后时间的推移各级卵泡数和卵泡存活率逐渐下降;各组卵泡超微结构具有差异性,移植对小鼠卵巢卵泡和间质都有损伤,移植后48 h间质稀疏,大量红细胞渗出,组织损伤严重;移植后7 d可见有微血管生成,卵泡、细胞器及细胞骨架系统修复良好.结论 冻融小鼠卵巢随着移植后时间的推移各级卵泡数和卵泡存活率逐渐下降,组织损伤主要在卵泡和间质,以移植后48 h损伤严重;光镜结合电镜观察能更全面地评价移植过程对冻融小鼠卵巢组织的影响.

  • 羊睾丸提取液对铅暴露小鼠睾丸细胞的保护作用

    作者:田洪艳;李质馨;徐冶;王弘珺;朱辛为;林冬静;李宏宇;窦肇华

    业已证实铅对男(雄)性具生殖毒性,长期从事铅作业的男性,精子数量减少、活力下降,精子畸形率升高[1].慢性铅暴露大鼠睾丸中脂质过氧化物增多,说明铅可导致睾丸中氧自由基增多,致睾丸功能下降[2],而铅诱导的活性氧簇对精子细胞发育具有进行性损伤作用[3],使精子畸形率升高,精子总量降低[4],铅对睾丸的脂质过氧化作用是使雄性生殖功能受损的重要机制之一[5].

  • 茶多酚对顺铂所致肾损伤保护作用的实验研究

    作者:姚林;刘桂香;李清钊;王广增

    顺铂(DDP)已广泛应用于临床,并显示了较强的抗癌作用,但是顺铂也具有重金属类物质的毒性作用,其中主要的是对肾脏的毒性作用。在临床应用中,往往由于严重的肾功能损伤而限制了药物的使用。茶多酚(TP)是从茶叶中提取的一种酚类物质[1],具有抗癌、防癌、增强机体免疫力、清除自由基、阻止脂质过氧化等功能。我们拟探讨TP对顺铂所致机体损伤的保护作用,以期为临床顺铂的毒性防护提供新思路。

  • 硫酸镍对体外培养小鼠精原细胞的损伤作用

    作者:苏莉;常旭红;李晋;赵迟;孙应彪

    目的 初步探讨硫酸镍(NiSO4)对小鼠精原细胞的毒作用.方法 采用MTT、分光光度法和透射电子显微镜分别检测NiSO4,浓度为0、25、50、100、200、400和800μmol/L,染毒6、12、24和36 h对体外培养小鼠精原细胞的增殖、乳酸脱氢酶(LDH)活力及其超微结构的影响.结果 NiSO4显著抑制体外培养小鼠精原细胞的增殖,且存在剂量/时间依赖性(r=1,P<0.01).50 μmol/L NiSO4染毒24和36 h,100、200、400和800 μmol/L NiSO4染毒6、12、24和36 h时,精原细胞悬液LDH活力显著低于对照组(P<0.05),并呈剂量/时间依赖性(r=-1,P<0.01).此外,NiSO4还可引起小鼠精原细胞超微结构改变,主要表现为细胞皱缩、胞内出现空泡,细胞膜和核膜破裂,细胞器模糊不清等现象,特别是NiSO4浓度在200μmol/L以上变化更明显.结论 NiSO4对体外培养的小鼠精原细胞具有明显毒作用.

  • 硒对氟致小鼠脑海马突触超微结构损伤的影响

    作者:章子贵;申秀英;许晓路

    脑海马是学习记忆的关键脑区,近年来高氟对脑海马的毒性作用已有一些报道[1],我们的前期研究也表明,高氟(10 mg/L)能损伤小鼠的学习能力[2] ,并能引起其脑海马内一些突触超微结构的病理性变化[3].硒是人体必需的微量元素,硒对氟中毒有较强的拮抗作用[4-6],但硒对氟致小鼠脑海马突触超微结构损伤的影响尚报道甚少.本文在过去工作基础上,拟通过小鼠经口摄入由高浓度氟和适当硒相组合的溶液,探讨硒对氟致小鼠脑海马突触超微结构损伤的影响,为预防和治疗氟中毒提供基础资料.

  • 小鼠吸入70号汽油肝脏的超微结构观察

    作者:王河川;邹赛英;殷学军;唐新萍;仇东辉;刘德祥;黄应堂;黄国香

    汽油作为一种有机溶剂,用途广泛,已有实验研究表明:慢性吸入70号汽油对小鼠肝脏有较大影响[1],对大脑结构亦有改变[2],但70号汽油慢性吸入小鼠肝脏超微结构的影响未见详细报道,本实验选用70号汽油,通过小鼠不同时间,不同浓度的慢性吸入,动态观察肝脏超微结构的变化,以进一步明确70号汽油对肝脏的影响.

  • 盐酸克仑特罗对小鼠心肌超微结构的影响

    作者:邹明;邹本革;张启迪;刘焕奇;毕可东

    目的 研究盐酸克仑特罗对小鼠心肌超微结构的影响.方法 选用18 ~22 g健康雄性小鼠50只,随机分为5组,每组10只,分别为对照组(生理盐水)、1组(0.1 mg/kg bw)、2组(1 mg/kg·bw)、3组(2 mg/kg·bw)和4组(5 mg/kg·bw),各组小鼠均通过腹腔注射染毒,1次/d,连续30 d.末次染毒后24 h,颈椎脱臼法处死小鼠,通过电子显微镜技术,观察心肌超微结构变化.结果 小鼠心肌超微结构变化主要表现为线粒体肿胀、空泡化及嵴缺失、肌细胞膜外被基膜菲薄、横管和肌浆网扩张等.结论 盐酸克仑特罗可导致心肌细胞损伤,并随剂量增加而加重.

  • 丙烯酰胺对小鼠心肌超微结构及线粒体酶的影响

    作者:王耀峰;马全祥;袁向山;毛泽善;杨杰;杨志军;文小军

    目的 观察丙烯酰胺染毒后小鼠心肌超微结构及心肌线粒体酶的改变,探讨丙烯酰胺的心肌毒性。方法 健康清洁级昆明种雄性小鼠48只,随机分为1个正常对照组和5、30和60 mg/(kg·d)3个丙烯酰胺剂量实验组,腹腔注射染毒。10 d处死小鼠,透射电镜观察心肌超微结构变化;心电图机检测小鼠心脏电位变化;比色法检测小鼠心肌线粒体Na+-K+-ATPase、Ca2+-ATPase;ELISA法检测细胞色素氧化酶(CCO)。结果 与对照组相比,各剂量实验组小鼠心室肌细胞线粒体嵴减少或消失,线粒体部分膜融合;糖原减少,肌节出现紊乱,随着染毒剂量的增加,损伤程度加剧,呈现出剂量-效应趋势。中和高剂量组和对照组相比Na+-K+-ATP酶活力明显下降(P<0.05);各实验组和对照组相比Ca2+-ATPase、CCO均下降并存在剂量依赖关系(P<0.05)。结论 丙烯酰胺摄入后,可造成小鼠心肌超微结构及线粒体相关酶表达改变,提示丙烯酰胺具有心肌毒性。

  • 铅对大鼠成骨细胞形态学的影响

    作者:靳翠红;蔡原;刘秋芳;(伧)悦;王树森;赵剑

    铅是应用广泛的重金属毒物.越来越多的研究显示骨骼是铅毒性重要的靶器官,儿童因其独特的生理发育特点对铅的毒作用较成人更为敏感,低剂量铅暴露即可引起儿童多系统、多脏器的损伤[1].对儿童体格发育的影响近年来已引起广泛的关注[1].铅中毒可以直接和间接地改变骨细胞功能[2].研究发现铅中毒儿童血清骨钙素水平下降[3].许多研究表明铅对成骨细胞可能有直接毒作用.成骨细胞是骨形成细胞,对骨组织的生长发育和损伤修复起关键作用[4].目前,国外关于铅对成骨细胞的毒性研究绝大多数采用单克隆的成骨细胞瘤细胞系(ROS17/2.8),而未见用原代成骨细胞者.国内研究只限于一些流行病学调查.为了阐明铅对幼年动物成骨细胞的影响,本研究选用原代细胞培养方法观察铅对成骨细胞光学显微镜下细胞形态及电子显微镜下超微结构的影响,为铅对成骨细胞乃至骨骼系统的发育毒性机制提供依据.

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