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琼玉膏延缓衰老作用的候选靶蛋白分析
采用iTRAQ技术研究琼玉膏干预衰老大鼠模型的下丘脑蛋白,寻找候选靶蛋白,探索琼玉膏延缓衰老的作用机制.结果表明,琼玉膏可以提高大鼠血清GSH-Px及肝脏SOD活力.iTRAQ技术鉴定到的总蛋白为3 522个,FDR< 1%.通过数据分析,鉴定出琼玉膏组与模型组比较,具有295种差异蛋白;模型组与空白组比较,具有20种差异蛋白;其中与空白组相比,模型组中下调而琼玉膏组中上调的蛋白有14种.在琼玉膏组和模型组的295种差异蛋白中,差异倍数≥1.30的差异蛋白有40种,高为1.47.查阅文献及基因功能检索,筛选出琼玉膏延缓衰老的候选靶蛋白12种:ST18,Ptprc,PSMB8,INPP4B,Shc3,Pik3r1,PIP5 K1C,Nampt,Rasgrp2,Asah2,Pdpk1,Map2k7.Western blot法检测下丘脑炎症通路NF-κB蛋白,模型组(0.96)相对空白组(0.85)表达量升高;而琼玉膏组(0.89)相对模型组则下降.Q-PCR检测PIP5K1C,Ptprc等与炎症相关的候选靶蛋白,与空白组相比,模型组中mRNA相对表达量显著下降(P<0.01),而琼玉膏组中则显著升高(P<0.01),与蛋白质组学数据分析一致.琼玉膏可能通过调节下丘脑炎性反应而延缓衰老的发生.
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冬令补膏四款
琼玉膏人参120克,鲜地黄800克,白茯苓(去黑皮)245克,白蜂蜜500克.将人参、茯苓研细末,白蜜用洁净纱布滤去杂质,鲜地黄捣取汁(捣时盛器要用陶器,不要用铜、铁器),然后将参、苓、蜜、地黄汁拌匀放入瓷瓶内,用净纸二三十层封口,放锅内隔水蒸三天三夜,而后用蜡纸数层包紧瓷瓶,放入井口约4小时去火毒,而后取出瓷瓶,再放入锅内蒸24小时即成.每次10~30毫升,每日2次,温开水送服.可补气血,填精髓,适用于中老年人平时保健之用.
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琼玉膏抗衰老作用方药解读
琼玉膏具有滋阴润肺、益气健脾的功效,是经典的抗衰老名方,始载于宋·洪遵<洪氏集验方>所引"铁瓮先生神仙秘法琼玉膏"中,历代许多医籍也都有收录.琼玉膏虽只有人参、茯苓、生地、白蜜四味药组成,但其配伍严谨,动静结合,有气阴双补之妙,疗效显著,"珍赛琼瑶,故有琼玉之名",是一剂耐人解读的精妙小方.
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提取浓缩对琼玉膏品质一致性的影响
目的 研究较长时间提取和浓缩对琼玉膏品质的影响,探讨琼玉膏主成分在提取和浓缩过程中的降解、转化机制.方法 采用HPLC-MS方法同时测定琼玉膏中主要活性成分5-羟甲基糠醛、梓醇、密力特苷、毛蕊花糖苷、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷20(S)-Rg3、人参皂苷Rg1、人参皂苷Ro和茯苓酸,比较不同提取和浓缩时间重复制备样品中10种成分质量分数标准差(SD)的累加值,考察提取和浓缩时间对琼玉膏品质的影响.结果 随着提取和浓缩时间的延长,10种活性成分的总量和部分成分的相对质量分数显著改变,同时重复制备样品质量分数误差累加值随提取和浓缩时间延长呈下降趋势.结论 提取和浓缩时间可显著影响琼玉膏活性成分转化程度,从而影响其品质的一致性.
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琼玉膏抗皮肤自然老化作用的实验研究
目的:探讨琼玉膏抗皮肤自然老化的作用机理.方法:50只18个月龄大鼠随机分为空白对照组、琼玉膏大剂量组(14g/kg)、琼玉膏中剂量组(7g/kg)、琼玉膏小剂量组(3.5g/kg)和维生素E组(2g/kg),各组大鼠均连续灌胃给药4周,测定皮肤组织SOD活性、羟脯氨酸、丙二醛含量和透明质酸水平,比较皮肤厚度和皮肤血管化程度;测定皮肤组织中VEGF和BFGF蛋白的表达.结果:琼玉膏可增加大鼠皮肤组织SOD活性、羟脯氨酸和透明质酸含量,降低丙二醛含量,并且呈剂量依赖性;琼玉膏可剂量依赖性增加大鼠皮肤真皮层厚度和血管数目;琼玉膏可剂量依赖性增加大鼠皮肤组织VEGF和BFGF蛋白含量.结论:琼玉膏可增加皮肤组织SOD活性及丙二醛含量而提高皮肤组织的抗氧化防御能力,增加VEGF和BFGF蛋白表达而提高皮肤血管化程度,增加胶原蛋白和透明质酸的含量而提高皮肤厚度而具有较好的抗皮肤老化作用.
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规范化按科分诊对膏方疗效的作用研究
膏方又称膏滋,是中医重要的治疗手段之一,它在祛除疾病,改善体质,补益虚赢方面发挥独特的功用[1].膏方的适用人群为各系统慢性病者[2].中医膏方一般被作为滋补剂用于调理养生,其非单纯补剂,乃包含纠偏却病之义[3].随着医学不断地发展,目前膏方的发展进入新阶段,研制与运用得到迅速发展,出现了较规范的专病用膏方研究报道,如琼玉膏是临床肺癌放化疗增效减毒的良方等.各专科诸多专家研究表明从事某一专科专家在自己所从事的专科领域有独到的见解和经验,因此专家的研究成果在一定程度上说明按科规范分诊对确保开膏方疗效具有重要意义,但具体影响因素目前国内尚无研究报导.根据近几年来我们回访服膏方人群的疗效信息提示,专科化的膏方辨证疗效相对较好,但是没有明确的数据来证实,同时由于目前膏方分诊无规范或者标准,护士的分诊大多依据个人经验,可靠的分诊标准不多,使部分病人并不能被准确的分至相应的科室进行诊治,导致服用效果不理想.
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琼玉膏防治阿尔茨海默病
琼玉膏是扶正固本、补益长寿的抗衰老名方.现代科学研究也证实了琼玉膏在包括肺癌等多种疾病的防治中有着显著的疗效,特别是它还能起到保护衰老动物中枢神经系统的作用.阿尔茨海默病目前仍是医学界棘手的问题之一.琼玉膏不仅能有效地防止自由基攻击,阻断该条通路对细胞凋亡的激活,更有可能激活线粒体自噬,清除受损线粒体,促进了受损神经元的修复.由于琼玉膏对衰老动物中枢神经系统有保护作用,它在阿尔茨海默病的防治领域将极有前途.
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从琼玉膏的历史沿革看中医膏方文化的发展
中医膏方为中医药文化的重要遗产,已有非常悠久的历史.在众多膏方中,琼玉膏也不例外.他从诞生至今,已有近千年的历史,可谓是膏方的活化石.他从一首临床治疗咳嗽的方剂发展成为被广大人民群众所喜爱的益寿保健膏方,其中经历了很多的变化与发展.
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琼玉膏减轻实验肺癌小鼠化疗导致抑制骨髓有核细胞分裂的研究
目的:观测琼玉膏对化疗实验性肺癌小鼠导致的骨髓抑制的保护作用.方法:使用肿瘤癌株接种的方法制造肺癌模型,分别观测空白对照组(生理盐水)、化疗组(顺氨氯铂)及联合组(顺氨氯铂加琼玉膏)小鼠的骨髓有核细胞计数及其细胞周期变化.结果:化疗组骨髓有核细胞计数及S期细胞明显低于联合组与对照组(P<0.01);而联合组与对照组相比,对照组又高于联合组(P<0.05).化疗组C11期细胞明显高于联合组与对照组(P<0.01),而联合组与对照组相比,对照组又低于联合组(P<0.05).各组间C12+M期细胞没有显著差异.结论:琼玉膏对实验性肺癌小鼠化疗所致骨髓抑制可能有明显的减轻作用.
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琼玉膏对肺腺癌细胞珠GLC-82的细胞周期及凋亡的影响
目的:观察琼玉膏对顺氨氯铂在肺腺癌细胞珠GLC-82培养中的细胞增殖抑制的影响.方法:用血清药理学,流式细胞等方法技术研究古方琼玉膏对肺腺癌细胞株GLC-82的细胞周期及凋亡的影响.结果:流式细胞仪的分析结果表明,琼玉膏可明显加强化疗药物顺氨氯铂(DDP)延长癌细胞G1期,降低S期的作用;并且琼玉膏还可明显加强顺氨氯铂诱发癌细胞的凋亡.结论:说明琼玉膏有加强化疗的抑制癌细胞分裂及诱发癌细胞凋亡的作用.
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琼玉膏对实验肺癌小鼠化疗导致骨髓抑制的影响
目的:观察琼玉膏对实验性肺癌小鼠化疗导致的骨髓抑制的影响.方法:使用癌细胞接种的方法制造肺癌模型,分别观测空白对照组(生理盐水)、化疗组(顺氨氯铂)及联合组(顺氨氯铂加琼玉膏)小鼠的血常规及骨髓有核细胞计数变化.结果:联合组及对照组的外周血红细胞、白细胞及血小板皆明显高于化疗组(P<0.01).化疗组骨髓有核细胞数明显低于联合组与对照组(P<0.01).而联合组与对照组相比,对照组又高于联合组(P<0.05).结论:琼玉膏对实验性肺癌小鼠化疗所致骨髓抑制可能有明显的解除作用.
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琼玉膏抗衰老与下丘脑nf-kb炎症通路及GnRH1关系的相关性研究
目的 探索琼玉膏抗衰老以及下丘脑nf-kb炎症通路的激活与GnRH1基因甲基化相关性的可能分子机制.方法 ①观察比较6只24月龄自然衰老SD大鼠和6只2月龄青年SD大鼠下丘脑衰老相关蛋白及其基因mRNA的表达水平:Western Blot检测GnRH1、Sirt1、DNMT1、DNMT3a的蛋白表达水平;Real-Time PCR检测GnRH1、Sirt1、DNMT1、DNMT3a基因mRNA的表达水平;使用SPSS19.0统计软件做统计学分析.MSP法检测老年鼠和青年鼠GnRH1基因甲基化情况.②通过分离新生SD大鼠下丘脑神经元干细胞,建立D-半乳糖诱导的下丘脑神经元干细胞衰老模型,比较正常神经元干细胞组、D-半乳糖衰老组以及不同浓度琼玉膏干预组之间炎性因子及NF-κB表达的差异.结果 ①GnRH1、Sirt1、DNMT1的蛋白及其基因mRNA表达水平在老年鼠中明显降低,与青年鼠比较有显著性差异(P<0.05);DNMT3a的蛋白及基因mRNA表达水平在老年鼠中无明显变化,与青年鼠比较无显著性差异(P>0.05);老年鼠中GnRH1基因出现部分甲基化,青年鼠中GnRH1基因未发生甲基化.②D-半乳糖诱导建立的神经元干细胞衰老模型呈现炎性指标高表达以及NF-κB信号通路激活;琼玉膏可抑制炎性因子、nuclear P65的表达水平以及NF-κB的转录活性;并且,随着琼玉膏浓度从45 μg/ml增加到90μg/ml,其提前干预D-半乳糖诱导的神经元干细胞衰老的作用也相应增强.结论 琼玉膏抗衰老的可能分子机制在于降低下丘脑神经元干细胞炎性因子表达和NF-κB转录活性,进而能够逆转衰老进程中Gn-RH1基因甲基化及其表达水平下降.
关键词: 琼玉膏 下丘脑nf-kb炎症信号通路 甲基化 抗衰老 -
琼玉膏对衰老大鼠作用的差异蛋白分析
目的 研究琼玉膏对衰老大鼠产生调节作用的相关蛋白质,在分子水平上探索琼玉膏的作用机制.方法 将42只6月龄SD雄性大鼠随机平均分为3组,分别标记为琼玉膏组、空白组和模型组.给药结束后,取三组大鼠下丘脑全蛋白,运用同位素相对标记与绝对定量(iTRAQ)技术,分离、分析、鉴定大鼠下丘脑差异蛋白质.结果 成功建立衰老大鼠模型,分析比较三组大鼠下丘脑蛋白质,发现14种显著差异蛋白质.结论 14种显著差异蛋白分别为,细胞色素C氧化酶多肽Ⅵc-2、中性神经酰胺酶、植烷酸-辅酶A羟化酶相互作用类蛋白、尼克酰胺磷酸核糖转移酶、尾锚定蛋白插入受体WRB、O-甘露糖β-1,4-N-乙酰葡糖胺基转移酶、信号转导子和转录激活子5b、脂酰CoA合成酶、特定微管伴侣蛋白E、3-磷酸肌醇依赖的蛋白激酶1、双特异性作用蛋白激酶7、RAS脒基释放蛋白2、SHC转运蛋白和泛酸酯激酶4,琼玉膏对这些蛋白均起到下调的作用,该研究为琼玉膏延缓衰老作用的靶蛋白研究奠定基础.
关键词: 琼玉膏 延缓衰老 差异蛋白 同位素相对标记与绝对定量 下丘脑 -
琼玉膏含药血清对化疗药物抑制肺腺癌细胞株GLC-82体外培养增效作用的实验研究
目的:观察琼玉膏含药血清对化疗药物抑制肺腺癌细胞株GLC-82体外培养增效作用.方法:使用细胞培养及计数方法绘制癌细胞株的生长曲线;用血清药理学、流式细胞等技术观察琼玉膏对肺腺癌细胞株GLC-82的细胞周期及凋亡的影响.结果:细胞形态学观察显示,化疗组与联合组对人肺癌细胞均有明显抑制作用,但联合组抑制作用更显著;细胞生长曲线显示,琼玉膏可明显加强顺氨氯铂(DDP)抑制癌细胞株的分裂;而且琼玉膏具有明显加强DDP延长癌细胞G1期(P<0.05)、降低S期(P<0.01)的作用,并可明显加强DDP诱发癌细胞的凋亡(P<0.01).结论:琼玉膏有加强化疗药物抑制肺腺癌细胞分裂及诱发其凋亡作用.
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琼玉膏对实验性肺癌小鼠化疗致免疫抑制的血清白细胞介素-2及肿瘤坏因子含量影响
目的:观察琼玉膏对实验性肺癌小鼠化疗致免疫抑制的血清白细胞介素-2(IL-2)及肿瘤坏死因子(TNF)含量影响.方法:使用癌细胞接种的方法制造肺癌模型,分别观察空白对照组(生理盐水)、化疗组(顺铂)及联合组(顺铂加琼玉膏)小鼠的血清IL-2及TNF含量变化.结果:空白对照组与联合组的荷瘤小鼠血清TNF含量均显著高于化疗组(P<0.05);虽然联合组血清TNF稍低于空白对照组,但差异无显著性意义(P>0.05).空白对照组与联合组荷瘤小鼠血清IL-2含量均显著高于化疗组(P<0.01);而联合组与空白对照组比较,联合组IL-2血清含量又高于空白对照组(P<0.05).结论:琼玉膏对实验性肺癌小鼠化疗所致免疫抑制可能有明显的解除作用.
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琼玉膏加强顺氨氯铂对肺腺癌细胞株GLC-82的体外抑制作用
目的:观察琼玉膏对顺氨氯铂抑制肺腺癌细胞株GLC-82增殖的影响.方法:使用血清药理学分别观察空白对照组(生理盐水)、化疗组(顺氨氯铂)及联合组(顺氨氯铂加琼玉膏)细胞形态学的变化;使用活细胞计数方法记录各组癌细胞6日的生长情况并绘制其生长曲线;使用流式细胞等方法分析各组癌细胞株GLC-82的凋亡情况.结果:对照组癌细胞生长良好,化疗组癌细胞数基本不增长,联合组活癌细胞数则下降.流式细胞仪的分析结果表明,琼玉膏可明显加强化疗药物顺氨氯铂(DDP)诱发癌细胞的调亡.结论:琼玉膏有加强化疗抑制癌细胞分裂及诱发癌细胞凋亡的作用.
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琼玉膏对D-半乳糖所致衰老大鼠差异蛋白质表达的影响
目的 采用蛋白质组学方法,在下丘脑中探索琼玉膏对衰老大鼠产生调节作用的相关蛋白质,从而在分子水平上解释抗衰老方剂琼玉膏的作用机理.方法 将2~3月龄42只SD大鼠,随机分为正常对照组、模型组、琼玉膏组,每组14只.给药结束后,抽提下丘脑全蛋白.利用荧光双向差异凝胶电泳、图像分析、胶内酶切、质谱鉴定等蛋白质组学技术,分离、分析、鉴定大鼠下丘脑差异蛋白质;通过数据库检索和生物信息学方法,分析差异蛋白的功能及属性.结果 1.成功复制亚急性衰老大鼠动物模型;2.获得了正常对照组、模型组和琼玉膏组下丘脑组织的全蛋白表达荧光双向差异凝胶电泳图谱;3.运用蛋白质组学技术,比较正常对照组、模型组及琼玉膏组的下丘脑组织,确认了15种表达量发生了变化的蛋白质.结论 鉴定出差异蛋白主要涉及有突触形成相关蛋白、线粒体相关蛋白、能量代谢相关蛋白、抗氧化、细胞骨架蛋白、细胞分化、增殖和凋亡蛋白等,为进一步筛选特异相关蛋白和药物靶位治疗奠定基础.
关键词: 琼玉膏 延缓衰老 蛋白质组学 荧光双向差异凝胶电泳 下丘脑 -
琼玉膏对实验性肺癌小鼠化疗疗效的影响
目的:观测琼玉膏对实验性肺癌小鼠化疗疗效的影响.方法:使用癌细胞接种的方法制造肺癌模型,分别观测空白对照组(生理盐水)、化疗组(顺氨氯铂)及联合组(顺氨氯铂加琼玉膏)小鼠的一般状态、体重、瘤重及抑瘤率的变化,了解琼玉膏对实验性肺癌小鼠化疗疗效的影响.结果:联合组的小鼠一般状态明显好于对照组及化疗组.联合组与化疗组及对照组比较,在接种后7日体重出现显著差异,14日后则出现极显著差异.无论化疗组或联合组,其荷瘤小鼠的瘤块都明显小于对照组,抑瘤率分别为52%与71%;而联合组与化疗组比较,瘤块又明显小于化疗组.结论:琼玉膏对实验性肺癌小鼠化疗有明显的增效减毒作用.
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琼玉膏抑制肝癌细胞HBxAg表达及对原发性肝癌的防治作用
目的:观察琼玉膏对人肝癌细胞移植裸鼠HBxAg表达的影响, 分析其通过影响HBxAg表达防治原发性肝癌的机制.方法:建立人肝癌细胞移植裸鼠模型, 观察琼玉膏预防及治疗对小鼠体质量、癌组织质量的影响, 同时采用免疫组化法测定癌组织及肝脏中HBxAg的表达.结果:与模型组相比, 琼玉膏预防及治疗后, 裸鼠的体质量增长迅速, 癌组织质量偏低, 癌组织及肝脏HBxAg低表达.琼玉膏预防与环磷酰胺治疗的效果相近.结论:琼玉膏能减缓肿瘤的生长, 并抑制HBxAg的表达, 后者可能是其防治原发性肝癌的主要机制之一.
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琼玉膏治疗放射性肺炎97例
放射性肺炎是胸部肿瘤在放射治疗过程中所致的放射性肺组织损伤并发症之一.对患者后续放疗、愈后产生了不良影响.,目前西医上的抗感染、激素治疗效果均不太理想.根据中医辨证施治的原则,采用琼玉膏治疗伽马刀治疗所致的放射性肺炎97例,结果治愈62例,显效28例,无效7例,总有效率92.8%.证实琼玉膏防治放射性肺炎疗效较确切,可供同行参考.