首页 > 文献资料
-
三七总皂苷对线粒体调控作用的研究进展
线粒体是细胞关键的能量来源,在能量合成与释放、细胞功能维持方面具有重要作用.三七总皂苷作为中药三七中重要的活性成分,具有抗血栓形成、扩血管、降血压、抗炎、抗氧化等作用.国内外研究表明,三七总皂苷参与调节线粒体能量代谢、氧化应激、生物合成、凋亡与自噬及膜通道状态等,故线粒体是三七总皂苷生物活性的重要靶点.该文就三七总皂苷对线粒体的调控作用做一综述.
关键词： 三七总皂苷 线粒体 能量代谢 氧化应激 线粒体ATP敏感性钾通道 线粒体自噬 线粒体膜通透性转换孔 -
PI3K/Akt在线粒体ATP敏感性钾通道开放抑制缺氧复氧大鼠心肌微血管内皮细胞FKN表达中的作用
目的 观察PI3 K/Akt信号在线粒体ATP敏感性钾通道(mito-KATP)开放抑制缺氧复氧大鼠心肌微血管内皮细胞(MMECs) fractalkine(FKN)表达中的作用.方法 培养SD大鼠离体MMECs,建立缺氧复氧损伤模型24皿,随机分为4组(n=6):正常对照组(N组)、缺氧/复氧组(H/R组)、二氮嗪预处理+缺氧/复氧组(DZ组)、LY294002+二氮嗪预处理+缺氧/复氧组(LY294002+DZ组).DZ组加入100μmol/L二氮嗪预处理2h,LY294002+ DZ组在加入100 μmol/L LY294002预处理2h后再加入100μmol/L二氮嗪预处理2h,然后和缺氧复氧组同样进行缺氧2h、复氧2h.Hoeehst染色观察凋亡细胞显微结构,四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定细胞活力,RT-PCR检测Akt和FKNmRNA水平,Western blotting检测Akt蛋白水平.结果 与N组比较,H/R组细胞增殖率显著降低(P＜0.01)、凋亡率显著升高(P＜0.01),FKN mRNA和FKN蛋白表达显著增加(P＜0.01)、Akt mRNA和Akt蛋白升高(P＜0.05).与H/R组比较,DZ组细胞增殖率显著升高(P＜0.01)、凋亡率显著降低(P＜0.01),AktmRNA和蛋白显著升高(P＜0.01和P＜0.05),FKN mRNA和蛋白表达显著降低(P＜0.01).与DZ组比较,LY294002+ DZ组Akt mRNA和蛋白显著降低(P＜0.01)、FKN mRNA和蛋白表达显著升高(P＜0.01).结论 mito-KATP开放通过PI3K/Akt信号调节下游FKN mRNA的转录及表达,促使细胞增殖,抑制细胞凋亡,实现对缺氧复氧MMECs损伤的保护.
-
吡格列酮对缺血-再灌注大鼠心肌梗死面积和线粒体ATP敏感性钾通道的影响
目的 观察PPARγ激动剂吡格列酮对在体大鼠心肌缺血-再灌注心肌梗死面积、缺血面积及线粒体ATP敏感性钾通道(mitoKATP)影响,探讨其可能机制.方法 健康雄性SD大鼠54只,分为实验一和实验二完成.在实验一中24只大鼠随机分4组,每组6只:(1)假手术对照组(SO)行冠脉穿线但不结扎,4 h后取出心脏;(2)单纯I/R组于I/R前24 h由尾静脉注入0.9%生理盐水,开胸结扎冠脉前降支30 min,松解后再灌注4 h;(3)5-HD+吡格列酮组(5-HD+Pio)于I/R前24 h由尾静脉缓慢注入mitoKATP阻滞剂5羟基葵酸(10 ms/ks),30 min后再缓慢注入吡格列酮(3 mg/kg),持续5 min,24 h后处理同I/R组;(4)吡格列酮预处理组(Pio)于缺血-再灌注前24 h只注入吡格列酮(3 mg/kg),持续5min,余处理同(3).后三组结扎前降支30 min、再灌注4 h后取出心脏.Western blot法测P38MAPK、JNK和NFκB P65蛋白水平的表达.在实验二中SD大鼠30只,分为SO组、I/R组、Pio组、5-HD+Pio组及单纯5-HD组(于I/R前24 h由尾静脉缓慢注入5羟基葵酸10 mg/kg余同I/R组),再灌注4 h后,测心肌缺血及梗死范围.多组间比较采用单因素方差分析(SNK-q检验),采用SPSS 11.0软件系统分析,P<0.05为差异具有统计学意义.结果 (1)与I/R组(34.93±5.55)%相比,Pio组梗死面积(20.24±3.93%)明显减少(P<0.05),5-HD+Pio组和5-HD与I/R组相比差异无统计学意义(P>0.05);除SO组外,其他各绀间心肌缺血面积差异无统计学意义(P>0.05).与SO组相比,I/R组P38MAPKmRNA、JNK mRNA及P38MAPK、JNKI、JNK2和NFκB P65蛋白表达水平明显增加(P<0.05);与I/R组相比Pio绀能抑制以上水平的过度表达(P<0.05).结论 吡格列酮预处理可通过减少心肌梗死范围起到抗缺血-再灌注损伤作用,该保护作用可能与开放线粒体ATP敏感性钾通道及下调P38MAPK、JNK及NF-κB P65蛋白表达活性有关.
-
运动预处理对脑缺血再灌注大鼠线粒体ATP敏感性钾通道蛋白及细胞凋亡的影响
目的 探讨运动预处理对脑缺血再灌注大鼠神经功能缺损的影响及可能机制.方法 健康Sprague-Dawley大鼠36只随机分为假手术组、模型组和运动预处理组,每组12只.后两组采用改良线栓法制备脑缺血120 min再灌注模型.再灌注2h、12h、24 h后,采用Longa评分法评定;再灌注24h后,采用Western blotting检测线粒体ATP敏感性钾(mitoKATP)通道蛋白内向整流性钾离子通道6.2 (Kir6.2)和磺脲类受体1 (SUR1)的表达,TUNEL染色检测神经细胞凋亡.结果 脑缺血再灌注24h后,与模型组比较,运动预处理组Longa评分降低(P＜0.05),Kir6.2、SUR1蛋白水平下降(P＜0.05),细胞凋亡减少(P＜0.05).结论 运动预处理可能通过调节mitoKATP通道蛋白表达,降低细胞凋亡,从而改善脑缺血再灌注后神经功能.
-
线粒体ATP敏感性钾通道开放剂二氮嗪对大鼠缺血心肌细胞的保护作用
目的 评价线粒体ATP敏感性钾通道(mito KATP)开放剂二氮嗪对缺血损伤的心肌细胞超微结构和死亡率的影响.方法 选用Wistar大鼠30只,随机分为正常对照组、心肌细胞损伤模型组(皮下注射异丙肾上腺素5 mg/kg)和二氮嗪20 mg/kg组.24 h后处死动物,观察心肌细胞超微结构的改变.结果 异丙肾上腺素皮下注射可以引起心肌细胞超微结构明显受损,预先给予二氮嗪口服可以减轻超微结构的损伤.二氮嗪10～100 μmol/L可以降低缺血心肌细胞的死亡率,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论二氮嗪对缺血损伤的心肌细胞具有保护作用.
关键词： 线粒体ATP敏感性钾通道 二氮嗪 心肌缺血 -
纳他卡林对鼠脑线粒体ATP敏感性钾通道的开放作用
目的 探讨纳他卡林对脑线粒体ATP敏感性钾通道的影响.方法急性分离大鼠脑线粒体,采用Clark氧电极法测定纳他卡林对线粒体耗氧速率的影响；采用紫外分光光度法测定纳他卡林对线粒体悬液在540 nm处的吸光值的影响,用以监测线粒体基质容积的变化.结果纳他卡林可使脑线粒体的耗氧速率增加(7.58±2.76)%(P＜ 0.05),此作用可被线粒体ATP敏感性钾通道阻断剂5-羟基癸酸(5-HD)拮抗；与空白对照组比较,纳他卡林可使脑线粒体悬液在540 nm处的吸光值显著减小(P＜0.01),即增大线粒体基质容积,此作用也可被5-HD拮抗(P＜0.01).结论纳他卡林可开放脑线粒体ATP敏感性钾通道.
关键词： 脑线粒体 纳他卡林 线粒体ATP敏感性钾通道 -
线粒体ATP敏感性钾通道在缺血预处理保护硬化肝脏中的作用
目的 研究缺血预处理(IP)对肝硬化大鼠肝脏缺血/再灌注(I/R)损伤的保护作用,探讨线粒体ATP敏感性钾通道(mitoKATP通道)在这种保护机制中的作用.方法 复制雄性肝硬化SD大鼠,随机分为6组(每组8只).IP组以肝缺血5 min再灌注10 min作预处理;IP+5-HD组是在IP组基础上,使用微量注射泵经大鼠门静脉注射mitoKATP通道特异性阻滞剂5-HD进行预处理;DE组以静脉注射mitoKATP通道选择性开放剂DE作为预处理;DE+5-HD组是在DE组基础上再予静脉注射5-HD进行预处理;对照组(C组)以静脉注射等量生理盐水作为预处理;上述5组均在预处理后行肝缺血45 min再灌注60 min;缺血方式为70%肝脏热缺血.假手术组(S组)仅行开腹,不作任何其它处理.完成预定实验操作后分别取血用于血清谷丙转氨酶(ALT)与乳酸脱氢酶(LDH)检测,切取肝组织用于测定ATP酶活力、超氧化物岐化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量、湿重/干重(W/D)的测定及观察显微、超微结构变化.结果 C组ATP酶活性与肝损伤指标ALT与LDH活性、MDA含量与W/D比值均明显高于S组(P<0.01),肝脏在光镜与电镜下的显微与超微结构损伤明显;IP组与DE组的各项肝组织损伤指标均明显好于C组,ATP酶活性低于C组(P<0.05,P<0.01),而IP+5-HD组、DE+5-HD组的肝损伤指标分别差于IP组、DE组,ATP酶活性高于IP组、DE组(P<0.05,P<0.01);在SOD活性方面,C组明显低于S组(P<0.01),IP组低于S组,高于C组(P<0.01).DE组与C组相比无差异,IP+5-HD组、DE+5-HD组SOD活性分别与lP组、DE组相比无差异(P>0.05).结论 mitoKATP通道参与IP抗肝硬化大鼠肝I/R损伤的保护效应,其作用可能与下调肝组织ATP酶活性,减少ATP大量分解,改善肝能量代谢,增加能量储备;提高肝脏的抗氧化能力;改善肝组织微循环,减轻肝脏水肿有关.
-
5-羟基癸酸盐对低氧大鼠肺动脉平滑肌细胞转化生长因子β1表达的抑制作用
目的 探讨5-羟基癸酸盐(5-HD)降低低氧性肺动脉高压的作用机制.方法 雄性SD大鼠每天(10.0±0.5)％O2处理8h,连续7d后,sc给予5-HD 5 mg·kg-1后再进行同样的低氧处理,每天1次,连续21 d.测定右心室肥厚指数(RVHI),右心导管法测肺动脉平均压(mPAP)；分别用ELISA法检测肺组织、免疫组化法检测肺动脉和支气管上皮中转化生长因子β1(TGF-B1)的表达.结果 与正常对照组比较,低氧模型组的mPAP,RVHI及TGF-β1在肺动脉及支气管上皮细胞中的表达均明显升高(P＜0 05),TGF-β1在肺组织中表达无明显升高.与低氧模型组相比,5-HD 5 mg·kg-组肺动脉平滑肌mPAP和TGF-β1表达明显下降(P＜0.05)；但RVHI及GF-β1在肺组织及支气管上皮细胞中的表达无明显变化.结论 5-HD可能是通过TGF-β1信号通路发挥抗肺动脉平滑肌细胞的增殖作用而减轻肺动脉高压.
关键词： 线粒体ATP敏感性钾通道 转化生长因子 肺动脉高压 -
线粒体ATP敏感性钾通道与心肌保护
线粒体ATP敏感性钾通道发现已10余年,因其特异开放剂和抑制剂的发现,使研究不断深入,其在抗心肌肥大和抗凋亡等心肌保护方面,尤其是预适应心肌保护作用日益突出,但其相关的信号通道及调控仍未完全清楚,本文就此展开综述.
关键词： 线粒体ATP敏感性钾通道 心肌保护 预适应 心肌肥厚 -
乙酰胆碱对离体大鼠缺血/复灌心脏的保护作用及其机制
目的:探讨乙酰胆碱(ACh)预处理抗心肌缺血复灌(L/R)损伤作用及其与线粒体渗透性转换孔和/或线粒体ATP敏感性钾通道的关系.方法:采用离体大鼠心脏Langendorlf灌流方法进行全心停灌30min,复灌120min复制I/R模型.测定心室力学指标和复灌各时间点冠脉流出液中乳酸脱氢酶(LDH)含量.实验结束测定心肌组织fonnazan含量的变化.结果:与单纯I/R组相比,ACh(0.1 μmol/L,5 min)预处理明显提高心肌细胞的formazan含量,降低复灌期间冠脉流出液中LDH含量,明显改善I/R所致的左室发展压、左心室内压大上升和下降速率、心率与发展压乘积和左室舒张末压力的下降,缓解冠脉流量的减少.线粒体渗透性转换孔开放荆苍术苷(20 μmol/L,复灌前给药20 min)和线粒体A1P敏感性钾通道抑制剂5-羟基癸酸(100 μmol/L,缺血前给药20 min)能明显减弱ACh的保护作用.结论:在大鼠离体心脏灌流模型上,ACh预处理具有抗心脏缺血/复灌损伤的作用,这种保护作用可能与其抑制线粒体渗透性转换孔的开放和促进线粒体ATP敏感性钾通道的开放有关.
关键词： 乙酰胆碱 心脏 缺血/复灌损伤 线粒体渗透性转换孔 线粒体ATP敏感性钾通道 -
葛根素对离体大鼠缺血/复灌心脏的保护作用及其作用机制
目的:探讨葛根素(puerarin,Pue)预处理抗心肌缺血/复灌(ischemia/reperfusion,I/R)损伤是否与线粒体渗透性转换孔和/或线粒体ATP敏感性钾通道有关.方法:采用离体大鼠心脏Langendorff灌流方法,全心停灌30min,复灌120min复制I/R模型.测定心室力学指标和复灌各时间点冠脉流出液中乳酸脱氢酶(LDH)含量.实验结束测定心肌组织formazan量的变化.结果:与单纯I/R组相比,Pue(0.24 mmol/L,5 min)预处理明显提高心肌细胞的formazan含量,降低复灌期间冠脉流出液中LDH含量,明显促进左室发展压、左心室内压大上升和下降速率、心率与发展压乘积和左室舒张末压力的恢复,缓解冠脉流量的减少.线粒体渗透性转换孔开放剂苍术苷(20μmol/L,复灌前给药20 min)和线粒体ATP敏感性钾通道抑制剂5-羟基癸酸(100 μmol/L,缺血前给药20 min)能明显减弱Pue的保护作用.结论:在大鼠离体心脏灌流模型上,Pue预处理具有抗心脏缺血/复灌损伤的作用,这种保护作用可能与其抑制线粒体渗透性转换孔的开放和促进线粒体ATP敏感性钾通道的开放有关.
关键词： 葛根素 心脏 缺血/复灌损伤 线粒体渗透性转换孔 线粒体ATP敏感性钾通道 -
mito KATP和κ-阿片受体介导肢体缺血后处理对抗大鼠脑缺血/复灌损伤
目的:观察肢体缺血后处理(LIPC)在大鼠局灶性脑缺血/复灌损伤中的神经保护作用及其作用机制.方法:将大鼠随机分为6组:空白对照组,单侧LIPC组,双侧LIPC组(bLIPC),bLIPC+mito KATP阻断剂5-hvdroxydecanoate(5-HD)预处理组,bLIPC+κ-阿片受体拮抗剂nor-binaltorphimine(nor-BNI)预处理组,bLIPC+双侧后肢体外循环组.采用线栓法建立大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,术后进行神经系统症状评分,血浆强啡肽和脑啡肽水平测定,大脑梗死面积测定.结果:单侧LIPC能改善大鼠局灶性脑缺血/复灌损伤后的神经系统功能评分(P＜0.05),并减少大脑梗死面积(P＜0.01);而双侧LIPC能显著提高大鼠局灶性脑缺血/复灌损伤后的神经系统功能评分,并显著减少大脑梗死面积(P＜0.01),比单侧LIPC的作用更为明显(P＜0.05).双侧LIPC后5、15、30 min,1和2 h这五个时间点,血浆强啡肽水平显著增高(P＜0.01),12和24 h这两个时间点恢复至正常水平;而血浆脑啡肽水平的改变与双侧LIPC前比较无显著差异(P＞0.05).nor-BNI预处理(25 nmol)和5-HD预处理(10mg/kg)均消除了双侧LIPC所致的神经系统功能评分增加和大脑梗死面积减少(P＜0.01).结论:LIPC在大鼠局灶性脑缺血/复灌损伤中具有显著的神经保护作用,其作用可能与LIPC诱导内源性阿片激动剂释放和激活mito KATP有关.
-
选择性激活线粒体ATP敏感性钾通道抗心肌缺血作用的药理学特征
冠心病严重危害人类健康,是影响生存率和死亡率的主要原因之一,人们一直试图寻找一种能对冠心病心肌缺血产生确切保护作用的药物.目前使用的抗心肌缺血药物主要有硝酸酯类、钙离子拮抗剂、β-受体阻滞剂,由于这些药物不同程度的具有耐药、低血压、和负性肌力作用,使临床应用受到一定限制.
关键词： 线粒体ATP敏感性钾通道 心肌缺血 -
二氮嗪对大鼠脑缺血再灌注细胞凋亡的影响
目的 研究二氮嗪开放线粒体ATP敏感性钾通道对大鼠脑缺血再灌注细胞凋亡的影响.方法 采用线栓法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,将20只大鼠随机分成4组,假手术组、缺血组、缺血+二氮嗪治疗组和缺血+二氮嗪+MitoKATP通道特异性抑制剂5-HD组.观察各组凋亡细胞数和凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的变化.结果 与缺血组比较,二氮嗪使凋亡细胞数明显减少(83.2±9.04 vs 123.96±13.45),Bcl-2表达增高(0.17±0.01 vs 0.13±0.01),Bax表达下降(0.15±0.02 vs 0.20±0.03),差异具有显著性(P＜0.05).5-HD能取消这些作用(P＜0.05).结论 局灶性脑缺血再灌注损伤时,二氮嗪能通过上调半暗带区Bcvl-2蛋白表达,下调Bax蛋白表达,减少神经元凋亡,对脑缺血损伤起保护作用.
关键词： 线粒体ATP敏感性钾通道 脑缺血 凋亡 大鼠 -
开放线粒体ATP敏感性钾通道对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用
目的研究开放线粒体ATP敏感性钾通道对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的作用.方法采用线栓法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,将38只大鼠随机分成4组:假手术组(S)、缺血组(I)、缺血+二氮嗪组(D)、缺血+二氮嗪+5-HD组(DH).观察各组脑梗死体积和线粒体标志酶活性变化.结果与I组比较,D组脑梗死体积明显减少(自23.57±7.83%减至8.16±3.81%),线粒体标志酶活性明显增高,差异具有显著性(P<0.05),DH组与I组比较无明显差异(P>0.05).结论二氮嗪对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤具有保护作用,其机制与开放线粒体ATP敏感性钾通道,维护线粒体功能有关.
关键词： 线粒体ATP敏感性钾通道 脑缺血 再灌注损伤 -
线粒体ATP敏感钾通道开放剂对大鼠肺缺血-再灌注损伤的保护作用
目的 探讨线粒体ATP敏感钾通道开放剂二氮嗪(DE)对肺缺血-再灌注损伤(I/R)的保护作用.方法 建立大鼠肺I/R模型,随机设立假手术(sham)组、I/R组、DE组、线粒体ATP敏感钾通道阻断剂5-羟基葵酸(5-HD)组,每组10只,观察各组肺组织病理形态学变化,测定肺湿/干质量比,检测肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性、丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性.结果 与sham组比较,I/R组肺组织出现明显损伤性病理形态学变化,肺湿/干质量比明显增加(P<0.05),肺组织MPO活性显著增高、MDA含量显著增加和SOD活性显著降低(P<0.05).与I/R组比较,DE组肺组织损伤明显减轻,肺湿/干质量比降低(P<0.05),肺组织MPO活性降低、MDA含量减少、SOD活性增高(P< 0.05).5-HD组各观察指标与I/R组差异无统计学意义(P>0.05).结论 线粒体ATP敏感钾通道开放剂DE可通过抑制中性粒细胞聚集、减少自由基产生、增强抗氧化能力对大鼠肺缺血-再灌注损伤产生明显保护作用,该保护作用可被线粒体ATP敏感钾通道阻断剂5-HD所拮抗.
关键词： 肺 缺血-再灌注损伤 线粒体ATP敏感性钾通道 氧化应激 大鼠 -
鱼藤酮对SH-SY5Y细胞线粒体膜电位的影响
[目的]探讨环境毒素鱼藤酮对人多巴胺能神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞线粒体膜电位的影响以及线粒体ATP敏感性钾通道(Mitochondrial ATP-sensitive potassium channel,mKATP channel)在其中的作用.[方法]先用0、5、20、100 nmol/L浓度的鱼藤酮单独处理SH-SY5Y细胞,观察鱼藤酮与线粒体膜电位下降的量效关系;然后在此4组中分别按加和不加mKTP通道抑制剂5-羟葵酸(5-Hydroxydecanoate,5-HD)0.5 mmol/L和(或)激活剂二氮嗪(Diazoxide,DZX)1.0 mmol/L与不同浓度鱼藤酮共同作用,观察细胞线粒体膜电位的变化.细胞线粒体膜电位的检测采用罗丹明绿色荧光负载、流式细胞仪测量荧光强度的方法.[结果]5、20和100 nmol/L鱼藤酮作用24 h分别导致SH-SY5Y细胞线粒体膜电位下降至对照组的91.76%、71.21%和49.65%,膜电位下降程度与鱼藤酮剂量相关;DZX单独作用使线粒体膜电位下降了13.45%,DZX与5和20nmol/L鱼藤酮共同作用分别下降至对照组的75.32%和66.06%,比同浓度鱼藤酮单独作用更加明显;5-HD可抵消DZX的上述作用,5-HD与5 nmol/L鱼藤酮共同作用时可减轻鱼藤酮引起的细胞膜电位下降.[结论]鱼藤酮可以引起SH-SY5Y细胞线粒体膜电位下降;小剂量鱼藤酮(5和20 nmol/L)能开放mKATP通道,该作用可被5-HD逆转;与DZX相比,小剂量鱼藤酮只能激活某一类型的mKATP通道,这是它导致线粒体膜电位下降的机制之一.大剂量鱼藤酮降低线粒体膜电位的机制中mKATP通道的作用较小.
关键词： 鱼藤酮 线粒体膜电位 线粒体ATP敏感性钾通道 -
二氮嗪预处理对大鼠肝窦内皮常温缺血再灌注损伤的影响
目的:通过观察二氮嗪(Diazoxide)预处理对大鼠肝窦内皮常温缺血再灌注损伤(I/RI)的影响,探讨线粒体ATP敏感性钾通道(MitoKATP)在其中的可能作用.方法:32只成年健康雄性SD大鼠,随机分为4组,每组8只:①假手术组(Sham组);②对照组(Control组),进腹后行部分肝脏缺血再灌注(I/R);③二氮嗪组(Dia组),在行肝I/R前10 min,静注Diazoxide(5 mg·kg-1);④5-HD+Dia组,在行肝I/R之前20 min静注5-HD(10 mg·kg-1),10 min后静注Diazoxide(5 mg·kg-1).再灌注90 min时测定各组血清谷丙转氨酶(ALT)、透明质酸(HA)水平和肝脏一氧化氮(NO)、内皮素(ET)含量;并进行肝组织病理形态学观察,包括光镜HE染色和透射电镜(TEM)超微结构检查;免疫组化检测细胞间粘附分子(ICAM-1)的表达.结果:与Sham组相比,Control组的血清ALT和HA水平,肝组织ET含量均明显升高(P＜0.05);而肝组织NO含量明显降低(P＜0.05).与Control组相比,Dia组的ALT、HA及ET含量都降低(P＜0.05),肝组织中NO的含量升高.5-HD完全抵消了Dia的作用.HE染色和TEM检查提示Dia组较明显地减轻损伤,而5-HD+Dia组则与Control组相似.Dia组肝窦内皮细胞膜ICAM-1表达比例明显减少,且染色较淡,组间比较有显著差异(P＜0.05);5-HD可以抵消Diazoxide减少ICAM-1表达的效应.结论:线粒体ATP敏感性钾通道(MitoKATP)开放剂的预处理对后继的肝脏I/RI中肝窦内皮的损伤有较好的保护作用.
关键词： 二氮嗪 线粒体ATP敏感性钾通道 预处理 肝缺血再灌注 -
二氮嗪对长时程低温保存大鼠心脏Fas/FasL蛋白表达的影响
本文旨在研究线粒体ATP敏感性钾(mitochondrial ATP-sensitive potassium channel,mitoKATP)通道开放剂二氮嗪(diazoxide,DE)对离体长时程低温保存的大鼠心脏促凋亡蛋白Fas和FasL表达的影响.利用Langendorff离体大鼠心脏灌注法,观察心脏在4 oC含或不含(对照组)DE的Celsior保存液保存8 h后,复灌期心脏作功量(rate-pressure product,RPP)变化情况,采用原位末端标记(TdT-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL)染色法检测心肌细胞凋亡和免疫组织化学方法检测Fas和FasL蛋白表达情况.结果显示,在Celsior保存液中加入DE(30 pmol/L),复灌期RPP的恢复率在多个复灌时间点上优于对照组;同时可降低长时程低温保存心脏心肌细胞凋亡指数,减少Fas和FasL蛋白的表达.DE的上述作用可被mitoKAxr通道特异性阻断剂5.羟基葵酸盐(5-hydroxydecanoate,5-HD)所取消.以上结果提示,DE可能通过激活mitoKATP通道来减少Fas和FasL蛋白表达,从而减轻大鼠心肌缺血/再灌注损伤后的心肌细胞凋亡.
关键词： 二氮嗪 Fas/FasL 线粒体ATP敏感性钾通道 心脏保存 心肌保护 -
一氧化氮和线粒体ATP敏感性钾通道介导血管紧张素转换酶抑制剂加强阈下预处理的作用
实验采用离体大鼠心脏Langendorff灌流模型,观察含巯基(卡托普利)和不含巯基(培哚普利拉)的两种血管紧张素转换酶抑制剂(angiotensin-converting enzyme inhibitors,ACEI)对抗心肌缺血的作用,并探讨一氧化氮(nitric oxide,NO)和线粒体ATP敏感性钾通道(mitochondrial ATP-sensitive potassium channel,mitoKATP channel)是否参与ACEI的心肌保护作用.结果表明:(1)给予大鼠心脏2 min全心停灌和10 min复灌作为阈下缺血预处理(subthreshold preconditioning,sPC)、卡托普利或培哚普利拉单独使用,均不能改善长时间缺血复灌(缺血30 min+复灌120 min)引起的心肌损伤.(2)当两种ACEI分别和sPC联合使用时,与sPC组相比,缺血心脏在长时间缺血后的复灌期间左室舒张末压(left ventricular end-diastolic pressure,LVEDP)明显降低,左室发展压(left ventricular developed pressure,LVDP)和冠脉流量明显增高,乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)的释放量和心肌梗死面积明显低于sPC组.(3)利用NOS抑制剂L-NAME和mitoKATP通道的抑制剂5-HD灌流10 min后,可明显抑制卡托普利/培哚普利拉和sPC联合使用引起的LVEDP降低,并使LVDP和冠脉流量降低,LDH的释放量和心肌梗死面积明显增高(P＜0.05).(4)sPC、卡托普利或培哚普利拉单独使用,心脏NO的产生增加.ACEI和sPC联合使用,与三者单独使用相比NO的浓度亦明显增高(P＜0.05).结果提示:含与不含巯基的ACEI与阈下缺血预处理联合使用均可使大鼠心脏功能明显改善,其心肌保护作用的机制可能通过NO途径,并和mitoKAP通道的激活有关.
关键词： 血管紧张素转换酶抑制剂 一氧化氮 线粒体ATP敏感性钾通道 心脏 预处理
