酸性成纤维细胞生长因子对庆大霉素和顺铂所致肾小管上皮细胞损伤的保护作用

目的:研究酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)对庆大霉素(GM)和顺铂(DDP)引起的体外培养肾小管上皮细胞损害的保护作用.方法:大鼠肾皮质经研磨、过网、胰蛋白酶消化,进行肾小管上皮细胞的体外培养.经Cytokeratin 18抗体进行鉴定后,用GM、DDP建立损伤模型,观察aFGF对损伤的肾小管上皮细胞的保护作用.结果:①经形态学观察、GM或DDP组与对照组比较,CAT、SOD、GSH-Px、Na+-K+-ATP酶活性下降,而NAG活性和NO、MDA升高(P＜0.01或P＜0.05),提示肾小管上皮细胞的培养和GM、DDP损伤的建模成功.②aFGF+GM或DDP组与GM组或DDP组比较,大多数生化和酶学指标有显著或非常显著性差异(P＜0.05或P＜0.01);而aFGF+GM或DDP组与对照组比较,CAT、NAG、GSH-Px、Na+-K+-ATP酶活性无显著性差异,但SOD活性下降、NO、MDA升高尚有显著性差异(P＜0.05).结论:aFGF对GM、DDP损伤的肾小管上皮细胞有明显的保护作用.

改构型酸性成纤维细胞生长因子对细胞增殖活性的影响

目的:研究aFGF和MaFGF对正常的肾小管上皮细胞及胃癌细胞增殖的影响.方法:用不同浓度的aFGF和MaFGF分别作用于肾小管上皮细胞及胃癌细胞,48h后采用WST-8法测定aFGF和MaFGF对两种细胞的促增殖活性.结果:在各浓度下,MaFGF组对肾小管上皮细胞和胃癌细胞的促增殖作用都显著低于aFGF组.结论:MaFGF对肾小管上皮细胞及胃癌细胞的促分裂活性较aFGF明显下降.

血管生成素相关蛋白-2的研究进展

血管生成与机体的生理、病理有着密切的关系,胚胎发育过程中血管的生成、器官再生、创伤愈合、炎症反应以及实体肿瘤的生长与转移等都与血管生成有关.因此,寻找与血管生成相关的生长因子,成为当前心血管分子生物学研究的一个热点和重点.近年来,人们已发现一些与血管生成有关的因子,例如血管内皮生长因子(VEGF)、碱性/酸性成纤维细胞生长因子(b/a FGF)、血小板源性生长因子(PDCF)、表皮生长因子/转化生长因子a(EGF/TGF-α)、血管生成素(Ang)等,近发现的血管生成素相关蛋白-2(ARP 2)也是一种与血管生成有关的重要细胞因子.本文讨论ARP 2的发现、结构、功能和应用前景.

氯化两面针碱对肝、肾的毒性及酸性成纤维细胞生长因子对其的保护作用研究

目的:观察氯化两面针碱在体外对人胚肝细胞L-02,人胚肾细胞293的毒性作用,及酸性成纤维细胞生长因子(aF-GF)对氯化两面针碱引起的肝、肾细胞损伤的保护作用.方法:采用MTT法检测不同浓度氯化两面针碱对人肝、肾细胞的毒性,及加入aFGF后对肝、.肾细胞的IC50值的影响.采用紫外分光光度法测定培养上清液中的SOD、MDA、LDH值.结果:aFGF可明显提高人胚肝细胞L-02、人胚肾细胞293的IC50值.aFGF保护组与氯化两面针碱损伤组的SOD、MDA 和LDH测定结果有显著性差异(P＜0.05).结论:氯化两面针碱对人胚肝细胞L-02和人胚肾细胞293有一定毒性,加入aFGF后,可明显减轻氯化两面针碱对人胚肝细胞L-02和人胚肾细胞293的毒性作用.

酸性成纤维细胞生长因子对大鼠动脉血栓形成的影响

人类很多突发的损伤(如烧伤、电击)以及动脉粥样硬化等都可以引起血管内皮细胞的损伤,内皮下成分暴露,血栓形成.血管栓塞是一种威胁人类身体健康的疾病,可以引起心脏、大脑突然缺血导致猝死.前期研究已表明碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对电击所致大鼠动脉血栓形成有抑制作用[1-2].本实验通过建立大鼠颈总动脉血栓形成的实验模型[3],进一步探讨酸性成纤维细胞生长因子(acidic fibroblast growth factor,aFGF)对大鼠动脉血栓形成的影响及量效关系.1 材料和方法

白花丹素的体外肾毒性及酸性成纤维细胞生长因子对白花丹素所致肾损伤的保护作用

目的:观察白花丹素在体外对人胚肾细胞293的毒性,以及酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)对白花丹素所致肾损伤的保护作用.方法:采用四噻唑蓝(MTT)法检测不同浓度白花丹素对人胚肾细胞293的毒性,以及aFGF对白花丹素IC50值的影响,并测定培养上清液中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二酰二醛(MDA)和乳酸脱氢酶(LDH)的活性.结果:白花丹素在体外对人胚肾细胞293的毒性呈现剂量依赖性,24、48和72 h的 IC50值分别为(150.421±3.014)、(88.426±1.965)和(84.811±1.035) μg/mL.在aFGF作用下,24、48和72 h的IC50值分别升至(342.624±2.887)、(176.835±1.097)和(133.278±1.124) μg/mL.aFGF保护组与白花丹素损伤组的SOD、MDA和LDH测定结果有显著性差异(P<0.05).结论:白花丹素可抑制人胚肾细胞293的增殖,对肾脏有一定的毒性.aFGF对白花丹素所致肾损伤有明显的保护作用.

酸性成纤维细胞生长因子基因转染猪慢性缺血心肌促进侧支血管的增生

目的:探讨人酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)基因重组腺病毒载体(Ad.aFGF)转染缺血心肌后促进侧支血管增生的作用.方法:实验用小型猪开胸于左冠回旋支(Lc x)放置Ameroid环,4周后,将Ad.aFGF(n=7)、Ad.Null(n=6)、PBS (n=6 )直接注射到Lcx供血区域,每只10点,每点109 pfu或100 μl;4周后心脏超声检测局部心功能的改善,体外冠状动脉造影观察侧支血管的增生,注射点心肌Ⅷ因子免疫组化染色检测心肌中的新生血管.结果:冠状动脉造影显示 Ad.aFGF组较其他两组心肌中有明显的侧支血管增生,局部室壁功能显著提高;Ⅷ因子免疫组化染色显示Ad.aFGF组心肌中新生血管的密度显著高于另两组 (P<0.01).结论:Ad.aFGF转染慢性缺血心肌后可促进侧支血管增生,可以成为治疗缺血性心脏病的有效途径.

转染酸性成纤维细胞生长因子基因的自体内皮祖细胞移植促小型猪慢性心肌缺血模型血管新生

酸性成纤维细胞生长因子治疗中小面积深Ⅱ°烧伤创面

目的 探讨酸性成纤维细胞生长因子(rhaFGF)治疗中小面积深Ⅱ°烧伤创面的疗效.方法 80例患者随机分成治疗组和对照组,治疗组创面使用rhaFGF(100u/0.1mL/cm2)湿纱布后再用凡士林覆盖,无菌纱布包扎,对照组创面直接用凡士林纱布覆盖后无菌纱布包扎.结果 治疗组创面平均愈合时间为16.56±3.36d,无一例瘢痕形成.对照组创面平均愈合时间为21.56±4.27d,有6例出现瘢痕增生.结论 rhaFGF治疗中小面积深Ⅱ°烧伤创面疗效满意.

酸性成纤维细胞生长因子治疗烧伤残余创面的应用

目的 观察酸性成纤维细胞生长因子(rhaFGF)治疗烧伤残余创面的疗效.方法 将60例患者随机分成治疗组和对照组,治疗组使用rhaFGF(100U/0.1mL/cm2)湿纱布覆盖创面,对照组使用0.1%雷夫诺尔湿纱布覆盖创面,两组均用数层无菌纱布包扎固定.结果 治疗组平均愈合时间为16.52±4.76d,有1例出现瘢痕增生,瘢痕较薄较轻,无功能影响.对照组平均愈合时间25.38±4.26d,有9例产生瘢痕增生,其中有2例出现挛缩,功能活动受限.结论 rhaFGF治疗烧伤残余创面疗程短,效果显著.

afgf和TGFβ1联合诱导猪牙乳头细胞向成牙本质样细胞分化

目的 建立猪牙乳头细胞向成牙本质样细胞分化的体外诱导方案.方法 联合应用aFGF和TGFβ1对体外培养的猪牙乳头细胞进行平面诱导,观察诱导后细胞的形态学变化,通过Von Kossa 染色检测诱导后细胞的矿化能力,并采用免疫荧光染色和RT-PCR检测成牙本质细胞特异性标志物--DSP蛋白和DSPP mRNA在诱导后细胞中的表达. 结果诱导后部分细胞出现细长的单侧细胞突起,在矿化液培养2周后形成典型的矿化结节,并且表达DSP蛋白和DSPP mRNA. 结论 联合应用aFGF和TGFβ1可以诱导体外培养的猪牙乳头细胞向成牙本质样细胞分化.

单独或联合应用酸性成纤维细胞生长因子与转化生长因子对猪牙乳头细胞增殖的影响

目的 研究酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)和转化生长因子(TGF)β1单独或联合应用后对猪牙乳头细胞(pDPCs) 增殖的影响.方法 通过体外细胞培养技术,用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测aFGF、TGF β1不同浓度、不同时间单独及联合应用后对pDPCs增殖的影响,所得数据用单因素方差进行分析.结果 aFGF在5～100 ng/ml和8 d范围内能促进pDPCs增殖,强效应浓度为10 ng/ml和25 ng/ml,强效应时间为8 d;TGF β1在5～50 ng/ml和8 d范围内能抑制pDPCs增殖,其中以5 ng/ml和10 ng/ml抑制作用较弱;以aFGF强效应浓度与TGF β1较弱抑制浓度交互联合后对pDPCs有显著的促进增殖作用,其中以aFGF 25 ng/ml+TGF β1 10 ng/ml的效果明显.结论 在一定的浓度范围内,aFGF促进pDPCs增殖,TGF β1抑制pDPCs增殖,两者联合可以促进pDPCs增殖.

酸性成纤维细胞生长因子复合胶原海绵的制备及其疗效观察

以Ⅰ型胶原蛋白、酸性成纤维细胞生长因子(acid Fibroblast Growth Factor,aFGF)为主要原料,研制一种新型的创伤敷料,并对其进行了临床试验.制备高纯度的Ⅰ型胶原蛋白溶液,透析至中性,加入aFGF溶液冷冻干燥成为海绵体.再进行生物安全性评价试验,包括急性毒性试验、刺激性试验、致敏试验、溶血性试验、细胞毒性试验以及动物体内埋植试验;在临床上选取开放性创面进行贴敷,评价其治疗效果.结果:aFGF胶原海绵的毒理学试验结果均呈阴性,在兔肝埋植试验中未见异常反应,8周内降解;临床上应用具有促进创面愈合,阻止渗液溢出的效果.所研制的aFGF胶原海绵无毒副作用,具有良好的临床疗效,具备推广应用的前景.

酸性成纤维细胞生长因子的生物学特性

酸性成纤维细胞生长因子作为成纤维细胞生长因子家族的成员之一,不但具有促使DNA的合成、细胞分裂和分化等促分裂活性,而且还具有舒张血管、缺血保护、神经调节和保护等内分泌激素样活性.促分裂活性与其多肽的三维结构紧密相关,其中受体结合区、核转位区和肝素结合区在促分裂活性中具有重要地位.对于酸性成纤维细胞生长因子具有的内分泌激素样活性也与其蛋白质结构有关.

酸性成纤维细胞生长因子在培养的乳鼠心肌细胞中分泌表达及其意义

目的:研究非促分裂型haFGF(non-mitogenic human acidic fibroblast growth factor,nm-haFGF)真核表达载体(pSecTag/nm-haFGF)在原代培养的新生SD乳鼠心肌细胞中的分泌表达及其对心肌细胞生理特性的影响.方法:采用脂质体转染的方法将真核表达载体pSecTag/nm-haFGF转染原代培养的心肌细胞,转染48h后用免疫印迹法(western blotting)检测nm-haFGF的表达状况,同时用H2O2造成心肌细胞损伤,观察nn-haFGF对心肌细胞的保护作用,并观察心肌细胞生理特性的变化.结果:转染后48h,心肌细胞在转染nm-haFGF基因后能够表达目标蛋白,而空载体实验组和未转染组均为阴性;MTF法检测结果表明,nn-haFGF基因的表达产物具有生物活性,对H2O2造成的心肌细胞损伤有一定的保护作用;pSecTag/nm-haFGF组的细胞搏动率明显高于阴性对照组,nn-haFGF基因的表达产物对维持心肌细胞的生理特性具有积极的作用.结论:转染nh-haFGF cDNA能够在原代培养的SD乳鼠心肌细胞中分泌表达,并具有其相应的生理活性,对H2O2损伤的心肌细胞具有保护作用.

aFGF重组腺病毒载体的构建、转染效率和使用安全性的初步研究

目的旨在构建人酸性成纤维细胞生长因子(acidic fibroblast growth factor,aFGF)重组腺病毒载体,为基因转染的研究作准备.方法将用于转染的重组粘粒和DNA-TPC混合后,以磷酸钙共沉淀法转染包装细胞293细胞,获取重组腺病毒.结果重组腺病毒DNA经酶切鉴定为正确,所得重组腺病毒为E1缺陷型并带有aFGF基因.同时证明重组腺病毒体外转染效率高且使用安全.结论此重组缺陷型腺病毒载体可用于体内基因治疗研究.

大鼠肠缺血-再灌注损伤中FGFR2表达的规律

目的 观察酸性成纤维细胞生长因子受体2(acid fibroblast growth factor receptor, FGFR2 )在肠缺血-再灌注损伤中表达规律.方法 以大鼠肠系膜上动脉(SMA)夹闭造成肠缺血-再灌注损伤模型,并将动物随机分为假手术组(C组)、生理盐水对照组(R组)、改构体aFGF治疗组(F组).除假手术组外,其余各组动物均于缺血45 min后于2、6、12、24 h活杀,取小肠组织标本,免疫组化和RT-PCR检测FGFR的表达规律.结果 在正常大鼠,FGFR分布在小肠绒毛上皮细胞的肠腔侧、侧壁和小肠隐窝朝向隐窝腔的一侧的细胞膜上.缺血和再灌注的初期,FGFR的表达未发生明显变化,随着再灌注时间的延长逐渐增强.FGF使FGFR的表达有明显的增强和提前表达.缺血和再灌注使FGFR mRNA的表达迅速增加,在再灌注后6 h达到高峰.F组FGFR mRNA的表达较R组相应时间点显著增加(P<0.05).结论 FGFR在肠缺血-再灌注损伤的修复中起积极作用.

酸性成纤维细胞生长因子复合胶原蛋白对兔前交叉韧带重建后腱-骨愈合的影响

目的 观察酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)复合胶原蛋白对兔前交叉韧带(ACL)重建后腱-骨界面愈合的影响.方法 将30只新西兰白兔随机分为实验组与对照组,每组15只,均取趾长伸肌腱作为移植物.实验组将aFGF/胶原蛋白复合物植入到重建的ACL腱-骨界面,对照组单纯行ACL重建.于术后第4、8、12周分别处死动物取材,将股骨与胫骨端分别固定于生物力学试验机上,测试移植肌腱的腱-骨界面抗拉伸强度,取其绝对值作比较;同时,将股骨隧道和胫骨隧道纵向剖开,取下标本组织学观察移植物界面愈合情况.结果 术后第4、8、12周抗拉力强度实验组强于对照组,差异有统计学意义(P<0.001).两组动物均在第4周时移植物与骨隧道之间均形成了纤维结缔组织.术后第12周,实验组肌腱移植物在骨隧道内形成了纤维软骨移行带,类似于正常的纤维软骨连接,而对照组则形成了走向与骨隧道轴向垂直的Sharpey样纤维.结论 aFGF复合胶原蛋白能促进兔ACL重建腱-骨界面的早期直接愈合.

酸性成纤维细胞生长因子对体外培养肾小管上皮细胞存活与增殖的影响

目的 探讨酸性成纤维细胞因子(aFGF)对体外培养的大鼠肾小管上皮细胞生长的影响.方法 通过酶消化法获取肾小管上皮细胞.将aFGF(低、中、高浓度)加入培养液中作为实验组,不加aFGF的作为对照组.分别在12、24、48和72h进行细胞计数及形态学观察.结果 从大鼠肾成功地获取了肾小管上皮细胞.干预72h内,实验组和对照组的肾小管上皮细胞都有不同程度地增殖,12h内各组无明显区别,24、48、72h实验组与对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05).结论 aFGF有明显的促进肾小管上皮细胞存活与增殖的作用,存在剂量-效应和时间-效应关系.

酸性成纤维细胞生长因子对庆大霉素诱导的肾小管上皮细胞损伤的保护作用

目的 研究酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)对庆大霉素引起的体外培养的大鼠肾小管上皮细胞损害的保护作用.方法 大鼠肾皮质经研磨、过网、胰蛋白酶消化,进行肾小管上皮细胞的体外培养.用庆大霉素建立损伤模型,观察aFGF对损伤的肾小管上皮细胞的保护作用.结果 ①经形态学观察、GM组与对照组比较,CAT、SOD、Na+,K+-ATP酶活性下降,而NAG活性和MDA升高(P＜0.01),提示肾小管上皮细胞的培养和庆大霉素损伤的建模成功.②aFGF+GM组与GM组比较,各生化和酶学指标差异均有显著性(P＜0.01);而aFGF+GM组与对照组比较,CAT、NAG、Na+,K+-ATP酶活性差异无显著性,但SOD活性下降、MDA升高差异仍有显著性(P＜0.05).结论 aFGF对庆大霉素诱导的肾小管上皮细胞损伤有明显的保护作用.