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ASC和p16基因启动子甲基化与非小细胞肺癌发生发展的关系
目的探讨ASC和p16基因启动子甲基化与非小细胞肺癌发生发展的关系.方法应用甲基化特异性PCR(MSP)检测非小细胞肺癌中ASC和p16基因启动子的甲基化发生率.结果48例非小细胞肺癌中ASC和p16基因启动子甲基化的发生率分别为47.9%和37.5%,显著高于癌旁正常组织(P＜0.001);重度吸烟患者的肿瘤组织中ASC和p16基因启动子甲基化的发生率明显增高(P＜0.05);ASC基因启动子甲基化在较小的肿瘤组织中的有较高的发生率(P＜0.05).而且,重度吸烟患者的正常肺组织中亦可检测到ASC基因启动子的甲基化.结论ASC和p16基因启动子的甲基化在非小细胞肺癌中有较高的发生率.ASC基因启动子的频繁甲基化可能与吸烟引起的非小细胞肺癌有关,并且ASC基因甲基化有可能是非小细胞肺癌发展过程中的一个早期事件.
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大鼠肝癌组织中DLC1、ASC、p16和DLK1基因甲基化状态与肝癌的关系
目的 探讨大鼠肝癌组织中DLC1、ASC、p16和DLK1基因启动子区甲基化状态与肝癌发生的关系.方法 55只Wistar雄性大鼠随机分为黄曲霉毒素B1(Aflatoxin B1,AFB1)实验组(35只)和空白对照组(20只),用AFB1诱发大鼠肝癌并建立大鼠实验动物肝癌模型.用甲基化特异性PCR(MS-PCR)技术和琼脂糖凝胶电泳方法检测大鼠肝癌组织及正常肝脏组织中DLC1、ASC、p16和DLK1基因启动子区的甲基化情况,分析4个基因的甲基化状态与肝癌发生的关系.结果 在实验第52周可见大鼠肝脏发生典型的肝癌病理学改变,实验诱发大鼠肝癌模型制作成功.MS-PCR技术检测显示在大鼠肝癌组织中DLC1、ASC、p16和DLK1基因启动子区的甲基化率分别为83.3％、93.3％、86.7％和10.0％,在大鼠正常肝脏组织中的甲基化率分别为14.3％、35.7％、21.4％和85.7％,二者比较差异均有统计学意义(P均＜0.05).琼脂糖凝胶电泳法检测显示4种基因甲基化均为阳性.结论 大鼠肝癌组织中DLC1、ASC、p16基因启动子区高度甲基化,DLK1基因启动子呈低甲基化水平,提示DLC1、ASC、p16和DLK1基因启动子区的异常甲基化与大鼠肝癌发生的关系密切.
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ASC与Caspase-1在PBC患者外周血中的表达研究
目的 探讨ASC与Caspase-1在原发性胆汁性肝硬化(PBC)发病过程中的影响.方法 采用实时荧光定量PCR、Western blot、焦磷酸测序及ELISA等方法分别检测30例 PBC患者及健康对照者外周血单个核细胞(PBMC)中Caspase-1与ASC的mRNA和蛋白的相对表达情况,以及ASC启动子区甲基化状况和血浆中Caspase-1和IL-18的表达水平.结果 PBC组患者PBMC中Caspase-1、ASC mRNA和蛋白表达明显高于对照组(P<0.05).ASC启动子区域Island 1(IS1)各位点甲基化率明显低于对照组(P<0.05),Island 2(IS2)各位点甲基化率小于背景值,未发生甲基化.PBC组血浆中Caspase-1与IL-18的水平明显高于对照组(P<0.05).ASC mRNA与Caspase-1 mRNA的表达呈明显正相关(P<0.05);ASC启动子区域IS1的第1、2、4和5位点的甲基化率与ASC mRNA的表达均呈负相关(P<0.05),第3、6位点甲基化率则与其表达无相关性(P>0.05);血浆中Caspase-1与IL-18水平呈明显正相关(P<0.05).结论 ASC和Caspase-1参与了PBC的免疫炎性反应.
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LPS对支气管哮喘气道炎症中ASC表达的影响
目的 探讨凋亡相关点样蛋白(apoptotic speck-like protein containing a caspase recruitment domain,ASC)在支气管哮喘小鼠肺组织中的表达情况,以及脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对其的调节作用.方法 SPF级雌性C57BL/6小鼠24只,6～8周,18～20 g/只,随机分为3组,分别为PBS对照组(A)、哮喘组(B) 、LPS干预组(C).B、C组小鼠以卵蛋白(OVA)致敏并激发,其中C组在激发前给予10 μg/只的LPS腹腔注射,连续3d;A组用PBS溶液替代OVA致敏和激发.末次激发24 h后,记录各组小鼠的气道反应性监测指标增强呼气间歇(Penh)值.取右上肺组织常规HE染色,光学显微镜下观察组织形态,气管和血管周围炎症细胞浸润情况;行ASC免疫组化,观察其在各组肺组织中的分布情况.采用方差分析进行多组间比较.结果 对比A、B组小鼠行为学变化、气道反应性及肺组织病理,显示哮喘小鼠造模成功;C组气道反应性[(1.75±0.46)至(6.53±0.81)]较B组[(4.05±0.22)至(12.07±0.91)]下降,差异有统计学意义(P＜0.05);免疫组化提示ASC在哮喘模型中较对照组高表达,而10 μg的LPS可明显增加哮喘小鼠中气道上皮的ASC表达.结论 ASC参与哮喘中炎症反应的发生;一定剂量的LPS可加重哮喘小鼠气道上皮炎症,增强ASC在炎症中的参与,但降低哮喘小鼠气道高反应性.
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除湿通痹方对急性痛风性关节炎大鼠炎症级联反应的作用
目的 探讨除湿通痹方对急性痛风性关节炎炎症级联反应的作用.方法 SD大鼠随机分为空白组、模型组、秋水仙碱组,除湿通痹方高、中、低剂量组共6组,每组10只,于给药前1d和给药第6天,除空白组给予生理盐水外,其余5组复制急性痛风性关节炎模型,连续灌胃22d后处死采取标本取材,观察各组大鼠关节肿胀度、功能障碍指数和炎症指数、测定IL-1β、TNF-α浓度,检测caspase-1、ASC、NLRP3基因表达,并分析其关系.结果 各给药组对急性痛风性关节炎大鼠活动障碍均有缓解作用;秋水仙碱组TNF-α表达水平显著低于模型组(P＜0.05):秋水仙碱组及除湿通痹方高剂量组IL-1β、caspase-1、ASC、NLRP3表达水平显著低于模型组(P＜ 0.05);caspase-1、ASC、NLRP3均与IL-1β存在相关性(P＜0.05);TNF-α与ASC存在相关性(P＜0.05).结论 秋水仙碱及除湿通痹方高剂量能通过抑制NLRP3炎性体的表达,从而抑制IL-1β相关的炎性过程,发挥其抗炎免疫作用.
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探讨体质因素对AsC人群生命质量的影响
无症状慢性乙肝病毒携带者(Chronic asymptomatic HBV carrier,AsC)在临床上没有明显的症状和体征.通过文献研究及问卷调查,对AsC这一特殊人群的生命质量与中医体质因素的相关性进行了理论探讨,认为AsC人群的生命质量显著低于非携带的一般人群,且与该人群的体质特征有着密切的关联,气虚气郁质对其健康相关生命质量的影响大.
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对乙肝病毒表面抗原携带者治疗措施的探析
乙肝病毒表面抗原携带者(ASC)是指乙肝病毒表面抗原阳性,无明显临床症状肝功能正常者,其临床共识:"不主张积极治疗",随着对这类人群的深入研究、追究观察,发现这部分人群病情呈隐匿性发展,慢性肝损害、肝硬化,甚则肝癌发生.严重影响人们的身心健康,健康携带者并不健康,已引起临床工作者的重视,由于既往对ASC的治疗研究尚不深入,认识尚不统一,治疗措施如何都值得探析.
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宫颈细胞学ASC和HPV联合检测的临床意义
在宫颈癌的筛查过程中,TCT或HPV检测结果与两种方法联合检测结果比较差异显著,联合检测是筛查宫颈病变的有效方法,可提高宫颈病变结果的正确率。
