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HER2银染色原位杂交结果与前处理条件的相关性
HER2基因扩增和／或HER2蛋白过表达是判断乳腺癌患者预后的重要风险评估因子，同时也是判断曲妥珠单抗靶向治疗是否适用的重要依据。评价HER2状态的方法有免疫组织化学染色法（ IHC）、荧光原位杂交（ FISH）、显色原位杂交（CISH）及银染原位杂交（SISH）。 SISH法在亮视野下观察切片，切片可长期保存，观察结果与FISH结果的符合率高达90％～99％［1-5］。2013年美国临床肿瘤学会／美国病理医师学院（ASCO／CAP）乳腺癌HER2检测指南及中国乳腺癌HER2检测指南（2014版）相应增加了亮视野原位杂交的检测及判读指南等内容［6-7］，使得HER2 SISH检测技术逐步走向规范化、标准化。为了更顺利的开展HER2 SISH的检测，提高检测的成功率，我们分析不同前处理条件对HER2 SISH染色结果的影响。
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一项关于HER2基因检测的多中心研究
HER2基因状态对于乳腺癌患者治疗方案选择、预后评估十分重要.目前常用方法有免疫组织化学(IHC)、荧光原位杂交(FISH)和显色原位杂交(CISH).IHC在大多数病理实验室均能开展,但是所得结果对组织固定情况及其他因素较敏感,统计分析表明基层实验室用IHC方法所得出的HER2蛋白表达结果约20%被正规的中心实验室证明是错误的.
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胃腺癌组织HER-2/neu基因表达及其临床意义
目的:探讨胃腺癌HER-2/neu基因表达与临床病理参数和术后5年生存率的关系.方法:显色原位杂交(CISH)检测55例胃腺癌组织HER-2/neu基因表达.结果:55例胃腺癌组织HER-2/neu基因扩增5例(阳性率9.09%);阳性病例纽织学类型均为肠型胃癌(Lauren分型);HER-2/neu基因扩增患者生存率明显低于HER-2/neu基因不扩增患者(P=0.019).结论:HER-2/neu基因是导致胃腺癌术后5年生存率降低的重要因子,显色原位杂交法检测胃腺癌中HER-2/neu基因扩增状态,可指导trastuzumab靶向治疗胃腺癌.
关键词： 胃肿瘤 Her-2/neu基因 显色原位杂交 -
乳腺癌HER-2基因扩增显色原位杂交与免疫组化检测方法对比研究
目的 探讨乳腺癌HER-2 基因扩增显色原位杂交与免疫组织化学检测方法对比.方法选择153 例乳腺浸润性导管癌患者组织蜡块行免疫组化、显色原位杂交检测.结果 CISH 基因扩增与HER-2 IHC(+++)表达结果符合率较高,二者明显相关( 均P < 0.01).结论 CISH 检测 HER2 基因扩增结果与IHC 检测蛋白过表达及FISH结果高度一致,可作为乳腺癌HER2 基因扩增检测的一项安全可靠的技术.
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荧光原位杂交在检测乳腺癌组织HER2基因扩增的重要性
乳腺癌是女性常见的癌症之一.在乳腺癌患者中,约有25%～30%的人恶化的速度会更快,而且容易复发,其中一个重要的原因是HER2基因过度表达.目前国内外一般采用免疫组织化学(IHC)检测HER2受体蛋白表达状态,应用荧光原位杂交(FISH)和显色原位杂交(CISH)检测HER2基因扩增水平的方法.
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原位杂交试剂盒在临床诊断领域的应用
原位杂交(in situ hybridization,ISH)技术是用于细胞内检测和定位某一特定靶核苷酸的新兴分子诊断技术,随着荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)和显色原位杂交(chromogenic in situ hybridization,CISH)技术的问世和发展,其在灵敏度、特异性、实验室安全性等方面均有了较大进步,并逐渐开发出商品化的试剂盒,应用于微生物检测、产前诊断、肿瘤的鉴别诊断及个体化用药等多个领域.本文将对ISH技术的概况、特点及该类试剂盒在临床诊断中的应用作一综述.
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原发性乳房外Paget病中HER-2的表达
目的：观察原发性乳房外Paget病中HER-2/neu基因扩增及HER-2蛋白的表达，探讨其在乳房外Paget病中的意义。方法：收集2007年1月-2011年9月原发性乳房外Paget病手术切除标本20份，应用显色原位杂交和免疫组织化学的方法，分别检测患者皮损组织石蜡包埋标本中HER-2/neu基因扩增和HER-2蛋白表达情况。结果：所有20例患者分为3组：免疫组织化学检测HER-2蛋白高表达组、低表达组和阴性表达组分别为8例、6例和6例，HER-2蛋白阳性表达率为70.0％。显色原位杂交检测高扩增组、低扩增组和无扩增组分别为7例、2例和11例，HER-2基因的扩增率为45.0％。采用Spearman秩相关进行分析，两种检测方法的结果具有正相关性(P＜0.05)。结论：在原发性乳房外Paget病中存在HER-2/neu基因扩增和HER-2蛋白的表达，两者之间存在正相关性。干扰HER-2蛋白的表达可能为临床治疗原发性乳房外Paget病提供一种新的策略。
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CISH、IHC联合检测胃腺癌EGFR、HER2基因状态及其临床意义
目的 比较显色原位杂交(CISH)与免疫组织化学(IHC)检测胃腺癌表皮生长因子(EGFR)及表皮生长因子受体2(HER2)的基因状态.方法 CISH及IHC检测85例胃腺癌组织EGFR、HER2基因扩增及蛋白表达.结果 EGFR蛋白表达阳性29例,其中表达(3+)的4例中,4例基因扩增；表达(2+)的11例中,8例基因扩增；表达(1+)的14例中,1例基因扩增.HER2蛋白表达阳性13例,其中表达(3+)的4例中,4例基因扩增；表达(2+)的6例中,5例基因扩增；表达(1+)的3例中,无基因扩增.EGFR、HER2蛋白表达及基因扩增无相关性.结论 IHC检测蛋白表达仅(3+)与CISH检测基因扩增有较好一致性,CISH检测基因状态有较好特异性.
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CD97-CD55蛋白复合体在乳腺恶性肿瘤组织中的表达及临床意义
目的 探讨CD97-CD55蛋白复合体在乳腺恶性肿瘤组织中的表达与临床病理因素的关系和评判预后的价值.方法 收集212例乳腺恶性肿瘤及358例乳腺良性肿瘤组织石蜡标本制备组织芯片,采用免疫组化SP法检测CD97抗原表位CD97EGF、CD97Stalk和CD55的表达,结合临床资料分析其与临床病理因素联系.设计CD97和CD55寡核苷酸探针,应用显色原位杂交技术检测CD97mRNA和CD55mRNA在乳腺良、恶性肿瘤组织中的表达.采用Cox比例风险模型分析影响乳腺恶性肿瘤预后风险因素,Kaplan-Meier曲线法进行生存分析. 结果 CD97EGF和CD97Stalk在乳腺恶性肿瘤组织中表达率分别为53.3％(113/212)和65.1％(138/212).CD55在乳腺良、恶性肿瘤组织中均有表达.显色原位杂交显示CD97mRNA和CD55mRNA在乳腺良、恶性肿瘤组织中染色强度差异均有统计学意义(均P＜0.01).Cox比例风险模型分析显示肿瘤大小、阳性淋巴结转移数目、TNM分期、CD97EGF阳性表达是影响乳腺恶性肿瘤预后的独立危险因子.结论 乳腺恶性肿瘤组织可检测到CD97-CD55蛋白复合体表达,CD97Stalk和CD97EGF两个不同抗原表位可能在CD97参与肿瘤发生、发展机制中存在着一定的差异.乳腺恶性肿瘤组织CD97EGF阳性表达可作为预后判断指标之一.
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单探针和双探针显色原位杂交法检测乳腺癌HER2基因状态的比较分析
目的 通过对比分析单探针和双探针显色原位杂交(CISH)检测乳腺癌HER2基因状态,评估双探针显色原位杂交试剂盒的临床应用价值.方法 收集129例常规石蜡包埋的乳腺癌组织标本,分别使用单探针和双探针CISH技术,对肿瘤标本的HER2基因状态进行检测,并按照2007年美国临床肿瘤协会及美国病理家协会(ASCO/CAP)标准,计数HER2基因拷贝数或HER2/17号染色体的比值;同时运用免疫组织化学法(IHC)检测了HER2蛋白水平,与经CISH基因检测的结果进行了对比分析.结果 在129例切片中,单探针CISH结果显示有7例(5%)为临界状态,而双探针CISH结果则无一例结果为临界.在其余122例标本中,单探针和双探针CISH的结果同为50例(41%)阴性和72例(59%)阳性,其中双探针CISH对单探针CISH的阴性和阳性结果的吻合率分别为88%(44/50)和92%(66/72),统计分析显示两种方法的结果基本一致(κ=0.80,P<0.05).在两种方法检测结果一致和不一致的标本中,出现17号染色体异倍体的比例分别为38%(42/110)和53%(10/19).在109例IHC检测的HER2结果中,分别有34例(31%)被判读为(阳性),18例(17%)被判读为0～+(阴性)和57例(52%)被判读为(临界).结论 双探针CISH相对单探针而言,是检测乳腺癌HER2基因状态的可靠方法.双探针CISH能进一步明确判断单探针CISH结果判断不明确(临界状态)的HER2基因状态的标本,并提示17号染色体的异倍性可能会对个别乳腺癌HER2状态的解读产生一定的影响.
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显色原位杂交与免疫组织化学法检测子宫颈癌中HER-2/neu
1987年slamon等首次报道HER-2蛋白过表达与乳腺癌及卵巢癌患者的生存期缩短及近期复发有关.抗HER-2人源化抗体在乳腺癌基因治疗中已广泛应用,显色原位杂交(CISH)在乳腺癌HER-2基因检测方面较为成熟,但在子宫颈病变的研究中报道较少.我们分别采用CISH与免疫组织化学(IHC)检测子宫颈鳞痛组织中HER-2基因扩增和蛋白表达状况,探讨CISH在检测子宫颈癌HER-2基凶扩增中的作用.
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乳腺癌HER-2基因显色原位杂交与免疫组织化学检测对比研究
目的:对乳腺癌HER-2/neu/c-erbB-2(HER-2)显色原位杂交(chromogenic in situ hybridization,CISH)检测和免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)表达两者之间进行对比研究.方法:选择乳腺癌的组织蜡块44例,经HER-2 IHC蛋白表达;阴性9例,(+)9例,(+++)13例,(+++)13例.从中选取经HER-2 IHC表达阳性的乳腺癌22例[包括HER-2 IHC表达(+)9例和HER-2 IHC表达(+++)13例]作回顾性CISH基因检测.结果:HER-2 IHC表达(+)9例一组,经CISH基因检测9例均无基因扩增;HER-2 IHC表达(+++)13例一组,CISH无基因扩增2例(15.38%),基因检测不理想1例(7.76%),基因扩增10例,两种检测方法符合率76.92%,两者有高度一致性(P=0.001).HER-2 IHC表达(+++)和CISH基因检测扩增与乳腺癌类型间有一定相关性(P<0.05).结论:CISH基因检测与IHC表达(+++)组,两者具有很高的一致性.IHC可作为乳腺癌HER-2筛选的首选方法,对于HER-2 IHC表达(+)的病例,CISH检测无基因扩增;HER-2 IHC表达(+++)病例,经CISH基因检测,两者符合率高,CISH基因检测较IHC更准确,证实HER-2/neu扩增的患者可从采用抗HER-2单克隆抗体治疗中获益.
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显色原位杂交技术及其在临床病理中的应用
显色原位杂交(chromogenic in situ hybridization,CISH)是一种近几年来替代荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization,FISH)用以检测基因扩增的新方法.它早于2000年应用于检测乳腺癌HER-2(human epidermal growth factor receptor type-2,HER-2)基因扩增,目前该技术已经日渐完善,并应用于胃癌、肺癌、结肠癌、淋巴瘤等疾病的实验室及临床研究.本文主要就CISH的基本原理、特点及其临床病理应用,与FISH方法进行比较做一综述.
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胃癌HER2蛋白表达及基因扩增分析
目的 探讨胃癌组织HER2蛋白表达和基因扩增情况及其临床意义.方法 收集2011年4月至2012年5月间青岛大学医学院附属医院黄岛院区收治的80例胃癌标本,采用免疫组织化学染色(IHC)和显色原位杂交(CISH)方法检测HER2蛋白表达和基因扩增情况,分析其与临床病理因素的相关性.结果 80例患者中,HER2蛋白表达(-)51例,(+)12例,(++)12例,(+++)5例,阳性表达率为21.3％(17/80)；HER2基因扩增4例,临界扩增3例,基因扩增率为8.8％(7/80).IHC和CISH检测结果呈正相关(P＜0.05),两者的符合率为85.0％(68/80).HER2表达与肿瘤部位、分化程度及TNM分期有关(均P＜0.05).结论 胃癌组织中有较高的HER2蛋白表达和基因扩增率,其与胃癌的发生发展密切相关.
