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血管祖细胞研究进展
干/祖细胞是当今医学研究的热点.在小鼠胚胎干细胞分化模型中的研究已经证实,心肌细胞、内皮细胞和血管平滑肌细胞,这三种细胞亚系均来源于一种血管内皮生长因子受体-2(vascular endothelial growth factor receptor-2,VEGFR2又称KDR,Flt-1)阳性的心血管祖细胞,这一类祖细胞是带有中胚层标志的向心血管亚系分化过程中的早阶段的细胞[1].
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中药紫龙金对转移性前列腺癌体外增殖及侵袭能力的影响
中国传统医药紫龙金(原名"复方白龙片")是近年来由北京市肿瘤防治研究所研制开发的抗肿瘤药物.PC-3M-1E8(以下简称"1E8")细胞[1]是由北京大学病理学系构建的一株高转移前列腺癌细胞亚系,它来源于PC-3M前列腺癌细胞系.本研究探讨了紫龙金对1E8细胞体外增殖和侵袭能的影响,探索中药在治疗前列腺癌中的作用机理.
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骨肉瘤高低不同转移特性细胞亚系差异表达基因的分析和意义
背景与目的:骨肉瘤转移机制密切相关的基因筛选是骨科领域研究的难点.本研究应用基因芯片技术筛选高低不同转移特性骨肉瘤细胞亚系的差异表达基因,并探讨其转移的分子机制.方法:提取骨肉瘤细胞亚系A1和A2的总RNA, 反转录制备杂交探针, 运用基因芯片进行杂交, 杂交信号用Agilent Scanner扫描, 用Ima Gene 3.0软件和Genespring软件分析和处理数据.结果:对A1和A2的基因表达谱分析,发现两者表达差异显著的基因有222个, 其中在A1中119个基因表达上调,103个基因表达下调, 这些基因可以划分为6个主要功能群,其中49个基因的差异表达非常显著.结论:A1和A2存在多方面基因的表达差异,只有部分差异与骨肉瘤的转移机制密切相关;基因芯片技术能有效地分析各细胞亚系的基因表达谱、为研究骨肉瘤转移机制提供新的途径.
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两种体外筛选不同转移潜力骨肉瘤细胞亚系方法的比较
目的:为建立不同转移潜力骨肉瘤细胞亚系寻找一种理想的体外筛选方法.方法:利用体外克隆技术分离出20株骨肉瘤MG-63细胞亚系,通过电泳率测定和体外迁移实验两种体外筛选方法,各筛选出1个高转移和低转移潜力的细胞亚系(A1、A2和B1、B2),再利用体外增殖、琼脂克隆形成和裸鼠体内移植实验,进一步比较和证实两种方法的优劣.结果:A1、B1的细胞增殖率、琼脂克隆形成能力和肺脏转移率均明显高于A2和B2,有极显著性的差异(P＜0.01),A2的克隆形成能力和肺转移灶形成率均高于B2(P＜0.05).结论:两种方法均能有效地筛选出高转移潜力的骨肉瘤细胞亚系,在筛选低转移潜力的细胞亚系方面,体外迁移实验的方法明显优于电泳率测定的方法.
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食管癌SCID小鼠异位移植模型建立的初步探讨
目的 建立人食管癌SCID异位移植模型并对其转移性淋巴来源细胞进行筛选.方法 将食管癌细胞系Eca-109细胞悬液注射至SCID小鼠胃壁.三个月后或动物频死时处死解剖,观察肿瘤在小鼠体内的生长转移情况,对肉眼可见的转移病灶先建立皮下移植模型后建立转移性细胞亚系.结果 胃壁移植15只SCID小鼠,获得9只胃壁移植瘤动物,其中一只出现纵隔淋巴结转移和肺转移.取淋巴结转移灶部分移植至SCID动物皮下,在动物皮下传代两个月(共4代)后,进行常规组织块培养,初步建立细胞亚系,命名为LnF1/Eca-109.结论 肿瘤胃壁移植是建立食管癌免疫缺陷动物自发性移植模型和筛选转移性细胞亚系的可行方法.
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低频超声逆转人肝癌细胞多药耐药的实验研究
多药耐药(multidurg resistance,MDR)是导致肿瘤化疗失败的重要原因,超声波具有方向性好,可聚焦的特点,能非特异性地提高细胞膜的通透性,促进一系列物质进入细胞内[1],是一种理想的耐药逆转工具.为此,我们以人肝癌耐阿霉素(ADM)的多药耐药细胞亚系HepG2/ADM为研究对象,观察低频超声对其耐药特性的逆转,并探讨其可能的作用机制.
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不同转移特性人成骨肉瘤MG-63细胞亚系的建立及特征
目的:建立高低不同转移特性人成骨肉瘤MG-63细胞亚系并研究其生物学特性.方法:通过体外克隆技术和体内移植,筛选并建立了6个细胞亚系,测量其细胞电泳率、细胞增殖率,利用琼脂克隆形成实验和裸鼠体内成瘤实验,比较各细胞亚系的转移特性.结果:A2、A3、A16亚系的细胞电泳率、细胞增殖率、琼脂克隆形成能力和肺转移灶形成率均明显高于A1、A6、A20亚系.结论:通过体外克隆技术和体内移植的方法可建立不同转移特性的MG-63细胞亚系,有助于骨肉瘤转移机理的进一步研究.
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不同转移潜能骨肉瘤细胞株的筛选与建立
目的获得不同转移潜能的骨肉瘤细胞株.方法从我室建立的人成骨肉瘤细胞系SOSP0-9607中通过有限稀释法获得不同的单细胞克隆,经过侵袭试验初筛后获得5株转移潜能不同的细胞株,再通过裸鼠体内连续传代法筛选出具有不同转移能力的细胞系.结果获得两株转移潜能不同的骨肉瘤细胞株.结论这两株细胞株它们来源于同一亲本,他们之间的差异集中在转移表型上,为今后利用分子生物学的方法筛选出转移相关基因,从而为成骨肉瘤的转移机制及临床研究奠定基础.
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人前列腺癌细胞PC-3M亚系u-PAR基因与蛋白质表达
为研究与人前列腺癌细胞(PC-3M)侵袭能力相关的靶分子,采用有限稀释法分离单克隆细胞株,并应用单层细胞侵袭等实验鉴定各亚系的体外侵袭能力;借助RT-PCR和免疫组化的方法,分别在转录和翻译水平检测5株侵袭能力不同的PC-3M亚系尿激酶型纤溶酶原激活物受体(u-PAR)的表达.结果显示:高侵袭亚系u-PAR基因mRNA的表达和蛋白质水平均明显高于低侵袭亚系.提示:PC-3M亚系u-PAR的高表达与其较强的侵袭能力密切相关,而u-PAR可能是抑制高侵袭亚系侵袭效应的一个重要靶分子.
关键词： 肿瘤侵袭 尿激酶型纤溶酶原激活物受体 前列腺肿瘤 细胞亚系 -
Oct-4在不同侵袭转移能力的人胆管癌细胞系中的表达
目的 探讨干细胞因子Oct-4在不同侵袭转移能力的人胆管癌QBC939亚克隆细胞系中的表达.方法 运用体外侵袭实验筛选出1个高侵袭转移潜力和1个低侵袭转移潜力的细胞亚系,并对两者的生物学特性进行比较、分析和鉴定.运用RT-PCR,Western-blot的方法检测干细胞因子Oct-4在两个亚克隆细胞系的差异表达.结果 分离得到高和低转移能力的人胆管癌QBC939亚克隆细胞系QBC-H和QBC-L,体外侵袭指数分别为263±5.9和154±6.6(P＜0.05).干细胞因子Oct-4 mRNA和蛋白在QBC-H的表达均高于QBC-L,两者差异有显著性(P＜0.05).结论 干细胞因子Oct-4的表达强度与胆管癌QBC939的侵袭转移能力密切相关;它可能是调控胆管癌侵袭转移能力的重要基因.
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具有肝转移倾向的结肠癌细胞亚系的筛选与鉴定
目的 筛选人结肠癌SW480细胞中具有特定肝脏转移倾向的亚克隆,比较它与母系生物学特性的差异,为结肠癌肝转移机制的研究提供基本的实验材料.方法 采用外科原位接种、组织块细胞培养法从裸鼠体内获得SW480细胞系中具有肝脏转移倾向的亚克隆SW480/M5;体内体外实验验证它与母系细胞在生物学特性上的差异.结果 体内实验证明SW480具有广泛转移的潜能,而SW480/M5细胞只具有向肝脏转移的潜能;SW480/M5细胞原位瘤的质量较SW480细胞大且皮下瘤生长速度较快:体外实验证明SW480/M5细胞的克隆形成能力,体外增殖能力、体外运动及侵袭能力较SW480细胞强,而对FN的粘附能力较SW480细胞弱.结论 从结肠癌细胞系SW480中筛选出的细胞亚系SW480/M5转移方向明确,是结肠癌肝转移机制研究的理想细胞模型.
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裸鼠脊髓转移灶粘液表皮样癌细胞系Ms的建立及生物学特性
目的:建立Mc3细胞的脏器转移细胞系.方法:采用瘤细胞尾静脉注射法、组织块细胞培养法,从裸鼠体内获得Mc3细胞系脊髓转移细胞亚系.用染色体显示、细胞形态及细胞致瘤性观察证明其性质;用细胞生长曲线、流式细胞仪测定增值速度.结果:从50只受试裸鼠中荻得一只截瘫的裸鼠,取其脊髓组织行原代及传代培养获得细胞并建立细胞系,传代50次以上,生长稳定,倍增时间为43h,S期细胞占22.7%,染色体众数为61,保持人类染色体形态,细胞形态与其母细胞相似,相差显微镜观察活细胞呈"铺路石"样外观.裸鼠肺内转移肿瘤组织切片显示为粘液表皮样癌,将该细胞命名为Ms.结论:Ms细胞系是Mc3细胞系在裸鼠体内的脊髓转移细胞亚系,其生物学性质与Mc3细胞不同.
