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成人原发性肾病综合征HLA-DR基因频率
原发性肾病综合征(nephrotic syndrom, NS)是肾小球疾病的一种主要临床表现,其症状为高度水肿、大量蛋白尿、高脂血症和低蛋白血症.其发病机理尚不清楚.为了探讨人类白细胞抗原(HLA),尤其是DR抗原与本病的免疫遗传机制有否关联,以往的学者多采用血清学技术或特异性寡核苷酸探针杂交及聚合酶链反应(PCR-SSO)技术检测NS患者的HLA-DR基因频率.本研究利用序列特异性引物-聚合酶链反应(PCR-SSP)技术,检测成人原发NS患者的HLA-DR基因频率,试图发现与本病关系密切的HLA-DR等位基因,从免疫遗传学方面研究本病的发病机理.
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基因芯片技术(下)
3 基因芯片技术的应用3.1 DNA序列测定3.1.1 原理[5] 基因芯片测序采用的是杂交测序(SBH)的原理.该技术包括:末知序列的DNA与大量的短链寡核苷酸探针杂交;所形成完整的双链体的鉴定与分析.如对于一种12碱基的靶基因片段,假设其核苷酸顺序为5'-AGCCTAGCT GAA-3'.用它与一组8个碱基完全排列组合的寡核苷酸探针群混合杂交.在这一组由总数为48=65536种8个碱基的寡核苷酸组成的完全探针群中,仅有5种会同靶基因片段形成完全互补的双链分子.根据这5种发生了完全杂交的8个碱基的寡核苷酸之间重叠序列的线性关系,可推算出这段l2个碱基的靶基因分子的核苷酸顺序.
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中国南方妇女子宫内膜异位症与HLA-DQB1关联性的研究
子宫内膜异位症(endometriosis EM)是育龄妇女的一种多发病,发病率达10%~15%,并有逐渐上升的趋势。主要表现为痛经,不规则阴道流血和不孕(50%不孕)等,严重影响妇女的身心健康,其发病机制仍不清楚,现普遍认为EM是一种自身免疫性疾病[1]。其易感基因的研究已受到国内外学者的普遍重视,但有关HLA-DQB1与EM相关性的研究未见报道。HLA-DQB1 基因是一种高度多态性和具有多种免疫功能的HLA-Ⅱ类基因之一,与许多自身免疫性疾病相关[2]。本文采用聚合酶链式-序列特异的寡核苷酸探针杂交方法研究了中国南方妇女子EM与HLA-DQB1关联性。
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系统性红斑狼疮临床表现与HLAⅡ类单倍型关联的研究(摘要)
目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)易感基因致病的模式。方法利用多聚酶链反应/特异序列寡核苷酸探针杂交(PCR/SSOPH)方法检测113例确诊SLE病人的HLAⅡ类基因型并进行单倍型分析。结果 SLE病人的单倍型具有特定的结构特征;即以2或3个重型SLE相关基因共同组成1个单倍型;反之,2或3个轻型SLE相关基因组成另1个单倍型;重型基因和轻型基因之间很少有强连锁不平衡。DQA*0301*DQB1*0302*DRB1*1501-DQA1*0102-DQB1*0303和DRB1*1501-DQA1*0103-DQB1*0303与肾损害正相关,DQA1*0501*-DQB1*0301和DRB3*0202-DQA1 0501-DQBⅠ*0301与肾损害负相关;DRBI*1501-DQAI*0301-DQB1*0601与狼疮性神经精神症状正相关;DQA1*0201-DQB1*0201与白细胞减少正相关;均P<0.05。结论特异单倍型可能是影响SLE亚型临床表达的决定性因素。[全文刊登于中华微生物学和免疫学杂志 2000,20(1):66]
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探讨流式HlA-B27平均荧光强度用于原发强直性脊椎炎及继发性脊椎炎的鉴别诊断
目的 探讨B27平均荧光强度用于原发性强直性脊椎炎(AS)及继发性脊椎炎鉴别诊断的可能性及B27DNA亚型差异对流式B27平均荧光强度的影响;对流式(FCM)B27/B7双标法用于AS患者B27表达情况的测定进行评估.方法 采用FCM双标法、微量淋巴细胞毒试验(CDC)及引物特异性多聚酶链反应(SSP-PCR),对76例正常人、57例原发AS病和106例继发性脊椎炎进行B27测定;并用寡核苷酸探针杂交(SSOPH)对50例B27血清学阳性原发AS进行B27DNA分型.结果 原发性AS及继发性脊椎炎患者B27平均荧光强度差异无统计学意义(p>0.05);HLA B27 04型和HLA B27 05型的流式B27平均荧光强度差异无统计学意义(p>0.05);CDC、SSP-PCR和FCM双标法特异性和敏感性分别为76.3%和78.5%、88.4%和86.3%、86.8%和88.85%.结论 FCM B27平均荧光强度尚不能用于原发性AS及继发性脊椎炎患者鉴别诊断;不同B27 DNA亚型的B27平均荧光强度可能无差异;FCM HLA-B 27/B7双标法是一种快捷、简便、高效的HLA-B27检测方法.
关键词: 人类白细胞抗原B27 强直性脊柱炎 流式细胞仅测定 寡核苷酸探针杂交