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替米沙坦通过上调大鼠视网膜ACE2-Ang-(1-7)-Mas轴抑制细胞凋亡
目的 研究血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂替米沙坦对自发性高血压大鼠(spontaneously hypertension rat,SHR)视网膜血管紧张素转化酶2(ACE2)-血管紧张素(1-7) [Ang-(1-7)]-G蛋白耦联受体Mas轴的影响,以及其对视网膜血管内皮细胞凋亡的作用.方法 SHR 36只,雄性,16周龄,随机数字表法分成3组,即SHR组、SHRT组和SHRTA组,每组12只.SHRT组给予替米沙坦10 mg·kg-1·d-1灌胃,SHRTA组给予替米沙坦10 mg· kg-1·d-1灌胃,并给予选择性Ang-(1-7)拮抗剂A-7790.5 mg·kg-1 ·d-1静注,SHR组不予药物处理,另设12只同周龄雄性京都种大鼠(WistarKyoto rat,WKY大鼠)作为对照组.分别测定给药前(16周龄时)及给药后(24周龄时)大鼠鼠尾收缩压,于24周处死大鼠,采用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)、蛋白印迹法(Western blot)、免疫组织化学法分别检测视网膜ACE2、Mas mRNA和蛋白表达水平,ELISA检测血清Ang-(1-7)浓度,苏木素伊红(HE)染色观察视网膜血管铺片毛细血管情况,原位DNA末端酶标记技术(TUNEL)检测视网膜血管铺片细胞凋亡情况.结果 16周龄时SHR组、SHRT组和SHRTA组大鼠鼠尾收缩压均较对照组高(P均＜0.01),24周龄时SHRT组大鼠鼠尾收缩压较SHR组低(P＜0.01),SHRTA组则较SHRT组高(P＜0.05).24周龄时SHR组大鼠视网膜ACE2 mRNA和蛋白表达水平均低于对照组和SHRT组(P均＜0.01),而SHRT组与SHRTA组间差异无统计学意义(P＞0.05).24周龄时SHR组大鼠视网膜Mas mRNA和蛋白表达水平均低于对照组(P均＜0.01),SHRT组均高于SHR组(P均＜0.01),SHRTA组则均低于SHRT组(P均＜0.05).24周龄时SHR组大鼠血清Ang-(1-7)浓度低于对照组(P＜0.01),SHRT组高于SHR组(P＜0.05),SHRTA组则低于SHRT组(P＜0.01).24周龄时SHR组大鼠视网膜血管铺片TUNEL阳性细胞百分率高于对照组(P＜0.叭),SHRT组低于SHR组(P＜0.01),SHRTA组则高于SHRT组(P＜0.05).结论 替米沙坦可上调SHR视网膜ACE2-Ang-(1-7)-Mas轴,从而发挥抗视网膜血管内皮细胞凋亡的作用.
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血管紧张素-(1-7)对大鼠心肌梗死后心室重塑及功能的影响
目的探讨血管紧张素-(1-7)[Ang-(1-7)]对心肌梗死后大鼠心室重塑及心功能的影响.方法制急性心肌梗死 (AMI)模型雄性SD大鼠30只,随机分AMI对照组和Ang-(1-7)治疗组,各设15只.另设15只作假手术组.Ang-(1-7)治疗组,经置入式微量泵持续颈静脉给予Ang-(1-7) (25 μg*kg-1*h-1),假手术组及AMI对照组经微量泵只给予同量的生理盐水,4周后检测血流动力学及心功能参数,心脏标本检测左室重量及左室重量指数、左室截面直径、心肌梗死面积,并检测血浆和心肌血管紧张素Ⅱ水平.结果与假手术组比较,AMI对照组左室重量及左室重量指数、左室截面直径及心肌血管紧张素Ⅱ水平明显增高,而左室收缩压(LVSP)及左室内压大上升和下降速率(±dp/dt)均明显降低(P均<0.01);与AMI对照组比较,Ang-(1-7)治疗组左室重量及左室重量指数、左室截面直径明显降低(P<0.05或<0.01),LVSP和±dp/dt均明显增高(P均<0.05),但心肌梗死面积和心肌血管紧张素Ⅱ水平在两组间的差异无显著性.结论外源性血管紧张素-(1-7)能减轻AMI后心室重塑,保护心功能.
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血管紧张素-(1-7)在减轻兔腹主动脉球囊损伤后血管壁胶原合成中的作用
目的 探讨血管紧张素(ANG)-(1-7)对兔腹主动脉球囊损伤后血管壁胶原合成的影响及转化生长因子(TGF)β/Smad通路在其中的作用.方法 将32只健康新西兰白兔随机分为4组.假手术组不予任何处理,模型组、ANG-(1-7)组和ANG-(1-7)+A-779组均行腹主动脉球囊扩张术,术后分别通过微泵持续静脉给予生理盐水(2.5 μl/h)、ANG-(1-7)(576 μg·kg~(-1)·d~(-1)及ANG-(1-7)+A-779(576 μg·kg~(-1·d~(-1)4周.于术前、术后4周采血,用酶联免疫吸附测定方法测定血浆中ANG Ⅱ的水平.术后4周行腹主动脉造影及苏木精-伊红染色,计算血管腔的内径及新生内膜面积和管腔狭窄率等.以逆转录聚合酶链反应及免疫组织化学法测定血管壁中Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的含量和表达部位,同时以Western blot方法测定血管组织中TGF-β_1、磷酸化Smad2的表达水平.结果 术后4周,与模型组相比,ANG-(1-7)组和ANG-(1-7)+A-779组管腔内径较大[(4.11 ±0.10)mm和(3.34±0.1) mm比(2.88 ±0.08)mm,P均<0.05],新生内膜面积[(0.27±0.09)mm~2和(0.38±0.01)mm~2比(0.41±0.02)mm~2,P均<0.05],内膜厚度[(208 ±17)μm和(407 ±25)μm比(448 ±15)μm,P均<0.05]和管腔狭窄率[(28.1 ±2.7)%和(36.8 ±2.2)%比(40.1 ±2.7)%,P均<0.05]均较小,ANG-(1-7)+A-779组与ANG-(1-7)组间差异也有统计学意义(P<0.05).与假手术组比较,术后4周模型组、ANG-(1-7)组和ANG-(1-7)+A-779组血管组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白,TGF-β_1和磷酸化Smad2的表达水平均较高(P<0.01或P<0.05),ANG-(1-7)组Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白,TGF-β_1和磷酸化Smad2的表达均低于模型组(P均<0.05),ANG-(1-7)+A-779组与模型组间Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白,TGF-β_1和磷酸化Smad2的表达差异无统计学意义.术后模型组和ANG-(1-7)组血浆中ANG Ⅱ水平均较术前升高(P<0.05),但两组差异无统计学意义.结论 ANG-(1-7)可明显减轻兔腹主动脉球囊损伤后的再狭窄及血管壁胶原合成,这可能与调节组织中TGF-β_1的表达,间接抑制Smads途径的激活有关.
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血管紧张素-(1-7)对豚鼠心肌细胞电生理作用的研究
目的研究血管紧张素-(1-7)[Ang-(1-7)]对正常豚鼠心室肌细胞膜L型钙内流(I Ca-L)、延迟整流性钾流(IK)、内向整流性钾流(IK1)和快钠内流(I Na)以及跨膜动作电位的影响,旨在探讨Ang-(1-7)对心肌细胞的电生理作用. 方法应用膜片钳全细胞记录方法记录各项离子流和标准微电极技术记录动作电位. 结果 (1)Ang-(1-7)可使ICa-L 呈浓度依赖性增加,选择性血管紧张素(AT1)受体阻断剂缬沙坦(Val)或非选择性AT受体阻滞剂 Sarthran(Sar)均可以消除Ang-(1-7)增加ICa-L 的作用.(2)Ang-(1-7)可使IK 呈浓度依赖性增加,Val不能拮抗Ang-(1-7)增加IK 的作用,而Sar可以拮抗Ang-(1-7)的作用.(3) Ang-(1-7)对IK1和INa 无影响.(4)Ang-(1-7)可使动作电位时程( APD30、APD50和APD90 )呈浓度依赖性缩短,2μmol/L Ang-(1-7)使APD90从(152±18.14)ms缩短至(136±2 1.3 7)ms(n=5,P<0.05),对静息电位、动作电位幅度和大除极速率无影响. 结论 Ang-(1-7 )对心肌细胞复极电流IK 作用不同于AngⅡ,Ang-(1-7)通过非AT1受体促进I K ,有助于心肌细胞复极,有利于心电稳定.
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血管紧张素-(1-7)对Toll样受体4介导的人脐静脉内皮细胞氧化应激的作用及机制
目的 观察Toll样受体4(TLR4)在氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导人脐静脉内皮细胞发生氧化应激反应中的作用,并探讨血管紧张素(Ang)-(1-7)对上述反应的作用及其作用机制.方法 体外培养人脐静脉内皮细胞,并将细胞分为6组,分别为对照组(不干预)、ox-LDL组(以ox-LDL 75 mg/L干预)、ox-LDL+ Ang-(1-7)组[Ang-(1-7)1μmol/L预处理30 min后,以ox-LDL75 mg/L干预]、ox-LDL+ Ang-(1-7)+ A-779组[A-779(Mas受体阻断剂)1μmol/L预处理30 min,然后以Ang-(1-7)1 μmol/L预处理30 min,再以ox-LDL 75 mg/L干预]、ox-LDL+A-779组(A-779 1 μmol/L预处理30 min后,以ox-LDL 75 mg/L干预)、ox-LDL+ HTA125组[HTA125(TLR4特异性阻断抗体)10 μg/L预处理30 min后,以ox-LDL 75 mg/L干预].干预24 h后,分别以膜联蛋白V(Annexin V)-FITC/碘化丙啶(PI)双标记流式细胞术和末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记测定法(TUNEL)检测细胞凋亡,2',7'-二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)标记法检测活性氧自由基(R OS)水平,实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测TLR4和NADPH氧化酶4 (NOX4)的mRNA表达水平,Western blot检测TLR4和NOX4的蛋白表达水平.结果 (1)AnnexinV-FITC/PI双标记流式细胞术显示,ox-LDL组的细胞凋亡比例高于对照组[(21.18±1.40)％比(1.59 ±0.26)％,P＜0.01],ox-LDL+ Ang-(1-7)组[(7.42±1.07)％]和ox-LDL+ HTA 125组[(9.19±1.01)％]的细胞凋亡比例均低于ox-LDL组(P均＜0.01),ox-LDL+ Ang-(1-7)+A-779组[(19.91±1.30)％]和ox-LDL+ A-779组[(20.47±0.95)％]的细胞凋亡比例均高于ox-LDL+ Ang-(1-7)组(P均＜0.01).(2)TUNEL法显示,ox-LDL组的细胞凋亡比例高于对照组[(10.83±0.77)％比(2.83±0.82)％,P＜0.01],ox-LDL+ Ang-(1-7)组[(3.66±0.54)％]和ox-LDL+ HTA125组[(4.97±0.60)％]的细胞凋亡比例均低于ox-LDL组(P均＜0.01),ox-LDL+ Ang-(1-7)+A-779组[(10.69±0.62)％]和ox-LDL+ A-779组[(11.43±0.42)％]的细胞凋亡比例均高于ox-LDL+ Ang-(1-7)组(P均＜0.01).(3)ox-LDL组的ROS水平高于对照组(0.093±0.014比0.053±0.011,P＜0.01),ox-LDL+ Ang-(1-7)组(0.063±0.011)和ox-LDL+ HTA125组(0.070±0.010)的ROS水平均低于ox-LDL组(P值分别＜0.01和0.05),ox-LDL+ Ang-(1-7)+A-779组(0.088±0.003)和ox-LDL+A-779组(0.095±0.005)的ROS水平均高于ox-LDL+ Ang-(1-7)组(P均＜0.01).(4)ox-LDL组NOX4的mRNA表达水平高于对照组(11.74±0.65比1.00±0.00,P＜0.01),ox-LDL+ Ang-(1-7)组(2.85±0.75)和ox-LDL+ HTA125组(5.57±0.52) NOX4的mRNA表达水平均低于ox-LDL组(P均＜0.01),ox-LDL+ Ang-(1-7)+A-779组(10.51 ±0.54)和ox-LDL+ A-779组(11.04±1.01) NOX4的mRNA表达水平均高于ox-LDL+ Ang-(1-7)组(P均＜0.01).ox-LDL组TLR4的mRNA表达水平高于对照组(27.60±1.86比1.00±0.00,P＜0.01),ox-LDL+ Ang-(1-7)组(8.00±1.03)和ox-LDL+HTA125组(14.83±0.97) TLR4的mRNA表达水平均低于ox-LDL组(P均＜0.01),ox-LDL+Ang-(1-7)+ A-779组(24.81 ±2.19)和ox-LDL+ A-779组(26.64±0.65) TLR4的mRNA表达水平均高于ox-LDL+Ang-(1-7)组(P均＜0.01).(5)ox-LDL组NOX4的蛋白表达水平高于对照组(0.61±0.09比0.23±0.02,P＜0.01),ox-LDL+ Ang-(1-7)组(0.27±0.03)和ox-LDL+ HTA125组(0.22±0.02) NOX4的蛋白表达水平均低于ox-LDL组(P均＜0.01),ox-LDL+ Ang-(1-7)+A-779组(0.58±0.06)和ox-LDL+ A-779组(0.61±0.03) NOX4的蛋白表达水平均高于ox-LDL+Ang-(1-7)组(P均＜0.01).ox-LDL组TLR4的蛋白表达水平高于对照组(0.18 ±0.02比0.08±0.01,P＜0.01),ox-LDL+ Ang-(1-7)组(0.07±0.01)和ox-LDL+ HTA125组(0.09±0.01)TLR4的蛋白表达水平均低于ox-LDL组(P均＜0.01),ox-LDL+Ang-(1-7)+A-779组(0.18±0.02)和ox-LDL+A-779组(0.20±0.02) TLR4的蛋白表达水平均高于ox-LDL+ Ang-(1-7)组(P均＜0.01).结论 TLR4在ox-LDL诱导人脐静脉内皮细胞损伤中起介导作用,Ang-(1-7)通过特异性Mas受体发挥对细胞的保护作用.
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血管紧张素(1-7)对阿霉素扩张型心肌病大鼠心功能和心肌细胞凋亡的影响及其机制
目的 探讨血管紧张素(1-7) [Ang(1-7)]对阿霉素扩张型心肌病大鼠心功能及心肌细胞凋亡的影响及其机制.方法 雄性Wistar大鼠分3组:(1)阿霉素扩张型心肌病组(ADR-DCM组,n=25),阿霉素2.5 mg/kg,尾静脉注射,每周1次,连续10周.(2)阿霉素扩张型心肌病+Ang(1-7)治疗组[ Ang(1-7)组,n=25],阿霉素给药方式及剂量同前,同时Ang(1-7)用Alzet 2006型微量泵以24μg· kg-1,h-1速度持续腹腔泵入.(3)正常对照组(n=10).12周时进行超声和血液动力学检测,硫代巴比妥酸法检测丙二醛(MDA)含量,放免法检测外周血中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)含量,苏木精-伊红染色法(HE染色)检测心肌病理变化,原位末端转移酶标记技术(TUNEL法)检测心肌组织细胞凋亡,免疫印迹法( Western blot)检测大鼠左心室心肌中促凋亡蛋白半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和抗凋亡蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-xl( Bcl-xl)的表达.结果 Ang(1-7)组病死率明显低于ADR-DCM组(16％比40％,P＜0.01).ADR-DCM组大鼠左心室收缩末期内径(LVESD)及舒张末期内径(LVEDD)均明显大于正常对照组(P均＜0.01),左心室舒张末期压力(LVEDP)明显高于正常对照组(P＜0.01),左心室短轴缩短率(FS)及左心室压力上升(下降)大速率(±dp/dt)明显低于正常对照组(P＜0.01).Ang(1-7)组大鼠LVESD、LVEDD及LVEDP均明显低于ADR-DCM组(P均＜0.01),FS及±dp/dt明显高于ADR-DCM组(P＜0.01).与正常对照组比较,Ang(1-7)组大鼠LVESD、LVEDD及LVEDP仍较高(P均＜0.01),FS及±dp/dt仍较低(P均＜0.01).ADR-DCM组大鼠左心室心肌MDA含量及血浆Ang Ⅱ浓度均明显高于正常对照组(P均＜0.01),而在Ang(1-7)组MDA及Ang Ⅱ浓度显著低于ADR-DCM组(P＜0.01),但仍高于正常对照组(P＜0.01).ADR-DCM组大鼠心肌细胞凋亡指数显著高于正常对照组(P＜0.01),Ang(1-7)组则显著低于ADR-DCM组(P＜0.01),但仍高于正常对照组(P＜0.01).ADR-DCM组促凋亡蛋白caspase-3、Bax均明显高于正常对照组(P均＜0.01),抗凋亡蛋白Bcl-xl表达明显低于正常对照组(P＜0.01).Ang(1-7)组大鼠促凋亡蛋白caspase-3、Bax明显低于ADR-DCM组(P均＜0.01),仍高于正常对照组(P＜0.01),抗凋亡蛋白Bcl-xl表达明显高于ADR-DCM组(P＜0.01),但仍低于正常对照组(P＜0.01).结论 Ang(1-7)可显著改善阿霉素扩张型心肌病大鼠的心功能,抑制左心室心肌细胞凋亡.其机制可能与促凋亡蛋白caspase-3及Bax表达下调、抗凋亡蛋白Bcl-xl表达上调有关.
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缬沙坦与贝那普利联用治疗移植肾慢性损伤的远期效果
目的 探讨血管紧张素受体拮抗剂缬沙坦与血管紧张素转化酶抑制剂贝那普利联合应用治疗肾移植患者移植肾慢性损伤的远期效果. 方法非糖尿病患者肾移植术后尿蛋白＞0.5g/d或SCr＞177 mmol/L(＞2 mg/d)32例,随机分2组:①治疗组23例.男9例,女14例.平均40岁.病理诊断慢性移植物肾病(CAN)13例、环孢素中毒3例、肾小球疾病7例.②对照组9例.男4例,女5例.平均35岁.CAN 6例、环孢素中毒1例、肾小球疾病2例.治疗组给予缬沙坦(80mg/d)与贝那普利(20 mg,2次/d)联合治疗3年,对照组未进行此项处理.比较2组患者治疗前后SCr、24 h尿蛋白变化及移植肾生存时间.结果 随访3年后,治疗组SCr为(252.2±117.9)mmol/L,对照组为(375.3±203.0)mmol/L,2组比较差异有统计学意义(P＜0.05).治疗组CAN患者SCr为(282.4±147.3)mmol/L,对照组为(528.7±107.8)mmol/L,2组比较差异有统计学意义(P＜0.01).治疗组24 h尿蛋白为(1.0±0.6)g,对照组为(1.3±0.7)g,组问差异无统计学意义(P＞0.05).移植肾存活时间治疗组76个月,对照组为71个月,组间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 缬沙坦与贝那普利联合应用可保护移植肾功能,对蛋白尿及移植肾远期存活的影响有待进一步观察.
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神经酰胺和p53在AngⅡ诱导内皮细胞凋亡过程中的作用
目的 探讨AngⅡ诱导内皮细胞凋亡过程中神经酰胺和p53的作用及相互关系.方法 体外培养脐静脉内皮细胞,分别用血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1)拮抗剂氯沙坦、血管紧张素Ⅱ2型受体(AT2)拮抗剂PD123319、神经酰胺合成酶抑制剂烟曲霉素B1(FB1)、p53抑制剂PFT-α预处理细胞,再加入AngⅡ,24h后与对照组(用双蒸水预处理细胞)比较,观察细胞凋亡情况,RT-PCR和Western blot检测各组p53表达情况.结果 PD123319和FB1能显著抑制AngⅡ诱导的内皮细胞凋亡,而氯沙坦和PFT-α则不能抑制AngⅡ诱导的内皮细胞凋亡.FB1和PFT-α可以抑制p53的mRNA和蛋白表达.结论 AngⅡ通过AT2受体和神经酰胺诱导内皮细胞凋亡.神经酰胺在AngⅡ诱导的内皮细胞凋亡过程中起重要作用,且可能经过p53诱导凋亡.
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血管紧张素转换酶抑制药对慢性缺氧大鼠血循环内皮细胞数量的影响
目的 本研究旨在观察血管紧张素转化酶抑制剂(ACEI)西拉普利对慢性缺氧性肺动脉高压大鼠循环内皮细胞(CEC)数量及形态的影响,探讨对血管内皮的保护作用机制.方法 观察大鼠慢性缺氧性肺动脉高压的血液动力学变化及循环内皮细胞、血管紧张素转化酶、脂质过氧化物的变化.结果 缺氧性肺动脉高压时肺动脉压力升高、脂质过氧化物产生丙二醛(LPO)升高,血管紧张素转化酶(ACE)活性降低,循环内皮细胞数量增加(P<0.01);西拉普利治疗后脂质过氧化物降低,血循环内皮细胞数量明显下降(P<0.01).结论 本实验表明ACEI可以抑制氧自由基反应及脂质过氧化、平衡ACE系统从而减少血CEC数量、降低肺动脉压而达到保护血管内皮功能.
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血管紧张素1-7对博来霉素诱导大鼠肺纤维化的抑制作用
目的 探讨血管紧张素(Ang) 1-7对博来霉素诱导大鼠肺纤维化的抑制作用.方法 18只Wister雄性大鼠按随机数字表法随机分为对照组、博来霉素组和博来霉素+Ang1-7组.均以微量泵0.29 μl/h皮下24 h恒速持续泵注4周,具体为:博来霉素组以博来霉素气管内滴入并泵内注入注射用水,博来霉素+ Ang1-7组以博来霉素气管内滴入并泵内注入Ang1-7(25 μg·kg-1·h-1),对照组以生理盐水气管内滴入并泵内注入注射用水.4周后HE、Masson染色评价纤维化程度,测定羟脯氨酸含量,Western印迹法分析检测Ⅰ型胶原蛋白,实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测转化生长因子(TGF)-β及α-Ⅰ型胶原mRNA含量.培养人胚肺成纤维细胞(HFL-1),设置无刺激对照组、AngⅡ刺激组(10-7 mol/L的AngⅡ刺激)、Ang1-7刺激组(10-7mol/L的Ang 1-7刺激)、AngⅡ+Ang1-7刺激组(上述浓度的Ang1-7和AngⅡ刺激)、AngⅡ+Ang1-7+ A779刺激组(10-6mol/L的A779干预1h后予上述浓度Ang1-7和AngⅡ刺激).利用QuantiGene多基因定量检测下游因子TGF-β1、RT-PCR检测α-Ⅰ型胶原mRNA表达情况.结果 体内实验:与对照组比较,博来霉素组纤维化程度增高,组织中羟脯氨酸的含量明显增多[(3.69±0.18)比(0.50±0.15) mg/g,P＜0.05]；博来霉素+ Ang1-7组纤维化程度减轻,羟脯氨酸含量[(2.14±0.29) mg/g]明显减少(P＜0.05)；博来霉素组TGF-β1 mRNA、α-Ⅰ型胶原mRNA和α-Ⅰ型胶原蛋白相对表达量分别为4.45 ±0.45、5.14±0.55和1.48±0.34,均高于对照组的1.00±0.20、1.00±0.08和0.23 ±0.11(均P＜0.05)；而博来霉素+ Ang1-7组上述表达量(2.80±0.35、3.10±0.52和0.49±0.11)均低于博来霉素组(均P＜0.05).体外实验:AngⅡ刺激组TGF-β1 mRNA和α-Ⅰ型胶原mRNA的相对表达量(1.67±0.26和4.86±1.36)均高于无刺激对照组(1.00±0.10和1.46±0.54)(均P＜0.05)；而Ang1-7刺激组上述表达量(1.30±0.22和2.07±1.05)与无刺激对照组差异均无统计学意义(均P＞0.05)；AngⅡ+ Ang1-7 刺激组上述表达量(0.91±0.30和1.57±0.27)均低于AngⅡ刺激组(均P＜0.05)；AngⅡ+ Ang1-7+A-779刺激组上述表达量(1.25 ±0.14和1.29±0.49)与AngⅡ+Ang1-7刺激组差异均无统计学意义(均P＞0.05).结论 Ang 1-7对博来霉素所致的肺纤维化具有抑制作用,该作用可能与Ang 1-7抑制AngⅡ诱导TGF-β1的表达有关.
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雌激素对低氧性肺动脉高压大鼠体内血管紧张素转换酶-血管紧张素Ⅱ-血管紧张素受体-1轴的影响
目的：探讨雌激素对低氧性肺动脉高压大鼠体内血管紧张素转换酶-血管紧张素Ⅱ-血管紧张素受体-1（ ACE-AngⅡ-AT1）轴的影响。方法将60只健康雌性SD大鼠按随机数字表法随机平分为6组：假手术组、单纯去势组、单纯低氧组、去势＋低氧组、去势＋雌激素组、去势＋低氧＋雌激素组。假手术组打开腹腔找到双侧卵巢后不做处理直接还纳缝合，单纯去势组行切除卵巢术，单纯低氧组持续低氧（24 h，8周），去势＋低氧组切除卵巢后持续低氧，去势＋雌激素组切除卵巢后每天给予雌激素20μg· kg -1皮下注射，去势＋低氧＋雌激素组切除卵巢后每天给予雌激素并且持续低氧。连续饲养8周，以建立低氧肺动脉高压模型。测量平均肺动脉压（ mPAP）后放血处死大鼠，观察右心室肥厚指数（ RVHI）、HE染色观察肺小动脉重塑情况。用放射免疫法、紫外分光光度法、Western印迹法、反转录PCR测定AngⅡ、ACE、AT1水平。结果单纯低氧组和去势＋低氧组大鼠肺小动脉管壁增厚管腔变窄明显， mPAP、RVHI 分别为（32.4±2.2） mmHg （1 mmHg ＝0.133 kPa ）、0.331±0.032和（37.9±1.6） mmHg、0.433±0.033，均显著高于假手术组的（12.6±1.8） mmHg、0.233±0.029（均P＜0.05）；去势＋低氧＋雌激素组上述改变较轻，mPAP[（26.1±1.4）mmHg]显著高于假手术组（P＜0.05），而RVHI （0.267±0.040）与假手术组差异无统计学意义（P＞0.05）。 ACE、AngⅡ、AT1表达水平在单纯去势组、单纯低氧组、去势＋低氧组均升高，且均显著高于假手术组（均P＜0.05），而去势＋雌激素组、去势＋低氧＋雌激素组上述指标表达水平变化不明显（均P＞0.05）。结论雌激素对低氧性肺动脉高压的干预作用可能部分是通过下调肺组织ACE和AT1受体的表达从而降低ACE-AngⅡ-AT1轴活性实现的。
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坎地沙坦对染尘大鼠肺纤维化的影响
目的 观察坎地沙坦对染尘大鼠矽肺形成过程中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、肺纤维化及细胞因子的影响.方法 将Wistar大鼠随机分为模型组、干预组、对照组,每组32只.干预组每天灌胃坎地沙坦10 mg/kg,模型组和对照组同法给予等量生理盐水;灌胃1周后,模型组和干预组水合氯醛腹腔注射麻醉,将0.5 ml矽尘混悬液(浓度为50 mg/ml)缓慢注入气管,对照组大鼠气管内注入0.5 ml灭菌生理盐水.染尘后第2天,各组大鼠恢复先前的处理后第3、7、14、28天各处死大鼠8只.计算肺脏系数并进行肺组织HE及Masson染色观察；用免疫组化方法测定肺组织血管紧张素转化酶(ACE)表达水平；用ELISA测定肺泡灌洗液中转化生长因子β1(TGF-β1)及AngⅡ含量.结果 干预组大鼠第3、7、14、28天肺泡炎症和纤维化程度均较模型组明显减轻,干预组大鼠肺脏系数明显低于模型组,差异有统计学意义(P＜0.01).与对照组比较,模型组和干预组肺泡灌洗液中TGF-β1和Ang Ⅱ含量均明显升高,差异有统计学意义(P＜0.01)；与模型组比较,干预组肺泡灌洗液中TGF-β1和Ang Ⅱ含量均明显降低,差异有统计学意义(P＜0.01).模型组和干预组肺组织ACE表达明显高于对照组,干预组肺组织ACE表达明显低于模型组,差异均有统计学意义(P＜0.01).结论 早期使用坎地沙坦干预能够明显减轻染尘大鼠的肺组织炎症和肺纤维化程度,降低肺泡灌洗液中的TGF-β1和AngⅡ含量,下调肺组织中ACE表达.
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关于血管紧张素-(1～7)的作用及其机制的探讨
血管紧张素-(1～7)[Ang-(1～7)]是肾素-血管紧张素系统中的一个独立代谢物,其在机体血压及水电解质平衡调节中具有非常重要的生物学作用.它在心血管系统血流动力学及压力反射调节等诸多方面与血管紧张素Ⅱ的作用相反,在近的科学研究中引起广泛重视,其作用及机制正在被逐步揭示,现综述如下.
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血管紧张素转化酶抑制剂与血管紧张素受体拮抗剂联合应用治疗慢性肾病蛋白尿的临床进展
临床研究已明确表明在糖尿病及非糖尿病的慢性肾脏疾病(CKD)中,蛋白尿程度和CKD的进展速度密切相关.动物实验证实蛋白尿具有损伤肾小管及促进肾间质硬化的作用.因此,蛋白尿不仅是判断肾小球损害程度的一个指标,而且能导致肾脏间质纤维化.基于此,有效降低蛋白尿是治疗慢性肾病的目标之一.
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阻塞型睡眠呼吸暂停低通气综合征患者肾素和血管紧张素水平的研究
阻塞型睡眠呼吸暂停低通气综合征(obstructive sleep apnea hypopnea syndrome,OSAHS)是因为睡眠时存在打鼾、呼吸暂停和低通气,反复发生低氧血症、高碳酸血症和睡眠结构紊乱,从而导致多脏器的损害.特别是与心血管疾病关系密切[1],现有研究表明OSAHS与高血压密切相关,但其发生机制未能明确.为探讨高血压的发生机制,我们对OSAHS患者进行了肾素、血管紧张素水平的监测.
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咪达普利治疗慢性心力衰竭疗效观察
目的 观察咪达普利治疗慢性充血性心力衰竭(CHF)的临床疗效.方法 选择我院CHF患者80例,随机分为治疗组和对照组各40例,两组患者入院后均卧床休息,限盐、积极治疗心衰病因及诱因,并联合应用地高辛0.125～0.250 mg/d,消心痛10mg/次,3次/d,倍他乐克12.5～25.0 mg/次,2次/d,呋塞米或安体舒通间断使用.治疗组在此基础上加用咪达普利2.5～10.0 mg/d,从2.5mg/d开始,如血压稳定,3d后改为5.0mg/d,部分血压偏高患者2周后可增至10.0mg/d,疗程均为3个月.结果 两组患者治疗有效率间差异有显著性意义(P＜0.05).两组患者治疗前、后收缩压(SBP),舒张压(DBP)、心率、6min步行距离、左室舒张末期内径(LVEDD)、左室收缩末期内径(LVESDD)、射血分数(LVEF)间差异均有显著性意义(P＜0.05).结论 咪达普利对CHF有较好的疗效,优于常规治疗.
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血管紧张素1-7的研究进展
随着各种血管紧张素转换酶抑制剂(angiotensin-converting e nzymeinhibito r,ACEI)和血管紧张素Ⅱ受体-1(AT1)拮抗剂越来越多应用于降压治疗以及深入进行细胞和分子生物学技术的实验研究,使人们对肾素-血管紧张素系统(renin-angiotensin system ,RAS)在高血压发病中的作用有了进一步的了解.RAS经典的代谢途径是由肾素作用其底物- 血管紧张素原生成含有十个氨基酸的血管紧张素Ⅰ(AngⅠ),AngⅠ在ACE的作用下形成含有8 个氨基酸的血管紧张素Ⅱ(AngⅡ),AngⅡ通过作用于AT1产生诸多生物学效应,在高血压形成和维持中的作用已广泛受到关注.但近年来的研究证实RAS还存在各种旁代谢产物,如血管紧张素(1-7)[Ang-(1-7)]、血管紧张素(3-8)、血管紧张素(2-7)等,其中Ang-(1-7 )是一种与AngⅡ有相反作用的血管紧张素家族的终末活性产物,并可能参与ACEI的降压作用和对靶器官的保护作用.
关键词： 血管紧张素类 血管紧张素转换酶抑制剂 受体 血管紧张素 -
在地氟烷脑保护作用下颅内动脉瘤夹闭术中不同时间点血管紧张素Ⅱ和内皮素水平的变化
背景:脑血管痉挛是颅内动脉瘤手术围术期主要并发症之一,颅内动脉瘤行开颅夹闭术的麻醉不仅应满足麻醉的基本要求而且要求尽可能预防脑血管痉挛、提供脑功能的保护.目的:观察地氟烷麻醉下颅内动脉瘤患者行夹闭术中收缩脑血管物质血管紧张素Ⅱ、内皮素水平的变化,探讨地氟烷的脑保护作用.设计:病例分析.单位:首都医科大学附属北京天坛医院神经外科和麻醉科.对象:选择2002-10/2004-06首都医科大学附属北京天坛医院神经外科64例拟行开颅动脉瘤夹闭术患者,男30例,女34例.方法:麻醉诱导后气管插管控制呼吸,地氟烷维持麻醉.分别于麻醉诱导前、剪硬膜、夹闭动脉瘤和动脉瘤夹闭后30 min 4个时点采集动脉血4 mL,应用放免法检测血浆中血管紧张素Ⅱ、内皮素的水平.主要观察指标:颅内动脉瘤患者麻醉诱导前、剪硬膜、夹闭动脉瘤和动脉瘤夹闭后30 min血浆中血管紧张素Ⅱ和内皮素的水平.结果:2例患者手术中发生动脉瘤破裂,进入结果分析62例.①血管紧张素Ⅱ水平:颅内动脉瘤患者术前血管紧张素Ⅱ水平在正常范围,地氟烷麻醉中3个时间点较麻醉诱导前无明显变化(P＞0.05).②内皮素水平:剪硬膜、夹闭动脉瘤和动脉瘤夹闭后30 min时明显低于麻醉诱导前[(40.4±10.3),(40.0±9.6),(40.7±12.3),(49.3±12.7)ng/L,(P=0.002,0.001,0.009)].结论:地氟烷麻醉下开颅动脉瘤夹闭术中收缩脑血管物质血管紧张素Ⅱ和内皮素在整个麻醉维持期间均无上升趋势,内皮素甚至明显低于麻醉诱导前水平,且不同手术阶段无明显差异,表明地氟烷麻醉能够避免由于血管紧张素Ⅱ和内皮素释放增加导致的急性脑血管痉挛,降低继发性脑缺血性损害,从而起到脑保护的作用.
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睡眠呼吸暂停综合征患者血压及血管活性物质的变化
目的:研究睡眠呼吸暂停综合征(sleep apnea syndrome,SAS)患者夜间平均动脉血压(mean artery pressure,MAP)与血浆中内皮素、血管紧张素Ⅱ(angiolensionⅡ,AngⅡ)、心钠素和降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)浓度的变化.方法:多导睡眠图(polysomnography,PSG)确诊SAS和对照组并记录MAP,放射免疫分析法测定30例SAS患者和20例对照组血浆中内皮素、AngⅡ、心钠素和CGRP浓度.结果:SAS患者血浆内皮素、AngⅡ、心钠素浓度显著升高,与MAP呈正相关(r=0.65,0.56,0.63,P＜0.05);血浆CGRP浓度显著降低,但与MAP无关(r=-0.29,P＞0.05).结论:SAS患者夜间MAP升高,可能与血浆中血管活性物质水平变化有关.
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红非鲫鱼皮胶原蛋白酶解产物中血管紧张素转换酶抑制肽的分离及其部分特性
背景:从红非鲫鱼皮胶原蛋白酶解产物中分离血管紧张素抑制肽有待研究.目的:通过酶解红非鲫鱼皮胶原蛋白获取具有高血管紧张素转换酶抑制活性的肽.设计:采用正交实验法进行复合酶解,采用超滤、凝胶柱层析和高压液相色谱技术进行降压肽的分离.单位:中国海洋大学水产品高值化利用实验室.材料:体质量(500±50)g红非鲫,由即墨热电厂罗非鱼分厂提供.方法:实验于2003-05/2004-05在中国海洋大学水产品高值化利用实验室完成.①采用稍作改进的Grossman和Bergman法提取红非鲫鱼皮胶原蛋白,通过菠萝蛋白酶和alcalase 2.4 L组成的复合酶依次对胶原蛋白进行水解.将红非鲫鱼皮胶原蛋白水解物煮沸使酶失活.得到的红非鲫鱼皮胶原蛋白水解物通过截流相对分子质量分别为6 000,4 000,1 000的超滤膜进行分离,得到3个组分,红非鲫鱼皮胶原蛋白水解物Ⅰ(相对分子质量6 000～4 000)、红非鲫鱼皮胶原蛋白水解物Ⅱ(相对分子质量4 000～1 000)和红非鲫鱼皮胶原蛋白水解物Ⅲ(相对分子质量小于1 000).②按照cushman等人的方法测定各组分的血管紧张素转换酶抑制活性.将抑制50%的血管紧张素转换酶活性所需抑制剂浓度定义为IC50.③将具有高血管紧张素转换酶抑制活性的红非鲫鱼皮胶原蛋白水解物上预先采用1.0 mol/L乙酸缓冲液(内含0.1%v/v吡啶,pH=4.0)平衡的sephadexG-25柱(1.6x100 cm),检测波长220 nm,对水解原液,RTCH-Ⅰ、RTCH-Ⅱ和RTCH-Ⅲ4个样品进行分离,收集活性峰,对每个活性峰测定其血管紧张素转换酶抑制率.冻干后进一步用反相HPLC ODS-C18分析柱分离.得到各组的高活性组分,同样方法测定其血管紧张素转换酶抑制率.④对4种高活性组分组分的样品均在110 ℃下用内含1 g/L硫代乙醇酸的6 mol/L HCI真空水解,采用氨基酸自动分析仪分析氨基酸组成,采用HPLC法测定各组分的分子量.主要观察指标:①红非鲫鱼皮胶原蛋白水解物的血管紧张素转换酶抑制活性(IC50值).②血管紧张素转换酶抑制肽的纯化结果.③血管紧张素转换酶抑制肽的氨基酸分析.结果:①红非鲫鱼皮胶原蛋白水解物的血管紧张素转换酶抑制活性:RTCH-Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ组分的IC50值分别为2.82,3.30,2.23和0.31 g/L,其中RTCH-Ⅲ的血管紧张素转换酶抑制活性大.②血管紧张素转换酶抑制肽的纯化结果:4个活性峰的IC50分别为3.5,2.12,1.56和0.65 g/L.采用反相HPLC分析柱(ODS-C18)对6 k、4 k、1 k和ACF组分进一步分离,结果分别如图2、3、4和5所示.实验结果显示,高活性组分分别为M 6 000组分第4个峰以及M4 000,1 000和水解原液的组分第2个峰,其血管紧张素转换酶抑制率分别为11.1%,89.9%,65%和49.7%,其中Mr 4 000组分第2个峰,显示出高的抑制活性.③血管紧张素转换酶抑肽的氨基酸分析结果:具有血管紧张素转换酶抑制活性的分离肽产物富含疏水氨基酸和芳香族氨基酸.结论:红非鲫鱼皮胶原蛋白的复合酶水解产物中存在较高活性的血管紧张素抑制肽,该肽富含疏水氨基酸和芳香族氨基酸,可以通过超滤、柱层析、液相色谱法从水解产物中分离.
