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双纸片法测定葡萄球菌诱导型克林霉素耐药的实验研究
大环内酯类、林克酰胺类和链阳菌素类B(macrolide,lincosamide and stretogramin B, MLSB)抗生素是广泛应用于治疗葡萄球菌及链球菌等细菌感染的抗菌药物,尤其是克林霉素和链阳菌素类常用来治疗严重的葡萄球菌等细菌感染并作为对青霉素过敏的首选替代药物.现大环内酯类药物已呈较高的耐药率,如能及时、准确地检测和报告诱导型 MLSB 的存在,可排除克林霉素潜在性耐药的威胁.本研究采用双纸片扩散法[1,2]对金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌进行诱导型耐药的实验研究及临床实用价值探讨.
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一种检测金属β-内酰胺酶的简便方法
金属β-内酰胺酶(metallo-β-lactamase,M-β-L)按Bush分类,属于3型酶[1],不仅能水解各种β-内酰胺类抗生素,且能水解碳青霉烯类.由于目前的ESBL菌感染的治疗以碳青霉烯类抗生素为首选,临床上出现了一些亚胺培南耐药菌,给治疗带来困难.为建立一种快速简便检测M-β-L的方法,我们对国外介绍的检测法进行了摸索和探讨,现报告如下.
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双纸片法检测可诱导的克林霉素耐药
葡萄球菌和链球菌是临床常见的引起多种感染性疾病的革兰阳性球菌,临床首选糖肽类抗生素,大环内酯类、克林酰胺类和链阳菌素类B(MLSB)亦用于其感染,尤其是克林霉素常用来治疗严重的感染,并作为对青霉素过敏的首选替代药物.
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嗜麦芽窄食单胞菌感染与耐药性分析
嗜麦芽窄食单胞菌即以前的嗜麦芽假单胞菌,后又称嗜麦芽黄单胞菌,1993年Phlleroni和Bradbury改为现名[1],该菌是院内感染重要病原菌,且对多种抗生素耐药,已引起临床的密切关注,为了解嗜麦芽窄食单胞菌耐药特点,我们对1997年~1999年分离的88株菌株进行了耐药性测定和产诱导型β-内酰胺酶的检测,现分析报告如下。1 材料和方法1.1 材料 1.1.1 菌株来源 88株受试菌株均为我院1997~1999年临床各类标本分离,其中痰62例,咽拭子10例,脓液8例,尿液5例,其他3例。1.1.2 试剂均为法国生物梅里埃产品。1.1.3 质控菌株铜绿假单胞菌 ATCC27853,大肠埃希菌ATCC25922。2 方法1.1 菌种鉴定按常规分离,对双糖铁似非发酵菌,氧化酶阴性,革兰氏阴性杆菌,用Vitek-NFC卡进行鉴定。1.2 药敏测定采用Vitek-GA卡,亚胺培南采用K-B法。1.3 诱导型β-内酶胺酶测定采用双纸片法进行测定[2]。
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双纸片法测定葡萄球菌诱导型克林霉素耐药的实验室检查
大环内酯类、林可霉素类和链阳霉素B(Streptogramin MLSB)是在功能上非常相似的抗生素.大环内酯类常用的有红霉素、克拉霉素和阿奇霉素:林可霉素类包括克林霉素和林可霉素:链阳霉素由喹蚁普叮和达福普叮两部分组成,起协同抗菌作用.上述3类抗生素通常称为MLS[1].
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产超广谱β-内酰胺酶革兰阴性杆菌的检测
目的研究大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌产超广谱β-内酰胺酶情况及耐药谱.方法收集2002年8月至2003年6月间从嘉善县第一人民医院分离的167株大肠埃希菌、154株肺炎克雷伯菌和67株阴沟肠杆菌,用头孢噻肟或头孢他啶药敏纸片筛选产ESBLs可疑株;用头孢噻肟和头孢噻肟加克拉维酸或头孢他啶和头孢他啶加克拉维酸双纸片扩散法检测ESBLs;采用K-B法进行药敏试验.结果符合CTX筛选标准的有158株,符合CAZ筛选标准的有94株,两者都符合的有76株,共176株产ESBLs可疑株.CTX和CTV/CA双纸片检出115株阳性,CAZ和CAZ/CA双纸片检出62株阳性,两种双纸片法都为阳性的有51株,共检出126株产ESBLs菌株.大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌的ESBLs检出率分别为30%(50/167)、34%(52/156)和36%(24/67).产ESBLs株对氨苄西林、阿齐霉素和克林霉素的耐药率近乎100%,对阿米卡星、环丙沙星和呋喃妥因的耐药相对较低,除2株产ESBLs肺炎克雷伯菌耐亚胺培南外,其余均为敏感.结论大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌的产ESBLs率较高,耐药性严重.筛选产ESBLs可疑株的佳纸片为CTX,表型确证产ESBLs菌株的佳双纸片为CTX和CTX/CA.阴沟肠杆菌的产ESBLs率超过肺炎克伯菌成为主要产ESBLs菌.
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产超广谱β-内酰胺酶(ESBL)细菌的药敏检测分析
目的:通过对129株产超广谱β-内酰胺酶(ESBL)细菌的分析,对临床针对性治疗ESBL耐药菌提出建议.方法:应用双纸片法测定临床分离的可疑产ESBL的大肠埃希氏菌和肺炎克雷伯氏菌.结果:210株大肠埃希氏菌ESBL阳性检出率为36%,77株肺炎克雷伯氏菌ESBL阳性检出率为68%.分离的129株ESBL细菌对青霉素类,一代、二代和三代头孢菌素、氨曲南耐药,对喹诺酮类、氨基糖苷类、复方磺胺耐药率在50%以上.结论:ESBL细菌的监测对指导临床用药具有重要意义.
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三种常用检测肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶方法的分析与研究
目的 评估三种检测产ESBLs肺炎克雷伯菌株常用方法 的可靠性.方法 选取2014年9月至2016年12月从收集三家医院PICU住院患儿深部痰液、血液、胸腹腔积液、创面分泌物等标本,排除同一患者同一部位重复分离的标本,分离非重复肺炎克雷伯菌207株.分别采用双纸片法、改良三维试验和自动仪器VITEK 2 Com-pact,对分离菌株进行ESBLs检测.检测结果 采用SPSS19. 0软件进行统计和分析,两种方法 之间不一致部分采用McNemarχ2检验,用Kappa检验两种检测结果 之间是否有一致性,P<0. 05为差异有统计学意义.结果 双纸片法、自动仪器法和改良三维试验ESBLs检出率分别是58. 5% (121/207)、61. 4% (127/207)和66. 7%(138/207).对三种方法 检测结果 进行两两间一致性检验,提示一致性较好(K>0. 4,P<0. 05)).双纸片法与自动仪器法检测结果 中不一致部分之间的差异无统计学意义(P>0. 05);改良三维试验与双纸片法检测结果 中不一致部分之间的差异有统计学意义(P<0. 05),改良三维试验的检出率高于双纸片法;改良三维试验与自动仪器法检测结果 中不一致部分之间的差异有统计学意义(P<0. 05),改良三维试验的检出率高于自动仪器法.结论 纸片法和自动仪器法具有操作快速简便、结果 可靠的特点,适合于临床微生物实验室常规开展检测ESBLs;改良三维试验可扩大ESBLs产酶菌株的检测范围,对表型试验起到重要补充作用.