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什么是蛋白质组学的基本技术流程?
答: 蛋白质组学的基本技术流程主要为以下四方面.1. 蛋白质标本的制备及分离:寻找较好的方法尽可能完全地抽提细胞或组织中的全部蛋白质是比较蛋白质组学研究的重要前提.由于不同细胞或组织中疏水性蛋白质,低丰度蛋白质,高丰度蛋白质,极性蛋白质等共存,很难用单一抽提液和方法将不同细胞或组织中全部蛋白质完全制备出.如希望获得尽可能完全的全部蛋白质,仍有赖于现有方法的不断改进和新方法的产生.
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淋巴细胞染色体畸变和微核分析估计生物剂量体系研究
为了解不同剂量的放射线对血细胞的致畸作用和实验室正常值,采用不吸烟的健康成年人外周血,用不同剂量的X射线照射,用以估计受照剂量的生物体系.采用0~3 GY之间的剂量范围进行外照射,经外周血淋巴细胞的培养,染色体标本的制备、染色体畸变分析后与相关剂量的对应关系进行比较.
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人体外周血淋巴细胞培养和染色体标本制备实验的改进
人体外周血淋巴细胞培养和染色体标本的制备是医学遗传学的重要实验内容之一,是我校本、专科各层次实验教学的必修内容.实验中我们通常采用RPMI 1640培养基外加植物血凝素 (PHA)、小牛血清及抗生素等成分培养血细胞,获得分裂相.其中PHA是影响实验结果的主要因素之一.为保证实验效果,本教研室首先从PHA的定量问题入手,对每次提取获得的PHA进行定量(效价)测定,再根据PHA的效价,换算出培养基中的PHA加入量,使每批次培养基中所含PHA的效价一定,从而保证实验结果相对稳定.1 材料和方法取菜豆(产地不限),洗净晾干,研磨成粉末,过50目铜筛.称取10 g浸泡于0.85%生理盐水50 ml中,置4℃冰箱,每隔6~8 h摇动一次.48 h后,取出.以4000 r/min离心20 min.取上清液,过滤,以G6玻璃滤器抽滤除菌,分装小瓶,冷冻保存,使用前采用常规效价测定方法进行定量(效价)测定.
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大鼠尾神经动作电位的引导及传导速度的测定
蛙坐骨神经动作电位(action potential,AP)的引导及传导速度的测定在机能学科学生实验中已开展多年,此实验是以坐骨神经干标本的制备、AP引导以及神经传导速度的测定为目的.
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血夜细胞检验中的几点注意事项
1 标本的采集为了取得准确、可告靠的检验结果,必须取得高质量的标本.保证血液标本中各项细胞的形态完整是血常规高质量标本的基本的要求.血液细胞检验标本的制备分为采集和抗凝2个步骤.
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腔镜活检小标本常规制片体会
腔镜主要是胃镜、肠镜、气管镜等,因其镜下可直接钳取直径在0.3cm以内的小块组织,广泛应用于疾病的诊断.而小标本的病理制备则直接关系到病理诊断的成败,现就小标本的制备谈几点体会.
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“传出神经系统药物对蟾蜍腹直肌的作用”实验改进
作为一门验证性的学科,从发展伊始,实验在药理学知识的获得及发展过程中具有不可替代的作用。几乎所有药理学知识都是通过实验--有目的的科学实验而得到的。传出神经系统药物药理是药理学重要的基础知识[1],其相关实验内容在药理学实验课教学中占有很大比例,是传统经典的药理学实验教学内容。其中,“传出神经系统药物对蟾蜍腹直肌的作用”是本科生实验教学中为数不多的离体器官实验之一,对于学生学习了解离体实验的研究方法具有重要意义。该实验除了以学习腹直肌标本的制备为目的外,还要观察乙酰胆碱兴奋骨骼肌的作用,以及拟胆碱药和抗胆碱药(肌松药)对乙酰胆碱作用的影响[2]。传统实验中,一般选择毒扁豆碱为拟胆碱药,筒箭毒碱为抗胆碱药[3]。但在长期的实验教学过程中发现该实验存在以下问题:(1)毒扁豆碱[4]和筒箭毒碱[5]都是从植物中提取的生物碱,其获得过程较复杂,价格昂贵。目前毒扁豆碱的价格为14000元/g,筒箭毒碱为8550元/g。(2)毒扁豆碱作为一种剧毒药物,属于国家管制药品,购买手续繁复。尤其近在大学校园内出现了多起学生中毒案件后,对该药的购买、保管等要求更为严格。(3)毒扁豆碱微溶于水,其溶液不易保存[6]。实验教学过程中发现,药物配制约半小时后即氧化变红,失去药效,影响实验结果。毒扁豆碱好临用时现配,不宜放置,增加了实验课准备的工作量。
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基于三维重建的冰冻断层标本制备的实验研究
本文在冰冻切片技术的基础上设计并自制了大体冰冻标本薄层切片机,以期能为生物组织三维重建断层标本的制备提供一个准确、经济、快捷的实验方法.大体标本冰冻切片机是由支架、标本升降系统、夹具和刀具等4个部分组成.支架是切片机的支撑,有使刀具作平行移动的滑动槽和保证标本作垂直升降的滑动槽.标本升降系统由升降转盘,螺帽、套筒、螺杆和载物台组成 .升降转盘带动螺帽旋转,使得螺杆和载物台作升降运动,切割精度可在0.5mm以下. 夹具为固定标本的夹板.为保证冰冻断层定标的准确性,需将组织在冰冻容器冰冻并埋设定标线.冰冻容器是用塑料板制成的一方形盒,在盒的两端有对等的定标孔的定标板,解决了冰冻断层定标准的问题.将准备好的组织标本经冷冻后放入设置了3根定标线的冰盒内,加入冰水后在-25℃的冰柜内冷冻.将制作好的冰冻组织块用夹具夹持在载物台上进行切割 .每切割一层便用Nikon880数码相机采集一幅图像,并将图像输入SGI图形工作站上进三维重建.该冰冻切片机制作简单,操作方便,制作周期短,获取的图像清晰,各层之间解剖结构的连续性较好,信息量丰富,且定标准确,是一种较好的薄层断面标本的制作设备和方法.在生物组织三维重建中具有广阔的应用前景.
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如何确保三分类血液分析仪的常规检验质量
为了取得准确、可靠的检验结果,首先要取得高质量的标本.另外,要正确分析细胞直方图,了解异常报警的含义,对异常直方图的标本要进行显微镜的形态学检查,为临床提供准确可靠的依据,以防漏检的发生.这一点尤为重要.