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足细胞特异性因子nephrin及肿瘤蛋白-1在肾小球硬化过程中表达变化
目的：应用嘌罗霉素氨基核苷（PAN）模型，通过观察临床、病理指标及足细胞特异性因子nephrin和肿瘤蛋白-1（WT-1）在足细胞的表达，了解足细胞损害在肾小球硬化过程中的重要作用。方法尾静脉注射PAN制作大鼠肾病模型，测定不同时间点的生化指标，处死大鼠，取其肾脏，石蜡包埋切片，PAS及免疫组化染色，测定肾小球硬化指数（GSI），肾小球面积（GA），nephrin及WT-1的表达，进行统计学分析。结果 PAN组在早期（第8天）表现为典型肾病综合征，后期（20周）表现为慢性肾炎。形态学方面，PAN组的GSI在4，14，20周均明显高于对照组（P＜0.05）。PAN组GA在14周时大于对照组（P＜0.01），但在20周时小于对照组（P＜0.001），并且20周时GSI与GA之间呈强负相关关系。PAN组nephrin表达在4，14，20周时与对照组比较均有所减少（P＜0.05），与此同时，WT-1的表达在14和20周时较对照组明显减少（P＜0.001）。结论（1）在肾炎发展中，随着时间延长，GSI增高，GA缩小，并且GSI和GA之间呈负相关。（2）在肾小球硬化发展中， nephrin和WT-1的表达进行性减少，说明有明显足细胞数量的减少。因此，足细胞的损伤与肾小球硬化密切相关。
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PAX8、WT-1、HER2在不同转移方式的晚期卵巢上皮性癌中的差异表达
目的：探讨PAX8、WT-1、HER2在不同转移方式的晚期卵巢上皮性癌中的表达差异，为临床治疗提供一定的理论基础。方法：收集临床样本，按照转移方式分为淋巴结转移组1例、混合转移组14例和盆腹腔转移组5例。采用实时定量荧光PCR方法检测PAX8、WT-1、HER2在20例不同转移方式的晚期卵巢上皮性癌中的相对表达量。结果：PAX8、WT-1、HER2在20例患者中均有表达；混合转移组PAX8、WT-1、HER2基因表达高于盆腹腔转移组。结论：PAX8、WT-1、HER2基因的表达可能与肿瘤的转移方式有关，可能成为提示预后的基因指标并对临床有一定提示作用，但仍需扩大样本进一步验证。
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WT-1蛋白在卵巢颗粒细胞瘤和卵泡膜细胞瘤中的表达及意义
目的 探讨WT-1蛋白在卵巢颗粒细胞瘤和卵泡膜细胞瘤中的表达及意义.方法 用免疫组织化学方法研究WT-1蛋白在37例卵巢颗粒细胞瘤(GCT)和39例卵泡膜细胞瘤(TCT)及10份健康卵巢组织中的表达.结果 在卵巢GCT和TCT组织中,WT-1蛋白的表达明显高于其在正常组织中的表达.且高、中分化组与低分化组之间,Ⅰ期、Ⅱ期与Ⅲ期之间的差异均有统计学意义(P＜0.05),即随组织学分级与临床分期提高而降低.WT-1蛋白阳性表达的病例10年生存率高于阴性表达者,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 WT-1蛋白有望作为卵巢GCT和TCT的辅助标记物和影响预后的一个因素,能为病理诊断和判定预后提供一定的指导作用.
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小鼠胚胎心脏心外膜细胞体外培养模型的建立
背景：胚胎心脏心外膜细胞是近被发现的具有分化为心肌细胞和血管平滑肌细胞潜能的心脏干细胞，可分化为心脏三系细胞，为心脏损伤的再生提供了新的细胞来源，但其定向分化机制及调控因素仍不清楚。目的：体外建立小鼠胚胎心脏心外膜细胞培养模型。方法：解剖显微镜下分离11.5-12.5 d小鼠胚胎心脏，剪除肺静脉血管、心房组织及左心室，移至6孔板(或35 mm培养皿)培养，24 h后移走胚胎心脏组织继续培养。相差显微镜观察胚胎心外膜细胞生长特点；使用免疫荧光技术对细胞进行胚胎心外膜细胞特异性抗体Wt-1、Tbx18染色。结果与结论：胚胎心外膜单层细胞从组织块边缘长出，呈鹅卵石样，并围绕组织块向外延伸。移去胚胎心脏后细胞继续生长，且增殖迅速，三四天后长至融合。所有细胞均强阳性表达胚胎心脏心外膜细胞特异性抗体Wt-1及Tbx18。结果表明，胚胎心脏心外膜细胞生长迅速、形态单一，均表达心外膜细胞特异因子，细胞纯度高，成功构建了体外胚胎心脏心外膜细胞培养模型，为研究其定向分化的分子机制提供了新的思路。
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CD117、CD34、DOG-1、WT-1在胃肠道间质瘤中的表达及意义
目的:探讨DOG-1、CD117、CD34、WT-1在胃肠道间质瘤(GIST)中的表达及临床意义.方法:应用免疫组织化学SP法检测DOG-1、CD117、CD34、WT-1在39例GIST患者肿瘤组织中的表达.结果:GIST光镜下主要由梭形细胞和(或)上皮样细胞或多形性细胞混合或单一性组成.DOG-1、CD117、CD34和WT-1在GIST肿瘤组织中阳性表达率分别为92.3％(36/39)、71.7％(28/39)、64.1％(25/39)、23.1％(9/39),四者的阳性表达率在各风险程度组(极低及低度危险性GIST、中度危险性GIST、高度危险性GIST)两两比较中差异均无统计学意义(P＞0.05).DOG-1与CD117相比,在极低及低度危险组中表达有显著差异(P＜0.05),DOG-1与CD34相比,在极低及低度危险组、高度危险组中表达有显著差异(P＜0.05);WT-1与CD117相比,在中度及高度危险组中表达有显著差异(P＜0.05),WT-1与CD34相比,在中度危险组中表达有显著差异(P＜0.05).对照组平滑肌瘤、纤维瘤、神经鞘瘤中CD117、DOG-1在GIST中的表达明显高于其他多种梭形细胞的表达(P＜0.05).结论:DOG1是GIST较为敏感和特异的标记物,WT-1在极低及低度危险性GIST中有一定的诊断价值,在GIST的诊断中加入两者将使患者更加受益.
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石棉肺并发恶性胸膜间皮瘤27例诊治分析
目的 探讨本地区石棉肺患者并发恶性胸膜间皮瘤(MPM)的临床特点、诊断、治疗及预后.方法 回顾性分析27例恶性胸膜间皮瘤患者的临床资料.结果 恶性胸膜间皮瘤的主要症状为胸痛、呼吸困难、咳嗽;胸部CT主要表现在石棉肺基础上出现胸腔积液、弥漫性胸膜增厚,胸膜结节;确诊依赖于获得病理学依据及免疫组化.结论 胸部CT有助于诊断MPM,但终需依赖病理组织学和免疫组化,Calretinin,WT-1,CK5/6和D2-40是较为理想的标记物,可作为诊断与鉴别诊断首选抗体.以手术配合化疗等综合治疗可延长生存期、改善生活质量.
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WT-1、AR和Ki-67在睾丸穿刺活检组织病理诊断中的应用
目的：探讨睾丸穿刺活检标本中Sertoli细胞和生精细胞的特异性标志物。方法选取3例经病理诊断为前列腺腺癌行去势治疗的正常睾丸组织及15例临床诊断为无精症的睾丸穿刺活检组织，采用免疫组化EnVision两步法检测WT-1、AR和Ki-67的表达。结果免疫组化染色显示WT-1和AR在3例正常睾丸组织和15例睾丸穿刺活检组织曲细精管内的Sertoli细胞胞核均呈棕黄色，阳性率均为100%，生精细胞胞核的阳性率为0。15例睾丸活检组织中生精细胞的Ki-67阳性率为100%。结论 WT-1、AR和Ki-67可做为睾丸穿刺活检组织中Sertoli细胞和生精细胞的特异性标志物，为睾丸穿刺活检的病理诊断提供依据。
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WT-1在中枢神经系统孤立性纤维性肿瘤/血管周细胞瘤中表达及临床病理学研究
目的 探讨WT-1在中枢神经系统孤立性纤维性肿瘤/血管周细胞瘤(SFT/HPC)中的表达情况及临床病理学意义.方法 回顾性分析36例中枢神经系统SFT/HPC的WT-1免疫组织化学染色情况,以29例脑膜瘤作为对照.结果 SFT/HPC以瘤细胞围绕血管形成血管外皮瘤样结构为特点,肿瘤小血管呈WT-1强弱不等的阳性表达或不表达,而毛细血管呈弥漫性强阳性表达.在脑膜瘤中,WT-1表达与肿瘤血管的大小和肿瘤的类型及分级无明显关联性(r=0.027 27,P=0.757 2).结论 WT-1可作为SFT/HPC区别脑膜瘤的标记物,将来也可作为抗SFT/HPC血管生成治疗的潜在靶点.
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低分子量肝素对糖尿病大鼠肾组织的保护作用
目的:观察低分子量肝素(LMWH)对糖尿病(DM)大鼠肾组织Wilm's tumor-1(WT-1)蛋白表达的影响,探讨其可能的肾保护作用机制.方法:将雄性SD大鼠分为对照组、糖尿病组、LMWH治疗组.于LMWH治疗后第6周末观察肾小球细胞数及细胞外基质(ECM)聚积;定量检测肾小球WT-1蛋白的表达.间接免疫荧光法检测尿沉渣足细胞WT-1蛋白,阳性即为尿液足细胞(UPC).结果:糖尿病组UPC、24 h尿蛋白(UTP)均较对照组及LMWH治疗组明显升高(P＜0.01或P＜0.05).病理组织学上,糖尿病组肾小球细胞数及ECM/肾小球毛细血管襻面积较LMWH组增多(P＜0.05或P＜0.01)).DM组肾组织WT-1蛋白表达显著低于对照组和LMWH组(P＜0.01),对照组和LMWH组无统计学意义,UPC与UTP呈正相关(rs=0.46,P＜0.05).结论:LMWH可减轻DM大鼠UAER及UPC的排泄,抑制肾小球细胞数及ECM增殖,恢复肾组织WT-1表达而有肾保护作用.
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intermedin预处理对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的相关修复基因的影响
目的 探讨intermedin(IMD)预处理对大鼠肾脏缺血再灌注损伤(IRI)修复再生过程中相关修复基因的影响.方法 健康雄性Wistar大鼠144只,随机分为假手术组、IRI 组、转染空质粒组和转染IMD组.动物右肾切除后,用超声微泡技术将质粒转染入左肾,1周后制作肾脏IRI模型.分别于再灌注后1d、2d、3d、4d、7d和14 d留取肾组织标本.RTPCR法检测肾组织Pax-2、ZO-1、Ncam、Wt-1和vimentin的mRNA表达变化；Western印迹法分析Pax-2、Wt-1和vimentin蛋白表达变化；ELISIA法检测ZO-1、Ncam的蛋白表达变化.结果 (1 )IRI组大鼠Pax -2、Zo-1、Ncam、Wt-1和vimentin的mRNA和蛋白的表达在IRI后1～3 d增加,2d达到高峰,与假手术组相比差异有统计学意义(P＜0.05),4d后基本恢复.(2)在IRI后1～4 d,转染IMD组上述的mRNA和蛋白表达与同时间点的假手术组、IRI组和转空质粒组相比差异均有统计学意义(均P＜ 0.05),其中2d达高峰.(3)在IRI后7d、14 d,IRI组、转染空质粒组和转染IMD组上述指标的mRNA和蛋白表达和假手术组差异无统计学意义(均P＞ 0.05)；在IRI后4d,IRI组和转空质粒组上述的表达较假手术组增高,但差异无统计学意义(P＞0.05).(4)各时间点IRI组和转染空质粒组上述各指标差异均无统计学意义(P＞0.05).(5)ELISA法检测的ZO-1和Ncam蛋白表达变化趋势与RT-PCR及Western印迹法一致.结论 IMD预处理可通过增加肾脏组织修复基因Pax-2、ZO-1、Ncam、Wt-1和vimentin的表达,从而对肾组织的修复和再生起到重要作用.
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WT-1、P53蛋白在上皮性卵巢癌中表达情况的临床统计及分析
目的:本文主要对WT-1、P53蛋白在不同年龄、期别、分化程度的上皮性卵巢癌患者的术后病理免疫组化中的表达情况进行临床统计并加以分析,用以临床上指导上皮性卵巢癌患者术后的追加治疗及预测患者的预后.方法:通过免疫组化法分析各蛋白阳性表达情况与不同因素之间是否存在统计学意义,P<0.05定为有统计学意义.结果:WT-1蛋白表达情况在上皮性卵巢癌的不同分期(P<0.025)及分化(P<0.005)有显著差异;P53蛋白阳性表达在肿瘤不同分期(P<0.025)及不同分化级别(P<0.05)有显著差异.结论:在低分化上皮性卵巢癌中WT-1蛋白阳性表达率高于高分化,且较晚期别中阳性表达率高于早期,在低分化上皮性卵巢癌中P53蛋白阳性表达率高于高分化,较晚期别中的阳性表达率高于早期.两个蛋白可用于对上皮性卵巢癌病情程度的判断及不良预后的预测,同时可能为生物学靶向治疗提供新的治疗靶点.
