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毛囊不同发育阶段表皮干细胞NK-1受体表达特征的实验研究
目的:通过观察不同阶段表皮干细胞表面感觉神经肽SP的受体NK1的表达特征与鼠毛囊发育间的相关性,研究表皮干细胞分化发育为毛囊时感觉神经肽的作用,为研究通过神经调控诱导表皮干细胞向毛囊分化奠定基础.方法:实验取胎龄12.5～13.5d胎鼠、1～2d新生鼠、成鼠三组皮肤标本,以β1整合素及K19双标阳性表达定位表皮干细胞,免疫组化方法定性、半定量分析NK1受体表达.结果:不同发育阶段鼠表皮干细胞表面均有NK1受体表达,其阳性表达率与ESC双标阳性表达率无明显差异;胎鼠及新生鼠NK1受体表达率同成鼠之间存在明显差异,提示鼠毛囊发生期前ESC的NK1受体表达明显高于毛囊静止期.结论:感觉神经肽在由ESC分化发育为毛囊过程中具有重要启动及调控作用.
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pH值对毛乳头细胞凝集性生长的影响
毛乳头细胞(dermal papilla cells,DPC)是一群位于毛囊基底部的真皮源性细胞,在毛囊发育和周期性再生调控中起主导作用[1-3].
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斑秃患者血清中几种细胞因子的检测
越来越多证据表明,斑秃是一种T细胞介导的自身免疫疾病,细胞因子及生长因子在斑秃中起着重要作用.血小板源生长因子(platelet-derived growth factor,PDGF)及转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)在毛囊发育及毛发生长的调节中起重要作用[1,2].近年来研究发现,可溶性Fas(sFas)在调节正常Fas活性和自身免疫疾病中起着重要作用[3].为探讨细胞因子与斑秃发病的关系,我们对斑秃患者外周血中的PDGF、TGF-β1和sFas水平变化进行了初步研究.
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毛囊发育和循环生长的信号机制的研究进展
近年来,脱发现象趋于普遍性和年轻化.临床对脱发的分类主要有:瘢痕性和非瘢痕性脱发.目前对各类脱发产生的原因尚不完全清楚,过去几十年来,对秃发的认识和理解主要集中在:瘢痕性脱发是毛囊上部干细胞以及腺体所在部位的炎症反应[1];非瘢痕性脱发则与激素的代谢和局部免疫反应有关.而新研究显示[2],在瘢痕性脱发和非瘢痕性脱发中毛囊干细胞对毛囊的分化和生长都起到重要的支持作用.因为毛囊的形态发育和再生具有高度相似性,所以清楚的理解毛囊发育的信号机制将为创造一个利于毛囊和皮肤再生的局部微小环境.
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C57BL/6小鼠皮肤毛囊发育的实验研究
目的 探讨胎鼠,乳鼠和成鼠毛囊发育的规律.方法 石蜡和冰冻超薄切片,采用HE染色, AP活性染色,油红O染色,凋亡细胞鉴定等方法观察不同时期C57BL/6小鼠毛囊的发育情况. 结果 胚胎发育第15.5 d(E15.5)开始出现毛囊,至E18.5胎鼠背部皮肤逐渐增厚,毛囊逐渐增多.乳鼠出生第1 d毛囊大部分处于第4阶段之前,毛囊数量继续增加,至出生第4 d皮肤基底层未见新生的毛囊,此时毛囊数量维持不变,出生第9 d毛囊达到第8阶段.成鼠脱毛后第9 d约有95%的毛囊进入生长Ⅳ期,第17 d 约有63.3%的毛囊进入退化期,第22 d约有85%的毛囊处于退化期.结论 小鼠毛囊的早期发育起始于E15.5,从E17.5到出生后3 d毛囊数量呈快速增加趋势,因此,这一时期可以用于探讨毛囊再生机制等相关研究.
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整合素β1在大鼠毛囊中的表达稳定性研究
目的 探讨整合素β1(β1 integrin)在大鼠背皮毛囊发育及生长周期中的表达及其意义.方法 采用免疫组织化学技术检测β1 integrin在胚胎E17.5、E18.5、E19、E20和出生后1、7、29 d的表达.结果 在E17.5、E18.5、E19、E20 β1 integrin在发育毛囊中未见表达,在胚胎前期即E17.5、E18.5时表皮呈阳性表达,到E19、E20转为阴性.出生后1、7 d β1 integrin 在毛囊外根鞘中下段接近毛球部呈阳性表达,29 d在皮脂腺细胞呈阳性表达.结论 β1 integrin在大鼠毛囊生长期作为毛囊干细胞标记物比较好,并且它对毛囊干细胞维持自身的稳定性有重要作用.
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转导素β-TrCP在小鼠毛囊发育中的表达与意义
目的 观察转导素β-TrCP在出生后乳鼠须毛囊的表达情况,并探讨β-TrCP在毛囊发生中的作用.方法 分别取胚胎18 d、出生后第1 d、6 d小鼠头部标本,40 g/L多聚甲醛固定,石蜡包埋,用LsAB法观察β-TrCP在须毛囊中的表达分布情况,并进行图像分析.结果 在出生后不同发育时期的须毛囊中,β-TrCP在毛囊发育时期的毛干细胞与毛小皮细胞胞浆阳性表达;鞘小皮细胞胞浆、内根鞘Huxley层、外根鞘、间充质细胞胞浆阳性表达.内根鞘亨勒层细胞胞浆与结缔组织鞘细胞胞浆阴性表达.图像分析显示出生第6 d表达量与胚胎18 d表达量的差异有统计学意义(P<0.01).结论 β-TrCP在小鼠毛囊发育中呈现特征性表达.提示β-TrCP对于毛囊发育的分子信号通路正常传递具有重要作用.
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β-catenin及其在毛囊发育中的作用
人们在对细胞生长调控研究的过程中发现,wnt途径是调控细胞生长增殖的关键途径,不仅在胚胎发育中起重要作用,而且与肿瘤的发生密切相关.目前认为wnt途径主要包括以下几个部分:细胞外信号分子、相应的膜受体、胞内蛋白以及核内转录因子.其中β-catenin是上皮细胞间一种重要的粘附分子,也是wnt信号途径重要的组成成分,当细胞外信号分子与细胞膜上的相应受体结合后,通过一系列胞质蛋白的相互作用使β-catenin在胞质内堆积,进而进入核内,激活靶基因转录,调节组织的形态发生,异常的信号传递会引起细胞过度增殖,甚至癌变.毛囊是皮肤重要的附属结构,毛囊的发育受wnt信号途径的调节,尤其是β-catenin在其中发挥重要作用,是表皮更替、毛囊发育不可缺少的因素.本文就β-catenin及其在毛囊发育中的作用作以综述.
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毛囊干细胞与组织工程研究进展
毛囊干细胞研究取得突破性进展的标志是由孙同天、Lavker和Cotsarelis等提出了隆突激活假说,明确了其定位的部位,是少数几种成体干细胞首先被明确定位的干细胞之一,并逐步得到了验证.毛囊干细胞不仅可以分化为毛囊上皮细胞,而且可以分化为皮脂腺细胞、表皮角质形成细胞,其分化过程是干细胞分化为短暂倍增细胞,后分化为终末分化细胞.近年来进一步证明了毛囊隆突部也是多种干细胞的居住地,包括黑素干细胞,和毛囊干细胞存在同步化激活的机制.Wnt/β-catenin是毛囊发育、再生循环的基本信号通路,使毛囊在再生过程出现着色一致的毛发.诱导和重建毛囊形成是组织工程皮肤主要的目标之一,毛乳头细胞的凝集性生长特性是诱导毛囊形成的条件,因此,维持毛乳头细胞凝集性生长特性主要有细胞团块法、低黏附性培养板(或高分子材料膜)法、悬滴培养法和胶原凝胶成球法,以实现体外重建毛乳头的目的.毛囊组织工程在体外还不能真正诱导形成,现有的毛囊再生或新生的成功方法还是须移植到动物体内,才能形成完整毛囊并产生毛发.主要方法有移植小室法、混合游离细胞注射法和皮瓣法.诱导毛囊形成比较成功的细胞是啮齿类动物来源的胚胎或新生鼠毛囊细胞和人胚胎毛囊细胞,成年人头皮毛囊来源细胞目前仍未能诱导出毛囊新生或再生.
关键词： 毛囊干细胞 组织工程 毛囊发育 毛囊重建 Wnt/β-catenin信号通路
