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CD44与CD62P在原发性肾小球肾炎患者中的表达及其及意义
细胞粘附分子是近几年来发现的一类来自不同基因的配体/受体分子,它们介导了细胞信息传递的关键步骤[1].粘附分子P选择素(CD62P)与细胞表面糖蛋白(CD44)均为粘附分子家族中的重要成员,CD44主要介导细胞与细胞、细胞与基质之间的特异性粘连,与肾小球肾炎时的白细胞浸润、细胞增殖及细胞外基质的增加有关[2].CD62P作为血小板粘附活化与释放反应特异的标志物,在免疫识别、炎症反应和血栓形成过程中起重要作用.我们采用流式细胞术观察了90例原发性肾小球肾炎患者外周血单核细胞(PBMC)CD62P及CD44分子的表达特征,旨在探讨CD44及CD62P在肾脏疾病中的作用.
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单克隆人胰腺干细胞的形态和蛋白表达特征
目的 研究1例单克隆人胰腺干细胞系的细胞形态和表达特性.方法 10例4~5月龄流产胎儿胰腺组织,胶原酶消化.原代细胞DMEM培养,胰蛋白酶消化传代.在传代中逐渐纯化胰腺干细胞.克隆环筛选单克隆人胰腺干细胞,扩增培养.活力较好的细胞液氮冷冻保存.采用HE和Giemsa染色,观察单克隆人胰腺干细胞的形态特征;通过透射电镜分析其超微结构.用免疫组织化学反应和RT-PCR方法,检测其蛋白水平和mRNA水平的表达特征.结果 1例来源于4月龄男性胎儿的单克隆人胰腺干细胞建系,传50代.液氮保存细胞1×109个以上.单克隆人胰腺干细胞完全贴璧时呈多角形上皮样,单核,圆形或椭圆形,单、双或多核仁.细胞核质比大.线粒体、内质网等细胞器均不发达,胞质内无分泌颗粒,属于发育早期的胰腺上皮样细胞.共表达胰肠同源域因子1(pdx1)、胰高血糖素、巢蛋白及角蛋白19(CK19),不表达胰岛素、周期蛋白34(CD34)、CD44及CD45.转录表达pdx1、胰高血糖素及巢蛋白的mRNA,不转录表达胰岛素.结论首次证实1例共表达pdx1、胰高血糖素、巢蛋白及CK19蛋白的单克隆人胰腺干细胞系.
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凋亡相关因子Caspase-3、Survivin在急性胰腺炎患者中的表达及意义
目的 探讨急性胰腺炎患者凋亡相关因子Caspase-3和Survivin的表达及其临床意义.方法 选取82例急性胰腺炎患者,其中轻症38例,重症44例.所有患者均术中留取胰腺组织标本进行免疫组化.观察轻症与重症患者的HE染色与免疫组化表现,比较HE病理评分、Caspase-3、Survivin平均光密度及Caspase-3、Survivin阳性率.结果 轻症患者的HE染色表现为胰岛组织出血,胰腺腺泡、小叶、细胞等间隙发生明显增宽;重症患者为正常结构消失、组织坏死、中性粒细胞浸润.轻症患者的Caspase-3免疫组化表现为胰腺腺泡组织胞浆深染,重症患者为淡染;轻症与重症患者Survivin免疫组化均表现为胰腺组织胞浆黄染,但重症患者颜色更深.轻症患者的HE病理评分、Survivin平均光密度低于重症患者(P<0.05),Caspase-3平均光密度高于重症患者(P<0.05).轻症患者Caspase-3阳性率55.26%,高于重症患者31.82%(P<0.05).轻症患者Survivin阳性率26.32%,低于重症患者52.27%(P<0.05).结论 急性胰腺炎患者早期已出现凋亡系统紊乱,表现为轻症患者的Caspase-3高表达与Survivin低表达.随着病情进展,Caspase-3表达减弱、Survivin表达加强,二者有负反馈调节作用.
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胰腺癌组织MGMT,hMLH1和hMSH2的表达意义
目的:研究MGMT,hMLH1和hMSH2在慢性胰腺炎和胰腺癌组织中表达特征及其临床病理意义.方法:胰腺癌(n=51)和慢性胰腺炎(n=10)手术切除标本经40 g/L中性甲醛固定后常规制作石蜡包埋切片,MGMT,hMLH1和hMSH2表达均采用常规ABC免疫组化法.结果:胰腺癌MGMT,hMLH1和hMSH2表达阳性率(39.2%,45.1%和50.9%)及其评分(1.8±1.4,1.7±1.6和1.9±1.7)明显低于慢生胰腺炎阳性率(100.0%,100.0%和90.0%)及其评分(3.8±0.8,3.8±1.0和3.5±0.9),均有显著或高度显著生差异(P<0.05或P<0.01);转移病例三者表达阳性率及其评分较明显低于未转移病例,但均无显著生差异(P<0.05);三者表达与胰腺癌其他临床病特征无明显关系.结论:MGMT,hMLH1或hMSH2表达与胰腺癌发生及进展密切相关,均具有抑制胰腺癌发生及进展的作用.
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胰腺癌组织ChAT,GAD65和PKC酶活性的表达
目的:研究ChAT,GAD65和PKC酶活性在慢性胰腺炎和胰腺癌组织中表达特征及其临床病理意义.方法:胰腺癌(n=47)和慢性胰腺炎(n=10)手术切除标本经40 g/L中性甲醛固定后常规制作石蜡包埋切片,ChAT,GAD65和PKC酶活性表达染色方法均为常规ABC免疫组化法.结果:胰腺癌ChAT,GAD65和PKC表达阳性率(48.9%,55.3%和57.4%)及其评分(2.2±1.4,2.2±1.2和2.1±1.6)明显高于慢性胰腺炎阳性率(0%,10.0%和10.0%)及其评分(0.2±0.4,0.6±0.9和0.6±0.9),均有显著或高度显著性差异(P<0.05或P<0.01).高分化腺癌ChAT评分值明显高于低分化腺癌(P<0.05),但阳性率之间无明显差异(P>0.05);高分化腺癌GAD65,PKC表达阳性率及其评分明显低于低分化腺癌,均有显著或高度显著性差异(P<0.05或P<0.01).酶活性表达与胰腺癌患者性别、年龄、有无转移等临床特征均无明显关系.GAD65评分与PKC评分存在高度密切关系(r=0.50,P<0.01)结论:ChAT,GAD65和PKC酶活性表达特征可能与胰腺癌发生发展及生物学行为有密切关系,均为胰腺癌重要生物学标志物.
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人类白细胞抗原DR和E-钙粘素在肺癌中的表达及意义
人类白细胞抗原DR( HLA-DR)是人类主要组织相容性复合体(MHC)Ⅱ类分子的主要抗原之一,研究表明肿瘤细胞表面异常表达HLA-DR,其表达水平与肿瘤的发生、发展及转移密切相关.E-钙粘素是一种钙依赖性粘附分子,与肿瘤侵袭和转移的相关性已有不少的报道.我们观察HLA-DR和E-钙粘素在非小细胞肺癌表达,探讨二者的表达特征及其临床意义.
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用免疫学方法分析急性白血病中多系表达
急性白血病(AL)免疫分型不但可以识别白血病细胞的系列来源、所处的分化阶段,而且对某些抗原表达的亚型与预后关系的判断具有指导意义.多系抗原表达是AL免疫分型中较少见的类型,国内外的报道较少,本研究对此类型的表达特征及意义作简要分析,以利于今后白血病的诊治.
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瘢痕组织中神经丝蛋白的表达特征及生物学意义
目的:观察瘢痕组织与成人正常皮肤中神经丝蛋白(NFP)及其表皮生长因子受体(EGFR)表达变化,阐明神经再支配对增生性瘢痕形成的影响.方法:标本取自烧伤瘢痕愈合后11~26个月来我院进行修复手术的病人,正常对照选自同一病人的供皮区.利用单克隆抗体免疫组织化学染色技术,光镜下观察瘢痕组织及正常皮肤上皮中神经丝蛋白(NFP)的表达和表皮细胞生长因子受体(EGFR)在表皮基底层细胞的标记情况.结果:随着瘢痕的形成,瘢痕组织与正常皮肤上皮中神经纤维的数量表现为早期明显增强,随着瘢痕的成熟,神经纤维的数量逐渐减少.表皮细胞生长因子受体的表达与NFP的动态变化呈现一致性,瘢痕早期表皮细胞生长因子受体的表达较强,瘢痕后期的表达减弱.结论:增生性瘢痕与正常的皮肤中神经丝蛋白(NFP)的变化与表皮细胞生长因子受体(EGFR)活性与创面愈合的结局密切相关.神经调节在瘢痕形成的过程中可能充当了重要的角色.
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表皮细胞生长因子和受体在胎儿肠道细胞中的表达特征及其意义
目的:研究表皮细胞生长因子(EGF)及其受体(EGFR)在胎儿和成人小肠组织中的表达特征以及可能的生物学意义.方法:21例被测标本中包括不同胎龄的胎儿小肠组织19例和成人小肠组织2例.用免疫组化方法和病理技术确定这两种蛋白在胎儿和成人小肠组织中的定们和表达量的变化规律.结果:EGF及其受体在不胎龄的胎儿和成人小肠组织中都有阳性表达.随着胎儿生长发育,小肠组织中EGF和EGFR的蛋白含量逐渐啬,这一变化趋势一直保持到成人皮肤组织中,其中EGF蛋白主要存在于小肠粘膜上能上能下细胞、粘腊下层的血管内皮细胞内和浆膜上皮细胞的胞浆和胞外基质中,EGFR则分布于这些细胞的细胞膜上.结论:EGF的生长发育、结构和功能的维持以及损伤后的修复.
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毛囊不同发育阶段表皮干细胞NK-1受体表达特征的实验研究
目的:通过观察不同阶段表皮干细胞表面感觉神经肽SP的受体NK1的表达特征与鼠毛囊发育间的相关性,研究表皮干细胞分化发育为毛囊时感觉神经肽的作用,为研究通过神经调控诱导表皮干细胞向毛囊分化奠定基础.方法:实验取胎龄12.5~13.5d胎鼠、1~2d新生鼠、成鼠三组皮肤标本,以β1整合素及K19双标阳性表达定位表皮干细胞,免疫组化方法定性、半定量分析NK1受体表达.结果:不同发育阶段鼠表皮干细胞表面均有NK1受体表达,其阳性表达率与ESC双标阳性表达率无明显差异;胎鼠及新生鼠NK1受体表达率同成鼠之间存在明显差异,提示鼠毛囊发生期前ESC的NK1受体表达明显高于毛囊静止期.结论:感觉神经肽在由ESC分化发育为毛囊过程中具有重要启动及调控作用.
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不同发育阶段人皮肤β1整和素及细胞角蛋白K19表达特征及其与创面修复结局关系的研究
严重烧创伤等所致皮肤损伤后的愈合能力随着人年龄的增大而逐渐降低,其原因涉及多方面,其中表皮细胞增殖分化潜能的改变可能是其重要原因之一.由于皮肤中β1整和素及细胞角蛋白K19仅在具有增殖与分化潜能的表皮干细胞和短暂扩充细胞上表达,本研究利用β1整和素和细胞角蛋白K19单抗,观察人胚胎期、幼儿期、成人期皮肤中表皮干细胞和短暂扩充细胞分布、数量的差异,并探讨这种差异特征与创面表皮再生能力随年龄降低的关系.分别取23~24周龄胎儿、4~10周岁幼儿、35~51岁三组全层皮肤.取材后即刻10%甲醛固定,常规石蜡包埋,切片5μm待用.采用免疫组织化学SP法,β1整和素和细胞角蛋白K19单抗分别购自Neo Markers和Maxim Biotech公司.β1整合素细胞膜染成棕黄色为阳性细胞,角蛋白细胞浆染成棕黄色为阳性细胞,同时设不加一抗的阴性对照.结果显示在胎儿期皮肤表皮基底层细胞β1整和素及角蛋白K19染色均为阳性,毛囊隆突部细胞β1整和素及角蛋白K19表达也均为阳性.幼儿期表皮基底层细胞中有部分细胞表达β1整和素及角蛋白K19,阳性细胞并非散在均匀分布,而是数个阳性细胞相对集中呈片状分布,β1整和素与角蛋白K19的表达规律相似.成年人表皮基底层中表达β1整和素及角蛋白K19的细胞也呈片状分布,阳性细胞率较幼儿组低,且染色强度较弱.本实验结果提示,胎儿期表皮基底层均为表皮干细胞和短暂扩充细胞,毛囊隆突部也含有大量的表皮干细胞和短暂扩充细胞,而幼儿期表皮基底层中仅有部分细胞为干细胞和短暂扩充细胞,成人期干细胞及短暂扩充细胞所占的比例则进一步降低.这可能与胎儿期皮肤的损伤在结构上能够完全修复,包括皮肤附件如毛囊、汗腺等也能完全再生,以及临床中幼儿皮肤损伤后再上皮化能力较成人强的现象有关.
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妊高征母亲之新生儿ACE基因多态性表达特征及其临床意义
研究显示血管紧张素转换酶(angiotensin converting enzyme, ACE)基因多态性与妊娠高血压疾病(简称妊高征)有关,且可能影响到胎儿[1-3];而妊高征引起的胎儿窘迫和/或出生时窒息可致新生儿缺氧缺血性损伤(hypoxic-ischemic damage,HID).本研究旨在探讨妊高征孕母子代ACE基因多态性的表达特征,并评价其在新生儿HID发生中的临床意义.
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阿霉素肾病大鼠肾小球nephrin、podocin蛋白的表达
2003年10月我们利用Sprague Dawley大鼠单次尾静脉注射盐酸阿霉素(ADR)诱导微小病变肾病模型,应用免疫蛋白印迹技术,检测ADR肾病大鼠肾小球nephrin及podocin蛋白进行了检测,以了解其表达特征.
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癫癎大鼠脑内白细胞介素6的表达特征
有临床资料显示,有癫(疒间)病史或癫(疒间)发作的患者脑脊液和血浆白细胞介素6(IL-6)浓度升高,动物实验也证明,在各种癫(疒间)发作模型中脑内IL-6表达增加.我们试图通过研究红藻氨酸(KA)诱导癫(疒间)发作的动物模型相关脑区中IL-6的表达特征及其与c-Fos表达的比较,进一步探讨IL-6在癫(疒间)发作中的意义及其细胞学来源.
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骨巨细胞瘤p21WAF1/CIP1、PCNA的表达及其与病理分级和复发的关系
骨巨细胞瘤(giant cell tumor of bone,GCT)是一种常见的介于良、恶性之间的原发性骨肿瘤,术后易复发,临床上常用的Jaffe病理分级难以准确评估其预后,D21WAFI/CIPI与肿瘤细胞分化密切相关,可抑制某些肿瘤细胞的生长.本文采用免疫组化技术,检测38例GCT中p21WAFI/CIPI蛋白以及反映细胞增殖活性的增殖细胞核抗原PCNA的表达,探讨两者表达特征及其与复发、预后的关系.
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肿瘤-睾丸抗原与肿瘤免疫治疗
1肿瘤-睾丸抗原的发现Van der Bruggen和Terry Boon等人发现了第一个人类肿瘤特异性抗原--MAGE-A1,在恶性黑色素瘤患者中它能诱发针对自身肿瘤细胞的特异性细胞毒T细胞(Cytotoxic T Lymphocyte,CTL)反应.目前已经发现了24个MAGE家族成员,它们均位于X染色体上,根据其在染色体上分布的区域不同,将MAGE家族分为A、B、C、D、E、F六个亚家族.MAGE-A亚家族由12个成员组成,位于人染色体Xq28,长约45 kb,有三个外显子,各成员之间高度同源(80%~99%),MAGE家族中的A、B、C三个亚家族具有独特的表达特征:(1)在正常组织中,除了睾丸组织和胎盘组织外,几乎不表达;(2)可表达于以恶性黑色素瘤为主的多种组织学来源的肿瘤组织中,研究发现,除了肾细胞癌和髓性白血病以外,人类半数以上的各种组织类型的肿瘤均表达至少一种MAGE基因.而MAGE-D、E、F亚家族在多种肿瘤组织和正常组织中均有不同程度的表达.
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CD15抗原在甲状腺肿瘤组织中的表达及临床意义
CD15抗原(Lewis X)是Lewis血型抗原之一,属细胞粘附分子(CAMs)家族成员,为选择素所识别的比较确定的一个配基[1~3].近年来研究表明,CD15表达与许多肿瘤的发生发展、侵袭转移及预后密切相关[1~7].我们应用免疫组化法对甲状腺肿瘤组织进行CD15抗原检测,旨在探讨CD15表达特征与其肿瘤发生发展和转移的关系及临床意义.
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Klotho 基因多态性在海南黎、汉族冠心病人群中的表达特征研究
目的:探讨 Klotho 基因多态性在海南黎、汉族冠心病人群中的表达特征。方法选取2013年1月—2014年12月在海口市人民医院心内科住院的黎族冠心病患者48例和汉族冠心病患者52例为冠心病组,及同期在该院体检中心进行体检的黎族健康人群50例和汉族健康人群50例为对照组,记录各组性别、年龄、体质指数(BMI)及血压、血脂、血糖水平,检测 Klotho 基因 G395A 位点多态性和 Klotho 蛋白水平。结果黎族、汉族冠心病组 BMI、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL - C)与各自对照组比较,差异均有统计学意义(P <0.05)。黎族冠心病组与对照组 GG、GA、AA 基因型和 G、A 等位基因分布间差异均无统计学意义(P >0.05);汉族冠心病组与对照组 GG、GA、AA 基因型和 G、A 等位基因分布间差异均有统计学意义(P <0.05)。黎族冠心病组与对照组 GG、GA、AA 蛋白表达水平间差异均无统计学意义(P >0.05);汉族冠心病组与对照组 GG、GA、AA 蛋白表达水平间差异均有统计学意义(P <0.05)。结论在汉族冠心病人群中,Klotho 基因多态性和蛋白表达水平与冠心病有关,G395A 位点 AA 基因型易患冠心病,GG 基因型可能对冠心病有保护作用。在黎族冠心病人群中, Klotho 基因多态性和蛋白表达水平与冠心病无明显关系。
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侵袭性垂体腺瘤中p21ras p21WAF1/CIP1的表达及临床意义
侵袭性垂体腺瘤形成原因尚不清楚,很多学者从细胞、分子水平来对与其发病相关的因素进行研究,以期对其发生机制及侵袭、复发相关性作出预测并指导临床治疗,取得了一定的进展.本文通过免疫组织化学方法研究垂体腺瘤组织中p21ras和p21WAF1/CIP1的表达特征、相关性及其与垂体腺瘤侵袭程度的关系.
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大学生脑功能特征表达与心理认知分析
大学生群体心理健康问题正逐年上升,甚至出现新生自杀等极端行为[1]。心理危机大学生有其共同拥有的独特的心理特征[2]。心理活动的复杂形式部分,与其说是脑皮质特定部分工作的产物,不如说是整个脑的活动的结果[3],脑电图检查除在临床诊断如短暂性脑缺血发作(TIA)[4]、头痛[5]等广泛应用,也成为检测大脑功能有效路径。为研究大学生脑功能表达特征和心理行为认知特征,进一步研究脑电和心理性格行为的相关性奠定基础,开展此项研究。