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肝癌中Smac和Caspase-3的表达及在细胞凋亡中的关系
目的探讨Smac和Caspase-3在原发性肝细胞癌(HCC)组织中的表达及二者在肝癌细胞凋亡中的作用和关系.方法免疫组化法检测43例肝癌组织、20例癌旁组织和11例正常肝组织中Smac和Caspase-3蛋白表达情况.RT-PCR检测Smac和Caspase-3 mRNA表达情况.结果43例HCC标本中Smac表达有20例(46.5%),而除2例癌旁组织外,其它癌旁组织和正常肝组织中均见Smac表达;Caspase-3在癌组织、癌旁组织和正常肝组织中分别有18例(41.9%)、15例(75%)和11例(84.6%)表达.Smac和Caspase-3在肝癌组织中的表达具有明显的正相关性(P＜0.05,r=0.6264).Smac mRNA表达阳性的肝癌组织的细胞调亡指数明显升高.结论Smac在肝癌组织中低表达,其表达和Caspase-3呈明显的正相关,二者可能是肝癌细胞凋亡信号传导网络中的重要一环.
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维生素K3促肝癌细胞凋亡的实验研究
目的观察维生素K3(VitK3)对肝癌细胞系HEPG2、Caspase-3、BCL-2基因的凋亡诱导作用.方法将不同浓度的VitK3作用于HEPG2细胞观察其作用的时间效应及剂量效应,应用细胞形态学,流式细胞术,DNA凝胶电泳等方法检测细胞凋亡的发生.应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测凋亡相关基因Caspase-3,Bcl-2 mRNA表达的变化.结果VitK3对HEPG2细胞的生长有明显的抑制作用,并诱导肿瘤细胞发生凋亡;细胞体积缩小,核固缩,折光性加强;DNA凝胶电泳显示DNA Ladder在G1期之前出现Sub-G1峰.凋亡相关基因Caspase-3转录水平比用药前增强.结论VitK3促HEPG2细胞凋亡,且与Caspase-3基因表达有关.
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γ射线诱导下胱冬肽酶-3基因在犬胆管壁增殖平滑肌细胞凋亡中的表达及意义
目的探讨在γ射线诱导下,胱冬肽酶-3(caspase-3)基因在犬胆管壁增殖平滑肌细胞凋亡中表达及意义.方法将103钯(103Pd)放射性支架植入6只犬肝外胆管内,普通支架植入6只犬肝外胆管内,取出胆管标本,用RT-PCR方法检测γ射线诱导犬胆管壁凋亡的增殖平滑肌细胞中caspase-3基因的mRNA.结果 103Pd支架组犬胆管组织中caspase-3基因表达较普通支架组明显,且caspase-3基因高表达组犬胆管出现明显增殖平滑肌细胞凋亡,而且犬肝外胆管无明显狭窄;caspase-3基因低表达组犬胆管未出现增殖平滑肌细胞明显凋亡,而且犬肝外胆管有明显狭窄.结论 caspase-3基因表达水平与细胞凋亡发生和对辐射敏感性有关,103Pd放射性支架通过激活caspase-3基因,促进犬胆管增殖平滑肌细胞凋亡,从而抑制犬肝外胆管狭窄.
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原花青素对宫颈癌HeLa细胞Caspase-3和Survivin基因表达的影响
目的 探讨原花青素对官颈癌HeLa细胞Caspase-3和Survivin基因表达的影响.方法 将按照不同终浓度原花青素(0,37.5μmol/L,75.0 μmol/L,150.0μmol/L,300.0μmo/L和600.0 μmol/L)处理宫颈癌HeLa细胞,分别纳入对照组(空白对照),37.5μmol/L PC组,75.0μmol/L PC组,150.0μmol/L PC组,300.0 μmol/L PC组和600.0 μmol/L PC组.继续培养24 h,收集细胞进行实验.采用RT-PCR检测Caspase-3 mRNA和Survivin mRNA表达变化.采取Western blot检测caspase-3和survivin蛋白表达的变化.采用比色法检测caspase-3相对活性.结果 随着原花青索浓度增加,Caspase-3 mRNA和caspase-3蛋白表达水平逐渐增加,而Survivin mRNA和survivin蛋白表达水平逐渐减少;随着处理官颈癌HeLa细胞原花青素浓度升高,caspase-3相对活性逐渐增加,且差异有显著意义(P＜0.05),在原花青素为600.0/μmol/L 时,活性大.结论 原花青素可剂量依赖性地增加Caspase-3 mRNA和caspase-3蛋白表达水平及caspase-3活性,并且可剂量依赖性减少Survivin mRNA和survivin蛋白表达水平.
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喉癌前病变及喉癌中Livin表达的意义及其与Caspase-3表达的关系
喉癌是呼吸道上皮常见肿瘤，正常上皮由增生开始发展为恶性肿瘤，一般要经过一个量变到质变的过程，即由正常上皮→不典型增生→原位癌，其中包括一个癌前病变阶段，进年来癌前病变的研究已渐成为癌症研究的重点。喉癌前病变包括：喉白斑病、喉厚皮病、成人喉乳头状瘤、慢性肥厚性喉炎。Livin基因是一种人类凋亡抑制蛋白（inhibitor of apoptosis protein family，IAP），其主要通过抑制Caspase途径阻断细胞凋亡[1]，而Caspase-3是凋亡的重要执行者之一，与肿瘤的发生、发展与肿瘤细胞的凋亡速度密切相关。本实验通过RT-PCR方法检测livin mRNA与Caspase-3 mRNA在喉癌组织和喉癌前病变组织中的表达情况，从来探讨喉癌前病变发展至喉癌的发病机制。
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富硒姬松茸提取物-硒蛋白多糖处理小鼠血清对K562细胞凋亡的影响及机制
目的:探讨富硒姬松茸提取物-硒蛋白多糖(SPP)处理的小鼠血清在体外对K562细胞凋亡的影响及机制.方法:采用血清药理学法制备SPP处理血清,MTT法观察SPP处理的小鼠血清(终浓度10%)对K562细胞增殖的影响;从形态学、DNA电泳技术观察凋亡发生,比色法检测凋亡相关基因Caspase-3的表达.结果:SPP处理的小鼠血清可显著抑制自血病K562细胞生长,且呈时间剂量依赖性.形态学和DNA电泳结果均证实有凋亡发生.与空白血清组比较,Caspase-3基因上调明显.SPP处理的荷瘤小鼠血清抗肿瘤效果明显优于正常小鼠的处理血清.结论:SPP处理的荷瘤小鼠血清可促K562细胞凋亡,其机制可能与上调Caspase-3基因有关.
关键词： 富硒姬松茸 硒蛋白多糖 血清药理学 凋亡 caspase-3基因 -
RNA干扰Caspase-3基因对镉诱导转化人胚肾293细胞凋亡的影响
目的 研究RNA干扰Caspase-3基因对镉致转化人胚肾293细胞凋亡的影响,探讨Caspase-3基因在镉致细胞凋亡中的作用.方法 选择转化人胚肾293细胞进行体外培养,以小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)处理细胞36 h后,再以40 μmol/L氯化镉分别处理12～24 h,以四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测细胞活力,以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western-blot法分别检测Caspase-3基因表达水平和蛋白表达水平,以流式细胞仪Annexin-V-PI双染法检测细胞凋亡率.结果 40μmol/L氯化镉处理转化人胚肾293细胞12 h后,Caspase-3基因mRNA水平显著增高,相对分子质量为20 kDa的活性亚单位条带显著增强;24 h后,细胞凋亡率显著增加(n=4,P＜0.01),RNA干扰显著抑制镉诱导的细胞Caspase-3基因mRNA和相对分子质量为20 kDa的蛋白表达水平,使细胞凋亡率显著降低(n=4,P＜0.01).结论 体外实验表明,RNA干扰Caspase-3基因对镉诱导转化人胚肾293细胞凋亡具有明显的抑制作用,Caspase-3基因在镉诱导转化人胚肾293细胞凋亡过程中起着重要的作用.
关键词： 镉 RNA干扰 caspase-3基因 凋亡 -
大豆异黄酮对初老大鼠卵巢Bcl-2基因和Caspase-3基因mRNA表达的影响
目的 观察大豆异黄酮(soyisoflavones,SI)对初老大鼠卵巢Bcl-2、Caspas e-3 mRNA表达及氧自由基含量的影响.方法 利用自然衰老的雌性大鼠建立初老动物模型,连续灌胃给药8周后,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测卵巢Bcl-2和Caspase-3 mRNA表达,采用硫代巴比妥酸和黄嘌呤氧化法分别检测卵巢丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性.结果 与初老组相比,各SI处理组卵巢Bcl-2 mRNA表达量和SOD的活性均明显增高、Caspase-3表达量明显下降,中剂量(158 mg·kg-1)和高剂量(500 mg·kg-1)SI处理组MDA含量也显著降低(P＜0.05或P＜0.01).结论 大豆异黄酮上调卵巢Bcl-2、下调Caspase-3表达、抑制氧自由基生成并增强SOD活性,可能是其改善衰老卵巢功能的机制之一.
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Bcl-2蛋白及caspase-3基因表达与暴发性肝衰竭肝细胞凋亡关系的研究
目的:研究Bcl-2蛋白与caspase-3基因表达在实验性暴发性肝衰竭(FHF)中对肝细胞凋亡的作用.方法:用脂多糖和D-氨基半乳糖制备FHF小鼠模型;免疫组化法检测肝组织内Bcl-2蛋白表达;原位杂交法检测肝组织内caspase-3基因表达;缺口原位末端标记技术检测肝细胞凋亡.结果:模型组用药后2 h Bcl-2有较多表达,4 h表达多,以后逐渐减少,4 h与2 h比较差别显著(P＜0.05),与8 h、12 h比较差别十分显著(P＜0.01).模型组用药后2 h caspase-3开始少量表达,8 h达高峰,并出现典型的肝细胞凋亡改变,12 h表达下降,且同时存在肝细胞凋亡和坏死..Bcl-2与caspase-3表达及肝细胞凋亡均呈负相关.结论:在FHF中,肝细胞凋亡与caspase-3的激活有关;Bcl-2可能通过抑制caspase-3的活性而抑制肝细胞凋亡.
关键词： 肝细胞凋亡 BCL-2蛋白 caspase-3基因 -
非小细胞肺癌组织BAG-1和Caspase-3基因的表达及其关系
目的 探讨BAG-1基因和Caspase-3基因在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其相互关系.方法 应用免疫组织化学方法检测75例NSCLC组织细胞中BAG-1和Caspase-3基因的表达.结果 在NSCLC组织细胞中,BAG-1基因表达率为64.0％(48/75),其表达与NSCLC TNM 分期、淋巴结转移和细胞分化程度密切相关(x2 =5.16 ～5.36,P＜0.05)；Caspase-3基因表达率为57.3％ (43/75),其表达与淋巴结转移密切相关(x2=5.96,P＜0.05)；在NSCLC组织细胞中,BAG-1基因表达与BAG-1基因表达呈高度正相关(r=0.436,P＜0.01).结论 在NSCLC组织细胞中,BAG-1基因表达上调,Caspase-3基因失活或低表达；BAG-1结合激活的Caspase-3,阻止细胞凋亡；BAG-1基因表达预示肺癌组织有较高的侵袭性和预后不良.
关键词： BAG-1基因 caspase-3基因 非小细胞肺癌 免疫组织化学 -
白毛藤多糖抑制人卵巢癌细胞增殖作用及其机制研究
目的:探讨白毛藤中多糖成分对人卵巢癌SKOV3细胞的生长抑制作用.方法:将不同浓度白毛藤多糖作用SKOV3细胞后,通过MTT法检测细胞增殖抑制率,RT-PCR法检测bcl-2、caspase-3基因mRNA表达量的变化,荧光显微镜检测细胞凋亡情况.结果:白毛藤多糖明显抑制SKOV3细胞增殖,诱导细胞凋亡,并抑制bcl-2表达,上调caspase-3表达.结论:白毛藤多糖能通过激活caspase-3、抑制bcl-2表达从而抑制SKOV3细胞增殖,促进凋亡达到抗癌的目的.
关键词： 白毛藤多糖 卵巢癌 Bcl-2基因 caspase-3基因 -
Caspase-3基因在大肠癌、大肠腺瘤中的表达及其与细胞凋亡的关系
目的 探讨大肠癌、大肠腺瘤中Caspase-3基因的表达及其与细胞凋亡的关系.方法 采用免疫组化S-P法和原位末端标记法分别检测28例大肠癌、10例大肠腺瘤及5例正常大肠黏膜中Caspase-3基因的表达水平及细胞凋亡.结果 Caspase-3基因在大肠癌、大肠腺瘤和正常黏膜组织中表达分别为46.4%(13/28)、60.0%(6/10)、80.0%(4/5),三者之间有显著性差异(P<0.01).大肠癌、大肠腺瘤中细胞凋亡指数显著高于正常黏膜组织(P<0.01),凋亡指数与肿瘤的分化程度有关(P<0.01),与病理类型、Dukes分期无关.大肠癌、大肠腺瘤中Caspase-3基因表达与细胞凋亡指数密切相关,阳性表达的细胞平均凋亡指数明显高于阴性表达的平均凋亡指数(P<0.01),而正常黏膜组织中二者无显著性差异(P>0.05).结论 肿瘤早期阶段的细胞凋亡异常和过度增生,可能是大肠癌的发病原因之一,作为细胞凋亡的调控因子,Caspase-3可能在大肠癌的发生发展中起重要作用.
关键词： 大肠癌 大肠腺瘤 caspase-3基因 细胞凋亡 -
黄芪建中汤对脾气虚证肺癌小鼠caspase-3表达的影响
目的:探讨黄芪建中汤对脾气虚证肺癌小鼠抑瘤作用的可能作用机制.方法:用苦寒泻下法及接种肿瘤法建立小鼠脾气虚证Lewis肺癌模型,第13天,眼球取血,检测血清木糖水平.模型成功建立后,药物治疗组小鼠分别给予不同浓度的药物处理,同时观察小鼠的整体情况.第28天,脱颈椎处死小鼠,取肿瘤组织.分别称取每只小鼠瘤重,计算抑瘤率,采用RT-PCR方法检测caspase-3的表达.结果:黄芪建中汤可明显改善脾气虚证Lewis小鼠的整体情况,有一定的抑瘤作用,黄芪建中汤低、中、高剂量组抑瘤率分别为23.50％、29.18％、32.69％.黄芪建中汤低、中、高剂量组caspase-3/β3-actin比值均高于肿瘤对照组和模型对照组(P＜0.05或P＜0.01).结论:黄芪建中汤抑制脾气虚证肺癌小鼠肿瘤的生长可能与上调caspase3-mRNA的表达的转录有关.
关键词： 黄芪建中汤 脾气虚证 肺癌 caspase-3基因 小鼠 -
Survivin、caspase-3及AKT1在大肠癌中的表达及意义
目的 探讨survivin、caspase-3和AKT1在大肠腺癌中的表达及其临床病理学意义以及三者在大肠腺癌癌变过程中的作用.方法 运用免疫组织化学SP法检测58例大肠腺癌、12例大肠腺瘤和10例正常大肠黏膜中survivin、caspase-3和AKT1的表达情况,并分析其与大肠腺癌临床病理特征之间的关系以及三者之间的关系.结果 在大肠腺癌中survivin、caspase-3以及AKT1的阳性表达率分别为77.6%(45/58)、32.8%(19/58)及70.7%(41/58).Survivin在大肠腺癌中的表达高于大肠腺瘤以及正常大肠黏膜 (P＜0.05,P＜0.05),cspase-3在大肠腺癌中的表达低于正常大肠黏膜 (P＜0.05),AKT1在大肠腺癌中的表达高于正常大肠黏膜 (P＜0.05).Survivin的表达与肿瘤分化程度关系密切(P＜0.05),caspase-3的表达与肿瘤分化程度、淋巴结转移关系密切(P＜0.05,P＜0.05),AKT1的表达与TNM分期关系密切(P＜0.05).Survivin的表达与caspase-3的表达呈显著负相关(P＜0.05),与AKT1的表达呈显著正相关(P＜0.05).结论 Survivin与AKT1在大肠腺癌中高表达,caspase-3在大肠腺癌中低表达,且survivin与caspase-3的表达显著负相关,survivin与AKT1的表达显著正相关,提示survivin可能下调caspase-3的表达而上调AKT1的表达,共同促进大肠腺癌的发生发展.
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As2O3对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤抑制作用及机制
目的 探讨不同剂量的三氧化二砷(As2O3)对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用及其机制.方法 将4×106个SKOV3细胞接种于裸鼠皮下,建立人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为As2O3高、中、低剂量组及生理盐水组(空白对照)、卡铂(CBP)组(阳性对照),连续给药10 d,停药后24 h处死裸鼠,计算移植瘤的瘤质量、抑瘤率及caspase-3基因表达水平的变化,并检测用药后裸鼠的肝、肾功能及血常规.结果 As2O3对移植瘤生长的抑制作用具有剂量依赖性,各剂量As2O3组及CBP组瘤质量与生理盐水组比较均有统计学意义(F=17.931,P<0.05);As2O3作用后caspase-3基因的表达较空白对照组升高,差异有统计学意义(F=31.821,q=2.89～3.84,P<0.05).同时,As2O3各组与CBP组相比,未表现出明显的肝、肾及血液学毒性.结论 As2O3对人卵巢癌移植瘤的生长具有明显的抑制作用,其机制可能与上调caspase-3基因的表达及诱导细胞凋亡有关.
关键词： 三氧化二砷 卵巢肿瘤 抗肿瘤药 caspase-3基因 -
塞来昔布对急性肺损伤大鼠肺组织细胞凋亡的影响
目的 观察塞来昔布对急性肺损伤大鼠肺组织细胞凋亡及凋亡相关基因Caspase-3 mRNA表达的影响.方法 将60只大鼠随机分为4组,各15只.脂多糖(LPS)组通过大鼠尾静脉注射LPS 5 mg/kg制作急性肺损伤模型,3h后处死；塞来昔布治疗组通过大鼠尾静脉注射LPS 5 mg/kg制作急性肺损伤模型后0.5h给予塞来昔布20 mg/kg灌胃,3h后处死；塞来昔布组给予塞来昔布20 mg/kg灌胃,3h后处死；对照组给予等量的生理盐水灌胃,3h后处死.大鼠处死后取其左肺组织,用TUNEL法和RT-PCR分别检测肺组织凋亡细胞和Caspase-3 mRNA.结果 LPS组肺组织细胞的凋亡指数和Caspase-3 mRNA表达与对照组相比,P均＜0.05；塞来昔布治疗组肺组织细胞的凋亡指数和Caspase-3 mRNA表达明显降低,与LPS组相比,P均＜0.05.结论 塞来昔布降低了急性肺损伤大鼠肺细胞凋亡指数,其机制可能与降低Caspase-3 mRNA的表达有关.
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辐射诱导犬胆管增殖平滑肌细胞凋亡中胱冬肽酶-3活性的影响
目的探讨γ射线对胱冬肽酶-3(Caspase-3)基因在犬胆管壁增殖平滑肌细胞凋亡中的活性影响.方法将103pd放射性支架和普通支架分别植入犬肝外胆管内,取出胆管标本,用免疫组化进行平滑肌细胞凋亡染色,并在JEM-1200EX电镜下观察凋亡细胞超微结构变化;又用RT-PCR检测γ射线诱导犬胆管壁凋亡的增殖平滑肌细胞中Caspase-3基因的mRNA.结果 103pd支架组犬胆管组织中Caspase-3基因表达较普通支架组明显,且Caspase-3基因高表达组犬胆管出现明显增殖平滑肌细胞凋亡,而且犬肝外胆管无明显狭窄;而普通支架Caspase-3基因低表达,且犬胆管未出现增殖平滑肌细胞明显凋亡,而且犬肝外胆管有明显狭窄.结论辐射可以使Caspase-3基因活性增高,切与细胞凋亡有关;103pd放射性支架通过激活Caspase-3基因,促进犬胆管增殖平滑肌细胞凋亡,可以抑制犬肝外胆管狭窄.
关键词： 支架 γ射线 caspase-3基因 脱噬作用 -
重构型天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶对人肺癌A549细胞的凋亡作用
目的探讨天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-3基因对人肺癌A549细胞的凋亡诱导作用.方法构建Caspase-3的真核表达载体pEGFP-Caspase-3,转染A549细胞株.用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫组织化学等方法检测转染后A549细胞中Caspase-3基因的表达.用荧光显微镜、电镜、四甲基偶氮唑盐(MTT)比色方法观察Caspase-3对A549细胞的抑制、凋亡作用.结果 Caspase-3基因在A549细胞中有表达;形态学观察证实转染后48 h的细胞株有细胞凋亡;转染Caspase-3后24～48 h细胞生长明显受到抑制.结论重构型Caspase-3基因对人肺癌A549细胞有致凋亡作用.
关键词： caspase-3基因 肺癌 脱噬作用 -
肝癌细胞自噬性凋亡过程中caspase-3基因的克隆与鉴定
目的从长春新碱诱导发生自噬性凋亡的肝癌细胞系HepG2中克隆caspase-3基因.方法提取细胞总RNA,采用RT-PCR技术扩增目的片段,构建重组克隆载体,测序鉴定及分析.结果经RT-PCR获得了预期的扩增产物即caspase-3基因625bp的核苷酸片段,其测序结果与文献报道一致.结论初步证明该caspase-3基因片段参与了长春新碱诱导的HepG2细胞自噬性凋亡过程.
关键词： HepG2肝癌细胞系 自吞噬作用 细胞凋亡 长春新碱 caspase-3基因 -
新乌头碱对K562细胞及耐柔红霉素的K562细胞凋亡的诱导作用及其机制
目的 观察温阳药新乌头碱对白血病细胞K562和K562耐柔红霉素细胞株(K562/DNR)的抑制作用及可能的分子机制.方法 应用MTT法,结合流式细胞术检测不同浓度新乌头碱对K562和K562/DNR增殖和凋亡的影响.通过Real-time PCR检测不同浓度新乌头碱作用72 h对K562和K562/DNR细胞C/EBPα、Caspase-3、p53凋亡相关基因表达的影响.结果 K562和K562/DNR细胞的增殖抑制率随着新乌头碱浓度增加及作用时间延长而上升,呈浓度、时间依赖性(均P＜0.05).新乌头碱能引起K562和K562/DNR细胞凋亡,且随着药物浓度增加,凋亡率也逐渐升高,差异均有统计学意义(均P＜0.05).Real-time PCR结果显示,经50μmol/L新乌头碱作用72 h,K562和K562/DNR细胞的C/EBPα表达下调,Caspase-3、p53表达上调,与正常对照组相比差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论 新乌头碱能够引起K562和K562/DNR细胞发生凋亡,并且凋亡机制可能与下调C/EBPa基因及上调Caspase-3、p53基因有关.
